"Ao de la Inversin para el Desarrollo Rural y la Seguridad Alimentaria".

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL

TEMA: AISLAMIENTO DE AZOTOBACTER

DOCENTE: MCBGA: DOROTHY TORRES DE LEON

INTEGRANTES: COVEAS PALMA KEVIN ITALO DOMINGUEZ ZETA JOEL FRANCO. HUERTAS SILVA FABIO ADALBERTO IMAN RIVAS RONALD NELSON RAIMUNDO IPANAQUE EDWIN JAVIER

FECHA: 13/11/13

PIURA 2013AISLAMIENTO DE AZOTOBACTERObjetivos: aislar la bacteria del genero azotobacter de una muestra de suelo miraflorino para utilizarlo en la produccin de nitrgeno. Comprobar que el azotobacter es un biodegradante Determinarla existencia de azotobacter en los suelos miraflorinos. El comportamiento de azotobacter frente a diferentes contaminantes del suelo. Evaluar el comportamiento, crecimiento y desarrollo del microorganismoActualmente la mayora de cultivos agrcolas dependen de los fertilizantes qumicos sintticos, los cuales proporcionan nutrimentos asimilables por las plantas. Sin embargo, su uso prolongado ocasiona contaminacin ambiental y daos ecolgicos, adems de un incremento en el costo de produccin y el impacto negativo en la salud animal y humana.La utilizacin de agroqumicos en los sistemas de produccin intensivos tiene una clara accin sobre la microbiota del suelo, afectando directamente las numerosas poblaciones de microorganismos nativos de inters biolgico expuestas a este tipo de sustancias. Como consecuencia de la retencin de ciertos plaguicidas en las partculas del suelo, microorganismos benficos, como muchas bacterias presentes en la mayora de los sistemas agrcolas, pueden sufrir alteraciones bioqumicas, disminuyendo su actividad como biofertilizantes y su efecto promotor del crecimiento de las plantas.Una alternativa es utilizar biofertilizantes para promover la agricultura orgnica y las tecnologas limpias y seguras. Las bacterias fijadoras de nitrgeno (diazotrofas) fueron las primeras en producirse comercialmente con fines de biofertilizacion. De este grupo, las ms utilizadas como biofertilizantes corresponden al gnero Azotobacter, el cual comprende siete especies a) A. chroococcum, b) A. vinelandii, c) A. beijerinckii,d) A. paspali, e) A. armeniacus, f) A. nigricans y g) A. salinestris.Los microorganismos de este gnero fijan asimbioticamente nitrgeno y son solubilizadoras de fosfato. Adems realizan procesos de biodegradacin de plaguicidas como el endosulfan.En vida libre, fijan al menos 10 mg de N2 por gramo de carbohidrato consumido. Los mtodos ms utilizados para aislar bacterias del genero Azotobacter incluyen el aislamiento en medio libre de nitrgeno, enriquecimiento en solucin de Winogradsky y posterior siembra en medio libre de nitrgeno, y siembra de grnulos individuales de suelo en medio libre de nitrgeno. Para su identificacin preliminar se emplean pruebas bioqumicas como la fermentacin de diferentes azucares.

HIPOTESISEntre los grupos microbianos reportados como organismos degradadores de plaguicidas, muchas de las bacterias hetertrofas sealadas los utilizan como sustratos, ya sea metabolizando las molculas o usndolas como nutriente y fuente de energa. Se incluyen en este grupo bacterias como: Azotobacter sp., Pseudomonas sp., Agrobacterium sp., Bacillus sp., Clostridium sp., Flavobacterium sp., entre otros.El papel de las bacterias en la biodegradacin y transformacin de los plaguicidas en el suelo es variable y depende de la disponibilidad, movilidad y toxicidad del plaguicida, las propiedades fisicoqumicas del suelo y del plaguicida, entre otros factores medioambientales.Dentro de las bacterias diazotrficas, el gnero Azotobacter es uno de los ms estudiados en la agricultura gracias a su alta capacidad de biodegradacin, especialmente para la oxidacin de compuestos fenlicos sustituidos; este hecho resulta de especial inters debido a que estas bacterias aumentan su actividad biolgica en suelos agrcolas adicionados de residuos que poseen un alto contenido en sustancias fenlicas, pudindose sugerir que estos microorganismos pueden contribuir a la biotransformacin de este tipo de residuos cuando se usen como fertilizantes.En este contexto, estos diaztrofos son considerados por algunos investigadores como bacterias ciertamente ideales para los procesos de descontaminacin de suelos agrcolas con sustancias xenobiticas.

JUSTIFICACION

Desde hace tiempo el hombre se ha dedicado a cultivar los suelos los cuales con el paso del tiempo han venido perdiendo sus nutrientes; debido a la sobreexplotacin y uso de sustancias qumicas que utilizamos para la agricultura, las cuales originan el empobrecimiento de los suelos y la baja productividad en los cultivos agrcolas.

Para lo cual nuestro proyecto est basado en el aislamiento de una bacteria nitrificante del gnero azetobactereas que se encuentra en los suelos, ayudando as al pueblo miraflorino en el desarrollo de las actividades agrcolas.

Con el aislamiento seleccionado de Azotobacter spp se realiz una evaluacin cualitativa de solubilizacin de fosfatos siguiendo la tcnica descrita por Vsquez et al. (2000) (14). Para tal fin el cultivo se igual al tubo 1 del patrn de Mc Farland y se incub en agar picovskaya modificado (15), a temperatura de 30C por un periodo de 24- 48 horas. Se tom como efecto solubilizador la presencia de un halo de aclaracin mayor a 5 mm alrededor del pitillo de 1 cm de dimetro. Para cuantificar la actividad fosfatasa se emple la tcnica de p-nitrofenil fosfato (16). La actividad se evalu en medio leche (medio de produccin) y medio Pikovskaya (17) (medio inductor) (17), registrando el valor de absorbancia cada cuatro horas por un perodo de 24 horas.