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Universidad Tecnológica de la Mixteca
Maestría en Ciencias Productos Naturales y Alimentos
Separación y determinación de tocoferoles en aceites vegetales por extracción en fase sólida con cartuchos de polímeros porosos y análisis
cromatografía de gases capilar
(Beldean-Galea et al.)
PRESENTA:
Analleli Jiménez Durán
Huajuapan de León , Oax. Noviembre de 2012
Contenido
1. Introducción
2. Objetivo
3. Procedimiento experimental
4. Resultados y discusiones
5. Conclusiones
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1. Espectrofotometría
2. Voltametría
3. Cromatografía de capa fina
4. Cromatografía de gas
5. HPLC
1.1. Técnicas analíticas para tocoferoles:
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1.2. Los tocoferoles están asociados con membranas,
lipoproteínas, etc. Tipos de extracciones:
1. Extracción directa de la matriz del alimento.
2. Extracción después de la saponificación.
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Libera las vitaminas,
aunque se debe tener
cuidado con la cantidad
de hidróxido de sodio
que se utilice.
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1.3. Métodos de extracción de tocoferoles y tocotrienoles
Fluidos supercríticos
Fase Solida
Líquido – Líquido
Solventes orgánicos
Baja cantidad de solventes Concentración de analítos Limpieza de la muestra
Se utilizan cartuchos con:
Ciclohexil [18] Diol [20] Sílica gel [12, 21] Octadecil [18] Polímeros de impresión molecular Polímeros porosos
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1.4. Extracción fase sólida
Evaluar la eficiencia de extracción de 4 polímeros porosos en SPE de tocoferoles de aceites vegetales, seguida de un análisis cromatográfico de gases capilar.
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2. Objetivo
3.1. Materiales
7 Tipos de aceites
Polímeros porosos (Carlos Erba, Italia)
Estándares (Supelco, USA)
Solventes orgánicos grado HPLC (Merck, Alemania)
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3. Procedimiento experimental
Tabla 1. Características de los polímeros porosos
Hewlett Packard HP 4890 serie D
Columna capilar de sílice fundida
Inyector splitless
Detector de ionización de llama
Gas acarreador (Nitrógeno al 99.999%)
Temperatura inicial 140ºC
Velocidad de flujo 1.5 mL min-1
Características
del equipo
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3.2. Equipo y cromatografía de gases
Saponificación
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3.3. Pretratamiento de muestra
1 • 400 mg de aceite
2 • 0.2 grs. de ácido ascórbico
3 • 15 mL de metanol absoluto
4 • 1.5 mL de hidróxido de sodio al 50%
5 • Calentamiento a 70ºC por 3 min
6 • Enfriar los tubos
7 • 3 mL de cloruro de sodio
Análisis de NaOH
Muestra+15 mL de
mezcla de hexano:
acetato de etilo (85:15,
v/v)
Evaporar en
Nitrógeno
Disolver en 2
mL de la misma
mezcla
Cromatografía
de gases capilar
Preparación y
acondicionamiento Evaluar la
selectividad de los
poros
Extracción
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0.5g de polímero
poroso
Acetona y metanol
10µL de estándar + metanol
Elución (2 mL de
hexano:acetato de
etilo (90:10,v/v))
Evaporación de eluato en
nitrógeno 100 µL de
metanol
Cromatógrafo de
gases capilar
Lavado con agua
destilada
3.4. Extracción líquido-líquido
3.5. Extracción fase-sólido
Porapak Q
Análisis
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4.1. Optimización de la saponificación
Tabla 2. La influencia de la adición de NaOH en la recuperación de tocoferoles.
4.2. Extracción eficiente de los polímeros porosos.
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4. Resultados y discusiones
Figura 1. Gráficas sobre la eficiencia de los polímeros.
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Buen método para limpiar las muestras y para la concentración de especies requeridas
4.3. Comparación de la extracción líquido - líquido y extracción en fase
sólida en porapak Q
Figura 2. Extracción en fase sólida cromatograma B, extracción líquido-líquido cromatograma C.
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Resultados cuantitativos y cualitativos . Se determinaron en base al método
de curva de calibración.
4.4. Análisis cuantitativo
Tabla 3. Contenido de tocoferoles de varios aceites vegetales, extracción con cartuchos Porapak Q y análisis GC en PE
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En la saponificación, la perdida de tocoferoles puede ser controlada con
una cantidad y concentración adecuada de hidróxido de sodio.
La estabilidad de los tocoferoles se incrementa con el número de grupos
metilos unidos al anillo fenólico.
El uso de una extracción de fase sólido con cartucho Porapak Q es un
buen método para limpiar las muestras.
Con los polímeros no polares o copo polares se obtienen buenos
rendimientos de los tocoferoles.
5. Conclusiones
Voltametría
Comprende un grupo de métodos electroanalíticos que
suministran información sobre el analíto, a partir de la
medida de la corriente en función del potencial aplicado, en
condiciones que estimulan la polarización de un electrodo
indicador o de trabajo.
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Diapositiva de apoyo
Polímero molecularmente impreso
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Una tecnología emergente llamada impresión molecular, conduce a polímeros
sintéticos altamente estables, llamados polímeros de impresión molecular
(MIPs), poseen propiedades de reconocimiento molecular selectivo debido a que los
sitios de reconocimiento dentro de la matriz del polímero son complementarios al
analíto en la forma y posición de los grupos funcionales.
Algunos de estos polímeros tienen altas selectividades y constantes de afinidad,
comparables con los sistemas de reconocimiento que ocurren naturalmente tales
como anticuerpos monoclonales o receptores, los cuales los hacen especialmente
adecuados como constituyentes en sensores químicos (biomiméticos) para la
química analítica.
Diapositiva de apoyo