Agentes físicos, asepsia y esterilidad Antimicrobianos FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Dr. Guido...
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Agentes físicos, asepsia y esterilidad
Antimicrobianos
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dr. Guido Mora L.Dr. Guido Mora L.
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Esterilización: “es el proceso mediante el cual células vivas, esporas viables y virus son destruidos o removidos de un objeto o hábitat”. Un objeto estéril es aquel que está libre de microorganismos vivos, esporas o cualquier agente infeccioso.
Un desinfectante no necesariamente esteriliza un objeto, ya que pueden permanecer algunos microorganismos o esporas.
Desinfección: “es el proceso de eliminar, inhibir o remover microorganismos que puedan causar enfermedad”. Desinfectante: “agente, generalmente químico, utilizado para llevar a cabo la desinfección”, normalmente se utilizan sobre objetos inanimados. Antiséptico: “agente químico utilizado sobre tejido vivo”
Sanitización: “es el proceso de reducir la población de microorganismos a niveles considerados seguros por los estándares de salud pública”.
Conceptos generales…
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Agentes Físicos (esterilizantes)
Calor: causa la denaturación de las proteínas y ácidos nucleicos,
destruye las membranas. Calor húmedo (20 min a 121ºC) y Calor seco (2 horas a 180ºC)
Radiaciones: producen daño al DNA.
Autoclave
Horno
Agentes antimicrobianos…
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Agentes Químicos (desinfectantes)
Alcoholes, fenoles, sales de metales pesados: denaturan las proteínas.
Agentes oxidantes: oxidan los grupos –SH de las proteínas.
Agentes alquilantes: sustituyen los átomos de H por radicales alquilo.
Detergentes: se insertan en la membrana celular e interfieren con sus funciones.
Agentes Quimioterapéuticos
Agentes antimicrobianos…
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La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
1. Tamaño de la población:... un mayor número de microorganismos demoran más en morir que
un número menor de ellos.
2. Composición de la población:... la efectividad de un agente varía de acuerdo de acuerdo a la
naturaleza del organismo; los microorganismos varían mucho en sensibilidad. (bacteria, levadura, espora, etc.)
3. Concentración o intensidad del agente antimicrobiano: ... generalmente un agente más concentrado o más intenso elimina más
rápido a los microorganismos. (no siempre...etanol 70% más efectivo que etanol 95%)
Actividad de los antimicrobianos…
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6. Medioambiente local: ... el medioambiente que rodea al microorganismo lo puede proteger
de la acción del agente antimicrobiano. (la materia orgánica de la comida protege a las bacterias de la esterilización por calor)
(todo el material quirúrgico debe ser lavado antes de esterilizar)
4. Duración de la exposición: ... mientras más tiempo este el microorganismo expuesto al agente,
mayor será el número de organismos eliminados.
5. Temperatura: ... un aumento de la temperatura en que se aplica el agente aumenta la
efectividad de éste.
La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
Actividad de los antimicrobianos…
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ANTIMICROBIANOS
(a) Bacteriostáticos…Inhiben el crecimiento del microorganismo
(b) Bactericidas…Matan a los microorganismos sin necesidad de
destruirlos o lisarlos
(c) Bacteriolíticos…Matan a los microorganismos por lisis
“Sustancia o Agente capaz de actuar sobre los microorganismos, ya sea inhibiendo su crecimiento o
causando su muerte”
Generalidades sobre antimicrobianos…
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1.- Especificidad:Se refiere al espectro de la actividad antimicrobiana, definida por su capacidad de unión a un sitio específico de la bacteria.
2.- Eficacia “in vivo”:Debe ser bacteriostático o bactericida in vivo, es decir, su acción no debe ser revertida en el interior del organismo.
3.- Toxicidad selectiva:Debe ser tóxico para el microorganismo, pero ser inocuo para el hospedero. Esto es indispensable para la utilización del antimicrobiano en clínica.
Requerimientos para un Antimicrobiano (Quimioterápico)…
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Paul Ehrlich (1908):Creó el primer compuesto químico sintético (Salvarsan) que podía curar una infección, la sífilis (Treponema pallidum).
Estructura química del Salvarsan(“La bala mágica”)
Antecedentes históricos…
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Alexander Fleming (1928):Observó que el hongo Penicillium notatum impedía el crecimiento de Staphylococcus aureusFlorey y Chain (1939): aislaron Penicilina G
Penicillium notatum
Antecedentes históricos. Descubrimiento de los antibióticos…
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El hongo Penicillium notatum impide el crecimiento de Staphylococcus aureus...
Foto original tomada por Fleming Foto actual
Antecedentes históricos. Descubrimiento de los antibióticos…
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Antimicrobiano:Sustancia capaz de actuar sobre los microorganismos, inhibiendo su crecimiento o destruyéndolos.
Antibiótico:Sustancia producida por el metabolismo de organismos vivos, principalmente hongos microscópicos y bacterias, que posee la propiedad de inhibir el crecimiento o destruir microorganismos.Según su origen, los antibióticos pueden ser:
Biológicos (naturales): sintetizados por organismos vivos, ej. Penicilina, Cloranfenicol.
Semisintéticos: obtenidos por modificación química de antibióticos naturales, ej. Ampicilina.
Sintéticos: generados mediante síntesis química, ej. Sulfas.
Antibióticos…
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En el laboratorio se puede estudiar la susceptibilidad a antimicrobianos que presentan bacterias aisladas desde una
muestra biológica...
La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad de la bacteria aislada y ciertos factores del hospedero constituyen las bases para la elección de una terapia
antimicrobiana adecuada…
Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro:Test por diluciónTest por difusión
Se realizan según ciertas normas previamente estandarizadas (NCCLS)
Evaluación de la susceptibilidad a un antibiótico…
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Concentración inhibitoria mínima (CIM)
Corresponde a la menor concentración de antimicrobiano que inhibe el crecimiento bacteriano
luego de 18 a 24 horas de incubación.
Concentración bactericida mínima (CBM )
Corresponde a la menor concentración capaz de matar un 99,9% la población bacteriana.
Definiciones…
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Técnica de referencia en la mayoría de los estudios clínicos de susceptibilidad a antimicrobianos.Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM).Se puede realizar en medio líquido (dilución en caldo) o en medio sólido (dilución en agar).Método complejo y de alto costo.
Dilución seriada en caldo
Lectura del CIM
CIM
Antibiograma por dilución…
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Es el método más usado…
Es práctico y sencillo de realizar e implementar…
Permite analizar un gran número de antibióticos al mismo tiempo y bajo las mismas condiciones…
Entrega un resultado cualitativo… (bacteria sensible o resistente)
Antibiograma por difusión…
“(Técnica de Kirby-Bauer)”
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Resistente(No hay halo de
inhibición)
Análisis de varios antibióticos en
un mismo ensayo
Sensible(Presencia de halos de
inhibición)
Antibiograma por difusión…
“(Técnica de Kirby-Bauer)”
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pH del medio de cultivo: algunos antibióticos son activos a pH ácido (nitrofurantoína) y otros lo son a pH alcalino (aminoglucósidos).
Componentes del medio de cultivo: pueden antagonizar al antibiótico (extracto de levadura antagoniza a sulfonamidas).
Estabilidad del medicamento: algunos antibióticos se inactivan a la temperatura de cultivo (clortetraciclina, en menor grado penicilina)
Tamaño del inóculo: si hay muchas bacterias, la susceptibilidad es menor y pueden aparecer mutantes resistentes.
Tiempo de incubación: si es muy breve los m.o. no mueren; si
es muy largo, pueden aparecer mutantes resistentes o
inactivarse el medicamento.
Factores que afectan la actividad antibacteriana “in vitro”…
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Es mucho más compleja, ya que hay que considerar la relación con el hospedero…
HOSPEDERO
ANTIBIÓTICO MICROORGANISMO
Gerhard Domagk (1939)
Prontosil
Metabolización en el ratón
Sulfanilamida (sulfa)
Actividad antimicrobiana “in vivo”…
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Estado de actividad metabólica de los m.o.: puede ser muy diferente, generalmente menor, que en el laboratorio.
Distribución del medicamento en los diferentes tejidos y órganos: es muy variable, ej. algunos medicamentos no penetran al SNC.
Localización de los microorganismos: pueden ser parásitos intracelulares, lo que dificulta la acción antimicrobiana.
Sustancias que interfieren con el medicamento: el medicamento puede ser inactivado por condiciones ambientales dentro del organismo (ej. pH) o fijado por proteínas sanguíneas o tisulares.
Factores que afectan la actividad antibacteriana “in vivo”…