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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA CARRERA DE ODONTOLOGÍA Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre streptococcus mutans contado en saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Cen-tral del Ecuador Informe final presentado como requisito parcial para aprobar el trabajo de titulación, para optar por el Título de Odontóloga AUTOR: Pamela Estefanía Molina Guevara TUTORA: María Fernanda Caicedo Breedy Quito, Octubre 2019

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

CARRERA DE ODONTOLOGÍA

Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre streptococcus mutans contado en

saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Cen-tral

del Ecuador

Informe final presentado como requisito parcial para aprobar el trabajo de titulación,

para optar por el Título de Odontóloga

AUTOR: Pamela Estefanía Molina Guevara

TUTORA: María Fernanda Caicedo Breedy

Quito, Octubre 2019

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DERECHOS DE AUTOR

ii

Yo, PAMELA ESTEFANÍA MOLINA GUEVARA en calidad de autora y titular de

los derechos morales y patrimoniales del trabajo de titulación: EFECTO DEL OIL

PULLING (ACEITE DE COCO) SOBRE Streptococcus mutans CON- TADO EN

SALIVA EN ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE

LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, modalidad presencial, de

conformidad con el Art. 114 del CÓDIGO ORGANICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL

DE LOS CONOCMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, Concedo a favor de la

Universidad Central del Ecuador una licencia gratuita, intransferible y no exclusiva para

el uso no comercial de la obra, con fines estrictamente académicos. Conservo a mi favor

todos los derechos del autor sobre la obra, establecidos en normativa citada.

Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador para que realice la

digitalización y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de

conformidad a lo dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.

La autora declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de

expresión y no infringe el derecho de autor de terceros asumiendo la responsabilidad por

cualquier reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad de

toda responsabilidad.

Firma: ___________________________

Nombres y apellidos: Pamela Estefanía Molina Guevara

CI:1722760350

Dirección electrónica: [email protected]

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APROBACIÓN DE LA TUTORA DEL TRABAJO DE TITULACIÓN

Yo María Fernanda Caicedo Breedy, en mi calidad de tutora del trabajo titulación, moda-

lidad Proyecto de Investigación, por la presente dejo constancia que he leído el proyecto del

trabajo de titulación, presentado por la señorita PAMELA ESTEFANIA MOLINA

GUEVARA cuyo tema es: EFECTO DEL OIL PULLING (ACEITE DE COCO) SO-

BRE Streptococcus mutans CONTADO EN SALIVA EN ESTUDIANTES DE LA

FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADOR.

Previo a la obtención de grado de odontólogo: considero que la mismo reúne los

requeri-mientos y méritos necesarios en el campo metodológico y epistemológico, para

ser so-metido a la evaluación por parte del tribunal examinador que se designe, por lo

que lo APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con el proceso

de titula-ción determinado por la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR.

En la ciudad de Quito a los 29 del mes de julio de 2019

________________________________

Dra. María Fernanda Caicedo Breedy

DOCENTE-TUTOR

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APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL

El tribunal constituido por: Dr. Juan Viteri, Dra. Mariela Balseca.

Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención del

título de odontólogo presentado por la señorita Pamela Estefanía Molina Guevara.

Con el título: Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre Streptococcus mutans contado

en saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del

Ecuador.

Emite el siguiente veredicto: (aprobado/reprobado) ___________________

Fecha:

Para constancia de lo actuado firman:

Nombre Apellido Calificación Firma

Dr. Juan

Viteri

-----------------

--------------------

Dra. Mariela

Balseca

-----------------

--------------------

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DEDICATORIA

El presente trabajo investigativo lo dedico Primero a DIOS por mantenerme de pie en

este largo recorrido hacia mis anhelos más deseados, por regalarme la vida, la salud y

sobre todo su amor.

A mi madre Cecilia Guevara por ser aquel ángel que desde el cielo guía cada uno de

mis pasos, que, aunque me hace mucha falta aquí en la tierra, sé que me levanto una y

mil veces cuando más lo necesite, ahora sé que está orgullosa de verme culminar un

peldaño más camino a mi meta, todos mis triunfos serán dedicados enteramente a ti por

enseñarme a ser una mujer luchadora y aguerrida.

Siempre estás en mi mente y corazón.

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AGRADECIMIENTOS

Quiero expresar mi gratitud a mi Padre Jorge Molina, quien con su amor, paciencia y

esfuerzo me ha permitido llegar a cumplir un sueño más, gracias por inculcar en mí el

ejemplo de esfuerzo y honestidad.

A mis hermanos Juan Carlos y George por su cariño y apoyo incondicional, durante

todo este proceso, por estar conmigo en todo momento. A toda mi familia y amigas por-

que con sus oraciones, consejos y palabras de aliento hicieron de mí una mejor

persona y de una u otra forma me acompañaron durante este proceso.

A mis amores Nicolás Real y Christian Ramos quienes me enseñaron que el apoyo y

amor incondicional pueden ser expresados desde el más pequeño de los abrazos hasta

la compañía y lealtad más pura y desinteresada.

De igual manera mis agradecimientos a la Universidad Central del Ecuador, a toda la

Facultad de Odontología, a mis profesores en especial a la Dra. María Fernanda Cai-

cedo Breedy quien, con la enseñanza de sus valiosos conocimientos, su cariño y pacien-

cia me permitieron culminar este proceso para la obtención de mi título profesional y

más anhelado sueño.

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TABLA DE CONTENIDO

CONTENIDO…………………………………………………………………………..vii

INDICE DE FIGURAS………………………………………………………………….x

INDICE DE TABLAS………………………………………………………………….xi

INDICE DE GRAFICOS………………………………………………………………xii

INDICE DE ANEXOS ………………………………………………………………..xiii

RESUMEN ……………………………………………………………………………xiv

ABSTRACT…………………………………………………………………………....xv

CAPÍTULO I .................................................................................................................... 1

REVISIÓN DE LA LITERATURA ................................................................................. 1

1.1 Saliva....................................................................................................................... 1

1.2 Microflora oral ........................................................................................................ 1

1.2.1. Streptococcus mutans ...................................................................................... 2

1.2.1.1 Patogenicidad ................................................................................................ 2

1.2.1.2 Streptococcus mutans y caries dental ............................................................ 3

1.3 Agentes antimicrobianos ......................................................................................... 3

1.3.1 Clorhexidina ..................................................................................................... 4

1.4 Oil pulling ............................................................................................................... 4

1.4.1 Historia ............................................................................................................. 4

1.4.2 Beneficios del oil pulling con aceites vegetales ............................................... 5

1.5 ACEITE DE COCO ................................................................................................ 5

1.5.1 Composición química del aceite de coco ......................................................... 6

1.5.2 Mecanismo de acción ....................................................................................... 7

1.5.3 Beneficios para la salud oral ............................................................................ 8

a. Caries dental ....................................................................................................... 8

b. Gingivitis inducida por placa ............................................................................. 9

c. Halitosis.............................................................................................................. 9

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1.5.4 Procedimiento del oil pulling (aceite de coco) ............................................... 10

CAPÍTULO II ................................................................................................................. 11

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ....................................................................... 11

CAPÍTULO III ............................................................................................................... 12

OBJETIVOS ................................................................................................................... 12

Objetivo General ......................................................................................................... 12

Objetivos Específicos.................................................................................................. 12

CAPÍTULO IV ............................................................................................................... 13

HIPÓTESIS .................................................................................................................... 13

HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN H1. ................................................................... 13

HIPÓTESIS NULA H0............................................................................................... 13

CAPÍTULO V................................................................................................................. 14

METODOLOGÍA ........................................................................................................... 14

5.1 TIPO Y DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN ..................................................... 14

5.2 POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA ....................................................... 14

5.3 CRITERIOS DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓN. ................................................ 15

5.3.1 Criterios de Inclusión ..................................................................................... 15

5.3.2 Criterios de Exclusión .................................................................................... 15

5.4 CONCEPTUALIZACION VARIABLES ............................................................ 15

5.4.1 VARIABLE DEPENDIENTE ....................................................................... 15

5.4.2 VARIABLE INDEPENDIENTE ................................................................... 15

5.4.3 VARIABLE INTERVINIENTE .................................................................... 15

5.5 Definición operacional de variables...................................................................... 16

5.6. Proceso experimental ........................................................................................... 17

MANEJO Y MÉTODOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS ................................ 17

EXPERIMENTACIÓN ........................................................................................... 17

a. Materiales y reactivos .......................................................................................... 17

b. Procedimiento experimental ................................................................................ 18

viii

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CAPÍTULO VI ............................................................................................................... 34

RESULTADOS .............................................................................................................. 34

6.1 TABLA DE RESULTADOS ................................................................................ 34

6.2. ANÁLISIS ESTADÍSTICO................................................................................. 35

a. Análisis de normalidad de resultados .................................................................. 35

b. Comparación de resultados entre grupos antes y después del tratamiento ......... 36

c. Comparación de resultados antes y después del tratamiento............................... 37

CAPÍTULO VII .............................................................................................................. 40

DISCUSIÓN ................................................................................................................... 40

CAPITULO VIII............................................................................................................. 43

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ............................................................. 43

8.1 CONCLUSIONES ................................................................................................ 43

8.2 RECOMENDACIONES ....................................................................................... 44

BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................ 45

ANEXOS ........................................................................................................................ 48

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INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Composición química del aceite de coco ......................................................... 7

Figura 2. Cuestionario ................................................................................................... 18

Figura 3. Consentimiento informado ............................................................................. 19

Figura 4. Explicación grupal ......................................................................................... 19

Figura 5. Sustancias de estudio ..................................................................................... 20

Figura 6. Rotulación de tubos eppendorf....................................................................... 20

Figura 7. Colocación de 1 ml solución tamponada de fosfato....................................... 21

Figura 8. Toma de muestra de saliva inicial .................................................................. 21

Figura 9. Recolección de muestras ................................................................................ 22

Figura 10. Entrega de sustancias ................................................................................... 22

Figura 11. Rotulación de cajas Petri .............................................................................. 23

Figura 12. Toma de muestra en laboratorio ................................................................... 23

Figura 13. Inoculación de la muestra inicial.................................................................. 24

Figura 14. Colocación Agar mitis Salivarius ................................................................ 24

Figura 15. Técnica de vertido ........................................................................................ 25

Figura 16. Solidificación del medio de cultivo.............................................................. 25

Figura 17. Colocación en la jarra de CO2……………………………………………..28

Figura 18. Incubación .................................................................................................... 26

Figura 19. Contador de UFC ......................................................................................... 26

Figura 20. UFC .............................................................................................................. 27

Figura 21. Rotulación de tubos eppendorf..................................................................... 28

Figura 22. Colocación de la solución tamponada de fosfato ......................................... 28

Figura 23. Explicación de segunda fase……………………………………………….31

Figura 24. Toma de la segunda muestra ........................................................................ 29

Figura 25. Trasporte de muestras .................................................................................. 29

Figura 26. Rotulación de cajas Petri finales .................................................................. 30

Figura 27. Inoculación de las muestras finales de saliva ............................................... 30

Figura 28. Colocación del agar mitis salivarius ............................................................ 31

Figura 29. Jarra de CO2………………………………………………………………..33

Figura 30. Incubación de las cajas finales ..................................................................... 31

Figura 31. Conteo UFC finales ...................................................................................... 32

Figura 32. Antes y después de la aplicación de sustancias ............................................ 32

x

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INDICE DE TABLAS

Tabla 1. Definición operacional de variables ................................................................. 16

Tabla 2. Resultados......................................................................................................... 34

Tabla 3. Pruebas de normalidad en los efectos medios de inhibición, 2019. ................. 36

Tabla 4. Comparación de grupos A, B y C antes y después del tratamiento .................. 36

Tabla 5. Comparación antes y después del tratamiento (T- Student) ............................. 37

Tabla 6. Comparación por pares de los 3 grupos (A, B, C) con respecto a los efectos

medios antes y después según el test de Tukey. .............................................................. 38

xi

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INDICE DE GRÁFICOS

Gráfico 1: Promedio de UFC de los grupos A, B, C antes y después del tratamiento ... 37

Gráfico 2: Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre sobre la carga bacteriana de

Streptococcus mutans, respecto a Clorhexidina al 0.12% cuantificado en saliva. ......... 39

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INDICE DE ANEXOS

Anexo 1. Solicitud y autorización para realizar el trabajo de investigación. ................. 48

Anexo 2. Autorización para eliminación de Desechos Infecciosos ................................ 50

Anexo 3. Solicitud y aceptación para el Decano de la Facultad de Odontología de la

Universidad Central del Ecuador .................................................................................... 51

Anexo 4. Solicitud para el uso del laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico de la

Facultad de Ciencias Químicas de la UCE ..................................................................... 52

Anexo 5. Consentimiento informado, participantes ....................................................... 53

Anexo 6. Cuestionario .................................................................................................... 56

Anexo 7. Protocolo a seguir para los participantes integrantes de los 3 grupos de

estudio. ............................................................................................................................ 57

Anexo 8. Informe de la cuantificación del principio activo del aceite de coco. ............. 58

Anexo 9. Protocolo de manejo de desechos de la Facultad de Ciencias Químicas de la

UCE ................................................................................................................................ 60

Anexo 10. Certificado de traducción del resumen ......................................................... 61

Anexo 11. Certificado del Urkund ................................................................................. 62

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TEMA: Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre Streptococcus mutans contado en

saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecua-

dor

Autor: Pamela Estefanía Molina Guevara

Tutor: María Fernanda Caicedo Breedy

RESUMEN

Para Richiani1 el aceite de coco inhibe a la bacteria responsable de las caries y puede

ser utilizada como un ingrediente en los productos de cuidado dental, según revela un estudio en Irlanda. Los científicos del Instituto Athlone de Tecnología encontraron que este aceite, que había sido tratado con enzimas, evitó el crecimiento de Streptococcus, que es una de las principales causantes de caries, patología que afecta al 60% a 90% de los niños y la mayoría de los adultos en gran parte del mundo.

La presente investigación se planteó con la finalidad de comprobar los beneficios de la

utilización del aceite de coco para la reducción del Streptococcus mutans, tomando como

población a los estudiantes de segundo semestre de la Facultad de Odontología de la Uni-

versidad Central del Ecuador. Por lo tanto, el objetivo del estudio es determinar el efecto

inhibitorio del oil pulling (aceite de coco) sobre este microorganismo contado en saliva,

haciendo una comparación con el efecto de la clorhexidina al 0,12% como control posi-tivo

y agua destilada como control negativo. El aceite de coco se adquirió en dos presen-

taciones comerciales en las cuáles se realizó un análisis de cuantificación del principio

activo para escoger el producto a utilizar en la experimentación. La prueba clínica se realizó

en 60 estudiantes divididos aleatoriamente en tres grupos de 20 cada uno; grupo A: aceite

de coco, grupo B: enjuague con clorhexidina al 0,12% y grupo C: agua destilada.

Se procedió a la recolección de muestras de saliva en tubos estériles los cuales fueron

trasferidos al laboratorio microbiológico para su inoculación en medio agar específico

para Streptococcus mutans incubado a 37ºC durante 48 horas y las unidades formadoras

de colonias se cuantificaron. Luego los participantes utilizaron el enjuague respectivo

durante un periodo de dos semanas, en el día 14 nuevamente se recolectó una muestra

de saliva para realizar el mismo procedimiento microbiológico descrito antes. Los

resultados con su respectivo análisis estadístico evidenciaron la efectividad del oil

pulling con aceite de coco, debido a que la cantidad de unidades formadoras de colonias

disminuyo signifi-cativamente posterior al tratamiento. Al comparar con el efecto de la

clorhexidina se ob-serva que el efecto de disminución de carga bacteriana de

Streptococcus mutans es mayor que el aceite de coco.

PALABRAS CLAVE: ACEITE DE COCO, REDUCCIÓN CARGA BACTERIANA,

STREPTOCOCCUS MUTANS.

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TOPIC: Effect of oil pulling (coconut oil) on Streptococcus mutans counted in saliva in

students of the Dentistry Faculty of the Central University of Ecuador

Author: Pamela Estefanía Molina Guevara

Tutor: María Fernanda Caicedo Breedy

ABSTRACT

For Richiani, coconut oil inhibits the bacteria responsible for tooth decay and can be used as

an ingredient in dental care products, according to a study in Ireland. Scientists at the

Athlone Institute of Technology found that this oil, which had been treated with enzymes,

prevented the growth of Streptococcus, which is one of the main causes of tooth decay, a

pathology that affects 60% to 90% of children and most of adults in much of the world. The

present investigation was carried with the purpose of verifying the benefits of the use of

coconut oil for the reduction of Streptococcus mutans, taking as a population the sec-ond

semester students of the Dentistry Faculty of the Central University of Ecuador. Therefore,

the objective of the study is to determine the inhibitory effect of oil pulling (coconut oil) on

this microorganism counted in saliva, making a comparison with the effect of 0.12%

chlorhexidine as a positive control and distilled water as negative control. Coconut oil was

purchased in two commercial presentations in which a quantification analysis of the active

substance was carried out to choose the product to be used in the experimentation. The

clinical trial was conducted in 60 students randomly divided into three groups of 20 each;

group A: coconut oil, group B: mouthwash with 0.12% chlor-hexidine and group C:

distilled water. Saliva samples were collected in sterile tubes which were transferred to the

microbiological laboratory for inoculation in a specific agar me-dium for Streptococcus

mutans incubated at 37°C for 48 hours and the colony-forming units were quantified. The

participants then used the respective mouthwash for a period of two weeks, on day 14 again

a saliva sample was collected to perform the same micro-biological procedure described

above. The results with their respective statistical analysis showed the effectiveness of oil

pulling with coconut oil, because the number of colony-forming units decreased

significantly after treatment. When compared with the effect of chlorhexidine, it is observed

that the effect of decreased bacterial load of Streptococcus mutans is greater than coconut

oil.

KEY WORDS: COCONUT OIL / BACTERIAL LOAD REDUCTION / STREPTO-COCCUS MUTANS.

xv

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CAPÍTULO I

REVISIÓN DE LA LITERATURA

1.1 Saliva

Según Sánchez2 es un líquido segregado por las glándulas salivales, de viscosidad

varia-ble, según el estado de hidratación y la fase digestiva; de composición parecida a

la del plasma, contiene agua, iones, mucina, proteínas plasmáticas, leucocitos y detritos

celula-res. Sirve para el procesamiento de los alimentos, facilitando su masticación y la

forma-ción del bolo alimenticio gracias a su contenido en α-amilasa. Ejerce además un

efecto de arrastre y limpieza de los dientes y la mucosa bucal.

Posee una función protectora de las mucosas de la cavidad oral y vías respiratorias

supe-riores, mediante la limpieza mecánica y la acción inmunológica (péptidos

antibacterianos, proteínas, lisozima, inmunoglobulinas sobre todo inmunoglobulina A.

Actúa protegiendo a los dientes frente al crecimiento bacteriano.2

1.2 Microflora oral

Algunos autores3,4

manifiestan que la cavidad oral está conformada de muchas

superficies y es un ecosistema donde cohabitan principalmente comensales

(aproximadamente 1010

bacterias, siendo el 60% cultivables) pertenecientes entre 500 y

700 especies, que colo-nizan las mucosas y dientes donde forman la placa bacteriana o

biofilm, algunas de ellas han sido implicadas en enfermedades bucales como la caries y

la periodontitis como in-fecciones más comunes en la cavidad oral.

Según Quintana et al3 esta gran diversidad microbiana hace que sea importante

compren-der cómo están conformadas las comunidades de microrganismos a nivel de la

cavidad oral, cómo interactúan y mantienen su homeostasis en el ser humano. Esta

variedad de hábitats en esta mucosa depende de las concentraciones de oxígeno, la

disponibilidad de nutrientes, la temperatura, la exposición a factores inmunológicos y

las características anatómicas.

Algunos autores3,5

manifiestan que las especies del género Streptococcus se encuentran en

un alto porcentaje en tejidos blandos, saliva y en la lengua. Las especies del género

Actinomyces se encuentran a nivel supragingival e infragingival y en fisuras de la lengua.

Otras bacterias como Veillonella parvula y Neisseria pueden encontrarse en todos los

hábitats orales. También puede existir colonización intracelular en células epiteliales de

1

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la cavidad bucal por complejos bacterianos constituidos por Aggregatibacter actinomy-

cetemcomitans, Porphyromonas gingivalis y Tannerella forsythia.

1.2.1. Streptococcus mutans

Según Moreno et al6, el Streptococcus mutans es el agente patógeno encontrado con

más frecuencia de la placa bucal, por lo que es considerado el principal elemento

etiológico de la caries dental, aunque son variados y diversos los factores relacionado

con la viru-lencia de este, que le permiten aumentar la población y por tanto,

acumularse en el interior de la placa dental, ocasionando la producción y tolerancia a los

ácidos que causan la ca-ries.

Explica Negroni7, que se denomina Streptococcus al grupo de bacterias anaeróbicas fa-

cultativas que poseen forma ovoidea o de coco esférica, agrupados en cadenas de largo

variable, debido a que este tipo de microorganismos se encuentran y permanecen

adheri-dos por una parte de la pared celular, no se mueven, generalmente reaccionan de

manera positiva a coloración de Gram, por lo que se clasifican como Gram positivos y

no forman esporas.

1.2.1.1 Patogenicidad

Explica Rocha et al8, que el Streptococcus mutans es una bacteria oral que depende de

la formación de la biopelícula para sobrevivir y persistir en el ecosistema natural, la

placa dental. En condiciones apropiadas puede producir ácidos por fermentación de

diversos hidratos de carbono que son ingeridos por la dieta habitual del individuo y así

iniciar la desmineralización del esmalte dental. Las condiciones del medio ambiente

encontradas por Streptococcus mutans en la biopelícula dental son diversas, incluyendo

variaciones en el pH, de aproximadamente de 6,8 a 3,4 durante el proceso de ingestión

de hidratos de carbono por parte del hospedero, ejerciendo el pH una presión ecológica

significativa sobre el microorganismo, por lo que la capacidad de tolerar bajos niveles

ácidos de pH es vital para la supervivencia y patogenicidad.

Señala Garcés et al4 que el Streptococcus mutans produce ácido láctico, ácido acético, ácido

propiónico y ácido fórmico mediante la metabolización de carbohidratos fermenta-bles

como la glucosa, sacarosa y fructosa, circulando estos ácidos a través de la placa

2

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dental hacia el esmalte poroso, disociándose y liberando hidrogeniones, que disuelven

en un corto lapso de tiempo el mineral del esmalte, produciendo fosfato y calcio, que a

la vez, son difundidos fuera del esmalte, el cual es un proceso conocido como

desminerali-zación.

1.2.1.2 Streptococcus mutans y caries dental

Olmos et al9 manifiestan que el nivel de desarrollo científico aplicado al área de salud

bucal permite determinar que la caries dental es la enfermedad más recurrente y preva-

lente en el mundo, afectando funciones básicas vitales, tales como la nutrición, la

alimen-tación y causando daños en el aspecto psicosocial de los individuos, afirmando

en conse-cuencia, que la salud integral, así como la calidad de vida se ven

comprometidas con la aparición y desarrollo de esta patología dental.

De acuerdo a Hoyos et al10

, se define la caries dental como una patología de origen

mul-tifactorial, donde se realiza la interacción entre elementos tales como la saliva y la

micro-flora de la cavidad bucal como factores del huésped y el aporte de la dieta como

factor externo, constituyendo un proceso infeccioso en el cual se acumulan cepas

específicas de microrganismos sobre la superficie del esmalte dental, donde se producen

compuestos proteolíticos y ácidos que favorecen la desmineralización de la superficie y

corroen la matriz orgánica, de tal manera que permiten la penetración, evolucionando a

través de la dentina hasta llegar a la pulpa, con el riesgo de si no se detienen este

proceso a tiempo la pieza dental resulta totalmente dañada.

Así mismo explica Miguelañez et al11

, que el proceso destructivo que sigue la caries

den-tal puede ser interrumpido mediante la eliminación mecánica del tejido dentario

afectado por la infección y sustituido por material sintético idóneo que recupera y

restaura la fun-ción y forma natural de la pieza dental

1.3 Agentes antimicrobianos

Platt et al12

manifiestan que, considerando la naturaleza microbiana de la placa, los agen-tes

químicos se caracterizan por ser efectivos en el control de la placa bacteriana, debido a su

capacidad de reducir o retardar su formación. Algunos interfieren en la absorción de la

película adquirida y la adherencia de las bacterias a la superficie dentaria. Puesto que

3

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la formación de la placa es un proceso dinámico y ordenado, sobre la superficie dentaria

limpia se establecen primero los formadores de la placa primaria, miembros de la

especie estreptocócica. Su presencia parece ser esencial para la adhesión de otras

especies bacte-rianas. Los productos químicos dirigidos contra los microorganismos

podrían ayudar en la eficacia de la limpieza mecánica y a prevenir y tratar las

enfermedades relacionadas con la cavidad oral.

1.3.1 Clorhexidina

La clorhexidina ha sido desde su descubrimiento en los años cincuenta y especialmente

desde su comercialización en los años ochenta, el principal antiséptico para el control

químico del biofilm oral. Así, se considera como el agente químico gold standard por su

acción antiplaca y antigingivitis superior a la del resto de antisépticos que existen. Por

su naturaleza catiónica y altamente reactiva, tiene un efecto bactericida en altas

concentra-ciones y bacteriostático en bajas, y además posee una alta sustantividad, lo

que le permite seguir actuando sobre el medio en el que se aplica varias horas después

de su administra-ción 13

Sin embargo, Hernández et al14

manifiestan que uno de los principales efectos secunda-

rios, que, aunque reversibles, son manchas en los dientes, dorso de la lengua y la

pérdida de la sensibilidad. La clorhexidina está disponible en colutorios, en

presentaciones al 0.2, 0.1 y 0.12%, en gel al 0.1%.

1.4 Oil pulling

Afirma Navarro 15

que la terapia del aceite, conocida en inglés como oil pulling (traducida

literalmente como extracción de aceite), o en nuestro medio llamado “enjuague con aceite”

se ha usado en la medicina ayurveda de la antigua India para mejorar y mantener la salud

bucodental y además de tener efectos beneficiosos para la salud en general.

1.4.1 Historia

Pavithran et al16

refieren que el concepto de extracción de petróleo u oil pulling se ha

descrito en el antiguo texto ayurvédico "CharakaSamhita" como " Kavalagraha " o

"Ka-valaGandoosha e implica el uso de aceites puros como agentes antibacterianos

para inhi-bir bacterias dañinas, hongos y otros organismos de la boca, los dientes, las

encías y la garganta.

4

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Según Peedikayi el at17

un individuo toma una cierta cantidad de aceite y lo retiene en

la boca durante algún tiempo y lo agita por toda la cavidad bucal, y cuando el aceite se

vuelve blanco lechoso, se escupe. El Dr. F. Karach, un científico ruso, popularizó este

procedimiento y lo describió como extracción o enjuague de aceites en la literatura mo-

derna.

1.4.2 Beneficios del oil pulling con aceites vegetales

La terapia de enjuague con aceites vegetales se puede hacer usando aceites vegetales co-

mestibles como aceite de sésamo, aceite de girasol, aceite de coco, aceite de oliva y

aceite de almendra, etc. 16

Añade Vagish et al18

que se cree que el enjuague con aceites vegetales ayuda a la excre-

ción de metales pesados tóxicos por medio de la saliva. Este enjuague con aceite activa

las enzimas salivales que absorben toxinas como las toxinas químicas y toxinas

bacteria-nas y toxinas presentes en sangre.

Los aceites son beneficiosos, especialmente si se prensan en frío, aunque el aceite refi-nado

también actúa para "extraer" las bacterias, virus y protozoos de la cavidad oral. De-bido que

las grasas trans están ausentes en los aceites prensados en frío en comparación con los

aceites comerciales que se extraen de disolventes fuertes a base de petróleo es por esto que

el enjuague con aceites se realiza idealmente con aceites prensados en frío.18

Tradicionalmente, el aceite de sésamo está documentado como el aceite preferido para

practicar el enjuague con aceites vegetales. También se documenta que el enjuague uti-

lizando aceite de oliva, leche, extractos de grosella y mangos y aceite de girasol de

sésamo se ha encontrado para reducir la gingivitis inducida por placa. La extracción de

aceite genera antioxidantes que dañan la pared celular de los microorganismos y los

matan. Es-tos aceites atraerán la capa lipídica de las membranas celulares bacterianas, y

harán que se pegue o atraiga, y se adhiera hacia el aceite. 18

1.5 ACEITE DE COCO

El Coco (Cocos nucifera L.) es uno de los principales cultivos comerciales en el sur de

la India, que brinda muchos productos útiles a los habitantes. El aceite de coco puro se

5

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produce al triturar la copra, el grano seco, que contiene alrededor del 60% -65% del aceite.

16

Cultivado en regiones tropicales, ha estado entre las principales fuentes de grasa en la dieta

durante décadas. El aceite de coco tiene muchos efectos saludables sobre el cabello, la piel,

los niveles de colesterol y la pérdida de peso, refuerza el sistema inmunológico y ha sido

utilizado en el alivio del estrés, con beneficios adicionales de salud y nutrición actúa como

un modulador inmune antiinflamatorio, crema hidratante y curador de heri-das, también

muestra una potente actividad antimicrobiana y antifúngica.19

Se diferencia de otros aceites

comestibles debido a su alto contenido de ácidos grasos de cadena media.

17

El ácido láurico principal ácido graso que tiene el aceite de coco tiene propiedades anti-

microbianas, antiinflamatorias, previene la caries dental y es beneficioso para la salud

bucal. Además de esto también tiene un sabor agradable. El aceite de coco también

tiene propiedades antisépticas y se puede usar de manera segura como emoliente y

humec-tante. El aceite de coco no tiene efectos adversos producidos por la clorhexidina,

como la tinción marrón y la sensación de sabor alterado.18

1.5.1 Composición química del aceite de coco

Manifiesta Naseem et al20

que el aceite de coco está compuesto de 92% de ácidos

satura-dos, con ácido láurico que constituye el 50% de estos ácidos. Se ha identificado

que la monolaurina y los monoglicéridos del ácido láurico tienen actividad

antimicrobiana con-tra una variedad de microorganismos. Estos incluyen, Helicobacter

pylori, Staphylococ-cus aureus, streptococcus mutans, Escherichia vulneris,

Enterobcater y Candida, inclu-yendo Candida glabrata, Candida albicans, Candida

stellatoidea, Candida parapsilosis, Candida tropicalis y Candida krusei y varios virus.

6

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FIGURA 1. COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL ACEITE DE COCO

Fuente: Nassem et al20

. Oil pulling and importance of traditional medicine in oral

health maintenance, Int J Health Sci (Qassim). 2017

1.5.2 Mecanismo de acción

Si bien existen numerosas teorías, el mecanismo exacto de la acción no está claro. Una

teoría especula un mecanismo que involucra la hidrólisis alcalina de la grasa, lo que re-sulta

en un proceso de saponificación o "fabricación de jabón". El ácido láurico que con-tiene el

aceite de coco puede reaccionar con los álcalis presentes en la saliva, como el

7

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hidróxido de sodio y los bicarbonatos, para formar una sustancia similar al jabón de lau-

reato de sodio, que reduce la adhesión y acumulación de la placa y posee una acción

limpiadora.18, 19

Otra teoría sugiere que la naturaleza viscosa del aceite inhibe la acumulación de placa y

la adhesión de bacterias. Durante en enjuague con aceite, el aceite se emulsiona y la su-

perficie del aceite aumenta. El proceso de emulsificación del aceite comienza a los 5

mi-nutos de extracción del aceite. Este aceite cubrirá los dientes y la encía e inhibirá la

co-agregación bacteriana y la formación de placa. De este modo, se eliminan de la

cavidad bucal las bacterias responsables de la caries dental, la gingivitis, la periodontitis

y el mal aliento.18, 20

Además, la tercera teoría plantea la hipótesis de que los antioxidantes presentes en el aceite causan la desintoxicación al evitar la peroxidación lipídica, lo que produce un efecto similar al de los antibióticos. Ayudando así en la destrucción de microorganismos y potenciando la acción de la vitamina E en la cavidad bucal.

1.5.3 Beneficios para la salud oral

Kaushik et al21

, la boca es considerada como el espejo de la salud general del cuerpo

humano. La cavidad oral alberga una gran cantidad de microorganismos, algunos de los

cuales contribuyen al desarrollo o progresión de enfermedades sistémicas. La resistencia

a los antibióticos, los efectos adversos y la toxicidad para los medicamentos modernos

han llevado a los científicos a investigar sobre productos naturales. Se afirma que el en-

juague con aceites vegetales mejora la salud bucal. Otros autores18, 19

indican que el

en-juague con aceites vegetales es útil para resolver los síntomas de boca, garganta seca

y labios agrietados, previene la aparición de caries dentales, gingivitis, candidiasis oral,

pe-riodontitis y logra una higiene oral vigorosa.

A continuación, se describe el beneficio del aceite de coco en algunos problemas

especí-ficos de la cavidad oral:

a. Caries dental

La eliminación química y mecánica de la biopelícula oral es importante para mantener el

equilibrio ecológico de la cavidad bucal y prevenir el proceso de caries. Se estima que

8

18, 19, 20

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hay 700 especies diferentes de bacterias en el microbioma oral, que habitan en la biope-

lícula oral. De estos, la bacitracina que produce Streptococcus mutans y el ácido láctico que

producen lactobacilos son los patógenos más comunes que causan la caries dental. El

proceso de desmineralización comienza después de que el pH de la placa cae por de-bajo

del valor crítico de 5.5 para la hidroxiapatita, 4.5 para la fluorapatita y 6.7 para el cemento,

lo que provoca la desintegración de los iones de fosfato de calcio en los cristales de

hidroxiapatita. La forma desmineralizada de esmalte se conoce como caries dental.20

Se ha demostrado que el oil pulling de aceite tiene actividad antibacteriana contra C. al-

bicans y S. mutans usando aceite de coco.20

b. Gingivitis inducida por placa

La gingivitis inducida por placa es uno de los tipos más comunes de enfermedad

gingival causada por la interacción de los microorganismos en el biofilm de la placa con

las células inflamatorias del huésped. Un estudio reciente mostró una disminución

significativa en las puntuaciones del índice gingival modificado y las puntuaciones de

placa después de la terapia de enjuague con aceite vegetal en comparación con el grupo

de clorhexidina. la extracción de aceite reduce la placa que causa gingivitis.20

Esto

puede deberse a que, durante la extracción del aceite, el aceite actúa como un emoliente.

Esencialmente, se espuma un poco como jabón, limpiando los dientes y las encías de la

acumulación no deseada.22

c. Halitosis

Solano et al23

refiere que la halitosis o el mal aliento es un problema común que a

menudo puede causar vergüenza social, esto se produce a partir de compuestos de

sulfuro voláti-les, especialmente sulfuro de dimetilo, sulfuro de hidrógeno y metil

mercaptano, que se originan a partir de la degradación proteolítica de los péptidos

presentes en residuos de alimentos, saliva, placa y células epiteliales descamadas.

También se sabe que las bacte-rias proteolíticas gramnegativas responsables de la

periodontitis y la gingivitis producen compuestos de sulfuro. Se encontró que la terapia

de enjuague con aceites vegetales es tan efectiva contra la halitosis y patógenos

asociados, como los enjuagues de clorhexidina que se consideran un Gold Standar.20

9

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1.5.4 Procedimiento del oil pulling (aceite de coco)

El oil pulling o enjuague con aceite de coco se realiza preferentemente por la mañana

con el estómago vacío. A continuación, se explica paso a paso21

:

1. Se toma una cucharada (aproximadamente 10 ml), dosis recomendada de aceite de

coco y se aplica entre los dientes durante 15-20 minutos aproximadamente.

2. Al final de esta actividad, si el procedimiento se realiza correctamente, el aceite se

volverá viscoso, blanco lechoso y más delgado.

3. Luego se escupe y se lava la boca a fondo con agua salina tibia limpia o agua del grifo y

los dientes se limpian con los dedos o se realiza un cepillado de dientes de rutina.

10

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CAPÍTULO II

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Según Ojeda et al4 la microflora oral es un complejo ecosistema que forman el biofilm

de la placa bacteriana, donde la presencia de caries está relacionada con la prevalencia

de Streptococcus mutans en saliva.

Vagish et al18

manifiestan que el enjuague con aceites orgánicos es un remedio popular

tradicional practicado en la antigua India; debido a la aparición de efectos secundarios con

los medicamentos modernos y productos de higiene oral, por lo cual las personas se sienten

cada vez más atraídas hacia prácticas complementarias y tradicionales. Se afirma que la

aplicación de aceites atrae la capa lipídica de las membranas celulares bacterianas,

provocando que se adhiera al aceite; la película de aceite así formada en la superficie de los

dientes y la encía puede reducir la adhesión de la placa y la agregación bacteriana. En este

contexto, el aceite de coco contiene ácido láurico que puede reaccionar con los álcalis

presentes en la saliva, como el hidróxido de sodio y los bicarbonatos, para formar una

sustancia similar al jabón de laureato de sodio, que reduce la adhesión y acumulación de la

placa, y posee una acción limpiadora. El aceite de coco no tiene efectos adversos pro-

ducidos por la clorhexidina, como la tinción marrón y la sensación de sabor alterado.18

En base a lo expuesto se plantea la siguiente pregunta de investigación:

¿Existe efecto inhibitorio del oil pulling (aceite de coco) sobre la carga bacteriana

de Streptococcus mutans, cuantificado en saliva?

11

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CAPÍTULO III

OBJETIVOS

Objetivo General

Medir el efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre sobre la carga bacteriana de Strep-

tococcus mutans, cuantificado en saliva, en comparación con la clorhexidina, al 0.12%,

evaluado en los estudiantes de segundo semestre de la Facultad de Odontología de la

Universidad Central del Ecuador.

Objetivos Específicos

i. Cuantificar la carga bacteriana inicial de Streptococcus mutans en la saliva de

los tres grupos de individuos previo a la aplicación del tratamiento.

ii. Cuantificar la carga bacteriana de Streptococcus mutans en la saliva de los in-

dividuos del grupo A, posterior al tratamiento de oil puling con aceite de coco.

iii. Cuantificar la carga bacteriana de Streptococcus mutans en la saliva de los in-

dividuos de los grupos control positivo (B) y negativo (C), posterior al trata-

miento con clorhexidina y agua destilada respectivamente.

iv. Comparar la carga bacteriana de Streptococcus mutans antes y después del

tra-tamiento en cada uno de los tres grupos de estudio.

v. Comparar la carga bacteriana de Streptococcus mutans, entre los grupos de

es-tudio después del tratamiento.

12

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CAPÍTULO IV

HIPÓTESIS

HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN H1.

El aceite de coco con la técnica oil pulling evidencia disminución de carga

bacteriana de streptococcus mutans cuantificado en saliva.

El aceite de coco con la técnica oil pulling tendrá igual efecto que la Clorhexidina

al 0.12%al disminuir la carga bacteriana de Streptococcus mutans cuantificado en

sa-liva.

HIPÓTESIS NULA H0.

El aceite de coco con la técnica oil pulling no evidencia disminución de carga bac-

teriana de Streptococcus mutans cuantificado en saliva.

El aceite de coco con la técnica oil pulling tendrá mayor disminución de carga bac-

teriana que la Clorhexidina al 0.12% cuantificado en saliva.

13

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CAPÍTULO V

METODOLOGÍA

5.1 TIPO Y DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN

Este estudio busca identificar el porcentaje de inhibición del aceite de coco (oill pulling)

sobre Streptococcus mutans contado en saliva. Según las características de la investiga-

ción se determina que es un Diseño de tipo Analítico Observacional de Estudio de

cohortes que se realizará en el Laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico de la

Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador, en condiciones

controladas y reguladas, la evaluación del efecto inhibitorio del aceite de coco (oil pu-

lling), será a través de un conteo de unidades formadoras de colonias posterior a la ino-

culación de la saliva de los grupos participantes del estudio en medio de cultivo especí-

fico. Se comparará el efecto inhibitorio del aceite de coco (oil pulling) entre el grupo

que utilizará la clorhexidina al 0.12 % como control positivo y el grupo que utilizará el

agua destilada como control negativo.

5.2 POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA

La población estará conformada por los estudiantes de segundo semestre de la Facultad

de Odontología de la Universidad Central del Ecuador.

La muestra serán 60 estudiantes seleccionados de forma probabilística, aleatoria y

además considerando los criterios de inclusión y exclusión, utilizando como referencia

el estudio de Kaushik et al21

que utiliza el mismo número de sujetos; divididos en los

siguientes grupos de estudio:

GRUPO A: 20 personas que realizarán un enjuague con Aceite de coco (oil pulling) por

un periodo de dos semanas posterior a la recolección de una muestra de inicial de saliva.

GRUPO B: 20 personas que realizarán un enjuague con clorhexidina al 0.12% como

control positivo por un periodo de dos semanas posterior a la recolección de una

muestra inicial de saliva.

GRUPO C: 20 personas que se realizaran un enjuague con agua destilada como control

negativo por un periodo de dos semanas posterior a la recolección de una muestra

inicial de saliva.

14

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5.3 CRITERIOS DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓN.

5.3.1 Criterios de Inclusión

Estudiantes pertenecientes a segundo semestre de la carrera de Odontología

Estudiantes que entreguen el consentimiento informado

5.3.2 Criterios de Exclusión

Estudiantes que se encuentren en tratamiento farmacológico

Estudiantes que padezcan alguna enfermedad de base

Estudiantes que se hayan realizado profilaxis dentro de las dos últimas semanas

Estudiantes que se hayan sometido a tratamientos de fluorización dentro de las dos

últimas semanas

Estudiantes que presenten alergia al coco

5.4 CONCEPTUALIZACION VARIABLES

5.4.1 VARIABLE DEPENDIENTE

Efecto inhibitorio sobre Streptococcus mutans: Inhibición visible del crecimiento

de Streptocccocus mutans contado en unidades formadoras de colonias presentes en

saliva25

5.4.2 VARIABLE INDEPENDIENTE

Aceite de coco: aceite vegetal, conocido también como manteca de coco. Se trata

de una sustancia grasa que contiene cerca del 90 % de ácidos saturados extraídos

mediante prensado de la pulpa o la carne de los cocos (Cocos nucifera).17

5.4.3 VARIABLE INTERVINIENTE

Gluconato de clorhexidina al 0.12%: Antiséptico de amplio espectro frente a los

microorganismos de la placa dentobacteriana.26

Agua destilada: Sustancia compuesta por dos átomos de hidrógeno y uno de

oxígeno que es incolora, insípida e inodora, es agua que ha sido sometida a un

proceso de destilación.27

15

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

5.5 Definición operacional de variables

TABLA 1. DEFINICIÓN OPERACIONAL DE VARIABLES

VARIABLE DEFINICION

TIPO CLASIFICACION INDICADOR ESCALAS DE

OPERACIONAL CATEGORICO MEDICION

Aceite vegetal, conocido

también como manteca de Volumen de aceite de coco

coco. Se trata de una sus-

extra virgen, prensado en 10 mL tancia grasa que contiene

Cuantitativo frío

ACEITE DE COCO cerca del 90 % de ácidos sa- Independiente

Discreta

turados extraídos mediante

Siembra en agar mitis sali- ufc/mL prensado de la pulpa o la

varius

carne de los cocos (Cocos

nucifera).17

Inhibición visible del creci-

INHIBICION DE miento de Streptocccocus Cuantitativa Siembra en agar mitis sali-

Streptococcus mu- mutans contado en unidades Dependiente ufc/mL Discreta varius

tans formadoras de colonias pre-

sentes en saliva25

Antiséptico de amplio es- Volumen de clorhexidina 5Ml

GLUCONATO DE pectro frente a los microor-

Cuantitativa

Interviniente

CLORHEXIDINA ganismos de la placa dento- Discreta Siembra en agar mitis sali-

ufc/mL

bacteriana.26

varius

Sustancia compuesta por

dos átomos de hidrógeno y Volumen de agua destilada 5mL

AGUA DESTILADA uno de oxígeno que es inco-

Interviniente Cuantitativa

lora, insípida e inodora, es Discreta Siembra en agar mitis sali-

agua que ha sido sometida a varius ufc/mL

un proceso de destilación.27

16

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5.6. Proceso experimental

MANEJO Y MÉTODOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS

Para efectuar el presente proyecto de investigación, se realizó las siguientes actividades

previas a la recolección de datos:

1. Solicitudes dirigidas a las autoridades pertinentes para realizar la investigación,

para la autorización de trabajar con los estudiantes de segundo semestre en la parte

expe-rimental del estudio y para la autorización de uso de las instalaciones del

Laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico de la Facultad de Ciencias

Químicas (Anexos 1,2,3,4)

2. La prueba piloto, que consistió en un perfil lipídico con la finalidad de determinar

la viabilidad del estudio al cuantificar el principio activo de dos marcas comerciales

de aceite de coco, con el propósito verificar el porcentaje de ácido láurico (ácido

graso) y de esta manera trabajar en el estudio experimental con la marca que mayor

porcentaje presente; esta actividad se realizó en el Laboratorio de Ingeniería Am-

biental de la Facultad de Ciencias Químicas; obteniendo un resultado positivo para

el ácido láurico en las dos muestras, la muestra (A) presentó el 45,98 % mientras

que la muestra (B) presentó el 41,82%. Por lo tanto, se trabajó con la muestra (A)

para el estudio por tener un porcentaje mayor de ácido láurico. (Anexo 8)

3. La estandarización del estudio consideró los siguientes aspectos:

a) Las indicaciones referidas a los estudiantes que participaron.

b) El tipo de aceite de coco, clorhexidina, agua destilada a utilizar, que se entregó

al estudiante

c) El tipo de microorganismo a estudiar.

d) El medio de cultivo.

e) El tiempo y temperatura de incubación.

f) La temperatura de incubación.

EXPERIMENTACIÓN

a. Materiales y reactivos

Tubos eppendorf de 2ml

Pipeta de milimetrada

Porta tubos

Contador manual de UFC

Cámara de flujo laminar

20 frascos de aceite de coco orgánico extra virgen

17

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Cajas Petri

Puntas amarillas

Matraz aforado

Jarra de CO2

20 frascos de clorhexidina al 0.12% 20 frascos de agua destilada Agar mitis salivarius

b. Procedimiento experimental: se dividió en fases:

FASE 1:

La primera fase de la parte experimental del estudio se llevó a cabo en la Facultad de

Odontología de la Universidad Central del Ecuador. Participaron en el estudio 60 volun-

tarios sanos con una edad media de 20 años (18-22 años), que firmaron previamente un

Consentimiento informado (Anexo 5). La selección de la muestra se realizó considerando

los criterios de inclusión y exclusión, para lo cual previamente, a través de un check list

(Anexo 6) se obtuvo información personal sobre el historial médico para verificar si existe

reciente exposición a antibióticos o enfermedad de base; el historial dental con el fin de

conocer si ha recibido tratamiento de fluoruro y profilaxis en las dos últimas semanas.

FIGURA 2. CUESTIONARIO

Fuente: Autora

18

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FIGURA 3. CONSENTIMIENTO INFORMADO

Fuente: Autora

La naturaleza del estudio se explicó a los participantes seleccionados en la muestra y

que entregaron el consentimiento informado, se proporcionó un documento explicativo

del procedimiento tanto para la recolección inicial de muestra de saliva previa al

tratamiento como para el procedimiento que deben realizar en casa según el grupo de

estudio al cual correspondan (Anexo 7)

FIGURA 4. EXPLICACIÓN GRUPAL

Fuente: Autora

Para el efecto, a cada sujeto se le asignó un número determinado para luego dividirlos

aleatoriamente en tres grupos de 20 individuos cada uno: GRUPO A: enjuague con

Aceite de coco (oil pulling).

GRUPO B: enjuague con clorhexidina al 0.12% (control positivo).

GRUPO C: enjuague con agua destilada (control negativo)

19

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A B C

FIGURA 5. SUSTANCIAS DE ESTUDIO

Fuente: Autora

FASE 2:

La muestra de saliva basal del día 1 en el cual no se ha aplicado ningún tratamiento, se

realizó en las siguientes condiciones:

1. El muestreo de realizó a las 08h00, el 1 de julio de 2019

2. Se solicitó previamente al estudiante que se realice el cepillado dental posterior a la

ingesta del desayuno y que no ingiera alimentos hasta la toma de muestra de saliva.

3. La muestra de saliva se recolectó en tubos eppendorf previamente rotulados cada uno

con un código específico: grupo A: A1 a A20; grupo B: B1 a B20; grupo C: C1 a

C20; conteniendo cada uno 1 ml de solución tamponada estéril de fosfato, elaborada

Facul-tad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador y colocada en

cada uno de los tubos utilizando una pipeta.

FIGURA 6. ROTULACIÓN DE TUBOS EPPENDORF

Fuente: Autora

20

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FIGURA 7. COLOCACIÓN DE 1 ML SOLUCIÓN TAMPONADA DE FOSFATO

Fuente: Autora

4. Se proporcionó las indicaciones respectivas para la toma de la muestra a los tres

grupos participantes, se les entregó un tubo eppendorf a cada uno con el código

correspon-diente a su grupo, se les solicitó que acumularan una cantidad de saliva

aproximando de 1 ml en boca y posterior lo colocaron en el tubo eppendorf

sellándolo hermética-mente.

FIGURA 8. TOMA DE MUESTRA DE SALIVA INICIAL

Fuente: Autora

21

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5. Se recogieron los tubos contenidos de la muestra de saliva y transportaron en un má-

ximo de 2 horas al laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico de la Facultad de

Ciencias Químicas, en recipiente hermético adiabático.

FIGURA 9. RECOLECCIÓN DE MUESTRAS

Fuente: Autora

6. La tutora María Fernanda Caicedo responsable de la administración de las sustancias

entregó a cada uno de los participantes un kit con las sustancias respectivas a cada

grupo. Los mismos contenían: Grupo A: un frasco de 200 ml de aceite de coco extra

virgen, una cuchara dosificadora de 10 ml y la hoja de indicaciones. Grupo B: un

frasco de 200 ml de clorhexidina 0,12%, envase dosificado a 5 ml y la hoja de

indicaciones. Grupo C: frasco de 250 ml de agua destilada, envase dosificado a 5 ml

y la hoja de indicaciones.

A B

FIGURA 10. ENTREGA DE SUSTANCIAS

22

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Fuente: Autora

7. Una vez en el laboratorio se tomó 60 cajas petri y se rotularon con los códigos corres-

pondientes a cada grupo; grupo A: A1 a A20; grupo B: B1 a B20; grupo C: C1 a C20.

A B

FIGURA 11. ROTULACIÓN DE CAJAS PETRI

Fuente: Autora

Se tomo 50 uL de muestra inicial de saliva de cada uno de los tubos ependorf que

contenían 1 ml de solución tamponada de fosfato, se utilizó una pipeta y una punta

amarilla individual para cada muestra.

FIGURA 12. TOMA DE MUESTRA EN LABORATORIO

Fuente: Autora

Se inoculó los 50 uL en una caja petri anteriormente codificada, cada muestra en una

caja individual.

23

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FIGURA 13. INOCULACIÓN DE LA MUESTRA INICIAL

Fuente: Autora

Posterior a la inoculación de la muestra inicial de saliva se colocó el agar mitis salivarius

con 1 ml de telurito en cada una de las cajas petris mediante la técnica de vertido.

FIGURA 14. COLOCACIÓN AGAR MITIS SALIVARIUS

Fuente: Autora

Se cerraron las cajas petri y se procedió a realizar 3 vueltas hacia la derecha, 3 vueltas

hacia la izquierda, arriba y abajo con la finalidad de integrar la saliva al medio de agar.

24

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FIGURA 15. TÉCNICA DE VERTIDO

Fuente: Autora

Una vez que se concluyó la inoculacion de saliva inicial, se esperó el tiempo de una

hora para permitir la solidificacion de las mismas .

A B

FIGURA 16. SOLIDIFICACIÓN DEL MEDIO DE CULTIVO

Fuente: Autora

Una vez trascurrida la hora se colocaron las 60 cajas Petri en la jarra de CO2 y se

llevaron a la incubadora a 37° C durante 48 horas, para posterior a este tiempo

cuantificar las unidades formadoras de colonias utilizando un contador.

25

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FIGURA

17. COLOCACIÓN EN LA JARRA DE CO2

FIGURA

18. INCUBACIÓN

Fuente: Autora

Fuente: Autora

Posterior a las 48 horas de incubacion se realizó el conteo caja por caja de unidades

formadoras de colonias S. mutans por medio de un contador, registrando en la hoja de

resultados.

FIGURA 19. CONTADOR DE UFC

Fuente: Autora

26

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FIGURA 20. UFC

Fuente: Autora

Posterior al día 1 los sujetos se aplicaron las sustancias de estudio bajo la supervisión de

la tutora a manera de enjuague una vez al día por la mañana durante dos semanas; según

las siguientes indicaciones:

Grupo A se aplicó 10 ml (una cucharada) del aceite de coco orgánico prensado en

frio durante 10 minutos antes del cepillado dental.

Grupo B se aplicó 5 ml de enjuague bucal de clorhexidina durante 1 minuto

posterior al cepillado dental

Grupo C se aplicó 5 ml de agua destilada durante 1 minuto posterior al cepillado

dental.

FASE 3:

Posterior a las dos semanas el lunes 15 de julio de 2019 a las 8:00 am se procedió a la

toma de muestras de saliva posterior a la aplicación de sustancias en estudio. Se

recolectó nuevamente una muestra de saliva de los participantes recibiendo el mismo

tratamiento experimental que las muestras del día 1.

27

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FIGURA 21. ROTULACIÓN DE TUBOS EPPENDORF

Fuente: Autora

FIGURA 22. COLOCACIÓN DE LA SOLUCIÓN TAMPONADA DE FOSFATO

Fuente: Autora

En la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador se colocó nueva-

mente a los participantes según el grupo de estudio, se les entregó un tubo eppendorf

individual con el mismo código del primer día, donde colocaron la cantidad de saliva

aproximada a 1 ml.

28

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FIGURA

23. EXPLICACIÓN DE SEGUNDA FASE FIGURA

24. TOMA DE LA SEGUNDA MUESTRA

Fuente: Autora

Fuente: Autora

Se recogieron las muestras y se colocaron en recipiente hermético adiabático para trans-

portarlas en un máximo de 2 horas al laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico

de la Facultad de Ciencias Químicas.

FIGURA 25. TRASPORTE DE MUESTRAS

Fuente: Autora

Una vez en el laboratorio se rotuló las 60 cajas petri con los códigos respectivos a cada

grupo A: A1 a A20; grupo B: B1 a B20; grupo C: C1 a C20.

29

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A B

FIGURA 26. ROTULACIÓN DE CAJAS PETRI FINALES

Fuente: Autora

Se tomó 50 uL de muestra de saliva de cada uno de los tubos ependorf y se inoculó en

cada caja petri utilizando una pipeta y una punta amarilla individual para cada muestra.

FIGURA 27. INOCULACIÓN DE LAS MUESTRAS FINALES DE SALIVA

Fuente: Autora

30

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Una vez inoculado la muestra de saliva se colocó el agar mitis salivarius con 1 ml de

telurito en cada una de las cajas petri mediante la técnica de vertido y se procedió a cerrar

las cajas y realizar la mezcla respectiva para la integracion de la saliva con el medio.

FIGURA 28. COLOCACIÓN DEL AGAR MITIS SALIVARIUS

Fuente: Autora

Se esperó el tiempo de una hora para permitir la solidificación del agar y se colocaron las

60 cajas Petri en la jarra de CO2, se llevaron a la incubadora a 37° C durante 48 horas horas

para posteriormente realizar el conteo de las unidades formadoras de colonias.

FIGURA

29. JARRA DE

CO2

FIGURA

30. INCUBACIÓN DE LAS CAJAS FINALES

Fuente: Autora

Fuente: Autora

31

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Una vez trascurrido las 48 horas se realizó el conteo unidades formadoras de colonias

de S. mutans presentes en el medio de cultivo posterior a la aplicación de sustancias.

Ade-más, se realizó una comparación del antes y después del tratamiento registrando en

la hoja de resultados.

FIGURA 31. CONTEO UFC FINALES

Fuente: Autora

A B

FIGURA 32. ANTES Y DESPUÉS DE LA APLICACIÓN DE SUSTANCIAS

Fuente: Autora

32

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FASE 4

Los desechos producto de la parte experimental de la investigación que se llevó a cabo en el

laboratorio de Análisis Clínico y Bacteriológico de la Facultad de Ciencias Químicas,

fueron desechados siguiendo los protocolos de Manejo de Desechos Infecciosos y a través

de la empresa gestora con la que trabaja el establecimiento. (Anexo 9)

33

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CAPÍTULO VI

RESULTADOS

6.1 TABLA DE RESULTADOS

TABLA 2. RESULTADOS

CONTEO DE LAS UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS

Registro antes de la aplicación de Registro posterior a la aplicación de

# sustancias sustancias

GRUPO A: Aceite de coco GRUPO A: Aceite de coco

1. 45 27

2. 60 41

3. 84 17

4. 44 17

5. 68 25

6. 75 40

7. 80 36

8. 34 20

9. 64 5

10. 81 3

11. 52 7

12. 55 15

13. 73 5

14. 44 3

15. 64 9

16. 36 19

17. 96 33

18. 36 11

19. 67 0

20. 36 27 Registro antes de la aplicación de Registro posterior a la aplicación de

# sustancias sustancias

GRUPO B: Clorhexidina 0.12% GRUPO B: Clorhexidina 0.12%

21. 208 78

22. 48 2

23. 0 0

24. 66 5

25. 37 13

26. 168 5

27. 52 18

28. 82 22

29. 128 32

30. 20 1

31. 112 10

32. 39 12

33. 32 14

34. 0 0

35. 21 8

34

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36. 0 0

37. 0 0

38. 156 35

39. 26 0

40. 28 19

Registro antes de la aplicación de Registro posterior a la aplicación de

# sustancias sustancias

GRUPO C: Agua destilada GRUPO C: Agua destilada

41. 0 5

42. 9 15

43. 47 50

44. 54 41

45. 22 29

46. 0 6

47. 0 14

48. 0 7

49. 5 6

50. 20 15

51. 300 300

52. 5 20

53. 300 300

54. 21 44

55. 36 33

56. 52 62

57. 76 110

58. 300 300

59. 300 300

60. 300 300

Fuente: la investigación

6.2. ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Con el objetivo de medir el efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre sobre la carga

bacteriana de Streptococcus mutans cuantificado en saliva de los estudiantes de segundo

semestre de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador, en com-

paración con la clorhexidina al 0.12%; se utilizó el estudio estadístico considerando un

nivel de significancia del 95% y 5% de error.

a. Análisis de normalidad de resultados

Previo a comparar la carga bacteriana de Streptococcus mutans antes y después del

trata-miento en cada uno de los tres grupos de estudio, se aplicó la prueba de

normalidad me-diante Shapiro Wilk (menos de 50 muestras) que se muestra en la Tabla

3; para lo cual las hipótesis planteadas fueron las siguientes:

H0: Los datos se comportan como una distribución normal

35

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H1: Los datos no se comportan como una distribución normal

TABLA 3. PRUEBAS DE NORMALIDAD EN LOS EFECTOS MEDIOS DE INHIBICIÓN, 2019.

Pruebas de normalidad

Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk

Grupos Estadístico gl Sig. Estadístico gl Sig.

Halos de inhi- Grupo A - Aceite de coco 0,137 20 0,200*

0,949 20 0,347*

bición antes Grupo B - Clorhexidina al 0,12% 0,186 20 0,069* 0,890 20 0,063*

Grupo C - Agua destilada 0,321 20 0,081* 0,670 20 0,060*

Halos de inhi- Grupo A - Aceite de coco 0,108 20 0,200*

0,939 20 0,228*

bición después Grupo B - Clorhexidina al 0,12% 0,229 20 0,007 0,725 20 0,000

Grupo C - Agua destilada 0,315 20 0,000 0,679 20 0,000

Fuente y elaboración:

Nota: * valor p> 0,05.

Los resultados evidenciaron que las unidades formadoras de colonias antes del trata-

miento provienen de una distribución normal y los resultados posteriores al tratamiento

provienen de una distribución no normal. Por esta variación, se utilizó las pruebas para-

métricas para todo el estudio.

b. Comparación de resultados entre grupos antes y después del tratamiento

En la Tabla 4, se observa la comparación de resultados entre grupos antes y después del

tratamiento, utilizando las pruebas de Anova y Tukey; donde se obtiene que entre los

grupos A, B, C, antes del tratamiento alcanzan un p-valor de 0,403; por lo tanto, al ser

mayor a 0.05 se interpreta que la carga bacteriana es estadísticamente similar.

Posterior al tratamiento se evidencia un p- valor de la significancia es menor que 0,05,

por lo tanto, se concluye que, si existe una diferencia significativa entre las cargas

bacte-rianas de los grupos A, B, C.

TABLA 4. COMPARACIÓN DE GRUPOS A, B Y C ANTES Y DESPUÉS DEL TRATAMIENTO

ANOVA

UFC Suma de cuadrados gl Media cuadrática F Valor p

ANTES

Entre grupos 12.151,30 2 6.075,70 0,92 0,403

Dentro de grupos 375.515,70 57 6.588,00

Total 387.667,00 59

DESPUÉS Entre grupos 89.838,20 2 44.919,10

8,73

0,000*

Dentro de grupos 293.318,80 57 5.145,90

36

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Total 383.157,00 59 Nota: * valor p<0,05

Fuente y elaboración: Pamela Estefanía Molina Guevara

c. Comparación de resultados antes y después del tratamiento

Se analizó comparativamente los resultados de la carga bacteriana de Streptococcus mu-

tans contados en unidades formadoras de colonias (UFC), presentes en la saliva de los

tres grupos de estudio antes y después la aplicación del tratamiento. El Gráfico 1

establece un comparativo descriptivo de medias de UFC.

GRÁFICO 1: PROMEDIO DE UFC DE LOS GRUPOS A, B, C ANTES Y DESPUÉS DEL TRA-

TAMIENTO

UFC incial

UFC Posterior

97,85 92,35

65,450 56,7

18,000 13,700

Grupo A: Aceite de coco Grupo B: Clorhedixina 0.12% Grupo C: Agua Destilada

Fuente y elaboración: Pamela Estefanía Molina Guevara

Para la comparación paramétrica de resultados antes y después del tratamiento de cada

grupo (A, B, C); se utilizó la prueba T-Student (muestras emparejadas); dónde se

eviden-ció que existe una variación significativa, según se observa en la Tabla 5.

TABLA 5. COMPARACIÓN ANTES Y DESPUÉS DEL TRATAMIENTO (T- STUDENT)

Prueba de muestras emparejadas

Diferencias emparejadas

Diferencia de Valor p

Grupos Tiempo Media+ D.E Media

Grupo A Antes 56,7± 18,47 38,70 0,000*

Después 18,00 ± 12,88

Grupo B

Antes

65,45± 62,09

51,75

0,000*

Después

13,70 ± 18,46

37

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Grupo C Antes 92,35 ± 124,77

-5,50 0,027* Después 97,85± 122,19

Nota: *valor p< 0,05

Fuente y elaboración: la investigación

Los resultados de p valor permiten concluir lo siguiente:

Grupo A (Oil pulling con aceite de coco): de la prueba se observa que el p-valor de

significancia es menor que 0,05, por lo tanto, la cantidad de UFC de Streptococcus

mutans antes y después del tratamiento es diferente. Por lo tanto, la cantidad de

UFC disminuye significativamente posterior al tratamiento de aceite de coco

mediante téc-nica de oil pulling; de esta forma se confirma la hipótesis de

investigación: “El aceite de coco con la técnica oil pulling evidencia disminución

de carga bacteriana de Streptococcus mutans cuantificado en saliva”

Grupo B (Clorhexidina 0.12%): de la prueba se observa que el p-valor de la

signifi-cancia es menor que 0,05; por lo tanto, la cantidad de UFC de Streptococcus

mutans antes y después del tratamiento con clorhexidina es diferente; es decir, la

carga bac-teriana disminuye significativamente posterior al tratamiento.

Grupo C (Agua destilada): de la prueba se observa que el p-valor de la

significancia es menor que 0,05; por lo tanto, la cantidad de UFC de Streptococcus

mutans antes y después del tratamiento es diferente; es decir, la carga bacteriana

aumenta signifi-cativamente posterior al tratamiento con agua destilada.

Finalmente se realizó la comparación por pares de grupos, mediante el test de Tukey,

observando que hay variación significativa de las unidades formadoras de colonia des-

pués de tratamiento de oil puling con aceite de coco y clorhexidina (p-valor <0.05)

(Tabla 6 y Gráfico 2)

TABLA 6. COMPARACIÓN POR PARES DE LOS 3 GRUPOS (A, B, C) CON RESPECTO A LOS

EFECTOS MEDIOS ANTES Y DESPUÉS SEGÚN EL TEST DE TUKEY.

ANTES DESPUÉS

Grupo A Grupo B Grupo C Grupo A Grupo B Grupo C Aceite de Clorhexidina Agua Aceite de Clorhexidina Agua des- Grupos Coco al 0,12% destilada Coco al 0,12% tilada

Media 59,70 65,45 92,35 18,00 13,70 97,85

Desviación están-

dar 18,47 62,00 124,77 12,88 18,46 122,19

Grupo A 0 0,973 0,417 0 0,980 0,002*

Grupo B 0,973 0 0,550 0,980 0 0,001*

Grupo C 0,417 0,550 0 0,002* 0,001* 0

Nota: * valor p< 0,05

38

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Fuente y elaboración: Pamela Estefanía Molina Guevara

GRÁFICO 2: EFECTO DEL OIL PULLING (ACEITE DE COCO) SOBRE SOBRE LA CARGA

BACTERIANA DE STREPTOCOCCUS MUTANS, RESPECTO A CLORHEXIDINA AL 0.12%

CUANTIFICADO EN SALIVA.

120 20,00%

97,85 10,00%

100 92,35 0,00%

-10,00% 80 65,45

5,96% -20,00%

56,7

-30,00%

60

-40,00%

40 13,7 -50,00%

18

-60,00%

20 -70,00%

68,25%

-80,00% 79,07%

0 -90,00%

Grupo A: Aceite de coco Grupo B: Clorhedixina 0.12% Grupo C: Agua Destilada

UFC incial UFC Posterior Efecto

Fuente y elaboración: Pamela Estefanía Molina Guevara

Por lo tanto, estos resultados muestran que el efecto del oil pulling (aceite de coco)

sobre sobre la carga bacteriana de Streptococcus mutans, es menor que el que evidencia

la clor-hexidina al 0.12%. En consecuencia, se verifica que no se cumple la segunda

hipótesis de investigación: “El aceite de coco con la técnica oil pulling tendrá igual

efecto que la Clorhexidina al 0.12%al disminuir la carga bacteriana de Streptococcus

mutans cuanti-ficado en saliva”

39

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CAPÍTULO VII

DISCUSIÓN

Con los resultados del presente estudio, se determinó que el aceite de coco con la

técnica oil puling evidencia disminución estadísticamente significativa (valor p<0,05) de

carga bacteriana (UFC) cuantificado en saliva posterior al tratamiento de dos semanas

con el aceite de coco, coincidiendo con los resultados del estudio de Kaushik y col. 21

donde también se determinó una reducción estadísticamente significativa en el recuento

de S. mutans, tanto en la extracción de aceite de coco como en el grupo de clorhexidina

después de emplearlo como enjuague bucal durante 2 semanas.

Según Dayrit 28

el aceite de coco contiene 92% de ácidos saturados, siendo el ácido laúrico

el componente principal en la reducción del recuento de Streptococcus mutans en la sa-liva,

este ácido de transforma en monolaurina al ingresar al cuerpo, la cual es un mono-glicérido

que posee la habilidad de destruir las bacterias, tanto gramnegativas como gram-positivas,

detentando la capacidad de alterar las paredes celulares bacterianas, penetrar y modificar las

membranas celulares, además de inhibir las enzimas involucradas en la ge-neración de

energía y nutrientes, llevando finalmente al deceso de las bacterias 29

.

En la investigación se evidenció la ausencia de diferencias significativas en la compara-

ción de la efectividad entre el aceite de coco y la clorhexidina, además con las dos sus-

tancias existió una reducción significativa de las unidades formadoras de Streptococcus

mutans, por lo que ambos son eficaces en la erradicación de la carga bacteriana.

Hallazgos que concuerdan con lo publicado por Faizal et. al (2016), aseguran que tanto

el aceite de coco como la clorhexidina son efectivos para reducir el recuento de carga

bacteriana de S. mutans en la saliva y placa 17

, con la gran ventaja de que el aceite de

coco no genera manchas en los dientes, evidencia un sabor agradable y no produce

alergia por ser consi-derada una sustancia natural, además la adquisición resulta

mayormente factible, en com-paración con la clorhexidina. 30

40

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Vagish 18

menciona que la aplicación de aceites produce captación de las membranas

celulares bacterianas, provocando que dichos microorganismos sean adheridos al aceite.

Específicamente con el aceite de coco, al contener ácido laúrico, reacciona con los

álcalis presentes en la saliva, creando una sustancia parecida al jabón de laureato de

sodio, lo que produce la reducción de la adhesión y acumulación de la placa, además de

una acción limpiadora.

Al comparar la carga bacteriana de Streptococcus mutans antes y después del

tratamiento del grupo A (aceite de coco) y el grupo C (control negativo), se identifica

que existió diferencia significativa (p< 0,05), donde el aceite de coco con la técnica oil

puling dismi-nuyó la carga bacteriana en comparación con el grupo control (agua

destilada), coinci-diendo con Sunkari y cols. 31

, la eficacia antibacteriana del producto

derivado del coco y la clorhexidina presentaron mejor efecto antimicrobiano sobre el

Streptococcus mutans en contraste con el agua destilada (control negativo).

Sin embargo, los resultados del presente estudio difieren de lo publicado por Barnabé y

cols. 32

, manifiestan que un derivado del coco (jabón) no fue eficiente

significativamente como detergente en prótesis dentales para la eliminación de

Streptococcus mutans (p< 0,05), no obstante, lograron reducir la presencia de Candida

albicans en las prótesis den-tales, un factor determinante es el tipo de producto derivado

del coco, la metodología empleada y la procedencia del coco 33

.

Shino y cols. 17

, aducen que el aceite de coco es diferente de otros aceites debido a la

composición predominante de ácidos grasos de cadena media en lugar de ácidos grasos

de cadena larga que pueden influir en las propiedades físicas y químicas del aceite.

Naseem y cols. 20

, menciona que durante en enjuague con aceite, este se emulsiona y la

superficie del aceite aumenta, donde el proceso de emulsificación del aceite comienza a

los 5 minutos de extracción del mismo, por lo que cubrirá los dientes y la encía, inhi-

biendo la coagregación bacteriana y la formación de placa. De este modo, se eliminan

de la cavidad bucal las bacterias responsables de la caries dental, la gingivitis, la

periodon-titis y el mal aliento.

41

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Para mantener un buen estado de higiene bucal de los dientes y las encías, el extracto de

coco es útil, ya que desempeña un papel vital en la prevención de la infección oral al

extraer la infección (bacterias, toxinas y pus) de los tejidos 34

, además con los

resultados de la actual investigación se evidenció que el enjuague bucal a base de aceite

de coco con la técnica oil puling es eficiente en la disminución de Streptococcus

mutans, microorga-nismo causante principal de la caries dental, por lo tanto es una

alternativa natural y fac-tible para combatir esta gran problemática que es la caries.

42

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CAPITULO VIII

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

8.1 CONCLUSIONES

i. Se cuantifica la carga bacteriana promedio de Streptococcus mutans en la saliva

de los tres grupos de individuos previo a la aplicación del tratamiento: A (56.7

UFC), B (65.45 UFC), C (93.35 UFC)

ii. Se cuantifica la carga bacteriana de Streptococcus mutans en la saliva de los indi-

viduos del grupo A, posterior al tratamiento de oil puling con aceite de coco: 18

UFC.

iii. Se cuantifica la carga bacteriana de Streptococcus mutans en la saliva de los indi-

viduos de los grupos control positivo clorhexidina al 0.12% B (13.7 UFC) y nega-

tivo agua destilada C (97.85 ufc), posterior al tratamiento con clorhexidina y agua

destilada respectivamente.

iv. La comparación de carga bacteriana de Streptococcus mutans antes y después del

tratamiento en los tres grupos de estudio, evidencia que la cantidad de UFC dismi-

nuye significativamente posterior al tratamiento de aceite de coco mediante

técnica de oil pulling; la cantidad de UFC de Streptococcus mutans después del

tratamiento con clorhexidina disminuye significativamente; y, la cantidad de UFC

de Strepto-coccus mutans después del tratamiento con agua destilada aumenta

significativa-mente.

v. Se confirma la hipótesis de investigación: “El aceite de coco con la técnica oil pu-

lling evidencia disminución de carga bacteriana de Streptococcus mutans cuantifi-

cado en saliva”.

vi. La comparación de la carga bacteriana de Streptococcus mutans, entre los grupos

de estudio después del tratamiento, muestra que el efecto del oil pulling (aceite de

coco) sobre sobre la carga bacteriana de Streptococcus mutans, es menor que el

que evidencia la clorhexidina al 0.12%.

vii. No se cumple la segunda hipótesis de investigación: “El aceite de coco con la téc-

nica oil pulling tendrá igual efecto que la Clorhexidina al 0.12%al disminuir la

carga bacteriana de Streptococcus mutans cuantificado en saliva”

43

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8.2 RECOMENDACIONES

Realizar nuevas aplicaciones clínicas con la técnica de oil pulling (aceite de

coco) en periodos mas extensos a la presente investigación.

Aplicar el aceite de coco para investigar la inhibicion de otros tipos de microor-

gamismos presentes en boca.

Extraer el aceite de coco, organico, extra virgen y prensado en frio de manera

artisanal, y aplicar el mismo procedimiento clinico para nuevas investigaciones.

Hacer nuevas investigaciones con la tecnica oil pulling aplicando aceites escen-

ciales natutales en comparacion con el aceite de coco.

Aplicar la tecnica oil pulling con aceite de coco en pacientes con enfermedad

per-iodontal, realizando observaciones antes y despues de la aplicacion clinica.

44

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BIBLIOGRAFÍA

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Odontología; 2015.

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ANEXOS

ANEXO 1. SOLICITUD Y AUTORIZACIÓN PARA REALIZAR EL TRABAJO DE INVESTIGA-

CIÓN.

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

UNIDAD DE INVESTIGACIÓN TITULACIÓN Y GRADUACIÓN

Quito, 22 de abril de 2019

Dr. Guillermo Lanas COORDINADORA DE LA UNIDAD DE TITULACIÓN DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

Presente.

De mi consideración.

Adjunto al presente sírvase encontrar el Perfil del Proyecto de Trabajo de Titulación: Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre streptococcus mutans contado en saliva

en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecua-

dor” vitro de la egresada PAMELA ESTEFANIA MOLINA GUEVARA del periodo

2018-2018, para que se sirva poner en consideración de la Comisión de Investigación de

esta facultad, del mismo que sea sugerido cambios, recomendaciones o aprobado.

Por la amable atención que se dé a la presente, anticipo mi agradecimiento.

Atentamente,

María Fernanda Caicedo Breedy

CI: 0602384083

Tutora

48

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

UNIDAD DE INVESTIGACIÓN TITULACIÓN Y GRADUACIÓN

Quito, 22 abril de 2019

Dr. Wilfrido Palacios COORDINADORA DE LA COMISIÓN DE INVESTIGACIÓN DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

Presente. -

De mi consideración:

Adjunto al presente sírvase encontrar el Perfil del Proyecto de Trabajo de Titulación: “Efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre streptococcus mutans contado en saliva en

estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecua-dor” de

la egresada PAMELA ESTEFANIA MOLINA GUEVARA del periodo 2018-2018, para

que se sirva poner en consideración de la Comisión de Investigación de esta facultad, del

mismo que sea sugerido cambios, recomendaciones o aprobado.

Por la amable atención que se dé a la presente, anticipo mi agradecimiento.

Atentamente,

María Fernanda Caicedo Breedy

CI: 0602384083

Tutora

49

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ANEXO 2. AUTORIZACIÓN PARA ELIMINACIÓN DE DESECHOS INFECCIOSOS

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ANEXO 3. SOLICITUD Y ACEPTACIÓN PARA EL DECANO DE LA FACULTAD DE ODONTO-

LOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

51

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ANEXO 4. SOLICITUD PARA EL USO DEL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICO Y BAC-

TERIOLÓGICO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS DE LA UCE

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ANEXO 5. CONSENTIMIENTO INFORMADO, PARTICIPANTES

FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA MAYORES DE

EDAD

Este formulario de Consentimiento informado va dirigido a los estudiantes de segundo

semestre de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador a quienes se les ha invitado a participar en la Investigación “Efecto del oil pulling (aceite de

coco) sobre Streptococcus mutans contado en saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador”

1. NOMBRE DE LOS INVESTIGADORES TUTORES Y/O RESPONSABLES:

Tutor: María Fernando Caicedo Breedy

Estudiante: Pamela Estefanía Molina Guevara

2. PROPÓSITO DEL ESTUDIO: En el presente estudio se tiene como objetivo me-

dir el efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre la carga bacteriana de

Streptococcus mutans, cuantificado en saliva, en comparación con la clorhexidina,

al 0.12%, eva-luado en los estudiantes de segundo semestre de la Facultad de

Odontología de la Universidad Central del Ecuador. Esto se llevará a cabo mediante

la toma de una muestra de saliva de los participantes y la entrega de tres tipos de

enjuagues, uno a cada sujeto dependiendo al grupo que pertenezca que deben

utilizar por un periodo de 14 días. Los participantes no recibirán ninguna

indemnización o compensación económica por participar en el proyecto; a su vez;

usted es libre de retirarse en cual-quier momento. Los datos obtenidos en la

presente investigación serán de uso exclu-sivo para la tesis previa a la obtención del

título de odontóloga de la Sta. Pamela Estefanía Molina Guevara.

3. PARTICIPACIÓN VOLUNTARIA O VOLUNTARIEDAD: En este estudio se respetará la autonomía de la persona que participa en la investigación: el participante puede elegir participar o no en el proyecto de investigación, y que aun

a pesar de haber entregado su consentimiento informado para participar puede retractarse y re-tirarse de la investigación en cualquier momento sin que esto de

lugar a indemniza-ciones para cualquiera de las partes.

4. PROCEDIMIENTO Y PROTOCOLOS PARA SEGUIR: si usted desea partici-par en este proyecto, realizaremos lo siguiente: Se tomará una muestra de saliva de cada uno de los participantes antes y

después de la aplicación de sustancias. Se entregará sustancias a cada participante de los tres grupos, las mismas que

deben aplicarse en un periodo de 14 días.

5. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO: Una vez entregado el consentimiento informado, se obtendrá la participación volun-taria de 60 estudiantes, los mismos que serán divididos aleatoriamente en tres grupos de 20 sujetos cada uno. Se tomará una muestra de saliva de todos los individuos en tubos de ensayo estériles de manera individual, se les entregará una sustancia a cada sujeto según al grupo que correspondan.

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Todos los participantes deberán aplicarse las sustancias siguiendo las indicaciones entregadas en una hoja individual para cada participante por un periodo de 14 días.

Una vez culminado este periodo se tomará nuevamente una muestra de saliva a cada uno de los sujetos participantes.

6. RIESGOS: Existe el riesgo de presentar alergia o manifestaciones a nivel de la

cavidad oral, si esto sucede el participante deberá suspender el uso y reportar inme-diatamente.

7. BENEFICIOS: Los beneficiarios indirectos serán los estudiantes, profesionales del

área de odontología, los pacientes y la sociedad, ya que al generar datos de relevante

importancia para la inhibición natural de Streptococcus mutans, se podrá sugerir al

aceite de coco como un complemento a la higiene de la salud oral de las personas. Al comprobar el efecto inhibidor del aceite de coco permitirá contar con un

elemento complementario en la higiene oral de los pacientes, el cual podrá ser empleado como un colutorio natural para el control del Streptococcus mutans,

microorganismos de gran relevancia de procesos infecciosos de la cavidad oral.

8. COSTOS: Todo el procedimiento será gratuito para el participante.

9. CONFIDENCIALIDAD: Se guardará absoluta confidencialidad sobre la identidad

de cada uno de los participantes, no existirá constancia de los nombres ni la

identidad de los participantes,

10. TELÉFONOS DE CONTACTO: Sta. Pamela Estefanía Molina Guevara. Teléfono: 0987066011

CONSENTIMIENTO INFORMADO

Yo,……………………………………portador de la cédula de ciudadanía número ……………………, por mis propios y personales derechos declaro que he leído este for- mulario de consentimiento y he discutido ampliamente con los investigadores los proce-dimientos descritos anteriormente. Entiendo que seré sometido a (la toma de una

muestra de saliva en dos ocasiones, y a la aplicación de una sustancia: aceite de coco, clorhexidina 0,12% o agua destilada; según al grupo al que corresponda)

Entiendo que los beneficios de la investigación que se realizará será para los estudiantes,

profesionales del área de odontología, los pacientes y la sociedad, ya que al generar datos

de relevante importancia para la inhibición natural de Streptococcus mutans, se podrá

sugerir al aceite de coco como un complemento a la higiene de la salud oral de las perso-

nas; y que la información proporcionada se mantendrá en absoluta reserva y confidencia-

lidad, y que será utilizada exclusivamente con fines académicos para la obtención del título

de Odontóloga de la Sta. Pamela Estefanía Molina Guevara.

Dejo expresa constancia que he tenido la oportunidad de hacer preguntas sobre todos los

aspectos de la investigación, las mismas que han sido contestadas a mi entera satisfacción

en términos claros, sencillos y de fácil entendimiento. Declaro que se me ha proporcio-nado

la información, teléfonos de contacto y dirección de los investigadores a quienes podré

contactar en cualquier momento, en caso de surgir alguna duda o pregunta, las misma que

serán contestadas verbalmente, o, si yo deseo, con un documento escrito.

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Comprendo que se me informará de cualquier nuevo hallazgo que se desarrolle durante el transcurso de esta investigación. Comprendo que la participación es voluntaria y que puedo retirarme del estudio en cual-quier momento, sin que esto genere derecho de indemnización para cualquiera de las par-tes. Comprendo que, si me enfermo o lastimo como consecuencia de la participación en esta investigación, se me proveerá de cuidados médicos. Entiendo que los gastos en los que se incurra durante la investigación serán asumidos por el investigador.

En virtud de lo anterior declaro que: he leído la información proporcionada; se me ha

informado ampliamente del estudio antes mencionado, con sus riesgos y beneficios; se

han absuelto a mi entera satisfacción todas las preguntas que he realizado; y, que la

iden-tidad, historia clínica y los datos relacionados con el estudio de investigación se

manten-drán bajo absoluta confidencialidad, excepto en los casos determinados por la

Ley, por lo que consiento voluntariamente participar en esta investigación en calidad de

participante, entendiendo que puedo retirarme de ésta en cualquier momento sin que

esto genere in-demnizaciones de tipo alguno para cualquiera de las partes.

Nombre del Participante…………………………………………………

Cédula de ciudadanía………………………………………………….

Firma………………………………………………….

Fecha: Quito, DM (día)…. de (mes)……. de(año)……….

Yo, Pamela Estefanía Molina Guevara en mi calidad de Investigador, dejo expresa cons-

tancia de que he proporcionado toda la información referente a la investigación que se

realizará y que he explicado completamente en lenguaje claro, sencillo y de fácil enten-

dimiento a ………………………………………………………………., estudiante de segundo semestre de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador,

la naturaleza y propósito del estudio antes mencionado y los riesgos que están

involucra-dos en el desarrollo del mismo. Confirmo que el participante ha dado su consentimiento libremente y que se le ha proporcionado una copia de este formulario de

consentimiento. El original de este instrumento quedará bajo custodia del investigador y formará parte de la documentación de la investigación.

Nombre del Investigador: Pamela Estefanía Molina Guevara

Cédula de Ciudadanía: 1722760350 Firma

Fecha

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ANEXO 6. CUESTIONARIO

ENCUESTA PARA LA OBTENCIÓN DE

INFORMA-CIÓN DEL HISTORIAL MÉDICO Y

DENTAL PASADO

Mayo 2019

Página 1de 1

Objetivo: Obtener información necesaria de la población de estudio para el proyecto de investi-

gación efecto del oil pulling (aceite de coco) sobre streptococcus mutans contado en saliva en estudiantes de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del

Ecuador

Instrucciones: Realice la lectura de los textos, para ello es preciso encontrar tiempo

suficiente, responda de acuerdo con lo que se solicite. Colocar un √ en su respuesta.

Nombre del investigador: Pamela Estefanía Molina Guevara

Nombre del participante: __________________________

Edad del participante: ______________

1. ¿Presenta usted alguna enfermedad de base (diabetes, hipertensión)?

Si ( )

No ( )

Si su respuesta es SI, escriba su diagnóstico ……………………………………….

2. ¿Ha tenido usted exposición o ingesta de antibióticos en los 3 últimos meses?

Si ( )

No ( )

3. ¿Se ha realizado tratamiento de fluorización en las 2 últimas semanas?

Si ( )

No ( )

4. ¿Se ha realizado el procedimiento de profilaxis dental dentro de las dos últimas

semanas?

Si ( )

No ( )

5. ¿presenta a usted alergia o alguna reacción adversa al consumir o aplicarse pro-

ductos elaborados con coco?

Si ( )

No ( )

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ANEXO 7. PROTOCOLO A SEGUIR PARA LOS PARTICIPANTES INTEGRANTES DE LOS 3

GRUPOS DE ESTUDIO.

INDICACIONES: Siga las siguientes indicaciones dependiendo al grupo que

le asignaron

1. En el horario de la mañana con el estómago

vacío, antes de realizar tu higiene habitual,

toma 10 ml (una cucharada) del aceite de coco

y coloca en tu boca, de manera que se distri-

GRUPO A (aceite de Coco)

buya por toda la cavidad

2. Realizar el enjuague durante 10 min, hasta que

el contenido se disuelva y se convierta en lí-

quido de aspecto turbio.

3. Escupir el contenido y realizarse la higiene

oral habitual normalmente.

1. En el horario de la mañana con el estómago

vacío, antes de realizar tu higiene habitual,

toma 5 ml de clorhexidina 0.12% (ENCI-

GRUPO B (clorhexidina 0.12%)

DENT) y coloca en tu boca, de manera que se distribuya por toda la cavidad

2. Realizar el enjuague durante 1 min.

3. Escupir el contenido y realizarse la higiene

oral habitual normalmente.

1. En el horario de la mañana con el estómago

vacío, antes de realizar tu higiene habitual,

toma 5 ml de agua destilada y coloca en tu

GRUPO C (Agua destilada) boca, de manera que se distribuya por toda la

cavidad.

2. Realizar el enjuague durante 1 min.

3.Escupir el contenido y realizarse la higiene

oral habitual normalmente.

NOTA: A todos los participantes de los tres grupos de estudio, se les recogerá una

muestra de saliva en un tubo de ensayo estéril individual posterior a la entrega indivi-

dual del consentimiento informado. Esta muestra se tomará en el primer día antes de la

entrega de las sustancias y después de 14 días al finalizar el enjuague que se le enviará a

casa con sus respectivas indicaciones.

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ANEXO 8. INFORME DE LA CUANTIFICACIÓN DEL PRINCIPIO ACTIVO DEL ACEITE DE

COCO.

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ANEXO 9. PROTOCOLO DE MANEJO DE DESECHOS DE LA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍ-

MICAS DE LA UCE

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ANEXO 10. CERTIFICADO DE TRADUCCIÓN DEL RESUMEN

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ANEXO 11. CERTIFICADO DEL URKUND

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