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Diagnóstico Histológico de CIN II y la Utilización de Biomarcadores. Presentación preliminar Autores: Jaen, A.; Saez, M.; Rosas, P.; Wernicke A.; Velazco, A.; Perrotta, M.
Congreso del cincuentenario
De la Sociedad Argentina de Patología del
Tracto Genital Inferior y Colposcopía
1. El cáncer cérvico-uterino (CCU) es el tercer
cáncer más frecuente en mujeres de todo el
mundo y el segundo de países
subdesarrollados.
2. Alrededor del 86 % de los casos se
diagnosticaron en países en vías de
desarrollo.
3. En la Argentina se diagnostican alrededor de
4.000 casos nuevos por año (incidencia de
19.7) y mueren 2.000 mujeres por esta
enfermedad (Tasa de mortalidad de 7.4)
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Epidemiología
MSAL. Estadisticas Vitales. Información básica 2011; 5(54)1-132. Jemal A Global Cancer statistics. Ca Cancer J Clin. 2011;61:69–90
1. Las lesiones intraepiteliales de alto
grado son las verdaderas precursoras
del CCU por lo que es fundamental el
correcto diagnóstico.
2. Los sucesivos cambios en la
nomenclatura de la LIE han traído
confusión en la interpretación y manejo
clínico.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Lesiones precursoras
ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29. Discacciatti M, el all. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011; 155(2):204-8
Castle P, Obstet Gynecol. 2009; 113(1):18-25.
En caso particular de CIN II nos enfrentamos a
múltiples desafíos como:
• La reproducibilidad del diagnóstico
• La definición de su perfil biológico (remisión
40-58 %).
La importancia de su correcto diagnostico
posibilita el tratamiento conservador,
disminuyendo las posibles complicaciones a largo
plazo sobre la fertilidad y los resultados
obstétricos.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
CIN II
ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29. Al-Halal H. Arch Gynecol Obstet 2013; 287(2):245-250
Jin G, Arch Gynecol Obstet 2014; 289(1):85-99 Bruinsma FJ, BJOG 2011; 118(9):1031-41c
1. Re-evaluar todas las muestras de biopsias
dirigidas con diagnóstico de CIN II por 2
patólogos encargados de la sección de
patología ginecológica en el Servicio de
Anatomía Patológica del Hospital Italiano de
Buenos Aires (HIBA), identificando el grado
de concordancia.
2. Confirmar el diagnóstico de CIN II por medio
de la utilización de la inmunohistoquímica
para p16 y ki-67 (30-9).
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores..
Objetivos
Tipo de estudio: Estudio de corte transversal retrospectivo.
Población en estudio: Mujeres con diagnóstico de CIN II por
biopsia dirigida de lesiones colposcópicas de sospecha en el
periodo transcurrido entre Enero de 2010 a Diciembre de 2013
estudiadas en el la sección de PTGI (Patología del Tracto Genital
Inferior) del HIBA.
Criterios de inclusión:
• Pacientes con diagnóstico de CIN II en material histológico de
biopsias dirigidas, en el periodo transcurrido entre Enero 2010 a
Diciembre 2013.
Criterios de exclusión:
• Pacientes con diagnóstico de CIN III o mayor lesión histológica.
• Pacientes con imposibilidad para realización de IHQ por
muestra escasa o casos en consulta en los que no contábamos
con tacos en parafina
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos
Re evaluación por dos patólogos expertos del material en formol e incluido en
parafina con cortes semiseriados de 5 micrones, que se colorearon con H&E.
Se realizaron técnicas de inmunohistoquímica para ki 67 y p16.
Ac primarios de VENTANA desarrollados para su uso en los módulos de tinción de
portaobjetos automatizados VENTANA BenchMark XT
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos: Interpretación de las
tinciones. P16
p16+ p16-
El patrón de tinción celular para CINtec p16
Histology es nuclear y citoplasmático:
a. Positiva: Sobreexpresión mediante una
tinción difusa continua de las células de las
capas celulares basal y parabasal.
b. Negativo: La tinción focal una tinción
aisladas o pequeños grupos de células.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos: Interpretación de las
tinciones/ resultados previstos
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos: Interpretación de las
tinciones. Ki 67
ki 67 superficial Ki 67 basal- para basal
A diferencia del p16, el ki 67 puede mostrar positividad difusa en
lesiones no HPV relacionadas.
• El Ki-67 es una proteína nuclear expresada en las células
proliferantes. Durante el ciclo celular, el antígeno Ki-67 está
presente en las fases G1, S, G2 y M, pero está ausente en la
fase G0 (quiescente).
• En el epitelio exocervical con displasia de alto grado, se
observa tinción nuclear positiva hasta en los dos tercios
superiores del epitelio mientras que en el epitelio normal la
tinción positiva se encuentra limitada a la capa basal y para
basal.
• Sin embargo, a diferencia del p16, el ki 67 puede mostrar
positividad difusa en lesiones no HPV relacionadas
(metaplasia pavimentosa, lesiones reactivas o reparativas)
• Aparente valor predictivo de grado y progresión de lesiones
esta en estudio
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Materiales y Métodos: Interpretación de las
tinciones/ resultados previstos
. Robert J. Kurman. Blaustein’s Pathology of the Female genital Tract. sixth edition. Springer; 2011. Pinto AP, Crum CP, Hirsch MS. MOLECULAR MARKERS OF EARLY CERVICAL NEOPLASIA. Diagn Histopathol (Oxf). 2010 Oct
1;16(10):445-454.
N: 65
Periodo: 2010-2013
2 casos excluidos por material escaso en
biopsia.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Resultados
Patólogo 1 Patólogo 2 N° de casos (%)
CIN2 45 49 42 (66.6)
CIN2 recategorizado como CIN3
18 14 21 (33.3)
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Resultados
CIN 2 CIN 3
• Se recategorizaron como CIN 3 un total de 21
casos.
• No se recategorizó ningún caso como lesión de
bajo grado o como simuladores benignos.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Resultados: Heterogeneidad morfológica del
CIN 2. Diagnósticos diferenciales CIN2 vs CIN1 CIN 2 en contexto cervicitis
CIN 2 vs metaplasia inmadura Corte tangencial
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores
Resultados de IHQ: p16
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores
Resultados de IHQ: Ki67
Se encontró una buena correlación entre ambas
marcaciones.
• Tres casos mostraron una discordancia:
• 2 casos: p16 + y ki 67 con marcación basal
• 1 caso: p16 – y ki 67 con marcación en
todo el espesor del epitelio.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Resultados: Correlación entre marcación con ki 67 y
p16
Ki 67 Marcación basal
Ki67 marcación superficial
Total
P 16 positivo 2 (5,13%) 37 39
P16 negativo 2 1 (33.3%) 3
Total 4 38 42
Título
Resultados
HyE p16 ki67
HyE p16 ki67
• El diagnóstico de CIN II es
controvertido ya que hay imágenes
histológicas difíciles de diferenciar con
tinción convencional.
• Con la utilización de la
inmunohistoquímica (IHQ) la
reproducibilidad diagnostica sería más
precisa
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Conclusión
• Nuestra serie muestra una buena correlación
morfológica e inmunohistoquimica.
• La diferenciación de CIN 2 y lesión mayor fue
lograda con cortes de HyE.
• En el diagnostico diferencial de CIN 2 con sus
simuladores benignos (metaplasia inmadura,
epitelio atrófico, cambios epiteliales reactivos)
el uso de biomarcadores fue de ayuda.
• Buena practica utilizar la IHQ de rutina para una
correcta caracterización de este tipo de
lesiones.
Título
Conclusión
Proyecto futuro correlación clínica,
morfológica, inmunohistoquímica y de
biología molecular de pacientes con
diagnóstico de CIN 2
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Presentación Preliminar
• ACCP Guidelines. Journal of Lower Genital Tract Disease 2012; 16(3):1-29.
• Al-Halal H. Arch Gynecol Obstet 2013; 287(2):245-250 • Bruinsma FJ, BJOG 2011; 118(9):1031-41c • Castle P, Obstet Gynecol. 2009; 113(1):18-25. • Darragh, et al, The Lower Anogenital Squamous Terminology
Standardization Project for HPV-Associated Lesions: Background and Consensus Recommendations from the College of American Pathologists and the American Society for Colposcopy and Cervical Pathology. Arch Pathol Lab Med, 136, 1266- 97.
• Discacciatti M, el all. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011; 155(2):204-8
• Jemal A Global Cancer statistics. Ca Cancer J Clin. 2011;61:69–90 • Jin G, Arch Gynecol Obstet 2014; 289(1):85-99 • MSAL. Estadísticas Vitales. Información básica 2011; 5(54)1-132.
Diagnóstico histológico de CIN II y la utilización de biomarcadores.
Bibliografía
Muchas Gracias.
Tte. Gral. J. D. Perón 4190 - Buenos Aires, Argentina Tel.: (5411) 4959-0200 - www.hospitalitaliano.org.ar