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Alumna: Javiera Inostroza Z.Fecha: 24 Agosto 2012
Universidad de ChileTecnología Médica
Introducción
• Estudio por microscopia directa: método rápido y rentable
• Orienta sobre la selección del medio de cultivo más adecuado u otros exámenes complementarios.
• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.• Sensibilidad menor a cultivos
¿Hialohifomicosis o Aspergilosis?
Aspergillus sp
Introducción
• Estudio por microscopia directa: método rápido y rentable
• Orienta sobre la selección del medio de cultivo más adecuado u otros exámenes complementarios.
• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.• Sensibilidad menor a cultivos
Muestra: Biopsia
• Etapas:• Observación macroscópica.• Fijación.• Selección de zonas de estudio.• Deshidratación.• Inclusión.• Realización de cortes.• Hidratación.• Tinción.• Examen microscopico.
Tinciones
• Hematoxilina-eosina• Gomori-Grocott• Ácido peryódico de Schiff(PAS)• Fontana-Masson• Mucicarmina• *Giemsa• * Gram
Giemsa
• Fundamento: afinidad que demuestran las células y sus componentes a los distintos colorantes incluidos en el colorante de Giemsa
Giemsa
• Muestras:• Frotis sanguíneos• Muestras
respiratorias
Gram
• Fundamento.• Cristal violeta.• Lugol
(complejo)• Alcohol-acetona• Colorante de
contraste (safranina)
Gram
• La mayoría de los hongos son gramnegativos
• * Cryptococcus neoformans
Hematoxilina-eosina
• Fundamento:• Eosina: ácido,
basófilo (rosado)• Hematoxilina:
catiónico unión a aniones (azul)
•Zigomicosis. H-E (hifas anchas no septadas, con membrana más basófila, polisacaridos son negativos)
• Tiñe mayoría de los hongos
Zona necrótica en cuyo seno se observa un crecimiento micótico formado por Aspergillus (H.E. Neg. X 100)
Formación de granulomas en infección micótica (H.E., Neg x20)
Hematoxilina-eosina
•Estudio de la respuesta tisular
Hematoxilina-eosina
• Se tiñen bien:• Aspergillus spp• Zigomicetos• Blastoconidios• Pseudohifas de
Candida.
Aspergilosis pulmonar invasiva
crecimiento invasor del hongo con infiltración del
parénquima pulmonar y de los vasos sanguíneos
Cryptococcus en hilio pulmonar
Hematoxilina-eosina
• Caracterización de hongos pigmentados
• Fundamento:• Ácido crómico: oxidación
grupos OH de polisacáridos de pared celular.
• Aldehidos reducen complejo nitrato-plata-metanamina color café-negro.
• Verde brillante
Zigomicosis, GMS
Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)
Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)
• Utilidad:• Aspergilosis• Zigomicosis• Candidiasis• Criptococosis
Mucorales (Rhizopus)
Biopsia pulmonar, disposición característica de las hifas de Aspergillus en el parénquima pulmonar.
Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)
Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)
Abundantes conidios (esporas) de forma oval o periforme de base plana (Grocott).
Cryptococcus
Ácido peryódico de Schiff (PAS)Fundamento:
• Ácido peryódico rompe la unión entre carbonos con hidroxilos adyacentes,
• Formación de grupos aldehído.
• Reactivo de Schiff reacciona con los aldehídos para dar un color rojo púrpura intenso.
Zigomiceto
Ácido peryódico de Schiff(PAS)
Vaso colonizado por hifas y esporas de morfología típica de Scedosporium spp (PAS).
esporas
Cryptococcus en miocardio (SIDA)
Ácido peryódico de Schiff(PAS)
Histoplasmosis, intracelular
Fontana-Masson
• Fundamento:melanina reduce el nitrato de plata que se precipita sobre los gránulos del pigmento dando una coloración negra.
• Hongos dematiáceosBipolaris spicifera in lung tissue (Fontana-Masson stain; magnification ×100).
Fontana-Masson
Cladosporium
Mucicarmina
• Fundamento: tiñe glucoproteínas.
• Cryptococcus sp.
Las mucinas o mucoproteínas son
proteínas con H.C. en una proporción superior al 4 %.
La técnica del mucicarmín de Mayer sirve para identificar globalmente las mucinas,
pero no reconoce su naturaleza bioquímica.
Criptocococis miocárdica
Mucicarmina
Mucicarmina
Riñón. Nefritis criptococócica.Mucicarmín.