7/23/2019 Aguas Residuales Termotasajero Genotoxicidad

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Autores: Carol Castillo T,Alfonso QuijanoParra,Ivan Melendez Gelvez

Ttulo de la ponencia:Determinacin de laactividad mutagenica en aguasresiduales de la curtiembre Tasajerode la ciudad de Ccuta,Norte deSantander,Colombia.

Escuela o facultad :Departamento de Qumica.Facultad de Ciencias Bsicas. Universidad dePamplona

rea temtica: Qumica AtmosfricaPala!ras claves: Ben"o#a$p%rene& P'(.)& *est

de Ames& ensa%o cometa& actividad muta+nica% +enot,-ica.

Resumen

La curticin es uno de los procesos industriales

que requiere de randes vol!"enes de aua

para transfor"ar un "aterial putresci#le en uno

i"putresci#le, co"pacto $ resistente ,apto para

su utilizacin en productos "anufacturados%Las

auas residuales eneradas por dic&a industria

eneral"ente son vertidas a los cuerpos de

aua sin trata"iento previo, enerando as

randes cantidades de '() * 'Q) co"o

ta"#i+n valores elevados de p al iual que la

presencia de sustancias qu"icas to-icas que

pueden actuar co"o "ut.enos, au"entando

as el rieso de desarrollar c.ncer $

enfer"edades &ereditarias en la po#lacin

e-puesta%/n la ciudad de 0!cuta se encuentran

peque1as industrias que no poseen las

&erra"ientas #.sicas, ni conoci"iento aluno

so#re el adecuado trata"iento de los residuos $

causan a su vez diversos pro#le"as de

conta"inacin en las zonas &a#itacionales

circundantes por el vertido de auas residuales,residuos slidos $ e"isiones at"osf+ricas% 2na

de estas industrias es es la curtie"#re

Tasajero, en donde no e-iste un adecuado

"anejo de sustancias utilizadas en los

procesos, lo que incre"enta el rieso de

conta"inacin por e-posicin% En las

curtiembres se emplean: el Cromo,Plomo

y sulfuros que causan severos daos

como la leucemia. Adems los cromatos

de Zn y Ca empleados en las curtiembres

parecen ser cancerenos y se cuentan

entre los ms potentes en !umanos. "a

e#posici$n intensa a estos compuestos !a

producido una incidencia muy elevada de

cncer de pulm$n. Por estas razones se

&ace necesario el an.lisis $ la deter"inacin de

"utaencidad $ enoto-icidad en auas

residuales de la curtie"#re Tasajero% 3e utiliza

para la deter"inacin de la enoto-icidad el

ensayo cometa que es una t%cnica

altamente sensible para evaluar el dao y

la reparaci$n del A&' en cualquier tipo dec%lula eucariota. Para la determinaci$n de

la mutaenicidad se emplea el test de

Ames, que determina los cambios en la

mol%cula de A&', causado por

mutaciones. "os

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compuestos presentes en las auas

residuales de la curtiembre (asa)ero,

ocasionan daos muta%nicos con lasdiferentes cepas de *. typ!imurium (A+-

y (A+// y constituyen un verdadero

peliro para la poblaci$n.

0ey 1ords: Salmonella typhimurium(A+-

, (A+//,mutaenicidad,enoto#icidad,

curtiembre.

Introduccin.

El desarrollo de la producci$n industrial !asido un ran avance para la !umanidad, !aenerado un indiscutible aumento en el nively la calidad de vida de la sociedad y de lamisma manera !a enerado un ran impactoa nivel ambiental, ya que debido a lademanda !an tenido que !acerse muc!o mscomple)os sus procesos, enerando as,mayores cantidades de residuos que la llevana ser el blanco de muc!as crticas y a adquiriruna imaen de contornos no muy positivos[1]. 2eddy and 3e!era, 4//5

La curticin es uno de los procesos industriales

que requiere de randes vol!"enes de aua

6(ornqvist et al., 4/7 0!1a)a et al., 4//7..para transformar un material putrescible, enuno imputrescible, compacto y resistenteapto para su utili8aci$n en productosmanufacturados, mediante el desarrollo deuna serie de procesos en los que se empleansustancias que varan se9n el tipo decurtici$n aplicada 6mineral, al cromo, veetal,entre otras7, adems de ciertos cidos, rasasy colorantes.

Aunque el !ec!o de que la industria del cueroes un sector econ$mico importante , !ay unaescalada apre!ensi$n ecol$ica relativa a lascurtiembres debido a la producci$n derandes cantidades de auas residualespotencialmente t$#icos que contienen cromo

trivalente y !e#avalente 6*8pyro1ic8 et al.,4//7.

"as auas residuales eneradas por dic!a

industria contienen randes concentracionesde Cr como dicromato de potasio 604Cr4;, que sonaltamente t$#icos 6?lvare8+3ernal et al.,4//57 Este e@uente de auas residuales de lacurtiembre est dispuesto a continuaci$n,!acia el medio ambiente sin nin9nprocesamiento y tratamiento. Por lo tanto, eldesempeo de residuos y compuestos t$#icosasociados a los sistemas acuticos representaun dilema ambiental perdurable debido a supotencial impacto en la poblaci$n en el auay los efectos inminentes para la salud!umana 6Abbas Alar!i et al., 4//-7.Adems, estas sustancias t$#icas !acen suentrada a los acuferos superBciales y delsubsuelo resultantes de la contaminaci$n delaua de rieo y potable 60ris!na et al., 4//y o!an et al., 4//7.

En el proceso de curtido se empleanproductos qumicos como: cloruro de sodio,!idr$#ido de sodio, !ipoclorito de sodio,aentes tensoactivos ,preparaciones

en8imticas, cidos ornicos tamponados6sulf9rico, clor!drico, lctico, f$rmico, b$ricoy me8clas7, sales de amonio, bisulBto desodio, per$#ido de !idr$eno D solventescomo erosene y el clorobenceno. (ambi%nse emplea cloruro de amonio, siendo las salesde cromo las ms utili8adas 6Ates et al.,

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Garios estudios se !an llevado a cabo en lasauas residuales industriales y dom%sticas yse !an encontrado enot$#icos ymuta%nicos en diversos ensayos a cortopla8o 6Hou, 47."a va de absorci$ncutnea es la de ms fcil acceso aloranismo, frente a lo cual cabe destacar elcuadro patol$ico de la dermatitis al%rica decontacto. En esta los compuestos de Cr5Ipenetran en la piel ms rpidamente que loscompuestos de Cr>I. [9]. 6C!ave8 Porras, A.4//-7. "os diversos compuestos del cromo!e#avalente representan la mayor amena8a,especialmente debido a sus efectosen%ticos.

Los co"puestos del cro"o 45I6 act!an en casi

todos los siste"as de ensa$o dise1ados para

deter"inar sus efectos "uta+nicos% /l &ec&o

co"pro#ado de que atraviesa la placenta

sinifica un alto rieso para los e"#riones $

fetos% [10]. 40allao, 7% 896%

/l trata"iento de efluentes industriales sie"pre

se lleva a ca#o en funcin de las e-iencias $

nor"ativas respectivas que esta#lece la le$% La

necesidad de eli"inacin de sulfuro $ cro"o

son la "a$or sinularidad que presentan los

residuos lquidos industriales de curtie"#re

para su trata"iento%4Moscoso Areda, u.scar%

899;6 , La presencia de sulfuro en la operacin

de pela"#re e-plica que esta operacin, por s

sola, sea responsa#le de la "a$or parte de la

to-icidad total del efluente, en la for"a de

sulfuro, dado que el p en el aua de pela"#re

es de ;%[11]. 43alas, Gil#erto% 899

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residuo en 89 "l de 'i"etilsulfo-ido al 89D

para conservarla%

/sta "uestra se dividi en dos alcuotas de 9"l cada una de ellas se transfiri a frascos

."#ar, se sellaron $ se "antuvieron

refrieradas para su posterior ensa$o

"utaenico%

Deteccin de la actividad mutagnica

Test de Ames

Para llevar a ca#o el Test de A"es se

prepararon las siuientes soluciones $ "edios

que se necesit para poder realizar el ensa$o:

0aldo Eutritivo

3e pes 8,< de caldo nutritivo en 99 "l de

8) destilada, se calent &asta e#ullicin, con

aitacin constante, posterior"ente se

transfirieron a erlen"e$er de 99 "l, $ se

a1adieron 89 "l de caldo nutritivo? se autoclav

< "in a 8 F0, se llev a incu#adora a ;F0

por unos "inutos $ seuida"ente se inocul

con cepas TA>H $ TA>99 por duplicado $ se

dej un control, despu+s de esto se volvi a

dejar en incu#adora por B & a ;F0%

3ales de 5oel>(onner a"inofluoreno

3e pes 9 " de 8AJ $ se disolvi en "l de

'M3) puro? de esta solucin se saco "l $ se

transfiri a otro frasco con B "l de 8)

destilada est+ril? la cual se utiliz co"o controlpositivo%

Preparacin de las dosis de tra#ajo

A partir de la "uestra pre concentrada se

prepararon las ; dosis correspondientes a

diluciones de concentraciones de

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Ensayo

3e "arcaron 89 tu#os de ensa$o de la

siuiente for"a: ', '8, '; 4TA>H6 $ de iual"anera con 4TA>996 por duplicado $ control

positivo 46 $ neativo 4>6 para cada una de las

cepas% 3euida"ente se adicion a cada uno

de los tu#os H $ TA>99? 99 Kl del e-tracto de

"uestra pro#le"a del aua residual de

curtie"#re, de cada una de las dosis a las

diferentes concentraciones%

A los controles positivos 46 de las cepas TA>H

$ TA>99 se adicion 99 Kl de 8AJ? $ al control

neativo 4>6 se adicion 99 Kl de 8)

destilada est+ril% Posterior"ente todos los tu#os

se llevaron a incu#adora 4Marca: (inder

T&er"o 3cientific, Modelo: ;(onner, solucin de lucosa

est+ril, lueo de solidificarse $ estar B & en

incu#adora6, se ait, se dej solidificar $ se

llev a incu#adora a ;F0 por 8 das% .

Resultados y Discisin

Deteccin de la actividad mutagnica por la

prueba de Ames

3e calcul el pro"edio arit"+tico de las placas de cada cepa de cultivo TA>H $ TA>99

para cada una de las dosis de "uestra

pro#le"a, de la siuiente "anera :

== =8=; @n

'onde: =: Media eo"+trica

=N =;: 0onteo de colonias por placa

n: n!"ero de placas

/n la ta#la , se "uestra el valor pro"edio de

colonias con la cepa TA>H

Ta#la % E!"ero de colonias $ valor pro"edioen las diferentes dosis $ controles con la cepaTA>H/n la ta#la 8, se "uestra el n!"ero de coloniascon la cepa TA>99

Ta#la 8% E!"ero de colonias $ valor pro"edio

en las diferentes dosis $ controles con la cepa

TA>99

A partir de los datos reistrados en las ta#las 8

$ ;, se &allo la razn de "utaenOcidad 47M6

7M7I@7/

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'onde?

7M: 7azn de "utaencidad

7I: 7evertantes inducidos 45alor pro"edio delas respectivas dosis6

7/: 7evertantes espont.neos 45alor pro"edio

del control neativo6

/n la ta#la ;, se "uestra la 7azn de

Mutaencidad en las cepas TA>H $ TA>99%

Ta#la ;% 7azn de "utaencidad en cepas TA>

H $ TA>99

'e acuerdo a las razones de "utaencidad en

cada una de las dosis, se considera que la

"uestra es positiva para la cepa TA>H $a que

e-iste una relacin de dosis de respuesta entre

las concentraciones pro#adas $ el n!"ero derevertantes inducidos? esto se puede

deter"inar utilizando los criterios descritos en

[12]. ar+as et al.& donde la "uestra se

considera "uta+nica cuando el n!"ero de

colonias revertientes en la inducida por

"utacin era 8, 0uando se o#serv slo uno

de estos criterios, la "uestra se consider

co"o una indicacin de "utaencidad, esto

posi#le"ente de#ido a la presencia de "etales

pesados tales co"o 0r $ que son "u$

co"unes en las auas de residuo de las

curtie"#res se!n lo plantea Taliari et al%,

"ientras que en las cepas TA>99 se podra

concluir que es neativa, $a que la razn de

"utaencidad es "enor a 8%

A trav+s de los controles neativos se verific latasa de reversin espont.nea en cepas de

3al"onella t$p&i"uriu" TA>H $ TA>99? las

cuales detectan "ut.enos que causan

desplaza"iento en el cuadro de lectura $

sustitucin de pares de #ases en el 'EA

respectiva"ente% 4fiuras $ 86

Jiura % 7azn de "utaencidad en cepasTA>H

/n el caso de la cepa TA>H se o#serva que

cada una de las dosis supera entre ;> veces el

valor del control neativo siendo "ediana"ente

"uta+nico, lo que ocasiona un

desplaza"iento en el cuadro de lectura%

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JJiura 8% 7azn de "utaencidad en cepasTA>99/n la cepa TA>99 se o#serva que cada una de

las dosis supera entre % $ % veces el valor

del control neativo siendo "u$ #aja su accin

"uta+nica%

Conclusines

/n cuanto a la "etodoloa utilizada para la

investiacin de la actividad "uta+nica

causada por contacto o e-posicin a auas

residuales de curtie"#re, se deter"in que la

utilizacin de sal"onella presenta una

sensi#ilidad adecuada para estudiar peque1as

cantidades de "uestra que son difciles de

o#tener, lo que per"ite el uso de peque1as

cantidades de "aterial analizado%

Los co"puestos presentes en las auas

residuales de la curtie"#re Tasajero de 0!cutaocasionan da1os "uta+nicos con las

diferentes cepas de /. t%p0imuriumau-otrficas

TA>H $ TA>99 siendo ".s notorio $ "a$or la

razn de "utaenOcidad cuando se utiliz la

cepa TA>H $a que se o#serva con "a$or

claridad la "orfoloa de las colonias%

La deteccin de "utaencidad en aua

residual de curtie"#res indica la presencia deco"puestos "uta+nicos co"o "etales

pesados que pueden causar el desplaza"iento

del "arco de lectura $ sustitucin de pares de

#ases en el 'EA%

Referencias ibliogr!ficas

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