eq_1_desinfectantes_microbiologia
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Las razones principales para controlar losmicroorganismos son:
1.- Prevenir la transmisión de la infección y laenfermedad.
2.- Prevenir la contaminación o la proliferación demicroorganismos perjudiciales.
3.-Prevenir el deterioro o destrucción de materiales porlos microorganismos.
Desinfectante: son agentes (sobre
todo químicos) antimicrobianoscapaces de matar los microorganismospatógenos (infecciosos) de un material.Pueden (y en muchos casos suelen)presentar efectos tóxicos sobre tejidosvivos, por lo que se suelen emplearsólo sobre materiales inertes.
• Sanitizante
• Antiséptico
• Concentración-Numero de bacterias existentes
• Humedad
• Materia Orgánica Extraña
• Temperatura
• pH
• Tipo de bacteria
• Amplio espectro de acción.
• Mayor capacidad bactericida que bacteriostática.
• Efectivo a temperatura corporal y ambiente.
• Soluble en agua y otros solventes a [ ] activa.
• Estable (que no pierda actividad con el tiempo)
• No toxico para animales y hombres.
• Que no se combine con la materia orgánica.
• No corrosivo
• Que no altere sus propiedades organolépticas.
• Poder desodorante.
• Capacidad detergente.
• Barato y fácil de adquirir
DETERGENTES
Catiónicos
Aniónicos
No iónicos
COMPUESTOS FENÓLICOS
fenol
cresoles
difenilos halogenados
alquilésteres del para-hidroxibenzoico
aceites esenciales de plantas
ALCOHOLES
etanol
isopropanol
METALES PESADOS
Mercuriales -Compuestos de plata-Compuestos de cobre
AGENTES OXIDANTES
Halógenos - Agua oxigenada - Permanganato potásico -Ácido peracético
COLORANTES
Derivados de la anilina
Derivados de la acridina (flavinas)
AGENTES ALQUILANTESFormaldehido – Glutaraldehido -óxido de etileno – Beta propionil-lactona
• Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energético; Salida de pequeñas moléculas de la célula.
Detergentes ( desinfectantes tensoactivos o surfactantes)
• Los detergentes se pueden clasificar en:
• Detergentes iónicos:
Catiónicos (grupo activo con carga positiva)
Aniónicos (grupo activo con carga negativa)
• Detergentes no iónicos (no suelen tener actividad antimicrobiana).
Activos contra bacterias Gram-positivas .
Los principales son losllamados compuestos deamonio cuaternario, sobretodo aquellas que van comocloruros o bromuros.
Son rápidamente bactericidasa concentraciones muy bajas(del orden de una parte pormillón, 1 ppm), siempre queen el material a tratar noexista materia orgánica.
•Provoca alteraciones en lasmembranas, provoca la pérdidade su semipermeabilidad, salidade metabolitos de N y P desde elcitosol.
•El detergente puede entrar alinterior celular, con un efectosecundario de desnaturalizaciónde proteínas.
•Su actividad se mejora a pHalcalino.
VENTAJAS INCONVENIENTES
Se pueden emplearcomo desinfectantes yantisépticos de la piel.Se empleanigualmente en ladesinfección dematerial de industriasalimentarias.
• Con grupos carboxilo como porción hidrófila:
Saponinas
Sales biliares
Ácidos grasos disociables
• Con grupos sulfato como porción hidrófila:
Dodecilsulfato sódico (SDS), también llamado laurilsulfato sódico
Sulfonato de alquilbenceno
Provocan disrupción de membranas, con efectos de lisis. Preferentemente sobre bacterias Gram-positivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya que éstas quedan más protegidas por la barrera del lipopolisacáridode la membrana externa.
Cuando los detergentes aniónicos se combinan con ácidos, se logran desinfectantes sanitarios muy potentes y de rápida actuación (unos 30 segundos).
Medios de cultivo selectivo; matan las bacterias grampositivas
VENTAJAS INCONVENIENTES
No tienen actividadantimicrobiana
Algunos tienen empleo enotros campos de laMicrobiología:
•Los ésteres del ácido oleico(CarbowaxJ, Tween-80J) puedenadicionarse a medios de cultivo .
•Favorecen el crecimientodisperso de ciertas bacterias(como Mycobacteriumtuberculosis).
•Puede estimular el crecimiento.
Rompen las membranas celulares y afectan la permeabilidad.
Eliminación mecánica de los microorganismos
•Sales de Na o K de ácidos grasos de cadena larga; depresores de la tensión superficial; aumenta la acción bactericida al aumentar la temperatura.
•Son eficaces contra los neumococos.
•Limpieza de la piel y de superficies.
• Fenol
• Cresoles
• Difenilos halogenados
• Alquilésteres del para-hidroxibenzoico
• Aceites esenciales de plantas
•Desnaturaliza y
precipita las proteínas
•Depresores de la
tensión superficial;
aumenta su actividad
con la temperatura
elevada
•El eugenol se emplea en odontología como antiséptico
•Conservadores •Bactericida
•Desinfección de equipo de
laboratorio, instrumentos, lavabos, o
excusados
•Desodorante en jabones; inhibe el
crecimiento de bacterias
grampositivas
•El fenol se emplea en la actualidad
como patrón para ensayar el poder
desinfectante de otros compuestos.
•Los alcoholesdesorganizan lasbicapas lipídicaspenetrando en laregiónhidrocarbonada delos lípidos.
•Desnaturaliza ycoagula las proteínas
ALGUNAS DESVENTAJAS
Efecto tóxico (narcótico)
No afectan a las endosporas
A 100% de pureza el etanol es poco
efectivo
Desinfección cutánea, empleado en tinturas para aumentar la capacidad de humectancia de otras sustancias químicas.
Destruyen las
membranas y paredes
celulares
debido a sus grupos
H+ y OH- disociados,
respectivamente
Limitados por su capacidad de corrosión principalmente a laboratorios.
En algún caso sirven para aislar
Desinfección de los establos, criaderos de aves; lavado de platos y refractarios utilizados en la industria
Los aniones de la moléculas no disociadas se combinan con los constituyentes protoplásmicos y así penetran a la célula.
“Envenenan" la actividad enzimática formando mercáptidos con los grupos -SH de la cisteína. También interaccionan con -NH2, -COOH y radicales fosfato.
Desinfectante de laboratorio
Sales de fenilmercurio se usan especialmente en el control de posibles contaminantes microbianos (bacterias oportunistas del género Pseudomonas)
Antisepcia de la piel, conservación de sustancias biológicas (sueros, etc.)
Antisepcia de membranas mucosas de faringe y conjuntiva ocular
Ven
taja
s • HgCl2 En solución al 0,1% es un desinfectante potente
• Son potentes inhibidores no sólo de bacterias, sino de levaduras, hongos y algas
• AgNO3 bactericida frente al gonococo (Neisseriagonorrhoeae)
Des
ven
taja
s • HgCl2 es muy tóxico
• Compuestos orgánicos de mercurio, no son totalmente fiables como desinfectantes y presentan cierta (aunque baja) toxicidad
• los compuestos de plata tienen efectos irritantes y cáusticos
Inactivan proteínas enzimáticas (convirtiendo los radicales -SH en disulfuros -S-S-).
Los más potentes también atacan radicales amino, el grupo indol (presente en el triptófano), y la tirosina.
Purificación de agua, desinfección de artefactos empleados en las industria láctea, sanidad de restaurantes
Desinfección cutánea
Antiséptico en cortadas y rasguños
Ejemplos:
Verde brillante
Verde malaquita
Violeta de genciana
Violeta cristal
Fucsina básica
Acriflavina
Proflavina
Su mecanismo depende de su afinidad hacia los grupos fosfato (ácidos) presentes en las nucleoproteínas
Bacteriostático; probablemente forma sales con los ácidos nucleícos.
Medios de cultivo selectivos, antisépticos de piel y membranas bucales; inhiben las bacterias grampositivas.
Los colorantes básicos son los más efectivos.
No sólo tiñen las
bacterias sino que también actúan como antibacterianos.
Son agentes esterilizantes, activos tanto sobre células vegetativas como sobre esporas, que ejercen su efecto letal por su acción alquilante de proteínas y ácidos nucleicos.
Reacciona con las enzimas y ácidos nucleicos
Coagulan proteínas
Ejercen su efecto letal por su acción alquilante de proteínas y ácidos nucleicos
Formaldehido
Usos comerciles: como gas, en la
descontaminación de habitaciones; como formalina (solución
acuosa al 35%); como paraformaldehido
(polímero sólido de 91-99% de pureza).
La formalina se emplea para preservar tejidos,
en líquidos de embalsamamiento, y al
0,2-0,4% en la preparación de
vacunas de virus.
Glutaraldehido
Empleado más como
esterilizantefrío de
instrumental quirúrgico. Es
el único recomendado para esterilizar equipamiento
de terapia respiratoria.
Oxido de etileno
Empleado como esterilizante
gaseoso, aunque es de acción lenta,
Presenta toxicidad para el hombre
ß-propionil-lactona
25 veces más activa que el
formaldehido. Actúa como gas en
presencia de 80-90% de humedad
relativa, aunque es poco penetrante
• se inocula una placa con el microorganismo y luego se puede poner un papel de filtro con la solución que queremos evaluar , o también se hace un pocillo al que añadimos una concentración conocida de sustrato .
• Se toma la sustancia a determinar ( x ) y se hacen diluciones que se añaden a distintos tubos de ensayo , se mete en el medio de cultivo adecuado y se inocula la misma cantidad de microorganismos en todos los tubos . Luego se mira si hay o no crecimiento por la turbidez el último tubo en el que no hay crecimiento da la mínima concentración inhibitoria
'valor experimental'
•Se realiza a las sustancias que tienen propiedades biocida.
•Se toma como referencia la capacidad biocida del fenol.
dilución del desinfectante
Coeficiente fenólico=
dilución del fenol
• Ejemplo:
Un desinfectante X a una dilución1:1000, elimina a las células en el mismotiempo que lo hace una dilución de fenol1:90. el coeficiente de fenol se calculadividiendo 1000/90, dándole un valor de11.1 para el desinfectante X.
• Si un coeficiente fenólico es mayor de 1, eldesinfectante utilizado es mejor que el fenol enlas condiciones de la prueba.
• Si tiene un valor menor de 1, el desinfectanteno es tan bueno como el fenol.
Método•Se usan dos bacterias
Staphylococcus aureus (G+)
Salmonella typhi (G -)
• Dos series de tubos con 5 mL• Se inoculan los tubos• A los 5, 10 y 15 min se realiza un
cultivo de cada dilución en caldo nutritivo estéril.
• Se incuban durante 24 – 48hrs y se observa el crecimiento del microorganismo
• La mayor dilución del desinfectante que mate a los microorganismos en 10 min pero no los mate en 5 min se divide por la dilución de fenol que de los mismos resultados
• Pelczar Michael J. Microbiología. México: McGraw Hill: 1998: 360-376.
• Ramirez R, et all.,Manual de practicas de microbiología general, 4ªed. México, Facultad de química, UNAM, 2000.
• Volk A Wesley. Microbiología Básica. México: Harla: 1992: 176-188.
• Zincer. Microbiología. 20ª edición. Buenos Aires Argentina: Panamericana, 1998: 268-277.
• http://fai.unne.edu.ar/biologia/microgeneral/micro-ianez/19_micro.html