Automatización en Hematología - UNR
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Automatización en
Hematología
Bioq. Ma. Verónica [email protected] lab.
Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas – UNRRosario, 14/10/21
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Automatización del Hemograma: Propósito
Búsqueda de mejoras en el diagnóstico y seguimiento de las enfermedades.
Incremento de la productividad.
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Automatización del Hemograma. “La tecnología como aliado del laboratorio”
Mayor eficien
cia
Mejora calidad
analítica
Estandarización
Biosegu
ridad
Progra
mas de QC y
estadís
ticas
Monito-
reo
T
A
T
Parámetros clínicos
avanzados
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Automatización del Hemograma
Con el tiempo, la revisión visual de los frotis ha disminuidoconsiderablemente. Así, a comienzos de los años 90 en un centroasistencial de agudos se hacían 100 revisiones manuales y esta cifrabajó a 13%.
(Publicación SAH 2005)
Utilizando los algoritmos de decisión, reglas y criterios establecidospor ISLH, la tasa de revisión de frotis fue del 29,3% en el 2013, conuna disminución de 8,9 puntos comparada con la obtenida paravalidación manual: 38,2%.
(Informe ALAC (Asociación de Laboratorios de Alta Complejidad)ISLH: International Society for Laboratory Hmetology
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Automatización del Hemograma: Evolución
1953• Wallace y Joseph Coulter patentan un equipo basado en impedancia
volumétrica para contar leucocitos y eritrocitos.
1980
• Nuevos modelos que realizan el diferencial de leucocitos en 3 partes ydeterminan los índices hematimétricos, útiles en la clasificación de lasanemias. (VCM y RDW).
90’
• Diferencial de leucocitos en 5 partes. Recuento diferencial de leucocitospor combinación de diferentes tecnologías, nuevos parámetros, flags oalarmas que alertan sobre las distintas patologías.
HOY• Nuevos parámetros, conexión a un LIS, módulos integrados, módulos de
realización de extendidos, tinción y análisis digital de la imagen.
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Hemograma manual a semiautomático
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Hemograma automático
Mid
LymGran
Diferenciación de WBC en 3 partes
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Principio de Medición
Impedancia eléctrica
Colorimetría
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Características generales
Analizador hematológico, automático, multiparamétrico: 19 a 21 parámetros.
Diferenciación de 3-partes para WBC; 3 histogramas.
Velocidad de análisis: 30 a 70 muestras/hora.
Bajo volumen de muestra: de 9 a 50 ul de sangre entera.
Control de Calidad : Diferentes programas: L-J Levey-Jenning, Ẋ-B, Ẋ. Con capacidad
para almacenar varios niveles.
Varias opciones para la calibración: manual, con “sangre fresca”, o completamente
automática con calibrador comercial.
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Características generales
Almacenan gran cantidad de resultados de muestras con histogramas, hasta 500K.
Varias opciones para el ingreso de datos: LCD color, touch screen, teclado integrado, teclado externo, lector de código de barras.
Varias opciones para la visualización de los resultados: LCD color, impresora térmica interna, impresora externa, conexión unidireccional o bidireccional a un LIS.
Sistema de avisos y alarmas.
Modelos con opción para trabajar con tubo cerrado.
Utilizan 2 o 3 reactivos líquidos: diluyente y lisante (libre de cianuro) , y algunos también detergente. Sistemas abiertos o cerrados.
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RBC
MCV
HCT
RDW-SD
RDW-CV
HGB
MCH
MCHC
WBC
Lymph#
Lymph%
Mid#
Mid%
Gran#
Gran%
7
PLT
MPV
PCT
PDW
48
19/21 Parámetros + 3 Histogramas
Menú de parámetros
P-LCC
P-LCR
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Indicadores en parámetros e histogramas
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Flag Type Flag Sgnificado
WBC Flag
Leukopenia Low WBC analysis results
Leukocytosis High WBC analysis results
Gran decreased Low neutrophils analysis results
Gran increased High neutrophils analysis results
Lymph decreased Low lymphocytes analysis results
Lymph increased High lymphocytes analysis results
Mid-size cell increased High granulocytes analysis results
Pancytopenia WBC, RBC and PLT low
RBC Flag
RBC Histogram Abn.Possible presence of microcytes, macrocytes, anisocytosis, RBC
agglutination and dimorphic histogram
HGB Abn./Interfere?HGB abnormal or RBC agglutination, or interference may exist (e.g., WBC high)
Microcytosis MCV low
Macrosytosis MCV high
Anemia Anemia
Erythrocytosis RBC high
PLT Flag
PLT Histogram Abn.Possible presence of microcytes, red
blood cell debris, giant PLT or PLT clump
Thrombocytopenia PLT low
Thrombocytosis PLT high
Mayor utilidad para un pre-diagnóstico
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Wiener lab. Counter 19 Counter XS 20
OrpheeMythic 18
DiatronAbacus 3CT
Analizadores Hematológicos 3-Diff
Sysmex XP-300 Abbott CELL-DYN Emerald
HoribaABX Micros ES 60
SiemensAdvia 360
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Diferenciación de WBC en 5 partes
Tinción Química Citometría de flujo Dispersión láser
Impedancia
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LAS(Low angle scatter): Volumen celular
MAS(middle angle scatter): Complejidad celular
WAS(Wide angle scatter): Granularidad celular
Dispersión láser
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Canal DIFF
LY
M
MO
N
NE
U
EO
S
RB
C
LYM
MON
NEU
EOS
RBC
LAS
WAS
WAS
LAS
DIF
F L
yse
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Canal DIFF
DIF
F L
yse
LAS
MAS
Volu
men c
elu
lar
Complejidad
LAS
MAS
Volu
men c
elu
lar
Complejidad
RBCLYMMONNEUEOS
RBCLYMMONNEUEOS
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Canal Basófilos/HGB
LH
Ly
se
Other WBC
BASO
Otros
WBC
BAS
RBC
Otros
WBC
BAS
RBC
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Parámetros
RBC
MCV
HCT
RDW-SD
RDW-CV
HGB
MCH
MCHC
PLT
MPV
PCT
PDW
WBC
LYM#
LYM%
MON#
MON%
NEU#
NEU%
EOS#
EOS%
BAS#
BAS%8
1168
P-LCC
P-LCR
25 Parámetros reportables + 24 Parámetros de investigación
ALY(#,%), LIC(#,%), NRBC(#,%), Lip /#%), Blast (#%), PLT clumps (#%), PDW-SD,
NLR, PLR, Neu-X, Neu-Y, Neu-Z, Lym-X, Lym-Y, Lym-Z, Mon-X, Mon-Y, Mon-Z.
WBC
LYM#
LYM%
MON#
MON%
NEU#
NEU%
EOS#
EOS%
BAS#
BAS%
PLT
MPV
PCT
PDW
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Flexibilidad en el modo de trabajo
AutoloaderModo sangre entera 40 muestras
Modo cerrado Modo sangre entera
Modo cerrado Modo Prediluido
Modo cerrado Modo sangre entera Muestra capilar
33µLSangre entera
20µL
SangrePrediluida
CBC / CBC + 5DIFF
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5-Diff, 31 y 49 parámetros (con parámetros de investigación), diagramas de dispersion e histogramas.
Dispersión láser + tinción química + citometría de flujo.
Canal independiente para basófilos y método de medida óptica, o basófilos por impedancia.
A partir de 60 muestras por hora.
Muestras STAT en tubo cerrado, sangre entera, capilar y prediluida.
Autoloader con 40 tubos.
Sólo 15 a 33uL de muestras en modo sangre entera.
Almacenamiento 250.000 muestras.
Diluyente y 2 / 3 lisantes. Sistema cerrado.
Comunicación bi-direccional.
Características generales
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5-DIFF - Tecnologías
Dispersión láser
Fluorescencia
Impedancia volumétrica
VCS (Volume-Conductivity-Scatter)
PANDA (Peroxidase Activity and Nuclear Density Analisis)
MAPSS (Multi Angle Polarized Scatter Separation)
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Parámetros tecnologías avanzadas
NRBC
MalariaRET
IRF
RET-He
PLT-O
IPFIGIG
6-Diff
Otros fluidos corpora
les
Más parámetros
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Otros parámetros
Parámetros
reportados:WBC,
BASO#,
BASO%, NRBC#,
NRBC%
PLT-O
IPF
Otros fluidos
RET
IRF
RET-He
IG
IG
6-Diff
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Fluorescencia y plaquetas ópticas
Fragmentos de RBCNormal
Medida del Volumen
Contenido RNA
Volu
men
Contenido RNA
Volu
men
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Trombocitopenia IPF - Recuento de plaquetas inmaduras
IPF
PLT
Diagnóstico diferencial de trombocitope
nia
IPF: Fracción de Plaquetas Inmaduras Es una medición directa de la actividad plaquetaria en la médula ósea.
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Trombocitopenia IPF - Recuento de plaquetas inmaduras
Trastorno de producción/
Destrucción o consumo de plaquetas
Trombocitopenia
IPF baja o normal
Anemia aplásica,
leucemia, supresión MO
Efecto de medicamentos
IPF alta
PTI, PTT, CID, toxicidad de
fármacos
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“El rol de los monocitos en la progresión de la sepsis”
CBC
Cambios
morfológicos
en monocitos
Anticipa el diagnósitco
de sepsis
* PCT
* PCR
* IL6
* Lactato
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• Cargador automático
• Identificación con CB
• Perforación de la tapa
• Homogeneización de la muestra
Manejo de muestras
• Programas de calidad interlaboratorial
• Reglas y algoritmos de consenso de ISLH
• Licencias para aumentar la velocidad, CBC en otros líquidos biológicos, etc.
• Veterinaria
Software
• Protocolo HL7
• Bidireccional
• Puertos: LAN/ USB/RS-232/PS2
Comunicación
Interface
5-DIFF: Otras características técnicas destacables
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Integración
• Reactivos concentrados para minimizar el recambio (x 25).
Nuevo enfoque en el manejo de
reactivos
• Touch screen
• Mantenimiento remotoOtros
5-DIFF: Otras características técnicas destacables
Escalabilidad (varias unidades analíticas) ESR, HbA1c, PCR. Módulos de preparación y tinción frotis Imagen digital de la morfología celular
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Sysmex XS 1000i
Sysmex Serie XN-L
HoribaYumizen H500
Siemens Advia 560 / AL
Beckman Coulter DxH500
Abbott Emerald 22
Mythic 22 y 22AL
DiatronAbacus 5
HoribaPentra 60C+ y ES 60
Analizadores Hematológicos 5-Diff (60 hem/h)
Counter 31ALCounter 29
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Beckman CoulterDxH800/900
DxH600Abbott Alinity Hq
Siemens Advia 2120i
Sysmex serie XNMindray BC-6800 ABX Pentra XL 80
ABX Pentra DX Nexus
Analizadores Hematológicos 5-Diff (> 60 hem/h)
Yumizen 1500/2500
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Módulos escalables
CAL 6000/8000
DxH 800 / 900
Yumizen P8000Pentra DX nexus SP evolution
XN Series
Alinity H-seriesHq + Hs
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Análisis Digital de la Imagen
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• Analizador POCT • 10 minutos • Informa 19 parámetros, CBC y WBC-5DIFF. • Se utilizan 2 gotas de sangre que se colocan en una cámara.• Un microscopio multicanal especializado toma imágenes que
escanea y analiza utilizando técnicas de visión e IA.
POCT - Hematología
OLO - SIGHT
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VOLUMEN DE TRABAJO DIARIO
COMPLEJIDAD DE LA POBLACIÓN DE PACIENTES
Selección de un contador hematológico
Automatización del Hemograma
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40
Linfocito
Monocito
Eosinófilo
Basófilo
Neutrófilo
Immature granulocyte
Blast/ Atypical lymphocyte
Flags
…
Más confiable
Más información
3-Diff vs 5-DiffDiferenciación de WBC en 5 partes
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3-Diff vs 5-Diff5-partes: menor revisión manual
3-
partes
5-
partes
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3-DIFF 5-DIFF 6-DiIFF (y otrosparámetros)
Vo
lum
en
de
mu
est
ras
dia
ria
s
50
-10
0>
10
0<
50
Automatización/complejidad del Laboratorio
Laboratorios privados
pequeños
Hospitales pequeños de
atención primaria
Laboratorios pequeños
Y medianos
Laboratorios medianos
Y medianos-grandes
Posicionamiento en el Mercado
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3-Diff vs 5-Diff
Costo del instrumento
Costo del hemograma
• Costo instrumento 5-Diff puede ser dos a tres veces mayor que un 3-Diff.
• 5-Diff requiere > n° reactivos que 3-Diff, y de mayor complejidad, implicando mayor costo del hemograma 5-Diff.
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• Volumen de trabajo diario
• Población
3-partes
5-partes
• Especificaciones técnicas
• Precio del analizador
• Precio del hemograma
Selección Proveedor
• Provisión de reactivos/controles
• Servicio técnico (tasa de fallas)
• Asesoramiento bioquímico
Monitorización
Qué nos preguntamos al momento adquirir un contador
hematológico…