Post on 15-Jul-2020
Teoria cel.lular
Descobriments previs a la Teoria cel.lular
• 1665, R. Hooke va vore açò:
A estes cavitats les anomenà cel.lescèl.lula
• 1668, Antony Van Leeuwenhoek amb un microscopi construit per ell mateix observa cèl.lules animals, vegetals, bacteris... ell li diu animàculs
• 1838 Schwann i 1839 Schleiden amb millorsmicroscòpis òptics veuen cèl.lules vegetals i animals:
1. Tots els éssers vius estan formats per cèl.lules
2. La cèl.lula és la unitat estructural i funcional delséssers vius
3. Totes les cèl.lules provenen d’una cèl.lula anterior
• 1858 Virchow afegeix el postulat “omnis cellula ex cellula”
• 1880 Weissman amplia l’afirmació de Virchow des del punt de vista evolutiu diet que: hi ha una continuitat ininterrompuda entre les cèl.lules actualsi les primitives
Mètodes d’estudi de la cèl.lula
1. Microscopia
1.1 Microscopia òptica
• El 1r microscopi òptic fou creat
per Janssen al 1590
• Els microscopis anaren millorant
afegint condensadors, filtres,...
LIMIT: poder de resolució la distància min entre dos punts per a veure’ls separats depen de:
la λ en que s’il.lumine l’objecte normalment llum visible
refracció del material entre la lent i l’objectiu oli immersió
Tamany de la lent objectiu
- Ull humà 0,2 mm- Microscòpics òptics poder de resolució de 0,2 µm- Microscopi electrònic 0,2 nm
Microscopi òptic compost de camp clar
• Preparació de les mostres per al microscopi òptic:– Fixació de la mostra agent fixador que entre en la
cèl.lula la mate però no altere morfològicament les seues estructures: formol, etanol, àc acètic
– Talls molt fins per a que la llum passe al traves
micròtom
Com que normalment són teixits molls es fa una inclusió en un material dur que es puga tallar: parafina
També es pot congelar la mostra i tallar-la amb un micròtom especial
– Tinció ja que normalment són transparents Al llarg del sXIX s’avançà molt en colorants
Colorants bàsics tinten parts àcides i al revés
– Muntatge portaobjectes + cobreobjectes
Es poden observar cèls vives amb colorants vitals que no maten les cèl.lules
https://www.youtube.com/watch?v=KnMdSgd5mts
Altres tipus
• Microscopi òptic de camp obscur
• Augmenta el contrast observem la mostra molt il·luminada sobre un fons negre
Microscopi de contrat de fases-També augmenta el contrast les ones de llum pateixen un desfase quan travessen una mostra amb un índex de refracció diferent que el medi que l’envolta- Es veuen cels vives sense tenyir
Microscopi de fluorescència- Les mostres es tenyeixen en colorants fluorescents i s’observen amb llum UV
1.2 Microscopia electrònica– La font “d’il.luminació” és un feix d’e- λ molt menor que
la llum poder de resolució major
– Dins del tub s’ha fet el buit
– Estructura invertida respecte del microscopi òptic
• Microscopi electrònic de transmissió (MET)
- Els e- travessen una fina mostra (ultramicròtom) i es projecten sobre una pantalla fluorescent- Les zones transparents als e-apareixen més brillants
• Microscopi electrònic de rastreig (barrido) (MEB)
• Els e- NO travessen la mostra xq està recoberta d’una capa finíssima de metall pesat els e- impacta en la mostra i està emet e- secundaris que són captats en una pantalla genera una imatge en 3D
2. Separació i fraccionament cel.lular
• Alguns estudis requereixen la separació de cèl.lules o l'aïllament dels seus orgànuls danyant-les el menys possible per a açò:
– Homogeneïtzació trencar l’adhesió que hi ha entre les cèl.lules, trencar l’estructura cel·lular i alliberar els seus orgànuls: xoc osmòtic, ultrasons, detergents, Potter, homogeneïtzador d’aspes (batidora)
– Centrifugació per a al separació de components que hem homogeneïtzat prèviament
3. Radioisòtops
• Incorporem a la cèl·lula isòtops (àtoms inestables que es desintegren i emeten partícules γ, α, β) i amb una emulsió fotogràfica es detecta la radioactivitat emesa
• Es fan créixer les cèl.lules en un medi de cultiu (amb nutrients, pH i Tª adequada) permet observar-les, fer una anàlisi bioquímica, i veure la resposta davant estímuls o presència o absència d’algunes substàncies
4. Cultius cel.lulars
Tipus cel.lulars
Teoria endosimbiòtica