Cómo diagnosticar y controlar APP - Información … de alta virulencia y…! Falla parcial en...
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Cómo diagnosticar y controlar APP
Marcelo Gottschalk DVM, Dr. Microbiología. Profesor en la Universidad de Montreal
Ponencia patrocinada por:
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Marcelo Gottschalk DVM, Dr. Microbiología. Profesor en la Universidad de Montreal
Es DVM y tiene un doctorado en Microbiología e Inmunología de la Universidad de Montreal, Canadá. Actualmente es profesor en el Departamento de Patología y Microbiología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de Montreal. Creó el Centro de Investigación Porcina en Québec y es el director del laboratorio internacional sobre Streptococcus suis. Sus investigaciones se basan principalmente en el estudio de los factores de virulencia bacteriana, respuesta del huésped, así como el desarrollo de herramientas de diagnóstico y vacunas para los patógenos de importancia veterinaria y zoonosis.
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Profesor M. Gottschalk, DVM, PhD
Facultad de Medicina Veterinaria Universidad de Montreal, Canada
Como diagnosticar y controlar App
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Ø Tres principales tipos de infección Ø Aguda: alta mortalidad; “outbreak” vs “non-outbreak”
Ø Crónica: perdidas económicas; lesiones en matadero
Ø Subclínica: muchas veces no hay indicación clínica o patológica de la infección
Ø Todavía muy importante: Latinoamérica, Europa, Asia
Ø Perdidas en EU: 200 millones de Euros/año
Ø Relativamente bien controlada en USA y Canadá Ø En esos dos países, $$ y esfuerzo:
Ø Mantener las granjas libres de App o cepas virulentas de App
Ø Controlar las granjas de reproductores para asegurarse la ausencia de cepas o, al menos, de cepas virulentas (serología)
Actinobacillus pleuropneumoniae (App)
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Toxinas producidas por distintas cepas de App
Serotipos de App
Producción de toxinas*
ApxI ApxII ApxIII
1, 5, 9/11 Si Si No
2,3,4,6,8,15 No Si Si
10, 14 Si No No
7, 12, 13 No Si No
*Todas las cepas producen ApxIV
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Enfermedad aguda
Dr Enric Marco
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Enfermedad aguda
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Ø Signos clínicos; lesiones patológicas
Ø Pulmones deben enviarse al laboratorio
Ø Si los órganos están en muy mal estado: PCR
Enfermedad aguda: diagnostico
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Ø Lesiones muy sugestivas; pleuritis, adhesiones, abscesos
Ø Pulmones al laboratorio? Ø Aislamiento muy difícil; hay métodos mas sofisticados
Ø PCR
Ø Diagnostico comúnmente utilizado: SEROLOGIA
Infección crónica: diagnostico
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Cepas virulentas?
Cepas poco virulentas?
Cepas no o poco virulentas?
Si
Si…o No
Si…o No
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Ø Normalmente: cepas virulentas
Ø Pude ocasionarlo cepas medianamente virulentas y en co-infeccion con (por ejemplo) Micoplasma: en general no en “outbreak”, relativamente baja morbilidad
Virulencia de cepas vs enfermedad clínica
Cepas virulentas?
Si
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Ø Cepas de virulencia intermedia
Ø Cepas de alta virulencia y… Ø Falla parcial en tratamiento
Ø Falla parcial en vacuna
Ø A veces no hay enfermedad clínica
Virulencia de cepas vs lesiones crónicas
Cepas poco virulentas?
Si…o no
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Ø Mayoría de granjas comerciales: cepas relativamente poco
virulentas
Ø Atención: algunas granjas…cepas virulentas Ø Enfermedad clínica puede aparecer tarde o temprano
Virulencia de cepas vs ausencia de enfermedad clínica
Cepas no o poco virulentas?
Si…o No
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Ø Como diferenciar cepas virulentas de cepas no virulentas?
Ø Como usar la serología para el diagnostico de las granjas crónica o sub-clínicamente infectadas?
Infección crónica y sub-clínica: preguntas criticas
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Donde se encuentra el App?
Portador sano Animal enfermo
Positivo en serología Aislamiento/serotipificacion
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Como diferenciar las cepas muy o poco virulentas de App?
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Ø De los 15 serotipos, solo algunos son altamente virulentos
Ø Otros tienen una virulencia baja o intermedia
Ø El problema: los serotipos virulentos e importantes difieren en los diferentes países/regiones
Ø Es extremadamente importante conocer los serotipos importantes en vuestro país
Virulencia = Serotipo
Ø Animales portadores…son mas o menos peligrosos dependiendo del serotipo
Ø Uso de bacterinas (especificas de serotipo)
SEROTIPO SEROTIPO
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Ø Hay dos tipos de prevalencia de App Ø Serotipos de los aislamientos que provienen de pulmones
de animales enfermos (serotipos mas virulentos)
Ø Serotipos mas frecuentemente presentes en las granjas (independientemente de la presencia de enfermedad): en general, serotipos de baja/intermedia virulencia
Cual es el serotipo mas prevalente en mi país?
DATOS DE CANADA
Condición Serotipos
Aislamientos de casos clínicos 5 (60%) 7 (30%)
12, 3/6/8,15, 2 (10%)
Serología de granjas comerciales sin presencia de signos clínicos
12 (60%) 3/6/8/15 (60%)
7 (25%) 5 (20%)
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Donde se encuentra el App?
Portador sano Animal enfermo
Positivo en serología Aislamiento/serotipificacion
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Ø Hay dos tipos de prevalencia de App Ø Serotipos de los aislamientos que provienen de
pulmones de animales enfermos (serotipos mas virulentos)
Ø Serotipos mas frecuentemente presentes en las granjas (independientemente de la presencia de enfermedad): en general, serotipos de baja/intermedia virulencia
Cual es el serotipo mas prevalente en mi país?
DATOS DE CANADA
Condición Serotipos
Aislamientos de casos clínicos 5 (60%) 7 (30%)
12, 3/6/8,15, 2 (10%)
Serología de granjas comerciales sin presencia de signos clínicos
12 (60%) 3/6/8/15 (60%)
7 (25%) 5 (20%)
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Los serotipos mas importantes Región Mas
prevalentes Aislados
ocasionalmente
Latinoamérica 1, 5, 7 12, 8, 4, 15
Norteamérica 5, 7 8, 12, 15
Europa 2, 9/11, 6, 8, 4 5, 7, 12
España 2, 4, 7 9/11, 5
UK 8, 6 7
Asia 2,1, 9/11, 5
8, 15
Australia 7, 15, 1 2, 8, 5, 9/11,12
Serotipos de App aislados de animales enfermos en distintas regiones
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80%
10%
5% 5%
1980-1990
serotype 1
serotype 5
serotype 7
others 63% 21%
11% 5%
1990-2000
serotype 1
serotype 5
serotype 7
others
29%
41%
21%
9%
2000-2010
serotype 1
serotype 5
serotype 7
others
1%
42%
42%
15%
2010-2015
serotype 1
serotype 5
serotype 7
others
App: Cambio de prevalencia de App en Canadá
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0%
26%
60%
14%
1995-1998
serotype 1
serotype 5
serotype 2
others
10%
49%
32%
9%
2006-2010
serotype 1
serotype 5
serotype 2
others
24%
32%
32%
12%
2014
serotype 1
serotype 5
serotype 2
others
App: Cambio de prevalencia de App en Corea
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Ø Como diferenciar cepas virulentas de cepas no virulentas?
Ø Como usar la serología para el diagnostico de las granjas crónica o sub-clínicamente infectadas?
Infección crónica y sub-clínica: preguntas criticas
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Ø ELISA Ø Especifica de serotipos: prueba LPS: Biovet, ID vet
Ø Todos los serotipos: prueba ApxIV (no diferencia los serotipos): Idexx
Ø Recuerden: la mayoría de las granjas están infectadas con App
SEROLOGIA: GRANJAS CRONICA O SUB-CLINICAMENTE INFECTADAS
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Ø ELISA especifico de serotipo (LPS) o para todos los serotipos (ApxIV)?
Ø Granjas comerciales
Ø ELISA-LPS: elegir los serotipos mas importantes en vuestro país y utilizar el kit solamente para detectar esos serotipos
Ø Si se usa la prueba ApxIV (Idexx): la mayoría de las granjas serán positivas. Esta información no será muy útil para el veterinario clínico
Serologia en granjas comerciales
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Uso limitado de la prueba ApxIV en granjas comerciales
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Ø ELISA especifico de serotipo (LPS) o para todos los serotipos (ApxIV)?
Ø Granjas de alto nivel sanitario
Ø Si la granja es negativa para todos los serotipos de App, la prueba ApxIV puede usarse para controlar el estatus negativo
Ø Si la granja es positiva para la prueba ApxIV, hay que confirmar que serotipos están presentes
Serologia en granjas de alto nivel sanitario
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Ø La expresión clínica causada por una cepa
virulenta puede depender de las condiciones
sanitarias de la granja y del manejo
Ø Muchas veces una cepa virulenta puede pasar
desapercibida en una granja…pero hasta
cuando?
Ø Ausencia de signos clínicos ≠ ausencia de cepas
virulentas
Cepas virulentas: presentan siempre signos clinicos?
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SEROTIPO
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Donde se encuentra el App?
Portador sano
Animal enfermo
Positivo en serología Aislamiento/serotipificacion
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Ø Reproductores Ø Serotipo indica el nivel de riesgo
Ø Cada compañía debe decidir ese nivel de riesgo
Ø Vender animales libres de todos los serotipos
Ø Vender animales libres de serotipos virulentos
Ø Las granjas reproductoras deben continuamente vigilar
serológicamente su estatus
Ø En presencia de infección subclínica con algún
serotipo de virulencia baja/intermedia: avisar al cliente
SEROTIPO
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Ø Si están comprando animales de remplazo Ø Primero hay que conocer su proprio status de infección
Ø Pedir a la granja reproductora los resultados serológicos
Ø Cuidado con comprar animales App-free si vuestra granja esta infectada con App…aclimatar los animales de reemplazo
Ø Si el reproductor no es libre de App…cuidado con los serotipos presentes en el país de origen de esos animales
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Ø Control/Tratamiento de casos clínicos Ø Antibióticos
Ø Prevención de casos clínicos (protección activa) Ø Vacunas
Ø Reducción de la colonización de lechones
Control y prevención de la pleuroneumonía
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Ø Identificar los casos muy tempranos y comenzar el tratamiento individual
Ø Cerdos afectados toman y beben menos
Ø Examinar los animales 2 veces/dia. Puede ser necesario inyectar o tratar todo el grupo
Ø Obtener antibiograma si es posible
Tratamiento de casos clínicos
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Ø Tratamiento individual necesario
Ø Marcado de animales para asegurarse que el tratamiento funciona bien
Ø Tratar todo el grupo de animales que estan a riesgo
Ø Si es posible: muestras al laboratorio, aislamiento, serotipificación y antibiograma
Ø Cambio de antibiótico (menor costo)
Ø Elegir el antibiótico para medicación oral
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Ø Antibióticos Ø Tilmicosina
Ø Ceftiofur (problemas por uso en medicina humana)
Ø Fluoroquinolonas
Ø Tulatromicina
Ø Florfenicol
Ø Otros
Ø Metafilaxis: medicación oral Ø Tilmicosina
Ø Florfenicol
Ø Trimethoprima + Sulphamethoxazol
Ø Otros
Ø Algunas a…muchas semanas, dependiendo de la granja
Tratamiento y/o prevención de casos clínicos
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Ø Bacterinas (comerciales o autógenas) Ø Especificas de serotipo
Ø Anticuerpos contra la bacteria: opsonización y destrucción de la bacteria
Ø Basadas en toxinas (comerciales) Ø Todos los serotipos en teoría
Ø Anticuerpos contra las toxinas: neutralización de las toxinas
Ø Mixtas Ø Bacterina + Toxinas Ø Todos los serotipos (en teoría) + protección suplementaria para los serotipos
incluidos en la vacuna
Ø Anticuerpos contra la bacteria (serotipos incluidos) y neutralizantes (toxinas)
Prevención de casos clínicos: vacunas
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Ø Presencia de anticuerpos maternales
Ø Momento de la aparición de casos clínicos
Ø Actividad del virus PRRS
Aplicación de la vacuna en lechones
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Ø Anticuerpos maternales
Ø “El” ejemplo de interferencia
Ø Cuanto duran estos anticuerpos?
Ø Depende del nivel de anticuerpos en madres
Ø Anticuerpos contra las toxinas duran mas tiempo (o las pruebas usadas son mas sensibles…)
Ø Tratar de dar la primera dosis de vacuna no antes de las 8 semanas de vida
Ø A veces se recomiendan 3 dosis (solución extrema)
Aplicación de la vacuna en lechones
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Ø Cuanto dura la protección? App afecta a veces animales al final de la engorda…
Ø Pedir información a las compañías: los datos existen para
varias vacunas (infección tardía de los animales)
Ø Otra opción: adaptar la edad de vacunación al momento en
que aparecen los signos clínicos
Ø De todos modos…en algunas granjas se debe combinar
tratamientos con antibióticos y vacunas
Aplicación de la vacuna en lechones
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Ø App y PRRS: buenos amigos o no?
Ø No hay ninguna prueba indicando que los dos patógenos pueden potenciarse
Ø Sin embargo, en Europa muchos clínicos han informado problemas mas serios con App cuando hay circulación del virus de PRRS
Ø Es posible que dependa de la cepa viral (y de App…)
Ø Sin embargo…puede la circulación del virus afectar la respuesta vacunal contra App?
Aplicación de la vacuna en lechones
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0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
An
tib
od
y le
vels
Weeks
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
An
tib
od
y le
vels
Weeks
PRRS estable
PRRS inestable
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Ø Control/Tratamiento de casos clínicos Ø Antibióticos
Ø Prevención de casos clínicos (protección activa) Ø Vacunas
Ø Reducción de la colonización de lechones Ø Acciones en lechones: antibióticos
Ø Acciones en madres
Ø Antibióticos
Ø Vacunas
Control y prevención de la pleuroneumonía
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Ø Tratar madres con antibióticos
Ø Ceftiofur/tulatromicina desde 5 días antes del parto hasta el destete
Ø Tratar lechones con antibióticos
Ø Hasta el destete
Ø Ceftiofur/tulatromicina/enrofloxacina
Ø Tratar los dos (decisión extrema)
Ø Madres: reducir/congelar la transmisión
Ø Lechones: reducir la colonización
Ø Reducir la edad del destete
Reducción de la colonización al destete: antibióticos
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Reducción de la transmisión/colonización en madres y lechones, respectivamente
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Reducción de la transmisión/colonización en madres y lechones, respectivamente
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PCR en superficie de tonsilas
PCR en las criptas de tonsilas
Tratados 1/6 5/6
Controles 6/6 6/6
Antibióticos en madres
Ø Animales infectados experimentalmente: 100% animales portadores Ø Tratamiento con tilmicosina (400 ppm) por 30 días Ø PCR en tonsilas: superficie y en criptas
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Ø Anticuerpos maternales naturales contra App retrasarían la colonización de lechones
Ø Marranas: talón de Aquiles en la transmisión de App a los lechones
Ø Puede la vacunación de madres provocar un efecto parecido?
Ø Atención: solamente bacterinas
Ø Mismo sin tener datos: se recomienda siempre vacunar a las marranas (reposición externa)
Ø Bajar la edad del destete
Reducción de la colonización al destete: anticuerpos
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Lechones
Anticuerpos maternales reducen la colonización? Y los vacunales?
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Vacuna App Infección App
4 sem. 2 sem. 1 sem.
Madres Lechones
Parto
PCR en tonsilas
Ac
vacu
nas
Madres Lechones
Parto
PCR en tonsilas 6 sem.
Ac
nat
ura
les
Madres Lechones
1 sem.
Parto PCR en tonsilas
Sin
Ac.
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Vacuna App Infección App
4 sem. 2 sem. 1 sem.
Madres Lechones
Parto
PCR en tonsilas
Ac
vacu
nas
Madres Lechones
Parto
PCR en tonsilas 6 sem.
Ac
nat
ura
les
Madres Lechones
1 sem.
Parto PCR en tonsilas
Sin
Ac.
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Cepillos para las tonsilas
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0
20
40
60
80
100
% ANIMALES POSITIVOS
S/AC S/AC AM /N AM /V1 AM /V2 AM /V3
A los 7 días de estar con la madre
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0
20
40
60
80
100
% ANIMALES POSITIVOS
S/AC S/AC AM /N AM /V1 AM /V2 AM /V3
A los 12 días de estar con la madre
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0
20
40
60
80
100% ANIMALES POSITIVOS
S/AC S/AC AM /N AM /V1 AM /V2 AM /V3
A los 22 días de estar con la madre
Podríamos ayudar con un tratamiento antibiótico a los lechones?
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Ø Granjas con problemas clínicos App serotipo 5
Ø Producción de una autovacuna (bacterina)
Ø Evaluación de una fuerte respuesta de anticuerpos contra App 5 luego de vacunar (dos dosis): prueba ELISA con la cepa vacunal
Ø Aclimatación:
Ø Dentro de los 7 días de la llegada: primera dosis de la vacuna
Ø 3 semanas luego de la primera dosis: segunda dosis de la vacuna
Ø Gestación
Ø Todas las cerdas y nulíparas (« gilts »): 4-5 semana antes del parto
Ø Mismo si se vacunaron las nulíparas en la aclimatación, se vuelven a vacunar
Ø Lechones
Ø Los jueves antes del destete (que se hace promedio a los 21 días), a todos los animales de 16 días o mas se les inyecta Tulatromicina.
Datos de un método que ha funcionado…
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Ø Mortalidad se redujo del 4.5% al 2.7%
Ø Las adherencias de menos de 6 pulgadas: del 5% al 1.5%
Ø Las adherencias de mas de 6 pulgadas del 7.5% al 1.5%
Ø Se suspendió el tratamiento profiláctico (3 semanas antes de la expresión de signos clínicos)
Ø Este es un protocolo que funciono…va funcionar en todas las granjas: por ahí si…por ahí no. Hay que probarlo.
Resultados obtenidos
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Ø Reducen los signos clínicos
Ø Reducen lesiones en el matadero
Ø En general, se considera que ninguno de los dos pueden eliminar totalmente la infección sub-clínica (eliminación de App en las tonsilas)
Vacunas y antibióticos
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Ø Es necesario tomar en cuenta que serotipos son los mas
prevalentes en vuestro país: 2 y 4/7. Ocasionalmente
pueden estar el 5 y 9/11
Ø Casi todas las granjas comerciales están infectadas con
uno o mas serotipos de App
Ø Cepas virulentas pueden estar presentes en granjas sin
signos clínicos
Ø La serología en granjas comerciales deben efectuarse con
pruebas ELISA especificas de serotipo (pruebas
comerciales estandarizadas y reconocidas)
« Take-home messages »
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Ø Existen varios antibióticos muy efectivos para el tratamiento y control
de la enfermedad
Ø A veces es necesario mantener el tratamiento por un periodo de
tiempo prolongado
Ø La vacunación es una alternativa valida: cuidado con el uso de
bacterinas (bacteria sin toxinas) si no se conoce el serotipo presente
en la granja
Ø Es muy posible que la baja significativa de la prevalencia (numero de
animales y/o carga bacteriana en los animales positivos) al destete
disminuya los signos clínicos y lesiones en el matadero
« Take-home messages »
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Ø Ni el tratamiento con antibióticos ni la vacunación parecen
poder eliminar completamente el estado de portador
Ø Cerrar la granja por varios meses, combinado con la
eliminación de animales jóvenes y tratamiento con
antibióticos no eliminaría totalmente el estado de portador
Ø Puede reducir/eliminar signos clínicos (reducción de la
prevalencia)
Ø App puede quedar escondido en las tonsilas por mucho tiempo
« Take-home messages »
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Gracias/Gràcies…