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8/15/2019 Practica de Aceites Esenciales (CCD)
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ENSAYO DE ANÁLISIS POR CROMATROFRAFÍA DE CAPA DELGADA DE UN
EXTRACTO
I. INTRODUCCIÓNLa cromatografía en capa delgada es un método simple y eficiente que
sirve para identificar y cuantificar metabolitos secundarios en las vegetales,
sus extractos, tinturas e igualmente para que en una formulación
farmacéutica sea posible identificar la presencia de un metabolito
secundario de interés farmacológico.La mayoría de monoterpenos y sesquiterpenos se encuentran presentes en
los aceites esenciales de diversas plantas. A partir de dichos extractos es
posible realizar su aislamiento mediante la utilización de uno o variosmétodos cromatogrficos tales como la cromatografía en columna, en capa
fina y !"L#. "ara las cromatografías en columna y en capa fina se utiliza
ampliamente la sílica gel como fase estacionaria. #omo fase móvil se
emplea solventes apolares puros o mezclados. $in embargo actualmente
se utilizan técnicas de separación ms eficientes y rpidas como la
cromatografía líquida de alta eficiencia !"L#, y la cromatografía de gases
%', así como también combinaciones (online) !"L#**+$.
II. OBJETIVOS Anlisis cromatogrfico %##' del extracto de a-o sacha para identificar sus
componentes principales.
III. REVISION BIBLIOGRAFICAxisten dos procedimientos, uno sobre papel y otro sobre placa de silicagel./anto al papel como a la placa de silica gel se les denomina fase
estacionaria.n ambos se deposita el material a ensayar con una micropipeta de
laboratorio o instrumental seme-ante %una -eringuilla de muestreo', sobre
una línea de referencia o de partida. La placa de silica gel con la muestra
depositada se coloca dentro de una cmara con una mezcla de solventes
orgnicos que son específicos para cada ensayo a la cual se le denomina
fase móvil. Al cabo de cierto tiempo especificado se determina el corrimiento que ha
tenido la mezcla de solventes los cuales se desplazaron sobre la fase fi-a
en el papel o placa de silica gel y se determina la distancia desde el punto
en donde se colocó la muestra hasta el borde extremo del corrimiento de la
fase móvil.
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n la medida que la muestra se desplaza sobre la fase fi-a va de-ando un
rastro de sustancias orgnicas que deben ser reveladas por medio de un
reactivo químico o exponiendo la fase móvil ba-o los rayos de la luz
ultravioleta.
$e determina la distancia que se encuentra la mancha o manchasdetectadas desde su posición al punto de partida de la muestra. La razón
entre la distancia a que se encuentra la mancha analizada y el total del
corrimiento de la fase móvil se le llama razón de fraccionamiento 0f.#uando los principios activos de una droga no son conocidos, la
identificación del extracto puede ser realizada a través de la determinación
de sustancias características de la planta en cuestión, aunque no tengan
actividad farmacológica %perfil cromatogrfico' contra un extracto preparado
ba-o las mismas condiciones de la muestra, pero con un material vegetal dereferencia.stas sustancias denominadas marcadores %o marcadores positivos', son
seleccionadas entre los diferentes compuestos característicos de la planta
medicinal. l uso de ellas debe limitarse solamente a la identificación del
material vegetal, de los extractos y de las tinturas. Los marcadores pueden
servir, igualmente, para identificar la presencia del extracto en un
fitofrmaco.#uando los marcadores no son las sustancias responsables de la acción
farmacológica del extracto, no deben ser utilizados para las
determinaciones cuantitativas. La presencia de manchas o bandas coloreadas con el mismo valor de
razón de fraccionamiento %0f' de las sustancias de referencia en el
cromatograma de la muestra, no es suficiente para identificar el material
vegetal.La existencia de otras manchas o bandas coloreadas debe ser anotada, así
como su posición en relación a la posición de las sustancias de referencia
utilizada. l uso de sustancias de referencia que no son constituyentes dela planta es de utilidad para determinar la ocurrencia de falsificaciones,
estas sustancias reciben la denominación de marcadores negativos.ebe especificarse las condiciones cromatogrficas de la fase estacionaria,
la fase móvil y el revelado.IV. MATERIALES Y MÉTODOS
+A/01AL$ +uestra2 extracto de material vegetal %a-o sacha'. $olvente de extracción2 puede ser et3!, +e3, #!4#l4, hexano. #mara oscura en 5ltra 6ioleta.
"robeta. #apilar.
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6ial. #mara cromatografía. "lacas cromatografías. "apel de filtro. +atraz.
+7/33$ 893 "03#1+1:/3;. $e pesa el extracto
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@. Anotar los resultados del recorrido de las manchas segFn ecuación.
=. espués de terminado la primer experimento, se procede a hacer otroexperimento ms pero esta vez usando una disolución del extracto en ;
ml. en la relación de ?2E.; cm.
Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresión:
Rf = Distancia recorrida de la substancia
Distanciarecorrida por el disolvente ; o
h1
D ,
hn
D
ónde2 h; G sustancia uno %;'
hn G sustancia n
RF CON UN SISTEMA DE TOLUENO: ACETATO DE ETILO 1:9
$e preparó ? ml de solvente, /olueno B Acetato de etilo en relación %4.E ml
de tolueno y
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substanci
a
Recorrido
(substanci
a)
Rf
A ;.> .=>
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$e puede demostrar la presencia de metabolitos secundarios en el
experimento.
:os indica la mayor separación de los metabolitos en los solventes. $e llega a la conclusión de que la separación se da por migración diferencial,
puesto que la fase móvil, arrastra a las substancias menos polares y aquellasmenos polares quedan retenidas.
VII. ANEXOS
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+omento de preparación del sistema tolueno*acetato de etilo2
#mara cromatografía lista para el experimento2
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+uestra de las placas cromatografías después del experimento y en la cmara ultra
violeta2
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VIII. BIBLIOGRAFIA
http299JJJ.plantas*medicinal farmacognosia.com9temas9m
K#?KA=todos*de*anK#?KA;lisis*de*droga9cromatograf
K#?KAa*en*capa*delgada9 http299JJJ.monografias.com9traba-os@>9analisis*fitoquimica*
metabolitos*secundarios9analisis*fitoquimica*metabolitos*
secundarios.shtml http299old.iupac.org9publications9cd9medicinalchemistry9"ractica*61*
C.pdf
http://www.plantas-medicinal/http://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.plantas-medicinal/