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LABORATORIO CLÍNICO-HOSPITAL OBRERO N°6 “Dr. JAIME MENDOZA” C.N.S. AMILASEMIA POE Amil-00-15 POE 00-15 Área: Química Sanguínea. Pág. 1 de 3 1. Objetivo Establecer el procedimiento que debe seguirse para la determinación de Amilasa. 2. Alcance A todas las solicitudes médicas que así lo requieran. 3. Responsabl e Bioquímica (o) del área y Técnicos de turno. 4. Definicion es Método para la determinación de Amilasa de modo cinético en suero o plasma. 5. Desarrollo del procedimient o 5.1 Fundamento: 5.2 Incertidumbre de la medición. - Tiempo: 10 minutos. - Interferencias: Hemólisis. Lipemia: Triglicéridos >250 mg/dL. Bilirrubina >5 mg/dL 5.3 Muestra requerida. Suero o plasma. Muestra obtenida en ayuno de 8 a 12 horas de ayuno. Muestras obtenidas de Emergencia. Volumen aceptable: 1 - 3 mL. 5.4 Reactivos. Reactivo de trabajo. 5.5 Materiales. Pipetas de Pasteur. Gradilla. Tubos de hemólisis para espectrofotómetro. Marcador indeleble, bolígrafo rojo y azul.. Redactado por: Dr. Revisado por: Dr. Aprobado por: Dr. Fecha de redacción: Fecha de inicio: Fecha de aprobación: VERSIÓN ORIGINAL: ACTUALIZACIÓN Nº: FECHA DE VIGENCIA: FECHA DE VIGENCIA:

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1. ObjetivoEstablecer el procedimiento que debe seguirse para la determinación de Amilasa.

2. Alcance A todas las solicitudes médicas que así lo requieran.3. Responsable Bioquímica (o) del área y Técnicos de turno.4. Definiciones Método para la determinación de Amilasa de modo cinético en suero o plasma.5. Desarrollo

del procedimiento

5.1 Fundamento:

5.2 Incertidumbre de la medición.- Tiempo: 10 minutos.- Interferencias:

Hemólisis. Lipemia: Triglicéridos >250 mg/dL. Bilirrubina >5 mg/dL

5.3 Muestra requerida. Suero o plasma. Muestra obtenida en ayuno de 8 a 12 horas de ayuno. Muestras obtenidas de Emergencia. Volumen aceptable: 1 - 3 mL.

5.4 Reactivos. Reactivo de trabajo.

5.5 Materiales. Pipetas de Pasteur. Gradilla. Tubos de hemólisis para espectrofotómetro. Marcador indeleble, bolígrafo rojo y azul.. Pipeta automática (25 uL). Tips/puntas nuevas. Pipeta automática (1 mL). Guantes. Reloj o timer. Contenedores para material de desecho. Jabón líquido para asepsia de manos.

5.6 Equipos. Centrifuga. Baño seco a 37°C.

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Espectrofotómetro. Vórtex.

5.7 Instrucciones detalladas.a. Preparación de reactivos. Reactivo listo para su uso. La preparación de los reactivos se realizará de acuerdo a instrucciones

del fabricante (inserto del reactivo).

b. Procedimiento. En tres tubos de hemólisis para espectrofotómetro marcados como C1

(Control 1), C2 (Control 2) y D (Desconocido) colocar 1 mL del reactivo de trabajo e incubar en Baño seco a 37°C durante 1 minuto.

Llevar a cero con agua destilada. Añadir 25 uL de C y D respectivamente, mezclar y disparar el

cronómetro y medir la absorbancia a los 15 y 120 segundos. Registrar los resultados en los registros respectivos.

c. Valor de referencia.Valor normal: 25 – 120 U/L.

d. Validación de los resultados. Emplear controles comerciales (Normal y Patológico). Determinación por duplicado. Elaboración de Gráficas de Levey-Jennings. Análisis e interpretación de las Reglas de Westgard.

e. Interpretación de los resultados.Resultados posibles:

La mayor actividad amilásica se encuentra en las glándulas parótidas y en el páncreas. La amilasa pancreática diferencia entre pancreatitis aguda y crónica. El 80% de los pacientes con pancreatitis aguda manifiestan valores aumentados de amilasa pancreática en las primeras 24 horas, declinando luego para volver a los niveles normales entre las 24 a 48 horas siguientes. En este caso, también se ve aumentada la excreción urinaria de la enzima, persistiendo la hiperamilasuria de 3 a 5 días, luego de que la actividad sérica ha alcanzado los niveles normales.Los valores aumentados que persisten durante más tiempo, sugieren una necrosis persistente o la posible formación de pseudoquistes.

Se utiliza para evaluar casos de pancreatitis aguda.

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f. Bioseguridad. Uso correcto de la indumentaria de trabajo (Mandil, guantes, gafas, gorro,

barbijo, etc.) necesarias para realizar el procedimiento o análisis) de acuerdo a instrucciones del Manual de Bioseguridad.

Eliminar los reactivos y envases de reactivos de acuerdo a Normas y Manual de Bioseguridad.

Eliminar el material biológico de acuerdo a Normas de Bioseguridad.

g. Informe.Se informará de acuerdo a formato del Laboratorio (Número designado a la Solicitud Médica, N° de Asegurado, Código de Beneficiario, Médico Solicitante, Unidad Sanitaria, Nombre y Apellido del Paciente, Servicio, Cama y fecha del análisis).El resultado se informará en cifras enteras sin decimal seguido de la unidad de análisis.

6. Formulario y registro

El registro se realizará en Registros secundarios, luego éstos se registrarán en el Registro General de Química Sanguínea para su posterior informe.

7. Referencia Todd, Sanford, Davidsohn. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio.Norma Boliviana de Bioseguridad. 2012.Manual de Bioseguridad de Área de Química Sanguínea.Insertos de Kits (LabTest, Wienner, Stambio).

8. Anexos Instrucciones para la Toma de Muestra.9. Lista de

distribución- Jefatura (original).- Responsable de área (copia controlada).- Operador técnico (copia controlada).

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