Post on 06-Jun-2015
¿Que es la Tecnología de Gel?
Sistema utilizado en inmunohematología para investigar e identificar antígenos y anticuerpos antieritrocitarios.
Técnica que estandariza la lectura de la reacción antígeno-anticuerpo con facilidad y repetitividad.
Estandariza el uso de reactivos, tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la influencia de la mano de operador.
¿Qué estandariza?
Historia de la Tecnología de Gel
Nació en 1984 en un pequeño laboratorio del Centro Regional de Transfusión Sanguínea de Lyon, Francia
Dr. Ives Lapierre.
Historia de la Tecnología de Gel
1985 – 1988Primer kit comercial, la
prueba en gel fue utilizada en el laboratorio del Dr. Lapierre
y allí se probó su calidad y eficiencia.
1988 Disponible en Europa
Objetivo1.Encontrar una forma de
estabilizar las reacciones de aglutinación
2. reducir los resultados falsamente negativos a consecuencia de una técnica inapropiada
3. crear un método de interpretaciones
sencillas y constantes.
Historia
1900Landsteiner
Sistema AB0
1939 Levine Factor Rh
1945Coombs Pba. de la Antiglobulina
Humana
1951 Pollak
Pba. en tuboPba. de la Antiglobulina HumanaPba. con enzimas
1960 Compatibilidad en 3 fases
1961 Hässing Albúmina
1980 LISS
1984 Lapierre Pruebas en gel
1986Normas de transfusión sanguínea
2005Pruebas en gel con mayor sensibilidad DG gel
Fundamento de las Tarjetas de Gel…
La tecnología de microtipificación en gel se basa en la separación por tamaño de los eritrocitos aglutinados, durante un proceso de centrifugación en un gel poroso.
Fundamento del Sistema de Gel
Los eritrocitos van perdiendo elasticidad en sus membranas de forma que los aglutinados grandes quedan atrapados en la zona superior y los pequeños quedan distribuidos a lo largo de la columna.
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
DG Gel®
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel…
Una nueva generación
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Gel de Sephadex
Sobrenadante
Cámara de Reacción
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Facilidad de dispensación
Diseño optimode la cámarade reacción
Gel de matriz compacta
Fondo en “V”
Resultados claros
Nuevo soporte
Visibilidad y definición
Burbuja de aire
Visibilidad de la columna
Perfil de 8 columnas
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Cámara de reacción
- volumen- Forma └┘- diámetro de la entrada
Facilidad de dispensaciónMejora en la fase de sensibilización
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Cuello-↓ Ø diámetro
estabilidad del “air-gap” resistencia a la caída de
los reactivos
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Columna
- Longitud- Diámetro- Segmento circular
Mejora la estabilidad del gel dentro de la columnaVisibilidad más clara
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
V-shape
Mayor definición de los resultados negativos y débilmente positivos
Fondo en “V”
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Grifols Gel Technology
Tratamiento técnico en Grifols
-Tamaño partículas más uniforme
-Menor rotura de partículas
-Distribución homogénea
-Volumen regular del gel en las columnas
- Velocidad centrifugación menor
- Solución tamponada común para las columnas neutras
Alta definición de la reacción
de aglutinación
DG Gel Sol
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una
nueva generación
Diluyente único:Facilita el procedimiento en la preparación de diluciones
Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
1. Cámara de reacción
2. Cuello
3. Columna
4. V-shape
5. Grifols Gel Technology
6. Soporte plástico
7. Diluyente único
8 columnas
Instrumentación
Automatización Total
Manual Semiautomatizado
Las Tarjetas de Gel están compuestas de:
Gel de Sephadex
Reactivos
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Inspección visual
En la tarjeta se deberá de observar un volumen uniforme en todos los pocillos y no se deben de observar gotas de gel en la cámara de reacción.
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Se debe observar claramente la
diferencia entre el Gel y el sobrenadante.
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
No se debe observar ningún cambio de coloración en el Gel.
OK
No OK
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
El Gel debe tener una consistencia uniforme libre de burbujas y/o partículas extrañas.
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Consideraciones importantes
Leer el inserto.
Almacenar las tarjetas a la temperatura indicada en el inserto
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
En lo que se refiere a los reactivos contenidos en las Tarjetas de Gel las especificaciones están contenidas en:
NOM-222-SSA1-2002
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Avidez
Es la medida del tiempo en el cual se observa aglutinación al reaccionar un anticuerpo con su correspondiente antígeno
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
No aplica en Tarjetas de Gel.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Especificidad
Es la capacidad que tiene un anticuerpo de reaccionar solamente con su correspondiente antígeno
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Preparar suspensiones de eritrocitos de grupo 0, A1, A2, B, A1B, A2B y variantes débiles del grupo A.
ABO
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Preparar no menos de 8 muestras de eritrocitos R1, R2, R0, r´, r”, r, Arr y Brr…
Anti-D
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel…
Especificidad
Los antisueros contenidos en las tarjetas para sistema AB0 se enfrentarán a :Células ACélulas BCélulas 0
Los antisueros contenidos en las tarjetas para sistema Rh-hr se enfrentarán a :Células R1rCélulas rr
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros
Preparar la suspensión de eritrocitos al 5.0 %
Suspender 50l de células en
1ml de diluyente.
Preparación de eritrocitos para AB0 y Rh
Dosificar 10 l de la Suspensión al 5.0 % en los pocillos
correspondientes
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Sistema ABOAntísueros
Pocillo Anti-A
Células A1 y A2
Positivo
Células B
Negativo
Células AB Positivo
Células 0 Negativo
Pocillo Anti-B Negativo Positiv
oPositivo Negativo
Pocillo Anti-AB Positivo Positiv
oPositivo Negativo
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Pocillo Anti-D
Células R1rPositivo
Células rrNegativo
PocilloAnti-D´ Positivo Negativo
PocilloControl Negativo Negativo
Sistema RhAntísueros
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
Enfrentar 50 l células A y B a 25 l
antisueros Anti-A, Anti-B y AntiAB
Sistema ABOCélulas para grupo
inverso
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Anti-A Anti-B Anti-A,B
Células A1
PositivoNegativ
oPositivo
Células B
Negativo
Positivo Positivo
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Centrifugar 9 min a 1100 rpm Leer
Lectura de tarjetas exclusiva para Lectura de tarjetas exclusiva para el Control de Calidadel Control de Calidad
POSITIVO NEGATIVO
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Antíglobulina humanaTarjetas de Coombs
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Lavar eritrocitos sensibilizados y no
sensibilizados
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Preparar una suspensión al 0.8 % de eritrocitos sensibilizados
Preparar una suspensión al 0.8 % de eritrocitos no sensibilizados
10l de eritrocitos
1ml de Diluyente
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Dosificar 50 l de la suspensión de eritrocitossensibilizados en un pocilloY 50 l de la suspensión de eritrocitos no sensibilizados en otro pocillo
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Centrifugar 9 min a 1500 rpm Leer
Eritrocitos Sensibilizados
Eritrocitos no Sensibilizados
Lectura de tarjetas exclusiva para el Control Lectura de tarjetas exclusiva para el Control de Calidadde Calidad
Control de Calidad en lasTarjetas de Gel
Titulación
Es la prueba para medir la máxima dilución un la cual un antisuero reacciona con su correspondiente antígeno.
No aplica en Tarjetas de Gel
leopl@prodigy.net.mx
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