A. Martínez 1

Ensayos de Reconocimiento deMetabolitos Secundarios de Interés

Farmacéutico

Alejandro Martínez M.Facultad de Química Farmacéutica

Universidad de Antioquia

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Definiciones

• Metabolito Primario: Cumple función vital en todos losseres vivos (Ej. proteínas, aa, a. nucleicos, carbohidratos, a. grasos, fosfolípidos, etc.) (Distribución general)

• Metabolito Secundario: Cumple función específica paracada ser vivo (Ej. aceites esenciales favorecen polinización, protegen contra plagas; pigmentos vegetales como las clorofilas para captar la energía lumínica;pigmentos flavonoides que dan color a las flores parafavorecer polinización, alcaloides tóxicos, etc.) (Distribución restringida).

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Ensayos de Reconocimiento paraMetabolitos Primarios

• Aminoácidos (R. Ninhidrina: color violeta)• Carbohidratos (E. antrona, E. Molisch, etc.)• Acidos nucleicos (Hidrólisis y

reconocimiento de base nitrog., azúcar,grupo fosfato, etc.)

• Proteínas (R. Biuret: Color azul, etc.)

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Clases de Ensayos de Reconocimientopara Metabolitos Secundarios

• Con sustancias puras• En productos farmacéuticos (jarabes, extractos

fluídos, tabletas, etc.)• En muestras vegetales (secas, frescas, etc.)• Marchas fitoquímicas (Específicas: Por clases

separadas de metabolitos, Generales: Para varias clases de metabolitos)

• En fluídos biológicos (sangre, orina, tejidos, etc.)

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Reconocimiento de Alcaloides• Experimento: En solución

acuosa ácida (HCl 5%) con sales de metales pesadosforman precipitados

• Ensayos: Mayer, Valser,Dragendorff, Reineckato deamonio, etc.

• Interferencias y falsos positivos: Varios

• Tipo de muestra: Seca molida o fresca en trozos

• Referencia: Quinina (sal)

N

HO

HN

MeO

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Reconocimiento de Flavonoides• Experimento: En solución

acuo-alcohólica producencolor roja-violeta al añadir HCl conc. y magnesio

• Ensayo: E. de Shinoda• Interferencias y falsos

positivos: Sust. con núcleo pirona.

• Tipo de muestra: Seca molida o fresca en trozos

• Referencia: Quercetina

O

OH

OOH

HO

OH

OH

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Reconocimiento de Antocianinas• Experimento: En solución

acuosa cambian de color con el pH

• Ensayo: pH ácido, alcalino yneutro

• Interferencias y falsos positivos: muy pocos

• Tipo de muestra: Fresca entrozos

• Referencia: Repollo morado, pétalos rojo-violeta-azul, etc.

O

OH

HO

OH

OH

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Reconocimiento de Saponinas• Experimento: En solución

acuosa producen espuma yhemolizan los glóbulos rojos

• Ensayos: E. espuma, E.Hemólisis.

• Interferencias y falsos positivos: Taninos (interf.),alg. proteínas (f.p.)

• Tipo de muestra: Fresca entrozos

• Referencia: Saponina cial.

O

O

O

OHHO

HO

OH

O

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Reconocimiento de Esteroides y/o Triterpenoides• Experimento: En solución

clorofórmica con anhídrido acético y ácido sulfúrico producen coloraciones verde-azul-violeta-rojo

• Ensayos: E. Liebermann-Burchard

• Interferencias y falsos positivos: Humedad y clorofilas(interf.), carotenoides y sust. con dienos conjugados (f.p.)

• Tipo de muestra: Seca ymolida

• Referencia: Colesterol

HO

OHOH

OH

HO

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Reconocimiento de Taninos• Experimentos: En solución

acuo-alcohólica al añadir cloruro férrico producen diferentes coloraciones yprecipitan las proteínas

• Ensayos: E. FeCl3 y Gelatina-sal

• Interferencias y falsos positivos: Otros compuestos fenólicos que no dan (+) ambosensayos.

• Tipo de muestra: Seca o fresca• Referencia: Acido tánico

OH

OH

R

OH

OH

HO

HO

OH

OH

R

OH

OH

OH

OH

R

OH

OH

HO

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Reconocimiento de Cumarinas• Experimento: Producen

fluorescencia bajo la luz UVEnsayos: E. fluorescencia, E. para lactonas

• Interferencias y falsos positivos: Otros compuestos lactónicos ( p. ej.cardiotónicos,terpénlactonas, etc.)

• Tipo de muestra: Seca ofresca

• Referencia: Umbeliferona

O OHO

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Reconocimiento de Cardiotónicos

• Experimento: Producen coloraciones violeta conreactivos nitro en medio alc.

• Ensayos: E. Kedde, E. Legal, E. Raymond, E. Keller-Killiani

• Interferencias y falsos positivos: Otros compuestos lactónicos ( p. ej. cumarinas,terpénlactonas, etc.)

• Tipo de muestra: Seca o fresca• Referencia: Digitoxina RO

OO

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Reconocimiento de Compuestos Cianogénicos

• Experimento: Liberan HCN el cual reacciona con picratode sodio para producir coloraciones rojizas

• Ensayos: E. Picrato sódico • Interferencias y falsos

positivos: No hay• Tipo de muestra: Muy

fresca• Referencia: Dhurrina

CO

H CN

HO

Glucosil

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Bibliografía

• Sanabria, A., “Análisis fitoquímico preliminar”,Depto. de Farmacia, Universidad Nacional, SF Bogotá, 1983.

• Martínez, A., “Notas del Curso de Farmacognosiay Fitoquímica, 1997”, Depto. de Farmacia, Universidad de Antioquia, Medellín, 1997.

• Domínguez, X. A., “Métodos de investigación fitoquímica”, Ed. Limusa, México, 1973.