Búsqueda de fracciones insecticidas y antimicrobianas en ......Possani LD, Becerril B, Delapierre...
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aHernández Salazar, Misadai; aRivera Martínez Karina; bIbarra Vega Rodrigo, aPREFECO Andrés Quintana Roo, Chamilpa, 62210 Cuernavaca, Mor. bInstituto de
Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México, UNAM. Apartado Postal 510-3,
Cuernavaca Morelos, 62250, Mexico.
INTRODUCCIÓN
Los alacranes son un grupos de organismos que han desarrollado
mecanismos para defenderse de agresores y para capturar a sus presas, la
característica central de estos mecanismos es la capacidad de producir veneno, el
cual, es una mezcla compleja de componentes activos; enzimas, péptidos,
nucleótidos, lípidos, mucoproteínas, aminas biogénicas, entre otros. Cuando el
veneno es inyectado a las presas o a los agresores les ocasiona trastornos
fisiológicos que puede llevarlos a la muerte.
Las especies de alacranes más estudiadas son aquellas que presentan riesgo
de envenenamiento a los humano, estos alacranes pertenecen a la familia
Buthidae y comprende aproximadamente 500 especies, (En México el género
Centruroides), sin embargo no todas las especies de alacrán son peligrosas
para el humano, se sabe que el veneno de algunas especies solo afecta a
insectos, como es el caso de los alacranes del género Vaejovis.
Por otra parte, existen reportes que indican que los organismos generan una
primera línea de defensa contra las bacterias para disminuir la suceptibilidad a
infecciones, esta línea de defensa está formada por péptidos y algunas otras
moléculas. Es predecible que el veneno del alacrán cuente con distintos
componentes antimicrobianos que favorezcan la salud del animal, evitando el
crecimiento de microorganismos que llegan al aguijón y al veneno.
HIPÓTESIS El veneno de alacrán Vaejovis mexicanus contiene componentes
insecticidas y componentes antimicrobianos.
OBJETIVO Separar las fracciones del veneno de alacrán Vaejovis mexicanus y
determinar la actividad insecticida sobre larvas de zofobas y la actividad
actimicrobiana sobre bacterias Gram(+) y Gram(-).
RESULTADOS
Se extrajo veneno de 17 ejemplares adultos de Vaejovis mexicanus para
ensayos insecticida, se empleó veneno de 18 ejemplares para los ensayos de
actividad antimicrobiana sobre bacterias Gram (+) y Gram (-).
En la separación de HPLC se obtuvieron 12 fracciones (Elusión de 5
min c/u) las cuales se emplearon individualmente en los ensayos.
CONCLUSIÓN
El veneno del alacrán es una mezcla de componentes, se observaron más
de 50 picos en el cromatograma (cada pico nos indica al menos un compoente).
La hipótesis del trabajo fue verdadera, se encontraron fracciones que
tienen actividad insecticida (7 y 8). Se observó actividad antimicrobiana
generada por la fracción 1.
Este proyecto abre la posibilidad para caracterizar los componentes
responsables de dichas actividades y evaluar la viabilidad de su uso como
insecticidas en la agricultura y como antibióticos para infecciones bacterianas.
REFERENCIAS
Alatorre-Rosas R, Bravo-Mojica H, Leyva-Vásquez JL, Huerta-De la Peña A. Manejo integrado de plagas, Secretaria de
agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural Pesca y Alimantación, Sistema de Agronegocios Agrícolas 1-12
Possani LD, Becerril B, Delapierre M, Tytgat J (1999) Scorpion toxins specific for Na+-channels. Eur J Biochem, 264:287–
300.
possani LD., El estudio de los componentes del veneno de alacranes en el contexto de la biología molecular, la farmacología
y la medicina, Biotecnología Vol 14:177-188
AGRADECIMIENTOS:
Al Dr. Lourival D. Possani (UNAM) por facilitarnos el uso de equipos de su laboratorio para realizar los
experimentos. Al Biólogo Cipriano Balderas por su apoyo en el proyecto.
Búsqueda de fracciones insecticidas y
antimicrobianas en el veneno del alacrán Vaejovis
mexicanus
METODOLOGÍA
Colecta de los alacranes Vaejovis mexicanus en
instalaciones de la UAEM
Ordeña de alacranes con estimulación
eléctrica
Separación de las fracciones por HPLC: gradiente de 0 a 60% acetonitrilo/60 min.
Cuantificación de las fracciones obtenidas
por densidad óptica en Nanodrop.
Pruebas de toxicidad en larvas de zofobofas y pruebas de actividad
antimicrobiana
Se administraron 3 y 15 μg de cada componente en el abdomen de zofobas:
Las fracciones 7 y 8 ocasionaron signos evidentes de parálisis con 3μg,
el efecto fue inmediato con 15 μg
Las fracciones 5 y 11 dieron lugar a una ligera parálisis y desorientación
con 15 μg
Estafilococcus
aereus
Pruebas de toxicidad
Pruebas de actividad antimicrobiana
Se inocularon Medio
de cultivo YPD con
Estafilococcus aereus y
E. coli, se colocaron
los sensidiscos con las
fracciones indicadas.
Se incubaron a 37 C
Después de 14 horas se observó actividad antimicrobiana en la fracción 1, en esta se
detectó un halo de inhibición de 2mm tanto para la bacteria Estafilococcus aereus
Gram(+) como para E. coli Gram(-). Dos de las bacterias que frecuentemente ocasionan
infecciones.