Programación de la IV Semana Gastronómica CORIA SABOR MICOLÓGICO. Del 20 al 27 de Noviembre de 2011
Diagnóstico micológico
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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELAFACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE BIOANÁLISISHOSPTIAL GENERAL “Dr. JOSÉ IGNACIO BALDÓ“
Diagnóstico Micológico
Profa. Yotsabeth Saúl G.
Caracas - 2016
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Clasificación de las Micosis según la OMS
• Dermatofitosis• Pitiriasis versicolor• Pilonodosis• Candidiasis cutáneas o mucosas.
Superficiales
• Esporotricosis• Cromoblastomicosis• Micetomas
Subcutáneas
• Histoplasmosis• Paracoccidioidomicosis• Coccidioidomicosis
Profundas
• Candidiasis sistémicas• Criptococcosis• Aspergilosis• Mucormicosis• Neumocistosis
Oportunistas
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Micosis Superficiales
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Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 1. Dermatofitosis o Tineas (Tiñas)
Tinea capitis no inflamatoria
Tinea faciei
Tinea corporisM. canis, T. rubrum
T. cruris por:
T. rubrum, E. floccosumTinea pedis interdigital.
T. rubrum, T. mentagrophytes, T. interdigitale
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Subungueal, distal y lateral Blanca superficial Distrófica total
Agentes T. rubrum, E. floccosum, T. mentagrophytes
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 1. Dermatofitosis o Tineas (Tiñas) Onicomicosis
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Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 1. Dermatofitosis o tiñas
• Recolección de la muestra: piel, pelos o uñas. Raspado, depilación, cepillo, onicotomía.
• Examen directo: KOH 10% - 40%. Se observan hifas hialinas, de 3 a 15 µm de diámetro, septadas y ramificadas, con o sin artroconidias. *Diagnóstico de la enfermedad. • Cultivo: Lactritmel, Sabouraud. Micosel/ T. Amb./ 7-15 días. Visualización de las características macroscópicas en placa o en tubo. Visualización de las características microscópicas: cultivo en lámina. Identificación del agente causal.
Identificación de hongos dermatofitos. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 12-1 - 12-11.
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Recolección de la Muestra:
pelos, piel ,uñas.
Hifas hialinas septadas.
Identificación de especie
Cultivos:
(placas/tubos)
Microcultivos
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 1. Dermatofitosis o tiñas
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Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 2. Pitiriasis versicolor
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• Recolección de la muestra: Escamas obtenidas por raspado con bisturí o la técnica de la cinta adhesiva.
• Examen directo: Azul de metileno 0,05% Se observan blastoconidias de Malassezia sp, de 3-8 µm de diámetro, de paredes gruesas y refringentes, aisladas o dispuestas en acúmulos e hifas cortas y gruesas, poco ramificadas de 2,5 a 4 µm de diámetro. *Diagnóstico de la enfermedad.
• Cultivo: Medios de cultivo enriquecidos con lípidos. Ej: Sabouraud + aceite de oliva.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 2. Pitiriasis versicolor
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Toma de muestra:
método de la cinta adhesiva
Examen directo con Azul de metileno 0,05%:
Levaduras e hifas cortas gruesas de Malassezia spp.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 2. Pitiriasis versicolor
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Candidosis en el área del pañal Onicomicosis por Candida
Candidosis de la cavidad oral: Muguet Vaginitis por Cándida
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales 3. Candidiasis cutánea y de mucosas
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• Recolección de la muestra: Escamas, detrito subungueal, fragmentos de uñas, exudado de mucosas, secreciones, flujo vaginal.
• Examen directo: KOH al 10% Se observan blastoconidias ovaladas o redondeadas de diferentes formas y tamaños (dependiendo de la especie).
• Aislamiento e identificación: Agar Sabouraud con o sin antibióticos sin cicloheximida.
Características macroscópicas de crecimiento en agar cromogénico. Bilis-agar: Clamidosporas (+) C. albicans/C.dubliniensis Filamentización en suero: C. albicans (+)/ Candida no-albicans ( -) Pruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
Identificación de levaduras. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 11-1 – 11-20.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales3. Candidiasis cutánea y de mucosas
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Identificación de levaduras. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 11-1 – 11-20.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales3. Candidiasis cutánea y de mucosas
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Micosis Subcutáneas
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Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas1. Cromoblastomicosis
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• Recolección de la Muestra: Escamocostras
• Examen directo: KOH 10% - 40%. Se observan cuerpos escleróticos o células de Medlar en grupos de dos o más, esféricos u ovalados, miden de 4 a 8 µm de diámetro, de color café amarillento y en ocasiones se observan divisiones o filamentos. *Diagnóstico de la enfermedad. • Cultivo: Agar Sabouraud, Lactritmel / Tº Amb / 15-21 días. Visualización de las características macroscópicas en placa o en tubo. Visualización de las características microscópicas: cultivo en lámina. Identificación del agente causal.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas1. Cromoblastomicosis
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Recolección de la Muestra: escamocostras
.
Cuerpos escleróticos.
Identificación de especie
Cultivos:(placas/tubos)
Microcultivos
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas1. Cromoblastomicosis
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Forma cutánea fija Complejo cutáneo linfático
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas2. Esporotricosis 2.1 Esporotricosis cutánea
2.2. Esporotricosis extracutánea
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• Recolección de la muestra: raspado, pus, biopsia, esputo.
• Examen directo KOH 10% No es práctico, en general resulta negativo. Se observan levaduras o cuerpos asteroides.
• Cultivo: Agar sabouraud, Micosel / 25 y 37ºC / 5-7 días. Forma filamentosa y levaduriforme
• Inmunodiagnóstico: Esporotriquina, pruebas serológicas.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas2. Esporotricosis
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Examen directo de la muestra clínica
Cultivo de la muestra clínicaIdentificación del agente causal
Cultivo en tubo, T.Amb Cultivo en lámina
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas2. Esporotricosis
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Triada del micetoma:• Aumento de volumen y deformidad del miembro afectado.• Presencia de fístulas.• Emisión de granos “ Formación in vivo de colonias de los agentes
causales”.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas 3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
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Los granos son microcolonias compactas que constituyen una adaptación parasitaria del hongo o bacteria.
MICETOMA
Granos: Negros, Claros, Rojos
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas 3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
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Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas 3. Micetoma
• Recolección de la muestra: obtención de granos
• Examen directo: KOH 10% Se observan las características de los granos: tamaño, color, forma, presencia de clavas.• Biopsia H&E: verificar presencia de granos.
• Cultivo: Temp. Amb. / días - semanas Medios especiales para hongos (eumicetomas): Agar Sabouraud o lactrimel + cloranfenicol Medios especiales para bacterias (actinomicetomas): AS, BHI, L-J. • Examenes complementarios: radiología
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Micosis Profundas o Sistémicas
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HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis:
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• Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre, biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos, LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo: Extendidos coloreados con Giemsa o Wright. Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metnamina). Calcofluor. Se observan blastoconidias intracelulares, ovaladas de 2-3 µm, generalmente con una sola gema.
• Cultivo: 25 y 37 °C / entre 1 y 5 semanas. Agar sangre, Sabouraud o extracto de levadura
• Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
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Examen directo Médula Ósea:Levaduras intracelulares
Coloración,Giemsa
Cultivo 25ºCMicelio y macroconidias
Coloración, azul de lactofenol
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas1. Histoplasmosis
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Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas2. Paracoccidioidomicosis
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DIAGNÓSTICO
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas2. Paracoccidioidomicosis• Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre,
biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos, LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo: En fresco, entre lamina y laminilla KOH al 10% con o sin tinta, Negro de clorazol, Calcofluor. Coloraciones histológicas (PAS, HE, plata-metenamina). Se observan blastoconidias de diferentes tamaños, entre 3-40 µm de diámetro, redondeadas, de pared gruesa y refringente. Característicamente se observan células multigemantes, también es posible ver cadenas de blastoconidias o células con gemación única o solitarias.
• Cultivo 25 y 37 °C / 15-21 días. Agar Sabouraud adicionado o no de antibióticos y cicloheximida. • Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
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Cultivo:
Temp. Amb.
37 ºC
Examen directo:Levaduras multigemantes
Estudio Histopatológico
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas2. Paracoccidioidomicosis
![Page 31: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/31.jpg)
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas3. Coccidioidomicosis
![Page 32: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/32.jpg)
• Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre, biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos, LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo: En fresco entre lamina y laminilla. KOH al 10-20%, con o sin tinta. Coloraciones histológicas (PAS, HE, Plata-metenamina). Calcofluor Se observan esférulasy endosporas de 10 a 80 µm, con pared doble y refráctil de 2 a 5 µm. • Cultivo 25 °C / 15-21 días. Agar Sabouraud adicionado o no de antibióticos y cicloheximida. • Inmunodiagnóstico: Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
COCCIDIOIDOMICOSIS: DIAGNÓSTICO
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas3. Coccidioidomicosis
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Coccidiodes spp. Examen directo
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas3. Coccidioidomicosis
Figura 39. Artroconidias de Coccidioides immitis de un cultivo en forma micelial (preparación con azul de Lactofenol). Fragmentación del micelio (M) en esporas (artroconidias) rectangulares. Preparación con Azul de Lactofenol, 1200 X. tomado de: Restrepo M., A. Rev. Acad. Colomb. Cienc. 2006; 30 (116):367-386.
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Micosis Oportunistas
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Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas1. Candidiasis invasoras
![Page 36: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/36.jpg)
• Recolección de la muestra: sangre, orina, secreciones vaginales, secreción respiratoria, LCR.
• Examen directo: KOH 10%, Si presenta pocas levaduras hay colonización, grandes cantidades de levaduras y presencia de hifas indica
parasitismo-enfermedad.
• Aislamiento e identificación: Agar Sabouraud con o sin antibióticos sin cicloheximida.
Características macroscópicas de crecimiento en agar cromogénico. Bilis-agar: Clamidosporas (+) C. albicans/C.dubliniensis Filamentización en suero: C. albicans (+)/ Candida no-albicans ( -) Pruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
• Estudio inmunológico: Detección de antígenos en candidosis invasora. Candidina.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas1. Candidiasis invasoras
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Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas2. Criptococosis
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Criptococosis, Diagnóstico
• Recolección de la muestra: LCR, esputo, lavado broncoalveolar, orina, biopsias, sangre, médula ósea, exudado de úlceras, material purulento, secreción prostática.
• Examen directo:Observación entre lámina y laminilla con KOH al 10-20%. . Tinta china o nigrosina. Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata metenamina, mucicarmina de Meyer, Azul de Alcián). Se observan blastoconidias provistas de una pared bien definida y una cápsula refringente, con o sin gemación, redondas u ovaladas de 4-6 µm de diámetro y hasta de 12-20 µm, dependiendo del tamaño de la cápsula
• Cultivo: 32 a 37° C/ 48 horas. Se realiza en Agar Sabouraud u otros medios de cultivo sin cicloheximida.
• Inmunodiagnóstico: Detección de antígeno capsular, técnica aglutinación de partículas de latex (LCR).
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas2. Criptococosis
![Page 39: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/39.jpg)
Criptococosis, DiagnósticoDiagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas2. Criptococosis
Colonia cremosa y mucoide Blastoconidios encapsulados(Tinta china, 100X.)
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Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas3. Aspergilosis
![Page 41: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/41.jpg)
Aspergilosis, diagnóstico:
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas3. Aspergilosis• Recolección de la muestra: escamas, detrito subungueal, esputos, lavado broncoalveolar, material purulento o necrótico, biopsias, hemocultivos (raramente positivos).
• Examen directo:En fresco, entre lámina y laminilla con KOH al 10-20% con tinta, Negro de clorazol E, Calcofluor, Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metenamina) Se observan hifas hialinas, septadas, con un diámetro de 3-6 µm, de pared lisa y gruesa, con ramificaciones dicotómicas en ángulo de 45º. Otitis y aspergiloma pulmonar y nasal, pueden encontrarse cabezas aspergilares. Aspergiloma en las cavidades pulmonares y de senos (paranasal, etmoidal y maxilar), se observan masas o bolas del hongo.
• Cultivo: 25° C/ 3-4 días. Sabouraud con y sin antibióticos, lactrimel o Czapek.
• Inmunodiagnóstico: ELISA para detectar el antígeno galactomanano.
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Histopatología Examen directo KOH 10/. Esputo
Cultivo en placa Cultivo en lámina. A. fumigatus
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas3. Aspergilosis
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Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas4. Zigomicosis
![Page 44: Diagnóstico micológico](https://reader033.fdocumento.com/reader033/viewer/2022061520/58ecc7b31a28ab9a498b46b5/html5/thumbnails/44.jpg)
Mucormicosis, diagnóstico
• Recolección de la muestra: biopsias (se debe obtener material abundante y de buena calidad), tejidos necróticos, secreciones, aspirado de senos nasales y paranasales, esputos, lavado broncoalveolar.
• Examen directo: En fresco, entre lámina y laminilla con KOH al 10-20% con tinta,
Negro de clorazol E, Calcofluor. Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metenamina). Se observan hifas anchas, aceptadas de 7-15 µm de diámetro, que se ramifican en ángulo de 90º.
• Cultivo: 37ºC / 12-48 horas. Agar Sabouraud sin cicloheximida.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas4. Zigomicosis
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Histopatología Cultivo en placa
Cultivo en lámina
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas4. Zigomicosis
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AspergilosisDiagnóstico: cultivo en placa y lámina
• Recolección de la muestra: lavado broncoalveolar, cepillado bronquial, esputos inducidos, biopsias.
• Examen directo: Giemsa, Wright. Diff-Quik. Plata-metenamina, Azul de toluidina O, Calcofluor Se observan trofozoítos (ascosporas) y quistes (ascas) de P. jiroveci.
• Cultivo: Aun no se ha podido recuperar en cultivo.
• Otros métodos diagnósticos: Amplificación del ADN por PCR.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas5. Neumocistosis
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Pneumocystis jirovecii
Quistes de Pneumocystis jiroveci en pulmón (flechas). Coloración histological Plata-metenamina. Disponible en: student.ccbcmd.edu/.../lab9/u1fig32d.html
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