CLINICA VETERINARIADE PEQUEÑOS ANIMALESVolumen 11Número 4Octubre/Diciembre 1991

Artículos originales

].R. GarcíaE. Ynaraja

Clínica Veterinaria San Francisco de AsísCI Alusranre, 628002 Madrid

21Diagnóstico de lasderrnatofitosis en el perroy el gato.

RESUMEN

En este artículo se revisan los diferentesmétodos de diagnóstico utilizables en loscuadros clínicos de dermatofitosis, comentandosu utilidad, ventajas, inconvenientes ycomplementariedad.

PALABRAS CLAVE

Perro; Gato; Dermatofitos; Cultivo füngico.

ABSTRAcr

In this paper it is reviewed the diagnosticprocedures for e/inic presentation ofdermatophytosis, thúr benefits, drawback andcomplementariety,

KEY WORDS

Dog; Cat; Dermatophytos; Pungal culture,

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].R. GarcíaE. Ynaraja

Las derrnatofitosis constituyen una de las enfer-22 medades cutáneas más frecuentemente diagnos-

ticadas sin identificación del agente causal, lo quelleva, en muchas ocasiones, a errores diagnósticosy a fracasos en el tratamiento posterior, si bien escierto que en cuadros leves este error puede pasardesapercibido al producirse una cierta mejoría delcuadro debido al efecto anti-inflarnatorio que so-bre la piel ejercen algunos antifúngicos. No hayque olvidar, además, que las derrnatofitosis pue-den presentarse como lesiones cutáneas muy di-ferentes a la tradicional forma anular, lo que haceimposible un diagnóstico sin identificar el agentecausal.

ORIGEN

Los-dermatofitos constituyen un grupo de hon-gos rniceliares caracterizados por su queratinofiliay su actividad queratinolítica, lo que les permitela asimilación de la queratina como nutriente.Existen cerca de 40 especies conocidas de der-

rnatofitos, muchas de las cuales sólo se han aisla-do del suelo. Taxonómicamente, fueron clasifica-dos dentro de la clase Deuteromycetes (hongos im-perfectos) pero en 16 de ellos ya se ha descrito lafase teleornórfica o sexual, clasificándose por tan-to en la clase Ascomycetes. Esto ha originado ciertaconfusión, dado que diferentes especies de As-comycetes pueden producir el mismo género-formaasexual. Por otro lado, la demostración del estadoperfecto requiere la utilización de técnicas mico-lógicas especiales, no asequibles al veterinario clí-nico. En consecuencia, la clasificación que utili-zaremos se basa en la forma conidial o asexual, loque sitúa los derrnatofitos en tres géneros: Micros-porum, Trichophyton y Epidermophyton.

DISTRIBUCIÓN

Todos los dermatofitos parecen haberse origina-do de formas geofílicas, pero muchos de ellos hanabandonado su existencia saprofítica, convirtién-dose en parásitos ocasionales u obligados. Epide-mio lógicamente los dermatofitos se clasifican, se-gún el habitar en que viven habitualmente, en:- Geófilos: pueden ser de vida estrictamente

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Diagnóstico de la dermarofirosis en el perro y el gato.

saprofita, sobre la queratina presente en el suelo,siendo habitualmente no patógenos o bien pue-den parasitar ocasionalmente al hombre y a los ani-males. Entre estos últimos se encuentra Microspo-rum gypseum.- Zoófilos: tienen su hábitat en los animales

aunque ocasionalmente pueden encontrarse en elsuelo. Incluye hongos como Microsporum canis oTrichophyton mentagrophytes.- Antopófilos: sólo pueden vivir parasitando

al hombre. Es el caso del género Epidermophyton.

FORMAS CLÍNICAS

Microsporum canis origina la típica forma anu-lar (Fig. 1) o bien una foliculitis-forunculosis enel perro y el gato, dermatitis miliar y alopecia irre-gular en el gato y muy raramente pseudomiceto-ma.Microsporum gypseum y Trichophyton menta-

grophytes pueden causar foliculitis-forunculosis,kerion (Fig. 2) Ymuy raramente onicomicosis opseudomicetoma.Una última presentación clínica frecuente en

personas, pero de aparición muy rara en perro ygato son las reacciones en «ides» o derrnatofítides,lesiones no parasitadas, a distancia, consistentes enmúltiples vesículas estériles que son el resultadode reacciones de hipersenbilidad al derrnatofito yque llevan, por tanto, un paralelismo evolutivo conel foco infeccioso primario.

RECOGIDA DE MUESTRAS

Las muestras siempre han de tomarse de la zonaperiférica de la lesión, dado que el proceso clíni-co origina una reacción inflamatoria de la piel quepuede destruir el hongo.Con el fin de reducir al máximo la contamina-

ción cutánea superficial se limpia la zona de don-de se va a tomar la muestra con alcohol de 700.- Pelos: se toman, con unas pinzas, del borde

de la lesión. La porción basal del pelo contiene elmejor material. En portadores asinromáticos (ge-neralmente gatos con M. canis) o en lesiones ex-tensas puede tomarse la muestra pasando un ce-pillo de dientes previamente esterilizado o inmerso

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en clorhexidina al 2% (técnica de MacKenzie).24 - Uñas: las mejores muestras se obtienen me-

diante raspado o pequeñas piezas de corte en laszonas cercanas al lecho ungueal.- Piel: los dermatofitos crecen sobre las célu-

las foliculares o epidérmicas. Por tanto, en lesio-nes con poco pelo, puede obtenerse una buenamuestra mediante un raspado de las zonas perifé-ricas. Debido a la reacción inflamatoria, si estamuestra se observa al microscopio, podrán apre-ciarse, además de las esporas fúngicas, neutrófi-los, macrófagos, linfocitos y células plasmáticas.

PROCEDIMIENTOS DIAGNÓSTICOS

1. Lámpara de Wood

Aproximadamente el 50% de las infeccionesproducidas por M. canis producen una fluorescen-cia verde-amarillenta al ser expuestas a una fuen-te de luz ultravioleta. Se pueden producir falsospositivos debido a costras, queratina o diversos me-dicamentos. En las infecciones verdaderas los pe-los individualmente deben presentar fluorescen-era,Para este procedimiento se pueden utilizar las

lámparas de Wood, con dos tubos situados a cadalado de una lupa o bien linternas de luz ultravio-leta cuyo coste es mucho menor.Para utilizar la lámpara de Wood correctamen-

te, hay que dejarla calentar, una vez encendida,durante S ó 10minutos, tiempo necesario para quese estabilice la longitud de onda de la luz. Des-pués se exponen las lesiones a la luz durante otros:> minutos, dado que en algunas ocasiones, la fluo-rescencia puede tardar este tiempo en aparecer. Lacausa no se conoce, aunque se sospecha que pue-de ser debido a la presencia de bajas concentra-ciones del rnetabolito fúngico que interfiere conla luz ultravioleta.Los casos positivos nos ayudarán a comenzar

cuanto antes el tratamiento y a elegir las muestraspara el cultivo.

2. Examen directo

El examen directo de los pelos, escamas o ras-pado de uñas permite la observación de artrospo-

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Fig. 1. Dermatofitom con la típicaforma anular, en un CachOTTO de Boxer.

Fig. 2. Kerion, foliculitis supurativa consecuencia de una inftcción fún-gica y bacteriana.

Fig. 3 .. Pelo inftctado por M. canis. La superficie está cubierta por ar-troconidias. Aparecen también querasinocitos degenerados.

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ras o hifas sobre el material parasitado. Para favo-recer la identificación de éstas, se pueden utilizarsustancias que disgregan la queratina y aclaran lapreparación. Habitualmente se utiliza el KOH enuna concentración que va desde el 10% hasta el40% según sea la naturalza de la queratina: paraestructuras fácilmente destruibles, como el pelo,es preferible utilizar una baja concentración, mien-tras que en el material con hiperqueratosis, comolas uñas, ésta debe ser alta. El procedimiento con-siste en poner el material a examinar sobre un por-taobjetos, añadir 1 ó 2 gotas de la solución deKOH, poner un cubreobjetos y calentar suavemen-te la preparación durante un minuto.En cualquier caso hay que tener en cuenta que

la mayoría de las invasiones fúngicas en pequeñosanimales son ectótricas; es decir, las hifas puedenverse dentro de la cutícula del pelo, pero crecen haciaafuera, formando artoconidias que aparecen en unpatrón de mosaico en la superficie del pelo (Fig.3).Sólo en un reducido número de casos, en in-

fecciones producidas por determinadas especies deTrichophyton se producen infecciones endótricas,en las cuales se forman conidias dentro de la cutí-cula del pelo sin romperse ésta.Por estas razones no es necesario emplear solu-

ciones queratinolíticas y aclarantes y sólo utilizandoun procedimiento de tinción ligeramente aclarantecomo es el caso del azul algodón lactofenol es su-ficiente para observar las artrosporas.El examen directo presenta importantes obstá-

culos, debido al gran número de artefactos quepueden aparecer en la preparación: melanosomas,queratinocitos degenerados, cristales de colesterol. ..Además, varios hongos, como es el caso del géne-ro Alternana, pueden presentarse en animales sa-nos como contaminantes accidentales, siendo im-posible diferenciarlos de los dermatofitos en el exa-men directo.Por todo lo expuesto, el examen directo es diag-

nóstico en menos de un 30% de los casos, lo queunido a la alta posibilidad de falsos positivos ha-cen poco recomendable este método como diag-nóstico definitivo.

3. Cultivo

Los medios de cultivo habitualmente utilizados

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toman como base el agar glucosado y peptonadode Sabouraud. A partir de él se pueden agrupar 25los medios en dos tipos:- Agar Sabouraud: medio que generalmente

lleva añadido un antibiótico (gentamicina y/o clo-ranfenicol) para minimizar la posibilidad de uncrecimiento bacteriano. Este es el medio estándarde cultivo fúngico, y en él crecerán todo tipo dehongos. Su ventaja radica en que al ser transpa-rente, permite observar el color del reverso de lacolonia, lo que es de gran importancia para la iden-tificación final.- DTM (Derrnatophyte Test Medium): es un

agar Sabouraud al que se le ha añadido un anti-biótico (generalmente cloranfenicol), un fungstá-tico (cicloheximida) y un indicador de pH (rojofenol). Este medio disminuye la posibilidad de cre-cimiento bacteriano y de hongos contaminantessensibles a la cicloheximida. El rojo fenal consti-tuye una ayuda adicional al virar del amarillo alrojo en presencia de un medio alcalino.Los dermatofitos utilizan como substrato me-

tabólico las proteínas y al digerirlas eliminan me-tabolitos alcalinos, lo que produce un cambio decolor del amarillo al rojo. Este cambio debe coin-cidir con el comienzo de crecimiento de la colo-nia y, por lo general, debe ser completamente evi-dente entre los 2 a 8 días del inicio del cultivo.No hay que olvidar que otros hongos cuyo primersubstrato es la glucosa utilizan, al agotarse ésta,las proteínas produciendo un viraje tardío (más de10 días) del color del medio. Por tanto, las colo-nias deben ser examinadas diariamente para apre-ciar el cambio inicial de color.El DTM es un medio que reduce la dificultad

de identificación de los derrnatofitos pero su ob-servación macroscópica no es definitiva como mé-todo diagnóstico: hay varias especies de Candida,Aspergz¡lus, Geozrich urn y diversas bacterias quepueden provocar en los primeros días, un virajeal rojo del medio.Por último, hay que recordar que el DTM, al

ser un medio coloreado, no permite la observacióndel reverso de las colonias.Comercialmente, estos medios pueden adqui-

rirseen placas de Petri, en tubos o en láminas do-bles (Mycoline).En nuestra clínica el procedimiento habitual es

el cultivo primario en «Mico lines'" (Bio Merieux),

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Fig. 4. Preparación de una muestra. Con unas pinzas se presiona lige-ramente el celofán sobre el cultivo.

Microsporum

s. GentamicinaCloranfenicol

Fig. 6. Colonia de M. canis en Agar Sabouraud

cuya ventaja es la presencía de dos láminas, unade Agar Sabouraud con gentamicina y cloranfe-nicol, y otra de DTM. El inconveniente es que, de-bido a la disposición de las láminas, no es posibleobservar el color dei reverso de la colonia. En casode que esto sea necesario para la identificación,realizamos un segundo cultivo de la colonia aisla-da en una placa de Perri con Agar Sabouraud.

IDENTIFICACIÓN

Para el diagnóstico de una dermatofitosis no bas-ta con la identificación macroscópica sino que esnecesaria una observación microscópica del hon-go. Ambos procedimientos son completamenta-rios y, en muchos casos, serán necesarios los dossimultáneamente para llegar a un diagnóstico de-finitivo.

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Fig. 5. Preparación de una muestra. El celofán se sitúa sobre una gotade azul algodón tacsofenol.

Microsporum

Fig. 7. Colonia de M: canis en DTM. El medio ha virado a rojo.

Las colonias de hongos deben examinarse des-pués de que el micelio tenga 1 cm de diámetro,pero antes de que se produzca la confluencia dediferentes colonias individuales. Macroscópicamen-te hay que fijarse en la textura, pigmento y velo-cidad de crecimiento de la colonia. Además, es ne-cesario examinar el micelio microscópicamente, loque se ve facilitado con una tinción de azul algo-dón lactofenol, aunque sirven otras tinciones comoel verde brillante y tinciones de tipo Romanowsky.La toma de muestras para la identificación mi-

croscópica se realiza fácilmente del siguiente modo:- Se pone una gota de azul algodón Iactofe-

nol o de la tinción elegida sobre un portaobjetos.- Se corta un trozo de celofán y, cogiéndolo

con unas pinzas, se presiona ligeramente la parteadhesiva sobre la colonia fúngica. No hay que ejer-cer una excesiva presión para evitar tomar unamuestra de micelio demasiado gruesa (Fig. 4).

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Fig. 8. Macroconidias de M. gypseum.

Fig. 9. Macroconidia de T. mentagrophytes. Forma de cigarropuro.

Alternaria

S. GentamicinaCloranfenicol

Fig. 10. Colonia de Alternaria en Agar Sabouraud.

Diagnóstico de las dermarofitosis en el perro y el gato.

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Fig. 11. Macroconidias de Alternaria. Forma de maza. En algunos ca-sos, similares a Microsporum. Se diferencian por los septos transversa-les.

Fig. lZ. Colonia de Penicillium en Agar Sabouraud.

Fig. 13. Conidióforos de Penicillium. Aspecto arboriforme.

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Fig. 14. Colonia de Aspergillus.

- Se sitúa el trozo de celo sobre la gota de tin-ción; se coloca un cubreobjetos y se observa al mi-croscopio (Fig. 5).- Si se desea conservar las preparaciones du-

rante un tiempo mayor, pueden sellarse con lacade uñas transparente.A la hora de hacer la identificación hay que re-

cordar que los dermatofitos sufren habitualmen-te un proceso de mutación en los cultivos a medi-da que van envejeciendo, conocido como pleomor-fismo, por el cual existe una pérdida parcial o totalde la esporulación con transformación de las co-lonias en una masa de micelio estéril. Todas lascaracterísticas de la cepa se pierden haciendo im-posible su identificación. Por esta razón, es nece-sario observar los cultivos con frecuencia, tanto parasu identificación como para el posterior aislamientode una colonia concreta.

IDENTIFICACIÓN DE DERMATOFITOS

1. Microsporum canis: es un derrnatofito zoo-fílico, aunque frecuentemente produce infeccio-nes en personas. Aproximadamente la mitad delas lesiones presenta fluorescencia verde-amari-llenta.- Aspecto macroscópico: en Agar Sabouraud

las colonias son de blancas a color ante, de textu-ra algodonosa (Figs, 6 y 7), y con un reverso queva del amarillo al naranja o naranja-marrón.- Aspecto microscópico: se observan hifas, con

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abundante presentación de macroconidias; éstastienen forma de huso, con paredes gruesas, equi-nuladas, formando un botón en la parte distal. Lasrnacroconidias contienen entre 6 y 15 células. Lasrnicroconidias son de presentación rara; son peque-ñas, unicelulares y claviformes o elongadas.2. Microsporum gypseum: es un derrnatofito

geofílico, pero que frecuentemente infecta tantoa animales como a personas. Las colonias no pre-sentan fluorescencia o si lo hacen ésta es muy mate.- Aspecto macroscópico: las colonias son de .

crecimiento rápido, con una textura de pulveru-lenta a granular, y color de ante a canela. El rever-so presenta una coloración entre amarillo pálidoy tostado.- Aspecto microscópico: existen gran cantidad

de rnacroconidias de aspecto grande, elipsoide, conparedes finas que contienen entre 3 y 9 células,siendo más abundantes las de 6 células. Estas ma-croconidias carecen del botón terminal que pre-sentan las de M. canis (Fig. 8). Pueden observarsemicroconidias unicelulares, sésiles y claviforrnes.3. Trichophyton mentagrophytes: es un derrna-

tofito generalmente zoofílico, que frecuentemen-te infecta a las personas y que puede vivir saprofí-ricamente en el suelo. No produce fluorescenciacon la lámpara de Wood.- Aspecto macroscópico: las colonias zoofíli-

cas presentan una superficie plana de pulverulen-ta a granular, de color blanco a cremoso y con unreverso marrón, tostado o de color vino.- Aspecto microscópico: la principal caracte-

rística es la producción de microconidias globo-sas, que habitualmente aparecen en forma de ra-cimo. De aparición menos frecuente son las ma-croco nidias con forma de cigarro puro y de paredesfinas y lisas (Fig. 9).

CONTAMINANTES

Vamos a revisar únicamente alguno de los con-taminantes más habituales que pueden ser iden-tificados por la aparición de formas reproductivascaracterísticas.-Alternaria: Macroscópicamente aparecen

como colonias algodonosas de un color que va delgris al negro (Fig. 10). Las conidias aparecen conformas globosas, piriformes u ovaladas. Son mul-

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ticelulares y tienen divisiones tanto longitudina-les como transversarles (Fig. 11). En nuestra clíni-ca es el contaminante más frecuente.- Penici/lium: El color de la colonia comienza

siendo blanco y posteriormente evoluciona haciauna gran variedad de colores, aunque más frecuen-temente hacia el gris (Fig. 12). La textura suele seralgodonosa. Microscópicamente los conidióforospresentan un aspecto arboriforme, con fialoconi-dias unicelulares en sus bordes (Fig. 13).- Aspergi/lus: El crecimiento inicial es de co-

lor blanco para posteriormente evolucionar haciadiversos colores más oscuros, con un aspecto de pul-verulento a algodonoso (Fig. 14). Microscópica-mente, desde el conidióforo, con forma esférica,se producen cadenas de fialoconidias en todas di-reccrories.

Diagnóstico de las derrnarofirosis en el perro y el gato.

CONCLUSIÓN29

El diagnóstico de las derrnatofitosis pasa por elestudio complementario del aspecto macroscópi-co y microscópico de sus colonias. Si bien es cier-to que en algunos casos los tratamientos iniciadossin una identificación previa del hongo causanteofrecen una cierta mejoría por los efectos antiin-flarnatorios de algunos fármacos, no lo es menosque la no identificación conduce, en muchas oca-siones al error diagnóstico, al fracaso terapéuticoy a soslayar posibles problemas epidemiológicostanto en animales como en el hombre.

BIBLIOGRAFÍA

1. Bevier Diane E. Infecrious skin disease in rhe dog anc the car IV. Pro-ceedins AAHH's 57th Annua! Meering. 1990.

2. Camacho].C. Dermatosis fitoparasirarias en: Plan de Perfeccionamien-to en dermatología. Schering Corporarion. 1990.

3. Carrer G.R. Dermatophytes and Dermarophyrosis, en Diagnosric Pro-cedures in vererinary bacreriology and micology fourrh ed. Ed. Tho-mas. 1984.

4. Cowell and Tyler.Curaneous and subcuraneous lesions, En Diagnosriccitology of rhe dog and the car. American Vererinary Publicarions.1989.

5. Moriello Karen A. Managemenc of dermatophyre infecrions in cat-reries and mulriple car households, en Advances in clinical derrnaro-logy. The vererinary clinics of NorrhAmerica. Saunders. 1990.

6. Mueller, Kirk, Scort. Fungal disease, en Small Animal Dermatology.Third edirion. Saunders. 1983.

7. Muller, Kirk, Scotr. Diagnosric merhods, en Small Animal Derma-tology. fourth edirion, Saunders. 1989.

8. Torres Rodríguez ].M. Derrnarofiros o riñas, en micosis que afectanpiel y mucosas. Ed. Doyma. 1987.

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