Extracción, aislamiento e identificación de Acido cafeico
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Extracción, aislamiento, cuantificación e identificación de Acido cafeico y Quercitina de la cascara de Piña var. Oro miel (Ananas sativus)
Ester BravoWilmar López
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OBJETIVOS
• Comprobar la presencia del metabolito secundario, acido cafeico en la cascara de piña Ananas sativus L
• Comprobar la presencia del metabolito secundario, Quercitina en la cascara de piña Ananas sativus L.
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INTRODUCCION
•En los últimos años, las personas desean reducir el riesgo o manejar un problema de salud específico a través de mejoras en la dieta. Las plantas han desarrollado diferentes fitoquímicos y enzimas como defensa antioxidante para mantener el crecimiento y el metabolismo ( Pandhair y Sekhon, 2006 ).
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INTRODUCCION
• Muchas de las enfermedades degenerativas humanas como el cáncer, cardio y cerebro-vasculares han sido reconocidas como una posible consecuencia de los daños de los radicales libres a los lípidos, proteínas y ácidos nucleicos ( Choi y Lee, 2009 ).
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INTRODUCCION
• El alto consumo de frutas y verduras se ha asociado con una menor incidencia de estas enfermedades degenerativas ( Bajpai, Yoon, y Kang, 2009 ).
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METODOLOGIA
• Acido cafeico (C 9 H 8 O 4 ).
Densidad: 1.478 g / cm ³ . Punto de fusión: 223-225 ° C.Lambda – Max : 327nm. •Ácido cinámico C6-C3 = A. Cafeico
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ACIDOS FENOLES• EXTRACCIÓN
• •Extracción con mezclas hidroalcohólicas
• •Hidrólisis posterior para obtención de geninas
• CARACTERIZACIÓN
• Separación por técnicas cromatográficas (CCF, HPLC CC)
• Detección: Cl 3Fe
• Vainillina sulfúrica
• P-nitroanilina diazotada + carbonato sódico
• PROPIEDADES FARMACOLÓGICAS
• Antimicrobianos´(antisépticos y desinfectantes)
• Anti-inflamatorio- analgésico l
• Antioxidante
• Colerétic
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METODOLOGIAQuercitina (C15 H10 O7 )
Masa molar: 302,236 g / mol Densidad: 1,799 g / cm 3
Punto de fusión: 316 °CLambda – Max : 369 nmSoluble en soluciones acuosas alcalinas.
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MARCHA FITOQUIMICA • METABOLITO RESULTADO• AMINOACIDOS ++• COMPUESTOS FENOLICOS ++• FLAVONOIDES ++• TRITERPENOIDES Y/O ESTEROIDES -• QUINONAS -• CARDIOTONICOS -• ALCALOIDES -• LEUCOANTOCIANINAS +• TANINOS ++
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METODOLOGIA
FASE ACUOSA BASICA
HACER PARTICION CON : CHCL3 , CH2CL2 Ó CH3OH.
TOMAR CON AYUDA DEL ENBUDO DE SEPARACION LA FASE ACUOSA.
REALIZAR CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA EN CONTRASTE CON ESTANDAR DE A. CAFEICO.
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METODOLOGIA• DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCION UV DE ESTANDAR
DE A. CAFEICO. • DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCION UV DE ESTANDAR
DE QUERCETINA. • DETERMINAR LA CONCENTRACIÓN DE FENOLES TOTALES EN
LOS EXTRACTOS MEDIANTE EL USO DE FOLIN-CIOCALTEU Y CALIBRACIÓN EXTERNA CON ESTANDAR DE ÁCIDO CAFEICO.
• DETERMINAR LA CONCENTRACIÓN DE FlAVONOIDES TOTALES EN LOS EXTRACTOS MEDIANTE EL USO DEL METODO COLORIMETRICO CLORURO DE ALUMINIO Y CALIBRACIÓN EXTERNA CON ESTANDAR DE QUERCITINA.
• DETERMINAR EL ESPECTRO DE ABSORCIÓN DEL COMPUESTO AISLADO Y COMPARAR.
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FUENTES DE CONSULTA• Manual practicas de laboratorio de farmacognosia y fitoquimica pag 72:78.• Harborne, J. B., Phytochemical . Methods. A Guide to Modern Techniques of Plant Analysis, Chapman
& Hall, London -Weinheim-New York, 1998.• Wagner, hildebert, Bladt, Sabine. Plant Drug Analysis: A Thin Layer Chromatography Atlas. Springer-
Verlag, Berlin-Heidelberg-New York-Tokyo, 2001. Páginas 335-338.• Edwin Alvarez, Orfa Jimenez, Cristian Posada, Benjamín Rojano, Jesus Gil, Carlos M. Garcia, Diego L.
Durango. Actividad Antioxidante Y Contenido Fenólicos De Los Extractos Provenientes De Las Bayas De Dos Especies Del Genero Visnia (Guttiferea). Vitae Revista De La Facultad De Quimica Farmaceutica Volumen 15. Medellín Colombia. Páginas. 165-172.
• Spectral Data base for Organic Compounds SDBS: 4-hydroxycinnamic acid documento disponible en: http://riodb01.ibase.aist.go.jp/sdbs/cgi-bin/direct_frame_top.cgi. 8 Diciembre del 2010
• M. Amzad Hossain,SM Mizanur Rahman, Fenoles totales, flavonoides y la actividad antioxidante de la piña frutas tropicales.Instituto de Investigaciones Biotecnológicas, Universidad de Malasia Sabah, Locked Bag N º 2073, 88999 Kotakinabalu, Sabah, Malasia Departamento de Química de la Universidad de Dhaka, Dhaka-1000,
• Sheng Xiao-yuan,Zhen Guo Li,Wang Wei , Du Li-junio, BangladeshCaracterización de los activos fenólicos componentes en el extracto etanólico de Ananas comosus L. deja de alto rendimiento utilizando cromatografía líquida con detección de diodos y espectrometría de masas. Laboratorio de Ciencias Farmacéuticas, Departamento de Ciencias Biológicas y Biotecnología, Universidad de Tsinghua, Beijing 100084, China Facultad de Ciencias de la Vida y Tecnología, el Instituto de Tecnología de Beijing, Beijing 100081, China. El Instituto para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos de la provincia de Henan, Zhengzhou 453000, China