Clase 16 IFI -Autoinmunidad
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16-10-2013
1
I.F.I.INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA
T .M .Paola Hernndez Pino
LABORATORIO INMUNOLOGIA
HOSPITAL CLINICO U. DE CHILE
OCTUBRE 2013
CONTROL DE CALIDAD
CONTROL NEGATIVO: PBS
SUERO
CONTROL POSITIVO DE PATRON HOMOGENEO
MOTEADO
CENTROMERO
NUCLEOLAR
ENDOMISIO
MITOCONDRIAL
FACTORES A CONSIDERAR EN CALIDAD
TECNICA
PROCEDIMIENTO
MICROSCOPIO
TECNICA
MANUAL
AUTOMATICA
SUSTRATO
Clulas HEp-2
Neutrfilos humanos
Critidia Luciliae
PROCEDIMIENTO
SUSTRATO
Dilucin del suero
Aplicar muestra diluida sobre sustrato
PROCEDIMIENTO LAVADO
INCUBACION
CONJUGADO (FITC)
MEDIO DE MONTAJE
CUBRE OBJETO
FLUORESCENCIA
D FILTRO PRIMARIO
H FILTRO
SECUNDARIO (BARRERA)
F OBJETIVOS
FLUORESCENCIA
La fluorescencia ocurre cuando una molcula
absorbe luz, se excita y luego emite luz de
una longitud de onda ms larga.
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halgeno de tungsteno.
arco de vapor de mercurio
nueva
vieja
FUENTES DE LUZ
EXTINCION DE FLUORESCENCIA
IFI
ANA
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Patron: Homogeneo
Pocillo 2
Patron: moteado
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Anticuerpo: antinucleares
Patron: nucleolar
Pocillo 1
Patron: Nucleolar / Moteado / Homogeneo
Puntos fluorescentes en Mitosis
Patron: Nuclear dots
Patron: Huso Mitotico
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CITOPLASMATICO GRANULAR CITOPLASMATICO FIBRILAR
IFI
ANCA
Pocillo 5
ANCA
Patron: c ANCA
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IFI
DNA
IFI
ENDOMISIO
Pocillo 1
Muestra: Esofago de mono
Anticuerpo: Endomisio (EMA)
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Esofago de Mono
Patron: Anti Endomisio
IFI
AMA,AML,ACPA
Estomago de rata
Patron: Musculo liso
ACS ANTICELULAS
PARIETOGASTRICAS
Patron: Mitocondrial