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Biología Forense
Laboratorio de Genética Forense
Departamento de Toxicología y Legislación Sanitaria. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid (UCM)
Biología Forense
Dra. Ana María López Parra
Biología Forense Laboratorio de la Policía Científica y Guardia Civil: ADN
Principios de los 90: 2.000 muestras
Año 2013: 25.664 informes
Año 2015: 35000 perfiles de ADN
Biología Forense Ventajas del análisis de ADN
1. Aumenta la probabilidad de discriminación:
El resultado de un análisis genético
permite EXCLUSIÓN INCLUSIÓN NO EXCLUSIÓN
¿Con que poder de discriminación?
Biología Forense Kits comerciales
*Población caucasoide
Nombre
Marca
Fecha STR Loci
*Poder de
Discriminación
TH01, TPOX, CSF1PO
monoplexes
Promega
Feb 1993
TH01, TPOX, CSF1PO
1:410
AmpFlSTR Blue
Applied
Biosystems
Oct 1996
D3S1358, VWA, FGA
1:5000
AmpFlSTR Green I
Applied
Biosystems
Jan 1997
Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO
1:410
CTTv
Promega
Jan 1997
CSF1PO, TPOX, TH01, VWA (vWF)
1:6600
FFFL
Promega
Jan 1997
F13A1, FES/FPS, F13B, LPL
1:1500
GammaSTR
Promega
Jan 1997
D16S539, D13S317, D7S820, D5S818
1:1.8x104
PowerPlex
(version 1.1 and 1.2 later)
Promega
Jan 1997
CSF1PO, TPOX, TH01, VWA, D16S539, D13S317,
D7S820, D5S818
1:1.2x108
AmpFlSTR Profiler
Applied
Biosystems
May 1997
D3S1358, VWA, FGA, Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO,
D5S818, D13S317, D7S820
1:3.6x109
AmpFlSTR Profiler Plus
Applied
Biosystems
Dec 1997
D3S1358, VWA, FGA, Amelogenin, D8S1179, D21S11,
D18S51, D5S818, D13S317, D7S820
1:9.6x1010
AmpFlSTR COfiler
Applied
Biosystems
May 1998
D3S1358, D16S539, Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO,
D7S820
1:8.4x105
AmpFlSTR SGM Plus
Applied
Biosystems
Feb 1999
D3S1358, VWA, D16S539, D2S1338, Amelogenin,
D8S1179, D21S11, D18S51, D19S433, TH01, FGA
1:3.3x1012
PowerPlex 2.1
Promega
Jun 1999
D3S1358, TH01, D21S11, D18S51, VWA, D8S1179, TPOX,
FGA, Penta E
1:8.5x1010
PowerPlex 16
Promega
May 2000
CSF1PO, FGA, TPOX, TH01, VWA, D3S1358, D5S818,
D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11,
Penta D, Penta E, amelogenin
1:1.8x1017
AmpFlSTR Identifiler Applied
Biosystems
May 2001
CSF1PO, FGA, TPOX, TH01, VWA, D3S1358, D5S818,
D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11,
D19S433, D2S1338, amelogenin
1:2.1x1017
1:410
1:2.1x1017
Biología Forense
2. Estudio de todo tipo de indicios biológicos e indicios mínimos
Ventajas del análisis de ADN
Biología Forense
3. Análisis de muestras antiguas y degradas, y mezclas
Ventajas del análisis de ADN
Biología Forense
5. Creación de bases de datos Bases públicas con interés criminal y/o investigación científica.
Ventajas del análisis de ADN
EDNAP mtDNA
Population Database
Biología Forense
Muestra obtenida en prueba paternidad /
escena del crimen
Extracción
de ADN Cuantificación
de ADN
Análisis de marcadores
genéticos
Obtención del perfil genético de la muestra
Comparación del perfil de la
muestra con el resultado de
otras muestras
Si coincide, comparación del perfil
con base de datos poblacional
Generación de Informe del caso con
probabilidad de coincidencia al azar
Procesamiento de muestras de ADN
Biología Forense
Indicios Biológicos
“ Toda sustancia líquida o sólida que provenga
directamente del cuerpo humano o que haya
estado en contacto con el mismo, y en cuya
superficie o interior pueda haber restos de
células”
“Todo material biológico o no biológico, objeto o fragmento que pueda encontrarse en el lugar de los hechos, sobre la víctima o sobre un sospechoso y de cuyo estudio pueda llegar a establecerse una evidencia en la reconstrucción del suceso”
Biología Forense
Tipos de indicios
Sangre
Semen
Pelo
Saliva
Orina
Fluido vaginal
Diente
Restos óseos
Células y Tejidos
Liquido amniótico
Biología Forense
Tipos de evidencias
Preservativos
Chicles, colillas
Sobres y sellos
Armas blancas
Llaves, monedas,
joyas
Piedras, ramas, hojas
Billetes, papeles
Ropa
Biología Forense Tipos de Indicios Biológicos
Indicios dubitados: -Recogidas en el lugar de los hechos -Recogidas en el cuerpo de la víctima
Indicios indubitados o de referencia: -Intervención corporal del individuo
Indicios atribuidos: -Se atribuye su pertenencia a un individuo pero no se tiene absoluta certeza
Biología Forense
“Normas para la preparación y remisión de muestras objeto de análisis por el Instituto
Nacional de Toxicología”
BOE nº 308 de 23/12/96
B.O.E. DEL 19 DE MAYO DE 2010
8030 ORDEN JUS/1291/2010, de 13 de mayo, por la que se aprueban
las normas para la preparación y remisión de muestras objeto de
análisis por el Instituto Nacional de Toxicología y Ciencias Forenses.
Biología Forense
Grupo Español y Portugués de la Sociedad Internacional de
Genética Forense (GEP-ISFG) • Universidad de Valencia. • Jefatura de Investigación y
Criminalística, Dirección General de la Guardia Civil, Madrid.
• Universidad de Granada. • Instituto Nacional de Toxicología y
Ciencias Forenses, Sevilla • Comisaría General de Policía
Científica, Madrid. • Instituto Nacional de Toxicología y
Ciencias Forenses, Madrid.
Biología Forense
En la hoja de custodia debe aparecer:
-Nombre o identificación y firma de la/s persona/s
responsable/s de la entrega de las muestras.
-Nombre o identificación y firma de la/s persona/s
responsable/s de la recogida de las muestras.
-Fecha y hora de la recogida.
-Condiciones de almacenaje de las muestras hasta su
envío al laboratorio.
Cadena de custodia
Documento escrito donde queda reflejada la gestión de
la muestra desde su toma hasta su destrucción o
devolución.
Biología Forense
ADN CELULAR
ADN MITOCONDRIAL
ADN NUCLEAR
COPIA ÚNICA (70%)
Codificante
10%
No codificante
60%
REPETITIVO (30%)
No codificante
20%
Codificante
10%
DNA repetido
disperso
DNA repetido
agrupado
(DNA satélite)
Minisatélites
(20-70bp)
Microsatélites
(2-4bp)
Exones
Reguladores
Intrones DNA
intergénico
Repeticiones en tándem Repeticiones dispersas
Organización del genoma
Biología Forense
• Variaciones de secuencia de ADN en una sola base
• Para que la variación sea considerada un SNP debe darse en, al menos, un 1% de la población
Tipos de variación genética
SNPs (Single Nucleotide Polymorphism)
Biología Forense
Tipos de polimorfismos de ADN
• Polimorfismos nucleares autosómicos
• Cromosoma Y
• Cromosoma X
• ADN mitocondrial
Biología Forense
ADN NUCLEAR Marcadores
autosómicos - Copia doble
Herencia paterna y materna
Poco abundante en muestras críticas / arqueológicas /
antropológicas
* Relaciones familiares (paternidad y
maternidad)
* Casos forenses
* Identificación de desaparecidos
CSF1PO
D5S818
D21S11
TH01
TPOX
D13S317
D7S820
D16S539
D18S51
D8S1179
D3S1358
FGA VWA
AMEL AMEL
Biología Forense
- Copia única
Regiones no recombinantes
Herencia exclusivamente paterna
Secuencia total ADN ~60 Mb
Poco abundante en muestras críticas
- Gran interés en investigaciones
forenses
98% crímenes violentos cometidos
por hombres
CROMOSOMA Y
Biología Forense
Herencia del cromosoma X
DXS8378
DXS9898
DXS7133 GATA31E08DXS8378
DXS9898
DXS7133 GATA31E08
DXS7132DXS9902 DXS6789
DXS7132DXS9902 DXS6789
GATA172D05DXS7423
DXS6809
DXS6810
GATA172D05DXS7423
DXS6809
GATA172D05DXS7423
DXS6809
DXS6810
GATA172D05DXS7423
DXS6809
Biología Forense
ADN MITOCONDRIAL
- Abundancia
Por célula: 1000-10000 copias mtADN
vs 2 copias nADN
- Copia única
no recombina
herencia exclusivamente materna
- Útil para la reconstrucción del pasado
reciente de las poblaciones humanas
µ región control=2’06 10-6 - 4’14 10-6
Resolución más baja que marcadores
nucleares
Biología Forense
ACCGCTATGT ATTTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACGG TACCATAAAT
16090 16100 16110 16120 16130 16140
rCRS
ACCGCTATGT ATCTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACAG TACCATAAAT Q
K ACCGCTATGT ATCTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACAG TACCATAAAT
Muestra Q
16093C
16129A
Muestra K
16093C
16129A
Adapted from Figure 10.8, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
Diferencias respecto a la Secuencia de referencia
16093 16129
Biología Forense
Haplotipo: Conjunto de alelos de diferentes marcadores que
definen a un individuo (Huella genética o DNA fingerprint)
Ejemplo: Marcadores nucleares
D3S1358 D8S1179 D5S818 HUMVWA D21S11 D13S317
10-12 15-21 7-9 8-8 10-15 8-12
Ejemplo: Cromosoma Y
DYS388 DYS389I DYS389II DYS390
12 10 26 14
Ejemplo: Región Hipervariable I de mtDNA
16069A, 16126C, 16261T
Identificación personal por ADN
Biología Forense
Bases de datos de interés poblacional o forense
- STRs autosómicos:
- Y- STRs:
- ADN mitocondrial:
EDNAP mtDNA
Population Database
Otros…
Biología Forense Low-Level DNA (LL-DNA)
• <100 pg ADN genómico (~15-17 copias diploides de ADN nuclear)
• Normalmente se requiere 150-250 pg
Allele imbalance Allele dropout