Prácticas Ftos. Microbiología Aplicada

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Prácticas de Fundamentos de Microbiología Aplicada (4º Biología UAH)* Detección de actividades bioquímicas en bacterias: hidrólisis de almidón, proteínas, lípidos, celulosa y xilano; utilización de hidratos de carbono.* Análisis microbiológico de agua de piscina.* Estudio de la sensibilidad de un microorganismo a un antibiótico “in vitro” por la técnica de macrodilución en caldo (C.M.I y C.M.B).* Búsqueda de Salmonella en carne picada.* Observación de las bacterias acéticas y de levaduras de la flor del vinagre.

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Alberto Fonte Polo 4º Biología (2009-2010)

Escherichia coli

Bacillus subtilis

Pseudomonasaeruginosa

Agar Almidón

Amilasas

Lugol

Staphylococcus aureus

Bacillus subtilis Pseudomonasaeruginosa

Agar Spirit Blue

Lipasas

Escherichia coli

Bacillus subtilis

Enterococcus faecalis

Agar Gelatina

Proteasas

Reactivo de Frazier

Proteus vulgaris

Tubos con caldo lactosado y caldo

con sacarosa con campana

Durham

Utilización de azúcares

AmarilloGas

E. coli

Fermentativo

Medio de Hugh y Leifson

Oxidación/Fermentación de azúcares

vaselina

Enriquecimiento

Caldo Mc Conckey con

campana Durham

Caldo Rothe

Caldo GiolittiCantoni

E. coli

Enterococcus faecalis

Staphylococcus aureus

vaselina

TurbidezAmarillo

Gas

Turbidez

TurbidezEnnegrecimiento

Aislamiento

E. coli

Agar Levine

Enterococcus faecalis

Medio KAA Agar Cetrimida

Pseudomonas aeruginosa

Aislamiento Confirmación

Medio Baird-Parker PCA

Colonias negras y con halo de aclaramiento

Colonias doradas

Pruebas confirmativas

Tinción de Gram

E. coli Pseudomonas aeruginosa

Bacilo

Gram –

Bacilo

Gram –

Pruebas confirmativas

Tinción de Gram

Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus

Diplococos

Gram +

Cocos

Gram +

Pruebas confirmativas

E. coli

Pseudomonasaeruginosa

Prueba de la oxidasa

Oxidasa +

Oxidasa –

Pruebas confirmativas

Prueba de la catalasa

Catalasa +Catalasa –Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus

Burbujas

Pruebas confirmativas

Medio KIA

Ac/Ac; SH2 –; Gas +24 h

Producción de indol

positivo

Escherichia coli

Pruebas confirmativas

Medio KIA

Alk/N.C.; SH2 –; Gas –

Microorganismo Oxidativo

Pseudomonas aeruginosa

Medio de Hugh Leifson

vaselina

Prueba O/F de la glucosa

Pruebas confirmativas

Formación de pigmentos

Piocianina Pioverdina

Pseudomonas aeruginosa

Actividad ureasa

Medio King A Medio King B

Positivo

Tubo de agar-urea

Pruebas confirmativas Pseudomonas aeruginosa

Reducción de nitratos

¿negativo?

Reactivo A Reactivo B

Limaduras de zinc

PositivoTubo de caldo

nitratado

Pruebas confirmativas

Crecimiento en caldo BHI con

NaCl 6,5%

Turbidez en

ambos tubos:

Prueba positiva

Enterococcus faecalis

Crecimiento en caldo BHI a 42ºC

Pruebas confirmativas

Prueba positiva

Prueba de la DNAsa Prueba de la actividad proteolítica

Agar-gelatinaAgar-DNA

Prueba positiva

Control negativo

Control positivo

Turbidez No turbidez

0,25 0,5 1 2 μg/ml 4

CMI

CMB=4 μg/ml

Enriquecimiento

Medio de Müller-Kauffmann

Aislamiento

Medio XLD

24 h 48 h

Proteus sp.Salmonella sp.

Salmonella sp.¿ ?

Aislamiento

Medio HEA

24 hProteus sp.Salmonella sp.¿ ?

Pruebas confirmativas

Prueba de la oxidasa

Oxidasa –

Prueba de la catalasa

Catalasa +

Pruebas confirmativas

Tinción de Gram Medio KIA

Alk/Ac; SH2 +; Gas +

24 h

Bacilo

Gram –

Pruebas confirmativas

Prueba de la lisina descarboxilasaPrueba de la ureasa

positivonegativo

Pruebas confirmativasPrueba de

Voges-Proskauer

IMViC

Producción de indol

Rojo de metilo

Prueba del citrato

IMViC–+–+

Tubo de agua de peptona

Reactivo de Kovacs

RMVP RMVP Medio de Simmons

Potasaα-naftol

Rojo de metilo

Vinagre añejoVinagre jovenVino

Tinción de Gram

Gluconobacter sp.Acetobacter sp.

Bacilos Gram +

Vinagre de vino joven

Agar-Etanol-Carbonato cálcico

Vinagre de cerveza añejo

Medio YEM

Saccharomyces cerevisiae