Agares
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Agar sangre
Medio de cultivo enriquecido que permite el desarrollo de todo tipo de bacterias
tanto Gram positivas como gran negativas, diferencial (por el tipo de hemólisis),
no selectivo.
Contiene una mezcla de peptonas particularmente adaptada al cultivo de
microorganismos exigentes (estreptococos, Staphylococcus, Listeria...).
La presencia de sangre permite la determinación de la hemólisis, criterio básico en
la orientación hacia la identificación bacteriana.
Ejemplo de hemólisis características:
Streptococcus pneumoniae: α-hemólisis, con una coloración verdosa alrededor de
la colonia.
Streptococcus pyogenes: ß-hemólisis, con una zona transparente alrededor o
debajo de la colonia
Staphylococcus epidermidis: gamma hemólisis
Agar sal y manitol
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y
diferenciación de estafilococos.
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina.
Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las
colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura.
Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de
sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente
de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono
fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el
agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante, y el rojo fenol es
el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el
manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el
indicador de pH del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar
el manitol.
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Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como
colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas,
rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.
Agar MacConkey
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el
desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las
colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no
fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Por la presencia de las sales biliares y el cristal violeta se inhibe el crecimiento de
las bacterias Gram-positivas. Por la presencia de la lactosa, las bacterias capaces
de fermentarla acidifican el medio, cambiando el color del rojo neutro y formando
colonias rojas o rosadas, pudiendo presentar un halo turbio correspondiente al
precipitado biliar.
Las bacterias lactosa-negativas dan colonias incoloras.
Agar Chocolate
Se emplea para el cultivo de Gonococos y aislamiento de Neisserias patógenas.
Como tal base debe ir acompañada de uno o varios suplementos según el fin que
se persiga.
El agar Mueller Hinton Agar, cuando se suplementa con sangre calentada o
hemoglobina y factores de crecimiento (por ejemplo, BD IsoVitaleX) se ha
recomendado como medio no selectivo para el aislamiento de Neisseria y
Haemophilus. En BD Mueller Hinton Chocolate Agar, el extracto de carne bovina y
peptona de caseína proporcionan los nutrientes.
El almidón absorbe los compuestos tóxicos tales como los ácidos grasos
procedentes de las torundas de algodón. La hemoglobina proporciona el factor X.
BD IsoVitaleX suministra vitaminas y factores de crecimiento, incluido el factor V
(NAD) que es necesario para el crecimiento de Haemophilus influenzae.
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Agar Salmonella-Shigella
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas
especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los
cuales se sospeche su presencia.
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. La selectividad, está dada por la
sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Gram
positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido
sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar,
acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias
rosadas o rojas sobre un fondo rojizo.
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen
bien en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de
ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la
formación de sulfuro de hierro
El agar Salmonella-Shigella es una modificación del agar citrato desoxicolato
descrito por Leifson. Se le considera un medio moderadamente selectivo según el
nivel de inhibición de los microorganismos Gram positivos y Enterobacteriaceae
diferentes de Salmonella y Shigella, que inhibe por contenido de sales biliares,
verde brillante y citratos.
En Salmonella Shigella Agar, la diferenciación de los organismos entéricos se
logra mediante la incorporación de lactosa en el medio. Los organismos que
fermentan lactosa producen ácido que, en presencia del indicador rojo neutro,
propicia la formación de colonias de color rojo. Los organismos no fermentadores
de lactosa forman colonias incoloras. Este último grupo incluye la mayoría de los
patógenos intestinales, incluidos Salmonella y Shigella. El tiosulfato sódico y el
citrato férrico permiten la detección de producción de ácido sulfhídrico, como lo
demuestran las colonias con centros de color negro.
Agar CLED (Cistina Lactosa Electrólito Deficiente)
Está recomendado para el recuento e identificación presuntiva de los
microorganismos de las vías urinarias. Su bajo contenido en electrolitos evita la
invasión de los cultivos por Proteus. La presencia de lactosa en su composición le
confiere el carácter de medio diferencial, aunque la interpretación sea diferente al
anterior medio por la incorporación de otro indicador: el azul de bromotimol. Las
colonias lactosa positivas aparecerán de color amarillo y las lactosa negativas lo
harán con un color verdoso, blanco o azulado.
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Estriado para aislar
Estriar para aislar implica una sola inoculación de una sección de la placa de Petri
y a continuación, disminuir la colonia arrastrando microorganismos de la sección
inicial de dos o tres secciones adicionales, achicando eficazmente la población de
microorganismos. Generalmente utilizado para separar un cultivo mixto de las
bacterias, los bacteriólogos también utilizan este método para aislar una línea de
bacterias que nacen de un solo progenitor.