Post on 30-Dec-2015
description
1PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
1
VALIDACION DE METODOS ANALITICOS
2PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
2
MEDICIONES ANALITICAS VALIDAS
• Las mediciones analíticas deben ser realizadas para satisfacer requerimientos preestablecidos.
• Las mediciones analíticas deben ser realizadas utilizando métodos y equipos que hayan sido verificados de tal manera que aseguren que son adecuados a su propósito.
• El personal que realiza las mediciones analíticas debe
ser calificado y competente para asumir esta tarea.
3PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
3
MEDICIONES ANALITICAS VALIDAS
• En forma regular, debe existir una evaluación independiente del desempeño técnico del laboratorio
• Las medidas analíticas realizadas en un laboratorio deben ser consistentes con las que se realizan en otros laboratorios.
• Las instituciones que realizan medidas analíticas deben tener procedimientos de control y aseguramiento de calidad bien definidos.
4PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
4
ASPECTOS DE LA VALIDACION DE METODOS
•Especificaciones analíticas.
•Evaluación de su exactitud.
•Evaluación de su precisión (Repetibilidad y Reproducibilidad).
•Evaluación de incertidumbre.
•Sensibilidad.
•Especificidad
•Robustez.
5PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
5
ASPECTOS DE LA VALIDACION DE METODOS
•Rango de concentraciones de trabajo y rango de linealidad.
•Límite de detección.
•Límite de cuantificación.
•Ensayos de recuperación.
•Grado de validación necesario según objetivos.
6PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
6
EVALUACION DE PRECISION Y EXACTITUD
DE UN METODO ANALITICO
ESPECIFICACIONES ANALÍTICAS:
Los límites aceptables de exactitud y precisión están determinadas por los requerimientos de los resultados a obtener a través de dicho método.
•LÍMITES LEGALES•SISTEMAS DE ACREDITACIÓN•USUARIO DE LAS MEDICIONES•EXPERIENCIA PREVIA
7PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
7
SELECCIÓN DEL MRC
• Nivel
• Matriz
• Cantidad
• Estabilidad
• Incertidumbre aceptable del MRC
8PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
8
EXACTITUD DEL METODO
Esta propiedad se obtiene por comparación del valor promedio obtenido y el valor certificado , del MRC
Existen tres factores que contribuyen a la diferencia anterior:
• El error (incertidumbre) del valor certificado.
• El error de los resultados del proceso de medición que está
siendo evaluado, expresado como su desviación estándar d.
• El error sistemático global que el laboratorio puede estar cometiendo.
9PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
9
CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
El criterio de aceptación de exactitud está dado por la siguiente expresión:
LAB = x - < ( t0.05 sw / n ) + U =
crítico
Se acepta cuando LAB < crítico
Para realizar esta prueba estadística, es necesario tener alguna información previa:
•El valor de U, del MRC•Un valor estimado de la precisión del método.•¿Cual es la magnitud del sesgo que se quiere detectar?•¿Cual es el número “n” de mediciones replicadas que
es necesario realizar?
10PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
10
CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
Para ilustrar el uso del criterio anterior, veamos un ejemplo tomado de un estudio de intercomparación (As) previo :
Un laboratorio participante realizó tres mediciones replicadas de un MRC obteniendo un valor promedio de 40,2 g/L con una desviación estándar de 0.49 g/L.
El MRC tenía un valor certificado de 41,7 g/L y U= 0.5 g/L
Entonces lab = | 40,2 - 41,7 | = 1,51,5
crítico =(t0.05; df=2 SD / n) + U = (4,303 0,49 / 3) + 0,5 = 1,72
En consecuencia “pasa” la prueba de sesgo
11PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
11
CRITERIO DE ACEPTACION
DE EXACTITUD
Supongamos ahora que el mismo laboratorio realiza 9 determinaciones replicadas obteniendo el mismo valor promedio, con una desviación estándar menor e igual a
0, 31 g/L.
El valor de lab es el mismo: 1,5
Ahora, crítico es = (2,306 0,31/ 9) + 0,5 = 0,74
En consecuencia NO “pasa” la prueba de sesgo.
¿ QUE ES LO QUE OCURRE?
12PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
12
CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
Lo que nos faltó es una pregunta previa muy importante:
¿ Cual es la magnitud de sesgo que necesitamos detectar, de acuerdo a lo que es requerido?
13PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
13
CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
Supongamos que por requerimiento regulatorio, o para “aprobar” un requerimiento de desempeño por parte de un organismo regulador es aceptable un sesgo máximo del 5% relativo, en el rango de concentraciones 40 - 50 g/L.
El laboratorio sabe que su precisión al usar este método es del orden del 2% relativo o Coeficiente de Variación.
Usamos la Tabla 1 (ver Informe). Con y = 0,05, para
d = d / = 5% / 2% = 2,5 N = 3
14PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
14
CRITERIO DE ACEPTACION DE EXACTITUD
Si, en cambio, este laboratorio tuviera (típicamente) un Coeficiente de Variación del 5% relativo, tendríamos que para poder detectar un sesgo del 5%:
d = 5% / 5% = 1
y entonces de la Tabla 1 encontramos para y = 0,05 que
N = 13
15PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
15
FUENTES DE SESGO
Control de las variables de medición Interferencias Calibraciones erróneas Contaminación Pérdidas Deterioro de las muestras Ineficiencias en las extracciones o
disolución de las muestras Blancos incorrectamente evaluados o no
tomados en cuenta.
16PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
16
PRECISION DEL METODO
• Número de determinaciones replicadas
• Mediciones independientes
17PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
17
EVALUACION DE LA PRECISION
• El control de la precisión del método implica la comparación entre la precisión (desviación estándar intralaboratorio) bajo condiciones de repetibilidad y el valor requerido de desviación estándar.
• Realizar las “n” mediciones independientes (previamente determinadas) sobre las muestras del MRC.
• Calcular, de la manera habitual el valor promedio y la desviación estándar (sw ), bajo condiciones de repetibilidad.
18PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
18
CALCULO DE LA PRECISION DONDE r ES LA PRECISION REQUERIDA
A PARTIR DE UNA TABLA DE 2 OBTENER EL VALOR CRÍTICO 2TABLA
PARA 95% DE SIGNIFICACIÓN, PARA n-1 GRADOS DE LIBERTAD Y DIVIDIR PORN - 1.
LA DECISIÓN ES:
a) SI 2 < 2TABLA NO HAY EVIDENCIA QUE EL PROCESO DE
MEDICIÓN NO SEA TAN PRECISO COMO ES REQUERIDO.
b) SI 2 > 2TABLA HAY EVIDENCIA DE QUE EL PROCESO DE MEDICIÓN
NO ES TAN PRECISO COMO ES REQUERIDO.
2
2
r
ws
19PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
19
OBTENCION DE d
•Utilizar la desviación estándar de reproducibilidad obtenida en un ensayo interlaboratorios.
•Si este valor no está disponible, se puede utilizar la reproducibilidad intra-laboratorio, obtenida de un gráfico de control para el método en estudio
•También podría usarse el valor de precisión suministrado por el certificado del MRC.
20PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
20
EJEMPLO.
Objetivo: Evaluar si cierto método analítico (método A)
es suficientemente preciso, utilizando un MRC de
hierro en minerales.
Información del certificado del MRC:
= 60.73% Fe
D = 0.20% Fe
R (requerido) = 0.09% Fe
21PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
21
EJ EMPLO
Se realizaron 10 determinaciones Independientes de Fe en el MRC, usando elmétodo A, con los siguientes resultados individuales:
Xi (%Fe) = 60.7, 60.8, 60.8, 60.9, 60.9, 60.9, 61.0, 61.0, 61.1, 61.2
x prom = 60.930% fe Sw = 0.149% fe
= (0.149/0.090)2 = 2.76
2tabla para 9 grados de libertad y 95% de confianza = 1.88
2 > 2tabla
Conclusión: la precisión intralaboratorio del método A no es tan buena como serequiere.
El método debe ser investigado químicamente.
2
2
r
ws
22PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
22
EJEMPLO
• Después de reexaminar el procedimiento se mejoraron las condiciones del ataque ácido inicial y se repitió la evaluación anterior. Ahora la precision del metodo “A revisado” es tambien la requerida
• SE OBTUVO UN VALOR PROMEDIO DE 61.087% Fe, CON UNA DESVIACIÓN ESTÁNDAR DE 0.092% Fe.
-x - = 61.087 – 60.730 = 0.357% Fe2 D = 0.40% Fe
- x - < 2 D
POR LO TANTO, EL MÉTODO ES TAN EXACTO COMO ES REQUERIDO.
23PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
23
EVALUACION DE UN PROCESO DE MEDICION A TRAVES DE UN PROGRAMA INTERLABORATORIO
• Establecer un número k de laboratorios participantes y el número n de mediciones replicadas que se efectuarán sobre un MRC adecuado al propósito del ensayo.
• Establecer los procedimientos técnicos y administrativos, por medio de los cuales la institución organizadora, coordinará el programa.
• Evaluación de la precisión: la precisión del método se expresa en términos de sw, que es la estimación de precisión intralaboratorio, y slm, que es la estimación de precisión interlaboratorios.
• La precisión intralaboratorio se determina de la misma manera que la descrita anteriormente.
• La precisión interlaboratorios puede ser determinada a través de un prueba estadística:
24PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
24
CONTROL ESTADISTICO
El siguiente concepto debe ser tomado como un axioma:
“El primer objetivo de un proceso de medición en el laboratorio debe ser alcanzar su control estadístico”
25PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
25
26PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
26
Ran
go (
n=
2)
(mm
ol/
L)
27PRESENTACION DE INTEC-CHILEPRESENTACION DE INTEC-CHILE
27
CONTROL ESTADISTICO
Donde Rprom es el promedio de un conjunto de, por lo menos, 15 medidas por duplicado.
LSP es el límite superior de precaución, igual a 2.512 Rprom
LSC es el límite superior de control igual a 3.267 Rprom