30415779 2752-eq-7-to-de-hongos-de-diferentes-fuentes
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1
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OBJETIVOS.
1. El alumno deberá demostrar la presencia y distribución de
los hongos.
2. Se analizara la morfología de los hongos que se han
obtenido de diversas fuentes.
3. Se realizara la identificación y clasificación de los hongos
aislados de los diferentes especímenes trabajados.
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3
Son heterótrofos
Pueden ser unicelulares y pluricelulares
Se alientan por
absorción
Reproducción sexual y
asexual
No son fotosintéticas
Tienen pared celular compuesta por quitina,
celulosa, glucanas y mananas
Son macroscópicos y microscópicos
Su unidad funcional es
la hifaSon organismos eucariontes
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4
CONDICIONES DE
CRECIMIENTO
Acidófilos siendo el pH 5.6 óptimo para la
mayoría
La mayoría crecen entre 0-55 con un
rango de 20-30 oportunistas y
patógenos 35-40
pH
Temperatura
Humedad
aw
Luz
Nutrientes
60%
CO2,glucosa, sacarosa y maltosa, sales de nitrógeno, iones inorgánicos,
agua
No es vital pero es importante en la esporulación
para algunos
Mayor 0.80 hongos
filamentosos y mayor 0.85
para levaduras
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De acuerdo a su nutrición pueden dividirse en
5
SAPROFITOS Toman sus nutrientes de la materia muerta o en
descomposición
PARASITOS Cuando se nutren de
materia viva
MICORRIZICOS
Viven en simbiosis con alguna especie vegetal (normalmente árboles), obteniendo ambos un beneficio mutuo.
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DIMORFISMO FUNGICO:
Un hongo puede pasar de una forma micelial a levaduriforme reversiblemente, pueden ser:
A) Nutriente dependientes.
B) Temperatura y nutriente dependientes
6Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3
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HONGOS BIFÁSICOS
Se refiere aquellos hongos que presentan dos formas, una filamentosa y a diferencia de los hongos dimórficos , no presenta fase levaduriforme sino de otro tipo Por ejemplo:
Las esférulas de
Coccidioides immitis
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PLEOMORFISMO FÚNGICO:
Consiste en la transformación irreversible de una cepa por un exceso de carbohidratos, está tiende a cambiar dando un micelio blanco, algodonoso y estéril. Se puede presentar en cualquier hongo filamentoso , pero es propio de los dermatofitos.
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POLIMORFISMO
LESIONAL:Es la capacidad de un agente
etiológico de generar diferentes
cuadros clínicos Por ejemplo:
La tiña del cuerpo o de la
cabeza puede ser producida
por un solo hongo: M. canis.
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Género Suelo Aire Frutas
Rhizopus
Mucor
Alternaria
Botrytis
Fusarium
Pennicillium
Cladosporium
Aspergillus
Candida
Geotrichum
Trichoderma
Cephalosporium
Curvularia
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Rhizopus sp.Trichoderma sp
11
Aspergillus sp. Fusarium sp.
Penicillium sp.
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Alternaria alternata Geotrichum candidum
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Se deben estudiar las características siguientes: Se observa si una colonia de hongos es filamentosa o levaduriforme. Forma y tamaño Color en la superficie o en el reverso. Difusión del pigmento. Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza, negra. Textura: yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, cérea, cremosa. Superficie: elevada o plana, levantamiento central. Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme. Consistencia: dura, suave, firme, membranosa. Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los oportunistas
crecen en 24 a 48 h, y los dermatofitos en 5 a 10 días.
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Macroscópicamente crecen
entre 3-6 días a temperaturas
de 25º y 37º, C 7-10 días las
colonias están cubiertas con
un micelio aéreo blanco,
velloso. A medida que la
colonia madura se observa
una superficie cubierta de
esporas negras. El reverso
de la colonia presenta un
color claro o verdoso.
Aspecto: plano, polvoso,
aterciopelado seco.
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Presenta micelios de crecimiento rápido
Anverso: tamaño ilimitado, ocupa todo el medio de cultivo, color verde con un halo blanquecino en la periferia, plana, polvosa, aterciopelada , rugosidades radiales.
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Anverso: tamaño ilimitado, color blanco amarillento, vellosa húmeda
Reverso: no presenta pigmento.
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•Micelio aéreo bien desarrollado, denso, algodonoso. Gris-blanco al
comienzo se forma pronto marrón oscuro a rojo púrpura. Bordes
enteros. El reverso es rojo púrpura a negro.
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Alternaria spAnverso: tamañoilimitado, color negrocon tonalidades caféobscuro, plana,aterciopelada, seca yen ocasiones lo cubreun velo vellosoblanco.
Reverso: presentapigmento caféobscuro que difundeal medio
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Anverso: tamaño
ilimitado, blanco en un
inicio, posteriormente
naranja, violeta-lila.
Aspecto: vellosa-secaReverso: presenta colornaranja o violeta difusibleal medio.
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Anverso: tamañoilimitado, en uninicio es blanco (2-3días) después tomauna tonalidadblanco-grisáceo,velloso-algodonososeco.Reverso: nopresenta pigmento.
Mucor sp
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Anverso: tamañoilimitado, cubriendo lasuperficie del agar conun crecimiento densocon , tiende a llenar lostubos y cajas petri.Color : en un inicio esblanco yposteriormente grisobscuro.
Reverso: pigmento nopresente, vellosos a-algodonoso seco
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•Aspecto inconfundible:
vellosas, algodonosas,
pulverulentas.
•De vistosos y variados
colores
•Crecen radialmente de
modo progresivo
•Colonias de mayor tamaño
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Anverso: tamaño ilimitado, crece de dos a cuatro cm, color blanco
amarillento-cremosa, convexa y plegada.
Reverso: no presenta pigmento
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Nutrientes básicos en medio de cultivo
Materias nitrogenadas como peptona.
Azucares como glucosa o maltosa.
Un soporte solido como la gelosa.
pH ácido (5 a 6).
Vitaminas (impurezas de la peptona)
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AGAR SABOURAUDComposición:*Peptona 10g*Glucosa 20g*Agar-Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH 5.6 ± 0.2
AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)Composición:*Pulpa de papa 250g*Glucosa 20g*Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH final 5.6 +- 0.2.
USO:
Para cultivo, aislamiento y determinación del numero de hongos y levaduras.
USO:
Para cultivo de hongos
patógenos y no
patógenos,
particularmente
dermatofitos, levaduras y
m.o. acidúricos.
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AGAR LITTMANComposición:
*Peptona, 10.0g
*Estreptomicina 15.0g
*Dextrosa, 10.0g
*Cristal Violeta 0.01g
*Agar 20.0g
AGAR BIGGY
*Sulfito de bismuto 8,0g
*Dextrosa 10,0g
*Extracto de levadura 1,0g
*Glicina 10,0g
*Agar 16,0g
*Citrato de Amonio y Bismuto 5,0g
pH 6.8 ± 0.2
USO:
Medio selectivo, que
suplementado con
estreptomicina, se
emplea para el
aislamiento primario y
cultivo de hongos,
especialmente
dermatofitos.
USO:
El Agar Biggy (por sus
siglas en inglés Bismuth-
Glucose-Glycine-Yeast) es
utilizado para el
aislamiento y
diferenciación de especies
de Candida. También es
conocido como Agar de
Nickerson.
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Micosel agar
- Estreptomicina 0,5%
- Peptona de soya.
- Dextrosa.
- Cloranfenicol
- Agar agar
- Agua destilada
- Cicloheximida.
USOS: Selectivo para el aislamiento de hongos patógenos de muestrasque puedan tener alto contenido de flora bacteriana.
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Aislamiento de Hongos del aire Aislamiento de hongos del aire
En una caja petri con agar
Saboraud y otra con agar Litman
Exponerlas abiertas a la
corriente de aire por 15 min.
Incubar a temperatura
ambiente
Realizar lectura, reportar
características macroscópicas
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Aislamiento de hongos en suelo
*Diluciones
hasta alcanzar
10 -6
Fundir Saboraud y Littman
Pesar 0.5 g de tierra y agregar a
un tubo 4.5mL de la solución salina estéril
Dil 1:10
Añadir el contenido
25º -30º se añaden 2 gts de la mezcla de
antibióticos. Penicilina-
Streptomicina 1:1
De las diluciones del
paso ( * )
colocar 1 mL de las diluciones
en dos cajas con agar Saboraud y dos con Littman
Incubar a temperatura
ambiente
Realizar lectura, reportar
características macroscópicas
Aislamiento de Hongos del suelo
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Diluciones realizadas para el aislamiento micológico del suelo
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Aislamiento de hongos de verduras y frutos
Aislamiento de Hongo de verduras y
frutas
Colocar un poco de tejido de la verdura o fruta que contenga el
hongo
Pasarlos unos minutos por hipoclorito
Incubar a temperatura
ambiente
Sembrar en agar Saboraud y
Littman
No realizar si el hongo es de
aspecto polvosoRealizar lectura,
reportar características macroscópicas
En el centro de la caja
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BIBLIOGRAFÍA:
Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3 32
Bonifaz A. Micología médica básica. Edit. Méndez. 2a edición. México D.F.
1991.
Arenas, Roberto, Micología médica ilustrada, Edit. Interamericana McGraw-
Hill. 1°edición, 1993