Post on 25-Jul-2015
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOSUniversidad del Perú, Decana de América
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA Escuela Académico-Profesional de Farmacia y Bioquímica
Departamento Académico de Farmacología y Toxicología.
TOXICOLOGIA Y QUÍMICA LEGAL
Práctica 1:Análisis Químico Toxicológico
Grupo:Miércoles
Integrantes:ARAUCO MARÍN, Roxana JIMENEZ LIMAY, Alexandra ROMOACCA SERRANO, Andrés PISCOYA VERGARA, Verónica
Profesor de la práctica:APESTEGUÍA INFANTES, José A.
Hora de la práctica:10:00 a.m. – 2:00 p.m.
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INTRODUCCION
El análisis toxicológico se define como el conjunto de medios técnicos y
humanos donde se identifican, cuantifica y controlan los efectos de los tóxicos,
teniendo en cuanta las propiedades químicas, físicas y biológicas de la
sustancia estudiada. La atención tiene como propiedad la identificación del
tóxico durante los primeros minutos de la demanda del servicio, para realizar el
manejo adecuado del paciente, buscando disminuir el riesgo de morir y evitar
las secuelas que pueden dejar las sustancias químicas.
El análisis toxicológico es de gran importancia en clínica no sólo como
ayuda al médico en el diagnóstico y pronóstico de una intoxicación sino en la
evolución del tratamiento, ya que con análisis de control subsiguientes dará
idea al médico si el tóxico permanece en el organismo o ha desaparecido. En
medicina legal igualmente es de suma importancia para la comprobación de un
envenenamiento el identificar y cuantificar el tóxico en vísceras u otras
muestras biológicas, ya que una intoxicación por accidental que parezca puede
tener implicaciones médico-legales cuyo resultado depende de un análisis
realizado o de una autopsia.
Los laboratorios de toxicología se han especializado al igual que las áreas
que cubre la Toxicología, por lo tanto existen varias clases de laboratorio
toxicológico como son:
a) El laboratorio de toxicología ambiental desarrolla sus análisis en la
identificación y cuantificación de sustancias tóxicas presentes en un
ecosistema que puedan directa o indirectamente ocasionar riesgo a las
personas, involucra análisis de aguas, alimentos, suelos y aire.
b) El laboratorio de toxicología industrial que investiga las sustancias
potencialmente tóxicas involucradas en los procesos de producción de
empresas formales o informales, que de forma directa o indirecta puedan
producir lesiones al individuo o afectar a la comunidad.
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c) Laboratorio de toxicología forense que investiga las sustancias tóxicas
que causan la muerte, o investiga los hechos legales donde se involucran
sustancias tóxicas.
d) El laboratorio de toxicología clínica realiza los análisis básicos para él
diagnostico de sustancias químicas que causan intoxicación aguda y las cuales
debe procesar el laboratorio clínico de Toxicología a través de análisis que
permitan hacer un pronto diagnostico y logren detectar el mayor numero de
intoxicaciones.
I. PARTE EXPERIMENTAL
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1.1OBJETIVOS
Aprender y relacionar los pasos sucesivos, relacionados a un análisis
químico toxicológico frente a una muestra problema.
Interpretar los ensayos con papel sensible, observado las distintas
coloraciones que ocurren en cada uno de ellos.
1.2 REACTIVOS, MATERIALES Y EQUIPOS
Reactivos:
Reactivo de Schombein.
Reactivo de Yodo almidonado.
Reactivo de Grignard.
Reactivo de AgNO3 10%.
Reactivo de PdCl2 10%.
Reactivo de Tártaro Emético 10%.
Reactivo de Acetato de Plomo 10%.
Reactivo Alcalino (NaOH 10%).
Materiales:
Recipiente de muestra.
Recipiente de vidrio con tapa.
Probeta.
Pipetas.
Papel de filtro.
Placa de vidrio.
Equipos:
Baño maría.
1.3 ENSAYOS CON PAPELES SENSIBLES
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1.3.1 PAPEL SENSIBLE DE SHOMBEIN
Fundamento:
La reacción se fundamenta en que el ácido cianhídrico y el sulfato de cobre
producen ozono que actúa sobre la resina de guayaco.
Sensibilidad de la reacción:
Es un ensayo sensible pero inespecífico. Algunos autores indican que
puede reconocerse hasta 0.25 µg de ácido cianhídrico.
Técnica operatoria:
Se coloco en un recipiente o en un matraz 22.5 ml. de orina para ser
analizado. Primero se añadió ácido tártarico hasta reacción ácida y mediante
un tampón se sujeta la tira de papel de sulfato de cobre con resina de guayaco
de modo que se sostenga libremente en el interior del recipiente, el cual se
baña en baño Maria. Si la tira de papel no se colorea de un verde oscuro o
verde petróleo, no hay que pensar en la presencia de ácido cianhídrico ni de
ningún cianuro que pueda ser desdoblado por el ácido tártarico, pero si se
observa la coloración antes mencionada, es posible que la muestra contenga
ácido cianhídrico. Sin embargo la presencia de éste no queda establecida de
modo indubitable, pues hay muchos otros cuerpos que pueden hacer que la
tira de papel tome color azul, tales como losa gentes oxidantes como el ozono,
ácido nítrico y vapores de cloro, amoníaco y ácido clorhídrico.
Mecanismo de reacción:
16CN- + 16H+ ---> 16HCN
16HCN + 8Cu++ ---> 8Cu(CN)2 + 16H+
8(CN)2Cu ---> 4Cu2(CN)2 + 4C2N2
4C2N2 + C22H26O6 + 7H2O ---> 4HONC + 4HCN + C22H24O9 + 8H+
4Cu2(CN)2 + 4HCN ---> 4[Cu2(CN)3]- + 4H+
16CN- + 8Cu++ + 7H2O + C22H26O6 ---> 4HONC + [Cu2(CN)3]- +12H+ +
C22H24O9
Reacción (ecuación) química balanceada:
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12HCN + 3H2O + 9CuSO4 9H2SO4 + 3Cu2(CN)2 + 3Cu(CN)2 + O2
Resultados:
No se observó en ningún momento la coloración típica del papel sensible de
Shombein.
1.3.2 PAPEL SENSIBLE YODO ALMIDONADO
Fundamento:
El yodo puede combinase con el cianuro o sulfuro de hidrogeno para dar
yoduro de cianógeno.
Sensibilidad de la reacción:
Es un ensayo muy sensible pero inespecífico (1:106).
Técnica operatoria:
Se tiene ya preparado franjas de papel de filtro ya secas, previamente
embebidas en solución de almidón soluble al 1% (conservadas en frascos de
color oscuro). Preparar en el momento una solución diluida de lugol (o reactivo
de Bouchardat), y embeber los papeles de almidón de manera de obtener un
color azul violeta netamente visible pero no muy intenso. Suspendido el papel
en el frasco se lleva a baño María por cinco minutos y luego se observará que
se produce una decoloración en forma más o menos rápida según la
concentración de cianhídrico.
Mecanismo de reacción:
KI + I2 + 2 almidón ---> 2 almidón-I + KI
HCN + 2 almidón-I ---> 2I- + 2 almidón + CN- + H+
Reacción (ecuación) química balanceada:
HCN + I2 ICN + HI
Resultados:
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Después del tiempo recomendado en el baño María se observa que
coloración azul violeta desaparece. Este procedimiento permite una
determinación rápida y simple del ácido cianhídrico en un líquido.
1.3.3 PAPEL SENSIBLE DE GRIGNARD
Fundamento:
Embeber en solución de acido pícrico al 1% en presencia de solución de
Na2CO3 al 10%, observándose una coloración rojo-naranja.
Técnica operatoria:
En el extremo de una tira de papel de filtro agregar 1-2 gotas de solución de
Na2CO3 10% y adicionar 2 gotas del reactivo de ácido pícrico 1%. En el otro
extremo colocar el número 3. Colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que
contenga la muestra problema en solución de agua destilada, procurando que
el extremo reactivo se encuentre a la luz del frasco. Iniciar un baño de María
por cinco minutos adicionando 100 mg de ácido tartárico. Terminado el baño de
María, observar los resultados en un vidrio limpio.
Mecanismo de reacción:
Reacción química:
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Resultados:
Por posible presencia de cianuro de hidrogeno, el extremo que se encuentra
en el interior del recipiente, toma una coloración roja-naranja ladrillo.
1.3.4 PAPEL SENSIBLE DE NITRATO DE PLATA (AgNO3)
Fundamento:
Reacciona con la muestra problema formando acido sulfhídrico (en forma de
sulfuro argéntico) además de arsina y fósforo blanco.
Técnica operatoria:
En el extremo de una tira de papel de filtro, agregar I o II gotas de solución
de nitrato de plata 10%. En el otro extremo colocar el número 4. Obtenida la tira
reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que
contenga la muestra problema, luego colocarlo en baño María por cinco
minutos adicionando 100 mg de ácido tartárico.
Mecanismo de reacción:
H2S + 2Ag+ ---> Ag2S + 2H+
ASH3 + 6Ag+ + 2H2O ---> AsO2H + 6H+ + 6 Ag°
Reacción balanceada:
H2S + 2Ag+ Ag2S + 2H+
Otras reacciones:
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a) Formol: separación de plata metálica
b) Fosmamina: formación de fosfuro de plata
c) Arsina: separación de plata metálica:
d) Estibamina: formación de antimoniuro de plata.
e) Fósforo blanco:
1.3.5 PAPEL SENSIBLE CON CLORURO DE PALADIO (PdCl2)
Fundamento:
Los métodos químicos emplean la propiedad del monóxido de carbono de
reducir diversas sales metálicas oxidantes. Uno de los elementos metálicos
más usados es el paladio II (Pd+2 ) Se basa en el poder reductor del monóxido
de carbono, el cual al ponerse en contacto con una solución de PdCl2 ,
reacciona produciendo Pdº.
Técnica operatoria:
La solución de cloruro de paladio al 10% p/v: disolver 0.222 g de cloruro de
paladio en 25 ml. de ácido clorhídrico 0.01N y completar a 250 ml con ácido
clorhídrico. Se prepara en el momento con 100 mg de ácido tartárico. Se
Colocar la cuarta parte de la muestra en frasco de boca ancha con un extremo
de una tira de 10 cm. Por 1 cm. de papel whatman Nº 1 una gota de solución
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CH2=O + 2Ag+ + H2O HCOOH + 2H+ + 2AgO
H3P + 3Ag+ 3H+ + Ag3P
H3As + 6Ag+ + 2 H2O HAsO2 + 6H+ + 6AgO
H3Sb + 3AgO Ag3Sb + 3H+
P4 + 6 H2O H3P + 3H3PO2
H3P + 3 Ag+ Ag3P + 36H+
12Ag+ + 3 H3PO2 + 6H2O 3 H3PO4-
+ 15H+ + 12AgO
de cloruro de paladio. Luego se colocar 1/3 de la tira por el extremo que
contiene la solución de paladio dentro del frasco de boca ancha, sin que esta
haga contacto con la muestra. Agregar 100 mg de ácido tartárico, tapar el
frasco, con la tapa sosteniendo el papel. Llevar el frasco a baño maría
hirviente por cinco minutos. Poner la tira sobre luna de vidrio.
Mecanismo de reacción:
Reacción balanceada:
Pd+2 + CO + H2O ---> Pdº + CO2 + 2H+
Resultados:
Negativo, no se observa coloración plateada o pequeña película de paladio
metálico, indicando posible ausencia de monóxido de carbono en la muestra de
orina analizada.
1.3.6 PAPEL SENSIBLE DE TARTARO EMÉTICO
Fundamento:
El tártaro emético (tartrato de antimonio y potasio) al entrar en contacto con
el ácido sulfhídrico precipitará en forma de sulfuro de antimonio.
Técnica operatoria:
- Colocar la cuarta parte de la muestra en frasco de boca ancha
- Colocar en un extremo de una tira de 10 cm. Por 1 cm. de papel whatman Nº
1 una gota de solución de tártaro emético.
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- Colocar 1/3 de la tira por el extremo que contiene la solución de paladio
dentro del frasco de boca ancha, sin que esta haga contacto con la muestra .
- Agregar 100 mg de ácido tartárico.
- Tapar el frasco, con la tapa sosteniendo el papel.
- Llevar el frasco a baño maría hirviente por cinco minutos.
- Poner la tira sobre luna de vidrio.
Mecanismo de reacción:
Reacción balanceada:
2K(SbO)C4H4O6 + 3H2S Sb2S3 + 2KH(C4H4O6) + 2H2O
Resultados:
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Negativo, no se observa coloración naranja tenue o morado, indicando
posible ausencia de sulfuro de hidrógeno en la muestra de orina analizada.
1.3.7 PAPEL SENSIBLE DE ACETATO DE PLOMO
Fundamento:
Al exponerse el olor de una muestra acidificada ligeramente, el papel se
ennegrece por formación de PbS.
Sensibilidad:
La sensibilidad de la reacción es de 10 mg/L.
Técnica operatoria:
Utilizar una solución al 10 % de acetato plúmbico o mejor aún, una de
plumbito alcalino preparada, descomponiendo el acetato de plomo disuelto en
c.s de agua destilada con un ligero exceso de hidróxido de sodio al 30% y
completando a 100ml. Sirve para revelar pequeñas cantidades de sulfhídrico y
constituye por lo tanto un ensayo diferencial con el papel argéntico.
Reacción balanceada:
SH2 + [Pb (OH)3] SPb + 2H2O + OH-
Resultados:
El resultado obtenido fue NEGATIVO para nuestra muestra de orina.
1.3.8 PAPEL SENSIBLE ALCALINO
Fundamento: Realizado para el reconocimiento de pequeñísimas cantidades de HCN en
vísceras, ha sido como papel reactivo. Este ensayo, si bien a veces no resulta
tan sensible como algunos de los que se han detallado, tiene en cambio la
enorme ventaja de su especificidad, puesto que el azul de Prusia solo se forma
en presencia de HCN. La presencia de otros compuestos no interfiere en
absoluto, por lo cual este papel sensible tiene, en la práctica forense, enorme
aplicación aun en el aspecto cuantitativo.
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Técnica operatoria:
Embeber una franja de papel de filtro en una solución de hidróxido de sodio
al 2%; dejar escurrir el exceso y exponer en el ambiente del frasco; después de
un tiempo de exposición conveniente, retirarlo y extenderlo sobre una placa de
porcelana o de vidrio; agregar 2-3 gotas de solución, en lo posible reciente, de
sulfato ferroso al 2% y dejar extender; acidificar finalmente con c.s. de HCl
(basta 3 – 4 gotas), y se observara que, en presencia de HCN se obtiene un
color al principio verde (para pequeñas cantidades de tóxico), que luego se
hace azul intenso. Para cantidades pequeñas de HCN, el color azul suele
aparecer a medida que se volatiliza el exceso de HCl agregado. En ausencia
de HCN, el color obtenido es amarillo debido a la sal férrica formada a
expensas de la sal ferrosa. Este ensayo ha sido convenientemente modificado
por Goldbaum y Gettier, para revelar y determinar cantidades muy reducidas de
HCN en vísceras.
Mecanismo de reacción:
Se interpreta de la manera que sigue:
6HCN + 6-OH 6-CN + 6H2O
6-CN + Fe++ [Fe(CN)6]Na4
4Fe++ + 8-OH 4Fe (OH)2
Simultáneamente, el ion ferroso se oxida a férrico debido a la gran superficie
de contacto con el aire:
4Fe (OH)2 + O2 + H2O 4Fe (OH)3
Que, en medio acido reacciona con el anión ferrocianógeno para dar el azul de
Prusia o ferrocianuro férrico.
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3[Fe(CN)6]-4 + 4Fe(OH)3 + 12H+ 12H2O + [Fe(CN)6]3Fe4
Reacción balanceada:
Se basa en la formación de azul de Prusia.
HCN + OH- CN- + H2O
Luego:
6CN- + Fe+2 [Fe(CN)6] -4
Fe+2 + 2OH- Fe(OH)2 precipitado verde
2Fe(OH)2 + 1/2O2 + H2O 2Fe(OH)3
En medio HCl
Fe(OH)3 + (Fe(CN)6)-4 + 3H+ + Na+ Fe(CN)6FeNa + 3H2O
Resultados: Este ensayo es un procedimiento segurísimo y terminante, por lo cual estimamos que debe utilizarse siempre que se sospeche una intoxicación cianhídrica. En nuestra muestra de orina se obtuvo un resultado POSITIVO.
1.4 ENSAYOS CON LÁMINAS METÁLICAS
Fundamento:
El arsénico se deposita en una laminilla de cobre cuando se encuentra
en solución fuertemente ácida.
Técnica operatoria:
Una fracción de papilla de vísceras o 25 ml. de orina, vómito, lavado
gástrico, se colocan en un erlenmeyer de 250 cm3 y se la adiciona
suficientemente ácido clorhídrico con 4 ml. y calentar suavemente al baño de
maría durante una hora. Utilizar una laminilla de cobre previamente lavada con
HN03 al 10% o con alcohol etílico al 95%, no tomar lámina con la mano. La
lámina de cobre, lavarla con agua destilada y secarla con papel de filtro. Si la
lámina de cobre permanece sin color, se concluye que no están presentes los
metales, tales como arsénico, mercurio, bismuto, antimonio, etc. Si se
encuentra un depósito en la lámina, se observará su color así:
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Arsénico Lámina del cobre negromate
Selenio Gris opaco
Bismuto Gris opaco
Mercurio Gris opaco
Antimonio Gris plateado brillante Púrpura oscuro
Mecanismo de reacción:
Cuº Cu+2 + 2e-
Hg+2 + 2e- 2Hgº
Resultados:
El resultado obtenido fue negativo para nuestra muestra de orina.
2. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
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- De común la investigación de los tóxicos mas comunes son específicos de
realizar en determinadas muestras, como por ejemplo la investigación de
monóxido de carbono es específica para muestras de sangre, en cambio la de
la mayoría de las drogas de uso social se pueden investigar en la mayoría de
muestras.
- En los métodos de cuantificación se utilizan otro agentes liberadores de los
tóxicos de las muestras problemas como el ferrocianuro de potasio o ácido
sulfúrico en el caso de muestras de sangre.
- En algunos casos de reconocimiento con papeles reactivos se utiliza papel
whatman número 4 o mayores para lograr una mayor evidencia de la reacción.
3. CONCLUSIONES
- Al obtener dos resultados positivos para la identificación de ácido cianhídrico
con los papeles sensibles en la muestra de orina tratada esta está contaminada
posiblemente con ácido cianhídrico.
- Al contener la muestra de orina el olor característico de almendras amargas,
cabe la posibilidad que la muestra esta contaminada con ácido cianhídrico.
- El análisis químico con papeles sensibles nos dan un indicio de lo que
podría contener la muestra en estudio, estos deben ser corroborados con
métodos cualitativos y cuantitativos.
El ácido tartárico volatiliza los tóxicos que podrían encontrarse en la
muestra problema para su identificación con los papeles reactivos impregnados
con el reactivo en cuestión.
4. CUESTIONARIO
1. Mencione los tipos de incendios y de extintores.
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El sistema de clasificación tiene distintas designaciones para los extintores: clase A, B, C y D. Las clases se basan en el tipo de incendio –o sea, qué es lo que se está quemando. El tipo de incendio, determina el tipo de agente extintor.
TIPO DE EXTINTOR
CONTENIDO TIPO DE INCENDIO
A Agua presurizada o espuma. Actúa por enfriamiento del material y remojando el material para evitar que vuelva a encender,
Combate el fuego que contienen materiales orgánicos sólidos, tales como la madera, papel ,plásticos, tejidos, etc.
B Contiene espuma, dióxido de carbono.
Se utiliza en los incendios provocados por líquidos y sólidos fácilmente inflamables como el alcohol, grasa, cera, gasolina, etc.
C Estos contienen gas carbónico o dióxido de carbono.
Son los recomendados para incendios provocados por equipos eléctricos, tales como caja de fusibles, interruptores automáticos, generadores, etc.
D Son los que contiene polvo seco especial.
Son utilizados en incendios que intervienen metales que arden a mucha temperatura y necesitan mucho oxigeno para su combustión y que con el agua o químicos reaccionan violentamente.
2. Primeros auxilios en quemaduras por ácidos y álcalis corrosivos.
- Por ácidos, en la piel. Cortar lo más rápidamente posible la ropa empapada
por el ácido. Echar abundante agua a la parte afectada. Neutralizar la acidez de
la piel con disolución de hidrógeno carbonato sódico al 1%. (si se trata de ácido
nítrico, utilizar disolución de bórax al 2%). Después vendar.
- Por álcalis, en la piel. Aplicar agua abundante y aclarar con ácido bórico,
disolución al 2 % o ácido acético al 1 %. Después secar, cubrir la parte
afectada con pomada y vendar.
- Por otros productos químicos. En general, lavar bien con agua y jabón.
Síndrome Cáustico o Corrosivo: Los cáusticos son de sustancias que
producen quemadura en el tejido con el cual se ponen en contacto, mientras
que los corrosivos son aquellos químicos capaces de producir lesiones
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químicas directas sobre los tejidos. Los agentes más comunes son los ácidos
y las bases fuertes (pKas de 0-3 y 11,5-14; respectivamente). Ante el consumo
oral, se trata de una de las intoxicaciones más dolorosas que existen.
El riesgo principal con el lavado gástrico es el de la aspiración del contenido
del estómago; no debe usarse en las intoxicaciones por cáusticos o
hidrocarburos. El carbón activado no está indicado, debido a que no adsorbe,
en caso de ingestión de cáusticos.
- No neutralizar un ácido con un álcali o viceversa.
– No intentar maniobras de vaciado gástrico.
– Si hay vómito, tratarlo sintomáticamente.
– Diluir el caústico administrando agua fría o mejor helada, 150 cc lo más
precozmente posible (máximo 30 min.), exclusivamente ante una ingesta de un
alcalí. Es probable que esta medida sea inefectiva ya que la lesión corrosiva se
establece en menos de un minuto tras la ingesta cáustica. Por otra parte es
conveniente no administrar mucha agua ni ingerirla muy rápidamente para no
estimular el vómito.
Quemaduras por causticación: Es la impregnación de la piel con sustancias
corrosivas como ácidos, productos químicos, etc.
Su tratamiento es similar al de las quemaduras:
Retirar la ropa impregnada.
Arrastrar el corrosivo con agua abundante.
Tratar después como el resto de las quemaduras: cubrir y trasladar.
Si la causticación se produce en los ojos:
Lavar con agua abundante durante un mínimo de 20 minutos.
Cubrir ambos ojos.
Traslado urgente a un centro especializado
3. indique reactivos con relación a su estabilidad y duración en el tiempo
(corta mediana y alta)
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Reactivos inestables
Ninhidrina: (polvos) sustancia cristalina de color amarillento, se utiliza para
revelar aminoácidos. Es inestable a la presencia de luz. La sustancia se
disuelve en disolventes orgánicos, normalmente se ha utilizado la acetona. Es
el revelador químico más usado y su principal defecto el de ensuciar el soporte.
Oxido de cloro: Póngase en una redomita un dragma de clorato de potasio
con cuatro dragmas de acido hidro – clorito
Solución de ácido tánico: Disolver 5g de ácido tánico en 100 de agua
destilada
Acido vanadisulfurico: Se prepara triturando una parte del vanadato amónico
con 200 partes de ácido sulfúrico concentrado.
Lugol: Disuelva 10 g de yoduro potásico en 100 ml de agua destilada.
Agregue lentamente 5 g de cristales de yodo, agitando al mismo tiempo.
Filtre y guarde en un frasco marrón, que cerrará firmemente.
BIBLIOGRAFIA
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LIBROS:
TEODORO SABALITSCHKA: Análisis químico toxicológico. Editorial Labor S.A. 1926. Pág. 28 – 29.
RENE FABRE:Tratado de toxicología. Editorial Paraninfo S.A. España, Madrid. 1976. Pág. 316
PAGINAS WEB:
gopleace.iespana.es/articulos/antimoniumtartaricum.htm - 13k –
www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/monoxido_carbono.html - 35k
www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/monoxido_carbono.html
http://www.quimicaweb.net/ciencia/paginas/laboratorio/auxilios.html
www.medicinainterna.com.pe/revista/revista_20_1_2007/a07v20n1.pdf
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