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  • MANUAL DE HISTOPATOLOGA BSICA PARA ODONTLOGOS. PAGINA NRO. 1

    MTODOS DIAGNSTICOS UTILIZADOS EN ANATOMA PATOLGICA

    BIOPSIA CONCEPTO

    Una biopsia es un pequeo fragmento de un ser vivo que se preleva o remueve

    para estudiarlo. Es equivalente a decir que es la remocin quirrgica de parte o

    la totalidad de una lesin en un tejido vivo con el propsito de realizar el examen

    microscpico y el diagnstico, esto por supuesto, nos permitir realizar el

    tratamiento adecuado.

    INDICACIONES En el pasado, la toma de la biopsia equivala a estudio por sospecha de cncer;

    actualmente, se emplea este mtodo de diagnstico para la mayora de las afecciones

    de la cavidad bucal. Son indicaciones obligatorias de biopsia en cavidad bucal las

    siguientes:

    Cualquier lesin de aspecto clnico compatible con lcera, ulceracin, erosin,

    ampolla, y que no muestre evidencia de curacin en 8 a 10 das.

    Cualquier tumefaccin sospechosa de ser una neoplasia.

    Cualquier lesin hiperqueratsica persistente.

    Cualquier tejido eliminado quirrgicamente.

    Cualquier tejido eliminado espontneamente.

    Material de una fstula que drene constantemente y cuyo origen no puede ser

    bien identificado.

    Cualquier lesin intrasea que no pueda ser identificada por mtodos

    radiogrficos.

    Lesiones blancas o rojas con aspecto de placa (leucoplasias y/o eritroplasias).

    Lesiones de cualquier tipo que se acompaen de adenomegaleas a la

    palpacin.

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    FINALIDAD

    La finalidad de la biopsia es obtener un diagnstico histopatolgico de certeza

    que permita a su vez establecer el tratamiento ms adecuado de la lesin.

    TIPOS DE BIOPSIA

    Biopsia excisional: cuando la lesin se extirpa totalmente, se aplica a lesiones

    pequeas o con base de implantacin pediculada.

    Biopsia incisional: es aquella en la que se extirpa parte de la lesin para su estudio, se aplica a lesiones grandes, de base de implantacin amplia o ssil o

    lesiones en las cules el diagnstico determinar si el tratamiento debe ser

    conservador o radical.

    FICHA O PROTOCOLO DE BIOPSIAS

    Consiste en una solicitud, elaborada por el mdico u odontlogo que est tratando al

    paciente, y la cual es enviada al anatomo-patlogo. Por medio de estos datos, el

    patlogo va a conocer al paciente y a travs del fragmento o muestra del tejido,

    relaciona toda esta informacin con la finalidad de llegar a un diagnstico exacto o

    preciso.

    Una solicitud de biopsia debe llenar los siguientes requisitos:

    1. El nombre o direccin del instituto o clnica de donde fue enviada la

    solicitud.

    2. Un recuadro en la parte superior en el que se toman los datos siguientes:

    Nombre del paciente, direccin del mismo, edad del paciente, sexo, raza,

    etc. Estos datos tienen particular inters en cuanto a la informacin o imagen

    que se hace el patlogo del caso, ya que es sabida la predominancia de

  • MANUAL DE HISTOPATOLOGA BSICA PARA ODONTLOGOS. PAGINA NRO. 3

    diferentes enfermedades en relacin con la edad y el sexo, ej. : en las

    edades avanzadas son ms frecuentes las enfermedades degenerativas y

    el cncer; hay tambin enfermedades relacionadas con el sexo, tales como

    aquellas que se transmiten a travs de cromosomas sexuales: hemofilia,

    incontinencia pigmentaria, displasia ectodrmica hereditaria, etc.

    3. Fecha: en la cual fue enviada la solicitud; de ser posible debe colocarse la hora en que fue tomada la muestra pues esto orienta al

    patlogo acerca del tiempo de fijacin de la muestra.

    4. Cdigo del servicio: es decir, el nmero o nombre del departamento que

    enva la solicitud.

    5. Residencias anteriores: se refiere a las localidades donde el paciente haya vivido, esto es necesario, ya que el paciente pudo adquirir la

    enfermedad en otro lugar y se le desarroll en su nueva residencia,

    adems sabemos que en nuestro pas existen zonas de endemia para

    determinadas enfermedades.

    6. Duracin de la enfermedad: significa el tiempo durante el cual el paciente siente o padece la enfermedad, esto es importante debido a que es un dato

    para saber si la enfermedad es de evolucin lenta o rpida.

    7. Duracin de la hospitalizacin: se coloca en caso de que el paciente haya estado hospitalizado; das, meses o aos.

    8. Evolucin durante la enfermedad: es un complemento del punto 6, pues mediante este dato el anatomo-patlogo sabr como ha progresado la

    enfermedad o lesin, si es agresiva o lenta. Pueden agregarse en este punto

    otros sntomas que refiera el paciente, tales como presencia o ausencia de

    dolor, hemorragias y otros sntomas generales que puedan orientar al

    patlogo.

    9. Resultados de exmenes de importancia: en caso de que existan datos paraclnicos que aportan exmenes como: hematologa, glicemia,

    radiologa, ultrasonidos, tomografas etc. Slo se colocan datos patolgicos.

    10. Exmenes patolgicos anteriores: esto es, si al paciente le han

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    efectuado anteriormente exmenes bipsicos y/o citolgicos, y los

    resultados que se obtuvieron.

    11. Otros datos de inters: se refiere a si el paciente padece de alguna enfermedad que pueda complicar el cuadro, ej. : si es hemoflico,

    diabtico, cardipata, etc.

    12. Sitio de toma del material: debe anotarse el lugar, rgano o regin de la cavidad oral, donde se tom la muestra, inclusive haciendo una especie

    de croquis o dibujo de la zona. ESTE DATO NUNCA DEBE FALTAR. 13. Material enviado: es una descripcin del fragmento o de la muestra

    tomada, su forma, tipo de tejido, color, consistencia (dura o blanda), grosor,

    si se enva una parte o la totalidad del tejido lesionado (este ltimo, si es

    pequea la lesin).

    14. Diagnstico clnico o sospecha: este es el dato que suministra el

    profesional tratante al anatomo-patlogo, el cual va a describir a manera de

    hiptesis, que tipo de lesin cree que es, es decir, cul fue la conclusin

    probable a la que lleg. 15. Firma del mdico: es la firma del mdico u odontlogo que envi la

    solicitud de biopsia.

    RESPUESTA DEL ANATOMO-PATLOGO AL MDICO SOLICITANTE

    Son los resultados obtenidos del estudio de la muestra enviada, los cuales son

    expresados en una hoja especial que incluye, aparte de los datos de identificacin del

    paciente, el cdigo de biopsia, la fecha, el diagnstico clnico o sospecha; una

    descripcin detallada de las caractersticas macroscpicas y microscpicas de la

    muestra examinada, expresando al final su conclusin acerca del tipo de lesin que

    padece el paciente, siendo esta ltima un diagnstico que podemos considerar de

    certeza, y que depende de la experiencia del anatomo-patlogo.

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    PROCESAMIENTO DEL MATERIAL BIOPSIADO

    Cuando se realiza una biopsia, el fragmento o material tomado de una lesin,

    debe ser sometido a una serie de procedimientos fsicos y qumicos, que tienen como

    finalidad permitir, en ltima instancia, su observacin a travs del microscopio con el

    objeto de llegar a una conclusin diagnstica.

    PASOS PARA EL PROCESAMIENTO DE UNA BIOPSIA

    1. Fijacin. Es una operacin que tiene por objeto matar las clulas y conservarlas estructuralmente en un estado lo ms parecido posible al que stas tenan en vida.

    Inhibe la autlisis, la heterlisis y la invasin bacteriana.

    Los fijadores pueden ser:

    Fsicos: como el calor, el fro y la desecacin.

    Qumicos: que pueden ser: oxidantes como por ejemplo: cido crmico, cido pcrico y bicloruro de mercurio; y reductores, como el formol al 10% y el alcohol

    al 70%.

    Cualidades que requiere un fijador:

    Gran poder de penetracin, para que acte lo ms profundamente posible

    sobre la masa de la pieza.

    Conservar las estructuras lo ms semejantes posible a las que posee el tejido

    vivo.

    Endurecer los tejidos bruscamente para evitar las deformaciones que pueden ocurrir

    al necrosarse las clulas.

    Facilitar la coloracin posterior.

    Insolubilizar los elementos constitutivos del tejido para que no sean arrastrados

    por las diferentes sustancias empleadas en la tcnica.

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    Tcnica de la fijacin. Una vez obtenida la muestra, debe colocarse inmediatamente

    en el lquido fijador, se prefieren los envases de boca ancha, debidamente rotulados,

    de vidrio o plstico y tamao adecuado. El volumen del fijador debe ser

    aproximadamente 50 veces el tamao de la pieza, o por lo menos, debe cubrirla

    completamente. La duracin de la fijacin vara segn el tipo de fijador; por lo general,

    se estima entre 4 y 18 horas pudindose prolongar hasta 24 a 48 horas. El fijador ms utilizado para las biopsias es el formol al 10%, el cual se prepara con una parte de formol puro por nueve partes de agua corriente. Cuando el tiempo de fijacin es

    muy prolongado puede ocurrir una reaccin qumica entre el formol y la hemoglobina,

    originndose un pigmento granular negro llamado pigmento formlico, que puede

    interferir en las investigaciones histolgicas.

    2. Lavado de la pieza. Tiene por objeto eliminar el exceso de fijador que ms adelante podra dificultar la coloracin. Se realiza con agua corriente que se deja actuar durante

    un tiempo ms o menos igual al que ha actuado el fijador.

    3. Proceso de deshidratacin. Se realiza por medio de alcohol, colocando la pieza en concentraciones crecientes del mismo (alcohol de menor a mayor concentracin), ej.:

    primero, alcohol a 70 por uno o dos das; luego, alcohol a 80-90 hasta llegar al

    alcohol absoluto. La comprobacin de la deshidratacin total se hace por medio del

    xilol, se coloca la muestra en este lquido y si se enturbia formndose como una nube,

    ser seal de que la deshidratacin es imperfecta. En cambio una completa

    homogeneidad y transparencia del xilol nos indicar que podemos continuar el proceso.

    4. Aclaramiento inicial. Se realiza sumergiendo la pieza en xilol para eliminar el

    exceso de alcohol y permitir que el tejido sea soluble en los medio de inclusin.

    5. Inclusin. Es un procedimiento que permite formar masas duras que contienen el material a estudiar con la finalidad de poder realizar cortes finos del tejido. Los medios

    de inclusin pueden ser:

    Acuosos: poco utilizados. ej.: jabn y gelatina.

    Anhidros: como la celoidina y la parafina, esta ltima es universalmente empleada

    por su gran penetrabilidad y consistencia. Para incluir en parafina, sta debe

    primero encontrarse en estado lquido, lo cual se logra sometindola a temperaturas

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    elevadas (55-70), en este estado, se coloca la pieza en ella y con la ayuda de los

    moldes o barras de Leucar, se deja solidificar y se le da diferentes formas, por lo

    general, piramidales. El producto final es llamado taco, pan o bloque, y a travs de

    ste se realizan los cortes

    6. Cortes. Un corte es una capa extraordinariamente delgada y transparente de una

    pequea porcin de tejido corporal. Para realizarlos, hoy en da, se emplean aparatos

    especiales llamados microtomos, los que nos proporcionan cortes delgados, parejos y

    de espesor variable. Esta etapa tambin es llamada de seccin.

    7. Montaje inicial del corte. Los cortes de parafina se extienden en agua tibia

    contenida en un cristalizador. All mismo se introducen los portaobjetos y con la ayuda

    de pinceles o agujas de histologa, se empujan los cortes hasta adherirlos al

    portaobjetos. Se recomienda utilizar sustancias como la albmina de Mayer, para

    asegurar mayor adherencia a la superficie de la lmina portaobjeto.

    8. Aclaramiento medio. Consiste en sumergir el corte en xilol con la finalidad de eliminar la parafina y permitir la coloracin.

    9. Hidratacin. Es el paso previo para la coloracin y se realiza con alcohol en grados decrecientes (de mayor a menor concentracin). Esta operacin permite una mayor

    penetracin del colorante.

    10. Coloracin. Nos permite obtener lmites precisos de los diferentes elementos tisulares y la observacin de los elementos celulares dependiendo de su afinidad

    tintorial.

    Existen combinaciones de colorantes en abundancia, pudindose realizar

    coloraciones monocrmicas, bicrmicas tricrmicas, segn consten de uno, dos o

    tres colorantes.

    Ejemplos de coloraciones:

    Monocrmicas: azul de metileno.

    Bicrmicas: hematoxilina - eosina.

    Tricrmicas: Van - Gieson.

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    La coloracin actualmente ms utilizada para la observacin de biopsias, es la

    hematoxilina-eosina, la cual consta de dos (2) colorantes: hematoxilina, colorante bsico que tiene afinidad por las estructuras cidas, como la cromatina nuclear, la

    matriz orgnica que ha contenido sales clcicas, etc., stas se tien de color violeta.

    La eosina, es el colorante cido, tie estructuras bsicas, como el citoplasma celular,

    fibras elsticas y colgenas del tejido conjuntivo, estructuras que toman un color

    rosado.

    11. Montaje final. Consta de tres (3) pasos: Deshidratacin final que se realiza con alcoholes de menor a mayor

    concentracin.

    Aclaramiento final, mediante utilizacin de Xilol.

    Colocacin de una gota de blsamo de Canad y un cubreobjetos.

    Luego de esto, la muestra est lista para ser observada en el

    microscopio.

    DIAGNSTICO MICROSCPICO

    Consiste en realizar una interpretacin clara, precisa, de las modificaciones

    estructurales de los tejidos, relaciones celulares, grado de modificacin de las clulas,

    comparacin de los tejidos sanos y enfermos, que tienen por finalidad, dar un

    diagnstico sobre la naturaleza de la lesin y orientar al clnico en su conducta

    teraputica.

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    MODELO 1 DE SOLICITUD DE BIOPSIAS UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE ODONTOLOGA CTEDRA DE ANATOMA PATOLGICA SOLICITUD DE BIOPSIAS Informe Clnico para Piezas Quirrgicas, Biopsias. Fecha...............................Cdigo del Servicio....................................... Residencias anteriores.......................................................................... Duracin de la enfermedad.................................................................... Duracin de la hospitalizacin............................................................... Evolucin durante la enfermedad........................................................... ................................................................................................................ Resultado de exmenes de importancia................................................. ................................................................................................................ Exmenes patolgicos anteriores............................................................ ................................................................................................................. ................................................................................................................. Otros datos de inters............................................................................. ................................................................................................................. ................................................................................................................. Sitio de toma del material......................................................................... .................................................................................................................. .................................................................................................................. Material enviado....................................................................................... ................................................................................................................... ................................................................................................................... ................................................................................................................... Diagnstico clnico o sospecha................................................................. ----------------------------------------- Firma del mdico u odontlogo

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    Modelo de respuesta del anatomopatlogo. UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE ODONTOLOGA CTEDRA DE ANATOMA PATOLGICA

    DIAGNSTICO HISTOLGICO

    ENTRADA N______FECHA: ______MDICO:______CGO. SERV :______

    DIAGNSTICO CLNICO:

    MATERIAL ENVIADO: (Descripcin macroscpica)

    EXAMEN MICROSCPICO:

    CONCLUSIN : ___________________ __________________________ FECHA DEL INFORME. FIRMA DEL PATLOGO.

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    BIBLIOGRAFA.

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    ed. 5) Mc CARTHY, P.L. y SHLAR, G.(1985): Enfermedades de la Mucosa Bucal,

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    Argentina, Panamericana.

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    http://www.neosoft.com/uthman/biopsy.html.