PRÁCTICA 5PRÁCTICA 5Sesión 2

Observación de cromosomas humanosObservación de cromosomas humanos

Curso 2007-2008Curso 2007-2008

GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos

Observar cromosomas metafásicos con tinción diferencial (Cromosomas arlequines).

Observar preparaciones de linfocitos de sangre periférica humana - Cariotipo humano.

Observar cambios estructurales de los cromosomas.

GENÈTICA MENDELIANAPráctica 5: ObjetivosPráctica 5: Objetivos

Observar preparaciones de linfocitos de sangre periférica humana. Cariotipo humano.

Observar cambios estructurales de los cromosomas.

GENÈTICA MENDELIANACariotipoCariotipo

Norma general

Cariotipo

Dotación cromosómica constante respecto al

número y la estructura de los cromosomas

GENÈTICA MENDELIANAObservación del cariotipoObservación del cariotipo

VENTAJAS DEL USO DE LINFOCITOS

1- Fáciles de obtener y de cultivar

2- Cariotipo estable (humanos 2n=46)

3- Población sincronizada (G0)

4- Técnica estandarizada

5- Circulan por todo el cuerpo (exposición global)

6- Vida media larga (semanas- años)

7- Sensibles a exposiciones perjudiciales (in vitro- in vivo)

GENÈTICA MENDELIANACiclo celularCiclo celular

CICLO CELULAR

INTERFASE

MITOSIS

PROFASE

METAFASE

ANAFASE

TELOFASE

GENÈTICA MENDELIANAObservación del cariotipoObservación del cariotipo

INTERFASE

Go G1 S G2

MITOSIS

Profase/ Metafase /Anafase/Telofase

Colcemid

G0 0 h

Fitohemaglutinina (PHA)

46 h 48 h

Provoca la activación de los linfocitos

Antimitótico. Impide la formación del huso mitótico, bloqueando la

división celular.

KCl

Fijaciones

Preparaciones

GENÈTICA MENDELIANAIdentificación de los cromosomasIdentificación de los cromosomas

Tinción uniforme - Giemsa

Clasificación:

Tamaño

Posición del centrómero

GENÈTICA MENDELIANAClasificación de los cromosomasClasificación de los cromosomas

Grupo C (6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, X)

Grupo A (1, 2, 3)

Cromosomas más grandes.

Grupo B (4, 5)

Submetacéntricos grandes

Grupo D (13, 14, 15)

Acrocéntricos grandes. Pueden tener satélites.

Submetacéntricos medianos

GENÈTICA MENDELIANAClasificación de los cromosomasClasificación de los cromosomas Grupo E (16, 17, 18)

Tamaño mediano.

Grupo F (19, 20)

Metacéntricos pequeños.

Grupo G (21, 22, Y)

Acrocéntricos pequeños.Pueden tener satélites.

Cromosoma Y

Los brazos q, suelen ser un poco más largos que los del resto del grupo G y están más juntos entre sí.

GENÈTICA MENDELIANAClasificación de los cromosomasClasificación de los cromosomas

GENÈTICA MENDELIANAObservación de preparacionesObservación de preparacionesCariotipo.Cariotipo.

INTERFASE PROFASE

METAFASE

GENÈTICA MENDELIANAObservación de preparacionesObservación de preparacionesCariotipo.Cariotipo.

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Curso 2007-2008Curso 2007-2008

GENÈTICA MENDELIANAAberraciones cromosómicasAberraciones cromosómicas

Variación respecto al cariotipo Cariotipo

Dotación cromosómica constante respecto al número y estructura

de los cromosomas

ABERRACIONES CROMOSÓMICAS (AC)

GENÈTICA MENDELIANAAberraciones cromosómicasAberraciones cromosómicas

Cambios citológicamente visibles que afectan el número y/o estructura de los cromosomas que forman el cariotipo de una especie.

El ensayo de AC se utiliza en la evaluación genotóxica de diversos productos.

GENÈTICA MENDELIANAAberraciones cromosómicasAberraciones cromosómicas

ABERRACIONES CROMOSÓMICAS

LÍNEA SOMÁTICA

ENVEJECIMIENTO

ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES

CÁNCER

LÍNEA GERMINAL

DEFECTOS DE NACIMIENTO

ABORTOS ESPONTÁNEOS

INFERTILIDAD

La asociación entre desordenes genéticos y la presencia de AC hace de las aberraciones un MARCADOR DE RIESGO.

GENÈTICA MENDELIANAAberraciones cromosómicasAberraciones cromosómicas

Numérica

Estructural

Número total de cromosomas difiere de la dotación cromosómica diploide.

Altera la morfología de uno o más cromosomas (cambios en la secuencia lineal de los genes).

CROMATÍDICA

CROMOSÓMICA

GENÈTICA MENDELIANAAC estructuralesAC estructurales

AGENTE CLASTOGÉNICO

Las aberraciones estructurales son biomarcadores de efecto que nos permiten cuantificar las exposiciones debido una relación dosis-efecto.

El incremento en la frecuencia de aberraciones después de una exposición permite determinar la dosis de exposición y el riesgo asociado.

ACs

ESPONTÁNEO

GENÈTICA MENDELIANAAC estructuralesAC estructuralesTeoría de la rotura y reunión.Teoría de la rotura y reunión.

A. clastogénico

ROTURAS (DELECIONES)

INTERCAMBIOS

............

INTRACAMBIOS

............

Reparadas

No reparadas

Reparadas incorrectamente

INDUCCIÓN DSBs REPARACIÓN ACs

GENÈTICA MENDELIANAAC estructuralesAC estructuralesCromosómicas (antes fase S)Cromatídicas (después fase S)

ROTURAS

delecióngaprotura isocromatídica

gaprotura o deleción

DicéntricoTranslocación recíproca

Intracromosomas Intracromosomas

Anillo céntrico Anillo acéntrico

triradial isocromatídico

INTERCAMBIOS

Entre cromosomas Entre cromosomas

tetraradiales

GENÈTICA MENDELIANAObservación de preparacionesObservación de preparacionesAC.AC.

NIVEL BASAL:

0-5 AC/100 células

GENÈTICA MENDELIANAObservación de preparacionesObservación de preparacionesAC.AC.

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