AF-6

Unioneshendidura

RGL

PLD

PI3K

Akt

Raf

MAPK

Rin1

BCR

Mekk

JNK

Nore-1

??

EFECTOS BIOLOGICOSEFECTOS BIOLOGICOS

Ras GTP

Ras GDP

Encendido

Apagado

Estímulo Externo:•Hormonas•Factores de crecimiento•Citoquinas

Miembros: H-Ras, N-Ras y K-Ras (4A + 4B)Bajo peso molecular: ~21kDa (188-189 aa)

GEF: Guanine nucleotide Exchange

Factor

GAP: GTPase Activating Protein

SH3

SH3

PTK PTK

GDP Rasinactivo

homologíaCDC25

SH3

SH3PPPVPPRR

Grb2SH2

Sos

Receptor EGF

PTKPTK

P P

GTPRas

activo

Cascada dekinasas

Receptor EGFactivo

EYINQ

G10 AAGGVGKSA18 D57 TAGQEL63 N116 KCD119 E143 TSA146

Región hipervariable

Y32 DPTIEDSY40

Unión a GTP Unión a efector

Switch I (interacción con GAP) Switch II (interacción con GEF)

H-Ras Q H K L R K L N P P D E S G P G C M S C K C V L SN-Ras Q Y R M K K L NS S D D G T Q G C M G L P C V V MK-Ras 4A Q Y R L K K I S K E E K T P G C V K I K K C I I MK-Ras 4B R K H K E K M S K D G K K K K K K S K T K C V E M

CajaCAAX

Unión de Pi Unión de Pi y y

Unión de Pi Unión de Pi y Mg y Mg++

Unión de anillo de GuaninaUnión de anillo de Guanina

ESTRUCTURA DE RASESTRUCTURA DE RAS

Inhibidores de Farnesil Transferasa

Posibles modos de atacar trasformación por Ras

Cascada activada por Ras

Raf-1, A-Raf MEKK 1-3 MEKK4 TAK1, ASK1, PAKB-Raf, Mos Tpl-2 DLK MLK3

MEK1 ? MKK5 MKK4, MKK7 MKK3, MKK6MEK2

ERK1 ERK3 ERK5 JNK1,JNK2 p38, p38ERK2 ERK4 JNK3 p38, p38

Factor crec. Stress, diferenciación, factor cr. Stress

P90rskS6 kinasa, Sos MEF2C c-Jun, ATF2, Elk1, MAPKAP kinasa, ATF2PL A2, EgFR, Elk-1 DC4, NFAT4 Elk1, Cop, Mx,Ets1, Sap1a, c-Myc, c-Jun MEF2CTal, STATs

Crecimiento, Crecimiento, dif., Produx citoquinasdiferenciación sobreviv, apoptosis apoptosis

Señalp.ej. EGF

Tirosin kinasa

p.ej. Receptor de EGF

Proteína adaptadorap.ej. Grb/Sos

GTPasa pequeña

p.ej. Ras

MAPKKKp.ej. Raf

MAPKK

p.ej. MEK-1

MAPKp.ej. ERK

MAPKMAPK

Sustrato

P

Sustrato

P

P.ej. PDE4D3

P.ej. Elk-1

Módulos de reconocimiento para MAPK presentesen diversas proteínas

MEF2A: myocyte-specific-enhancer-binding factor 2ARsk1: ribosomal S6 kinase

Estructura de Dominios de Activación Transcripcional (TAD) regulados por MAPK

DBD: DNA binding domainD/: kinase docking domainMEF2A myocyte specific enhancer-binding factor 2A

Fenotipos de ratones K.O. para MAPKK y MAPKFenotipos de ratones K.O. para MAPKK y MAPK

MAPKK/MAPK Fenotipo Semejante aMEK1 Vascularización de placenta ERK2?

defectuosaMKK4 Desarrollo de hígado defectuoso K.O. de c-JunMKK7 Letalidad embrionaria causa ?MKK3 Producción defectuosa de IL-12ERK1 Desarrollo de células T defectuoso MEK1 dn

(selección positiva)JNK1 Diferenciación a Th2 defectuosaJNK2 Diferenciación a Th1 defectuosaJNK1 ó JNK2 Proliferación de células T y JNK1 dn transgénicos

producción de IL-2 defectuosaJNK1 ó JNK2 Muerte inducida por activación JNK1 dn transgénicos

defectuosaJNK1 & JNK2 Sobreproducción de IL-2 K.O. MKK7JNK1 & JNK2 Cierre de tubo neuralJNK3 Resistencia a muerte celular de K.I. c-JunA63/73

neuronal excitotóxicasp38 Defecto de placenta (células trofoblásticas)p38 Producción insuficiente de eritropoyetina

Regiones para la localización nuclear de MAPKs

Secuencias de Dominios de Docking de MAPK enSecuencias de Dominios de Docking de MAPK en Factores de TranscripciónFactores de Transcripción

*c-Jun 33I L K Q S MT - L N L A D P V G S L*JunB 34L L K P S L A - V N L A D P Y R S L JNK*NFAT4 141L E R P S R D H L Y L P L E P S Y RATFa 26 V H K H K H E - MT L K F G P A R T *Elk-1 312K G R K P R D - L E L P L S P S L L ERK/JNK *LIN-1 281G M K P N P - - L N L T A TS N F S ERK*TFII-I279S K R P K A - - N E L P Q P P V P E SAP-1 318R S K K P K G - L G L A P T - - L V I ERK/p38SAP-2 290K A K K P K G - L E I S A P P L L V L *MEF2C 250N - R K P D - - - - L R - - - - V L I p38*MEF2A 267N S R K P D - - - - L R - - - - V V I ATF-2 44VH K H K H E - M T L K F G P A R N p38/JNK

Característica: Básico (L x L) ()

RAS - GAPRAS - GAP