Post on 27-Apr-2015
MÁSTER EN CIENCIA E INGENIERÍA
AGRARIAS
-TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS-
“Comparación de técnicas de detección de
sulfonamidas en leche de vaca”
Celia Librán Cuervas-Mons
1. INTRODUCCIÓN
2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
ÍNDICE
TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS
ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN
2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS
SULFONAMIDAS (SAs)Agentes antibacterianos
LECHE → Alimento importante presente el la dieta de
niños y adultos.
LÍMITES LEGALES:• F.D.A. : 10 ppb (ng/mL)
• U.E. : Límite máximo de residuos= 100 µg/kg
• Sulfametazina →Tumores en la tiroides
HPLC y GC/MS Métodos ampliamente usados en el análisis de muestrasbiológicas
INTRODUCCIÓN
TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS
1. INTRODUCCIÓN
2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
ÍNDICE
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CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS
TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS
ARTÍCULOS
• Wenjuan Xu, et al. Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 7198–7207. Determination of sulfonamides in bovine milk with column-switching high performance liquid chromatography using surface imprinted silica with hydrophilic external layer as restricted access and selective extraction material.
Determinación de presencia de sulfonamidas porinyección directa de leche en el HPLC → Empleo deprecolumna RAM (“Restricted acces material”)
OB
JE
TIV
O
HPLC + 2 bombas. Detector UV (Abs(SAs)=268nm; Abs(BSA)=280nm). Válvula 10 pos. Columna C18 (5μm) (250mm x 4.6mm). Inyector loop 100μL. Flujo=1mL/min
Preparación muestra → Dilución de SAs stock en disolvente A y después en leche (25, 100 y 500 ng/mL)M
AT.
Y M
ÉT
OD
OS
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ARTÍCULOS
• Valerie B. Reeves. Journal of Chromatography B, 723 (1999) 127–
137. Confirmation of multiple sulfonamide residues in bovine milk by
gas chromatography–positive chemical ionization mass spectrometry. Desarrollo de un método de confirmación de la presenciaSFAs en leche fortificada y concentración de los mismoshasta una concentración de 10 ng/mL mediante GC-MS
OB
JE
TIV
OM
AT.
Y M
ÉT
OD
OS
GC: Columna capilar DB-1 30m x 0.25mm. Inyector split-splitless.
Tª inyector=240ºC. 1 µL muestra. Vel=32 m/s. Grad Tª: 1 min a
40ºC, 30ºC/min hasta 200ºC, 6ºC/min hasta 280ºC, 10 min a
280ºC.
MS: Interfase directa. Inyector automático split-splitless. Ionización
química positiva. Tª cuadrupolo=100ºC
Obtención muestras: Alimentación vacas y ordeño hasta alcanzar
40 ng/mL (Almacenamiento=-80ºC)
Preparación muestras: Separación de fases en la leche.
Evaporación de solventes. Extracción en fase sólida de
ciclohexil. Derivatización con N1-metil-N4-trifluoriacetil
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2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
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• GC-MS:– Buena recuperación de las sulfonamidas con
respecto a las estándars, excepto la sulfaquinoxalina→ Columna DB-1
– Fractura iónica buena con repeticiones en todas lasmuestras de m/z 190 y 222 → Anilina trifluroacilada. Correcta derivatización
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• HPLC-UV:
– Separación total de la seroalbúmina bovina → Precolumna RA-MIP-GS
– Detección de todas las sulfonamidas → Empleo de 3 disolventes
RESULTADOS
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2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
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CONCLUSIONES
• Ambos métodos suponen una mejora
frente a métodos anteriores
• El método GC/MS requiere un
pretratamiento más laborioso
• El método GC/MS no da un buen
resultado para la sulfaquinoxalina
ÍNDICE
TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
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1. INTRODUCCIÓN
2. ARTÍCULOS
3. RESULTADOS
4. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFÍA
BIBLIOGRAFÍA
• Wenjuan Xu, et al. Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 7198–7207. Determination of sulfonamides in bovine milk with column-switching high performance liquid chromatography using surface imprinted silica with hydrophilic external layer as restricted access and selective extraction material.
• Valerie B. Reeves. Journal of Chromatography B, 723
(1999) 127–137. Confirmation of multiple sulfonamide
residues in bovine milk by gas chromatography–positive
chemical ionization mass spectrometry.
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FIN