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7/24/2019 Protocolo de Tesis A
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Q. Vanessa Monserrat Aldana Castolo
Q. Tabata Karewit Prez Contreras
7/24/2019 Protocolo de Tesis A
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PROTOCOLO DE TESIS
Titulo
Crecimiento y capacidad de biorremediacin de Chlorella vulgaris cultivada en
auas residuales con e!luentes de orien domstico" industrial y ar#cola en el lao
de C$apala.
Introduccin
%n los pa#ses en v#a de desarrollo" e&iste un crecimiento sin control ni planeacin
tanto de industrias como de asentamientos $umanos" oriinando entre otros el
problema de alteracin de la calidad del aua en los ecosistemas acu'ticos" ya (ue
se utilizan como un sistema de eliminacin muy cmodo" en donde los r#os tienen
un papel !undamental" dada su naturaleza ltica. %l deterioro de la calidad del aua"
supone un rave problema medioambiental y socioeconmico" (ue se acent)a en
zonas de escasos recursos. %l uso del aua potable para abastecimiento urbano e
industrial" debe ir acompa*ado de una correcta depuracin (ue permita su
reutilizacin para rieo ar#cola" de 'reas verdes" auas recreativas" reutilizacin
industrial" piscicultura" o bien como elemento (ue no perturbe el e(uilibrio biolico
de la zona de vertido y (ue evite la contaminacin de acu#!eros subterr'neos y
masas super!iciales de auas continentales o marinas+.
%n el caso del lao de C$apala" el r#o ,erma constituye la principal !uente de
contaminacin debido a (ue todos los desec$os (ue son vertidos en l
desembocan en el lao-.
%l ,ao de C$apala $a estado e&puesto a diversas !uentes y niveles de
contaminacin" como descaras municipales de di!erentes comunidades" auas de
retorno ar#cola y auas residuales provenientes del r#o ,erma" vertidas porindustrias.
,a inmensa mayor#a de los usuarios no tratan el aua una vez (ue la utilizan" y m's
bien la aprovec$an como ve$#culo para eliminar desec$os. %/emplo de ello $a sido
la escasa in!raestructura de saneamiento para tratar las descaras de las industrias
m's importantes de la cuenca" el incumplimiento de relamentos y condiciones de
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descara" las ba/as tari!as por uso de aua" as# como el incremento en el volumen
de los e!luentes urbanos y de los retornos ar#colas de zonas de rieo.
%n ambientes acu'ticos naturales o arti!iciales" marinos o de aua dulce" las
microalas est'n siempre asociadas a bacterias ya sea como promotoras de
crecimiento" simbiontes o bien contaminantes0. ,as microalas" oranismos
auttro!os (ue ocupan el primer eslabn en la cadena tr!ica" $an recibido muc$a
atencin en los )ltimos a*os" especialmente en las reiones tropicales y
subtropicales" en donde se emplean como un biosistema alternativo para la
remocin de nutrientes de este tipo de auas. %stos microoranismos incorporan
nitreno en !orma de amonio (ue es utilizado para !ormar amino'cidos1 aun(ue
tienen la capacidad de incorporarlo en !orma de nitrato2.
%l uso de las microalas" como biosistema alternativo" en el tratamiento de las
auas residuales" $a sido el ob/eto de numerosas investiaciones debido a su
capacidad de remover cantidades sini!icativas de 3 y P durante su crecimiento"
absorber metales y acelerar la inactivacin de bacterias patenas4. Adem's la
biomasa alal producida" durante el procesamiento de estos e!luentes" representa
una !uente potencial de alimentos" (u#micos y pimentos" entre otras importantes
aplicaciones5.
%l nero Chlorellaas# como alunas especies del rupo de las cianobacterias" se
$an descrito en el tratamiento de di!erentes tipos de auas residuales" destacando
las provenientes de plantas de tratamiento convencionales6" de orien industrial"
urbano y las derivadas de e&cretas animales. %l ob/etivo de la presente
investiacin es evaluar el uso de Chlorellavulgarispara la remocin de nitreno"
!s!oro y 7Q8 del lao de C$apala.
Antecedentes
%l tratamiento de las auas residuales es solo una parte del sistema de limpieza del
aua" la produccin de lodos y el mane/o del aua tratada es otro aspecto de esta
actividad. %&isten varios mtodos para el tratamiento de auas residuales. 7e
acuerdo con el rado de comple/idad y del espectro de sustancias" materiales y
oranismos eliminados" se dividen en los siuientes niveles9 primario" el cual
elimina el 4: ; de los slidos suspendidos" un : ; de materia or'nica y entre un
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2 a un +2 ; de nutrientes1 secundario" elimina el
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son todav#a descarados sin nin)n tratamiento previo. ,a concentracin e&istente
de nutrientes en el lao enera eutro!icacin asociada por el crecimiento de
veetacin acu'tica !lotante (ue podr#an causar problemas de sabor y olor en aua
para abastecimiento urbano y a!ectar la sanidad del ecosistema.
i!tesis
%s el razonamiento ordenado para e&plicar" demostrar y !undamentar el
planteamiento terico.
,a realidad de uno de los problemas (ue se plantea en el lao C$apala es la ran
cantidad de sedimentos (ue recibe de sus a!luentes. Cada a*o el lao recibe
acteriolica"por las auas residuales urbanas y de centros de
produccin porcina" y" (u#mica" de orien tambin urbano pero !undamentalmente
en las 'reas industriales. %l aua est' altamente contaminada con 77T" (u#micos
ar#colas" cobre" plomo" cromo" zinc" cianuro" auas neras y !s!oro. ?n estudio
de las descaras de nueve plantas de tratamiento (ue vac#an directamente en ellao encontr niveles de !s!oro 50 veces m's elevado (ue la norma de ?=%PA. %l
40; del aua (ue llea al lao est' sin tratar y se considera (ue se necesitar#an
unas +: plantas de tratamiento de auas neras para me/orar la calidad del lao.
,as consecuencias ambientales y econmicas a)n se desconocen" pero se advierte
un !uerte deterioro ambiental y" con ello" la deradacin del medio ambiente a laro
plazo. =alvar el ,ao de C$apala ser#a conruente con una pol#tica sustentable"
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para lo cual se propone probar la capacidad y crecimiento de la ala verde
Chlorella vulgaris en dic$as auas para su biorremediacin.
Ob"eti#os
8b/etivo eneral9
7esarrollar tecnolo#as e!icientes y de ba/o costo para el tratamiento de
auas residuales de uso domstico.
8b/etivo espec#!ico particular9
%valuar el crecimiento y la e!icacia de remocin de nutrientes de Chlorella
vulgaris en e!luentes enerados por poblacin /alisciense de orien
domstico" industrial y ar#colaen el lao de C$apala.
$etodolo%&a
%mpleando sepas de Chlorella vulgaris, aisladas. para el medio de cultivo se
utilizara aua residual proveniente del lao de C$apala. Por lo tanto el aua (ue
analizaremos solo ser' sometida a un tratamiento preliminar de cribado" por lo (ue
contendr' mayor concentracin de nutrientes. Tomando dos muestras m's1 una
sometida a esterilizacin durante -:minutos a +-+@C y +2 libras de presin"mientras (ue la otra al#cuota solamente ser' !iltrada usando dos veces papel
$atman 3@ 0-. ,as muestras ser'n rotuladas como9
Aua con contaminacin inicial.
Aua esterilizada.
Aua !iltrada.
,os tratamientos controles se prepararon con aua destilada esterilizada y medio
de Cultivo A,BA,+
a una concentracin e(uivalente a 4": mM de 3a38 y :" mMde 3aP80 como )nicas !uentes de nitreno y !os!ato.
,os bioensayos se iniciaran con un inculo de :.40&+:4 de Chlorella vulgaris, el
cual proven#an de cultivo en !ase e&ponencial y desarrollado en medio A,BA, a 4":
mM de 3a38. ,os e&perimentos se desarrollaron" por triplicado" en recipientes de
vidrio con un volumen de -:: m," se mantuvieron con una radiacin de +5
Dmol.(.mE-.sE+" ba/o ciclos de luz9oscuridad de
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+-9+- $oras" a una temperatura promedio de -6F-@C y sin aireacin por un per#odo
de -5 d#as.
DE'SIDAD CELLAR CO'TE'IDO DE PI*$E'TOS + DE PROTE,'AS
%l crecimiento de cada microala se determin mediante el conteo celular de los
cultivos cada d#as" utilizando una c'mara de 3eubaGer. %l contenido de cloro!ila
total y de carotenoides se cuanti!ic a partir del e&tracto metanlico de la biomasa
alal !resca cada d#as. ,os e&tractos obtenidos se clari!icaron por centri!uacin y
la concentracin de los pimentos se determin mediante espectro!otometr#a.
A'-LISIS .,SICO/,$ICOS
%l contenido de !os!ato HPIP80EJ" nitreno amoniacal H3I30 J y 7Q8. %stos
an'lisis se realizaron en9
aJ Aua residual cruda9 aua residual sin nin)n tratamiento.
bJ Aua residual para el cultivo de las microalas9 aua residual esterilizada y aua
residual !iltrada no esterilizada" y lueo de inocular la microala a las -0 $ y a los -5
d#as de iniciado el e&perimento.
%n estos an'lisis se utilizaron los sobrenadantes de los cultivos por rplica de cada
tratamiento" lueo de una centri!uacin de : m, de cada cultivo durante +2
minutos a +::: rpm.
A'-LISIS ESTAD,STICO
,os resultados se e&presaron como los promedios de los triplicados de cada
tratamiento.
Crono%rama De Acti#idades
Actividades Lec$as
nicio de protocolo de tesis -5 de aosto de -:+2
ndaar al)n tema de inters I+2 de septiembre de -:+2
Nedaccin del titulo +5 de septiembre de -:+2An'lisis e investiacin del tema -0 de septiembreI+5 de octubre de
-:+2ntroduccin del tema +
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Mtodos a utilizar < de noviembre
Necoleccin y procesamiento de
datos
++ de noviembre de -:+2
7ise*o de presentacin de
diapositivas
+ de noviembre de -:+2
Nevisin y correccin del traba/o !inal +4I-: de noviembre de -:+2%ntrea de protocolo de tesis
Htraba/o !inalJ
-: de noviembre de -:+2
0iblio%raf&a
+. ArandaICirerol" 3." erreraI=ilveira" O.A." Com#n" L.A. -::4. 'utrient
1ater 2ualit3 in a tro!ical coastal 4one 1it5 %round 1ater
disc5ar%e nort51est +ucat6n $e7ico8 Estuar Coast Shelf Scien
469002E020.-. ,imn O." Oaramillo" O." ,edesma" N." est" ,." lvarez" =. y Nu#z" N."
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