Efecto de la cantidad de fertilizante sobre la asimilacin de Nitrgeno en la Alubia Roja

Equipo No. 5

Nombre FirmaGonzlez Barrera Karla Pamela _________________Piones Ramrez Arely Anaid _________________Quintanar Orozco Paulina Itzel _________________Tolentino Acuahutla Patricia _________________Tovar Fras David Arturo _________________

Semestre 15-1

Efecto de la cantidad de fertilizante sobre la asimilacin de Nitrgeno en la Alubia Roja

Etapa No.2

Nombre FirmaGonzlez Barrera Karla Pamela _________________Piones Ramrez Arely Anaid _________________Quintanar Orozco Paulina Itzel _________________Tolentino Acuahutla Patricia _________________Tovar Fras David Arturo _________________

Fecha de entrega: 20-Mar-14

NIVEL DE INVESTIGACINExperimental: el objetivo es controlar un fenmeno a estudiar, empleando muestras cuantitativas para analizar los resultados obtenidos en el experimento. Experimental: el objetivo es comprender el efecto de la cantidad de fertilizante inorgnico sobre la asimilacin de Nitrogeno en la Alubia Roja, por medio de pruebas cuantitativas, para determinar en que cantidad de fertilizante tendremos ms concentracin de Nitrgeno.

DISEO DE INVESTIGACION

En el presente proyecto estudiaremos un caso enfocado en la asimilacin del nitrgeno especficamente en el crecimiento de la planta en donde controlaremos las condiciones. Para poder distinguir la variacin de protena en la panta de leguminosa es necesario variar la cantidad de fertilizante administrado, para posteriormente centrarnos en pruebas cuantitativas y cualitativas. El mtodo de Bradford es una prueba colorimtrica que se involucra en nuestras mediciones cuantitativas, adems de continuas mediciones de tallo y hoja, junto con un conteo en el volumen de follaje que representan nuestras pruebas cualitativas. Todo esto con la finalidad de conocer la cantidad de nitrgeno asimilado por la Alubia Roja y por ende la cantidad de fertilizante que proporciona una mayor concentracin de protena. POBLACION Y MUESTRAPara el siguiente trabajo tomamos como referencia Bioqumica del Nitrgeno introducindonos en el estudio del Ciclo del nitrgeno y sus etapas.

POBLACION: Ciclo del nitrgeno

MUESTRA: Asimilacin de nitrgeno en la alubia roja.

MTODOEl desarrollo experimental de nuestro proyecto se distribuye en los siguientes pasos 1.- Seleccin:Se seleccionaran 26 semillas de alubia roja conforme a su peso, su tamao y su color.2.- Pesado:Se pesaran las 26 semillas de acuerdo al rango de 2.0-2.5 g cada una, as como 250 g de tierra de hoja, y de fertilizante 0, 0.3, 0.6, 0.9 3.- Mezcla: Se colocan en un recipiente de capacidad de 3 L la tierra de hoja y el fertilizante, posteriormente se mezclaran ambas cosas; sembrando 2 alubias rojas por cada recipiente.4.- Riego:Se regaran los recipientes cada tercer da con 30 ml de agua.5.- Muestreo:El muestre tanto cuantitativo como cualitativo se realizara una vez pasada una semana de crecimiento de la planta.6.-Comprobacion experimental. Prueba cuantitativa (mtodo de Bradford) y cualitativa (tamao de tallo, hoja y volumen) de la leguminosa. 6.- Cualificacin:De acuerdo al crecimiento de la planta cada tercer da, se tomara la medicin y registro de cada tallo, ancho y longitud de hoja as como la coloracin de las hojas.7.- Determinacin.De acuerdo al mtodo cuantitativo, la tcnica a utilizar cada semana, ser Bradford para la determinacin de protena en la leguminosa.8..- Resultados:

A continuacin se esquematiza el mtodo antes mencionadoCualitativo Muestreo RiegoMezclaTierra Pesado Fertilizante Alubia Seleccin

Experimentacin Cuantitativo

Determinacin

Medicin Resultados

Bradford

Esquema elaborado: Propio 2015

DISEO EXPERIMENTAL Presentamos la tabla referente a la metodologa a seguir en el presente proyecto.TABLA METODOLOGICA Autor propio 2015Tabla N. 1Condiciones/RecipientesMetodologiaControl123

Tierra de hoja (g)400400400400

Fertilizante (g)00.30-60.9

Alubia (g)2222

Riego (ml)30303030

x3 Muestreo (dias)3333

Temperatura (C)AmbienteAmbienteAmbienteAmbiente

TECNICAS Y PROCESO Con el propsito de llevar una medicin cuantitativa en nuestro desarrollo experimental, es para nosotros imprescindible el uso del mtodo de Bradford; el cual est diseado para la medicin de protenas y se describe de la siguiente manera.

Colorimetra: se basa para medicin de protena total en una solucin dada. Involucra la unin de un colorante el Azul de Coomassie a las protenas en un medio cido y su cambio de absorbancia de 465 a 595 nm. Se tiene que hacer una curva de calibracin con albumina.

Paso 1. Preparacin de reactivo. Disolver 100 mg del Colorante Azul de Coomasie G-250 en 50 ml de cido fosfrico 85% (W/v). Diluir la solucin resultante a 1 litro. Las concentraciones finales en el reactivo son: Azul Brillante de Coomasie G-250 0.01 % (w/v), etanol 4.7% (W/v), cido fosfrico 8.5% (w/v).2. Pipetear en tubos de ensayo soluciones de protena que contengan 10 a 100 mg de protena.3. Ajustar el volumen a 0.1 ml con el buffer apropiado.4. Agregar un mililitro del reactivo Azul Brillante de Coomasie G-250 preparado como se describe anteriormente.5. Mezclar en vortex y leer absorbancia a 595 nm despus de 2 minutos de agregar el colorante y antes de una hora de iniciada la reaccin.

BIBLIOGRAFIA Mathews K. Christopher, Bioqumica, 3 Edicin, Addison Wesley: Espaa. Fundamentos de bioqumica metablica, Garrido A., 1thedicion, Alfaomega, Mxico D.F., 2005.Saber acerca del ciclo del nitrgeno [en lnea]FUENTES DE INFORMACIN [consulta en lnea el 13 de marzo 2015].http://www.bosquesmediterraneos.com/wp-content/documentos-pdf/fijacion-biologica-nitrogeno.pdf [consulta en lnea el 13 de marzo de 20015].