Factores Genéticos de Susceptibilidad a Desarrollar Cáncer...
55
“Factores Genéticos de Susceptibilidad a Desarrollar Cáncer Cervicouterino” Dr. Vicente Madrid Marina Investigador en Ciencias Biomédicas “F”
Transcript of Factores Genéticos de Susceptibilidad a Desarrollar Cáncer...
ldquoFactores Geneacuteticos de
Susceptibilidad a Desarrollar
Caacutencer Cervicouterinordquo
Dr Vicente Madrid Marina Investigador en Ciencias
Biomeacutedicas ldquoFrdquo
INSP
CISEI
En Meacutexico es el 2ordm caacutencer maacutes
frecuente en mujeres
Cada antildeo se presentan 10186 casos y
5061 muertes por CaCU
Factores determinantes del desarrollo
de Caacutencer Cervicouterino
Sociales Respuesta del sistema de salud
Cobertura de programa de tamizaje
Barreras culturales
Niveles de pobreza
Infraestructura de saneamiento
Epidemioloacutegicos
Niveles hormonales
Tabaquismo
Desnutricioacuten
Multiparidad
Infecciones asociadas
Muacuteltiples parejas sexuales
Mujer infectada
con VPH
Caacutencer Cervicouterino
VPH
bullAlto Riesgo
bullE6 E7
bullVariantes
Hueacutesped
bullInmunogeneacutetica
bullInmunosupresioacuten
IL-10 TGF-b1
VPH PERSISTENCIA
TRANSFORMACIOacuteN
PERSISTENCIA
INMUNOSUPRESIOacuteN
Factores ambientales
Factores geneacuteticos
VPH-Hueacutesped
Torres-Poveda K 2008
Relacioacuten entre infeccioacuten de HPV en ceacutervix y Caacutencer
92
Respuesta Inmune Alterada
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO
V Madrid 2008
INF-g Th1
IL-12
T CD8+
T CD8+
Th1
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
Th1
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
INSP
CISEI
En Meacutexico es el 2ordm caacutencer maacutes
frecuente en mujeres
Cada antildeo se presentan 10186 casos y
5061 muertes por CaCU
Factores determinantes del desarrollo
de Caacutencer Cervicouterino
Sociales Respuesta del sistema de salud
Cobertura de programa de tamizaje
Barreras culturales
Niveles de pobreza
Infraestructura de saneamiento
Epidemioloacutegicos
Niveles hormonales
Tabaquismo
Desnutricioacuten
Multiparidad
Infecciones asociadas
Muacuteltiples parejas sexuales
Mujer infectada
con VPH
Caacutencer Cervicouterino
VPH
bullAlto Riesgo
bullE6 E7
bullVariantes
Hueacutesped
bullInmunogeneacutetica
bullInmunosupresioacuten
IL-10 TGF-b1
VPH PERSISTENCIA
TRANSFORMACIOacuteN
PERSISTENCIA
INMUNOSUPRESIOacuteN
Factores ambientales
Factores geneacuteticos
VPH-Hueacutesped
Torres-Poveda K 2008
Relacioacuten entre infeccioacuten de HPV en ceacutervix y Caacutencer
92
Respuesta Inmune Alterada
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO
V Madrid 2008
INF-g Th1
IL-12
T CD8+
T CD8+
Th1
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
Th1
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Factores determinantes del desarrollo
de Caacutencer Cervicouterino
Sociales Respuesta del sistema de salud
Cobertura de programa de tamizaje
Barreras culturales
Niveles de pobreza
Infraestructura de saneamiento
Epidemioloacutegicos
Niveles hormonales
Tabaquismo
Desnutricioacuten
Multiparidad
Infecciones asociadas
Muacuteltiples parejas sexuales
Mujer infectada
con VPH
Caacutencer Cervicouterino
VPH
bullAlto Riesgo
bullE6 E7
bullVariantes
Hueacutesped
bullInmunogeneacutetica
bullInmunosupresioacuten
IL-10 TGF-b1
VPH PERSISTENCIA
TRANSFORMACIOacuteN
PERSISTENCIA
INMUNOSUPRESIOacuteN
Factores ambientales
Factores geneacuteticos
VPH-Hueacutesped
Torres-Poveda K 2008
Relacioacuten entre infeccioacuten de HPV en ceacutervix y Caacutencer
92
Respuesta Inmune Alterada
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO
V Madrid 2008
INF-g Th1
IL-12
T CD8+
T CD8+
Th1
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
Th1
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Relacioacuten entre infeccioacuten de HPV en ceacutervix y Caacutencer
92
Respuesta Inmune Alterada
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO
V Madrid 2008
INF-g Th1
IL-12
T CD8+
T CD8+
Th1
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
Th1
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO
V Madrid 2008
INF-g Th1
IL-12
T CD8+
T CD8+
Th1
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
Th1
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
PROLIFERACIOacuteN DE CMSP DE
PACIENTES CON LIE O CaCU
CMSP= Ceacutelulas mononucleares de sangre perifeacuterica
LIE= Lesioacuten intraepitelial escamosa en cervix de bajo grado y alto grado
CaCU= Caacutencer ceacutervico-uterino de tipo epidermoide Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
PRESENCIA DE LINFOCITOS T EN
ESTROMA DE BIOPSIAS DE CEacuteRVIX
LEIBG LEIAG CaCU
CD3
CD4
CD8
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Moleacuteculas de Activacioacuten de Linfocitos T
MHC II
PEacutePTIDO
ANTIGEacuteNICO
CD4
TcR
a b
L I N F O C I T O T
e g z z d e
Ceacutelula Presentadora de antiacutegenos
CD8
CD3
p56lck
P P P p59fyn
P
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Expresioacuten de la cadena z del
receptor de linfocitos T
0
20
40
60
80
100
120
Healthy SIL CC CC TIL
Positive
samples
NS
p lt 0001 B
PBL TIL
40
60
20
80
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
PACIENTES CON CACU
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Alteracioacuten en la activacioacuten de linfocitos
T normales por suero en pacientes NIC II
bull Shondel SM Helm CW Gercel-Taylor C Taylor DD Differential expression of T-cell CD3-zeta chains in patients with cervical dysplasia before and after treatment Int J Gynecol Cancer 200717(6)1278-82
The study demonstrates that in vivo suppression of zeta chains in patients with CIN II can be the result of a circulating factor
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
CONCLUSIONES
Los linfocitos T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-
uterino presentan una capacidad de proliferacioacuten disminuida
Los linfocitos T infiltrantes del caacutencer cervicouterino no
proliferan en presencia de mitoacutegenos
Existe mayor expresioacuten del RNAm de citocinas Th2 en linfocitos
T perifeacutericos de pacientes con caacutencer ceacutervico-uterino
Los linfocitos T perifeacutericos e infiltrantes del caacutencer ceacutervico-
uterino expresan bajos niveles de CD3-z y CD25
Hay mayor proporcioacuten de linfocitos T perifeacutericos CD4+ que de
CD8+ (relacioacuten 21) en donadoras sanas y pacientes con LIE o CaCu
Sin embargo en linfocitos T infiltrantes de pacientes con CaCu la
relacioacuten es invertida (CD8+gtCD4+)
Diacuteaz-Beniacutetez C et al 2009
TGFb-1 e IL-10 inhiben la proliferacioacuten de linfocitos T normales y
disminuyen la expresioacuten de la cadena CD3-z
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Demostramos la alteracioacuten
molecular que impide a la
respuesta Inmune celular
eliminar las ceacutelulas
transformadas por el VPH
Hay alguacuten dantildeo geneacutetico
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Hay Genes Involucrados en el Desarrollo de
Caacutencer
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD
A DESARROLLAR CaCU
Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a)
Matrix metalloproteinasa MMP-1
Receptor TNF Superfamilia miembro 6 (FAS o CD95) regiones promotoras
p53 codoacuten 72 p21 codoacuten 31
Interferon regulatory factor-1 (IRF-1) introacuten 6
Complejo Mayor de Histocompatibilidad Clase I relacionado con gen A (MICA)
La presencia del receptor KIR3DS1 activado resulta en un incremento del riesgo a CaCU
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
FRECUENCIA MAYOR DE HLA DQW3 EN
MUJERES MEXICANAS CON VPHCaCU
bull HLA-DQW3 en 2553 de controles 5789 en NIC-2 6316 en NIC-3 y 7222 en CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-16 positivo RP de 213 (IC 95 16-498) para CaCU
bull HLA-DQW3 maacutes VPH-18 RP de 132 (IC 95 047-372)
bull HLA-DRB115 (OR de 39 IC 9516-102) para CaCU VPH-16
bull HLA DQB10602 (OR de 41 IC 95 14-127) para CaCU VPH-16
V Madrid-Marina A new approach for gynecological cancer research 2010
K Torres-Poveda in Intraepithelial Neoplasia chapter 13 2012
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Localizacioacuten fiacutesica de potenciales
Genes candidatos para Caacutencer Cervicouterino
AKNA
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Siddiqa A Sims J Guzman-Rojas L Rangel R Gurer C Madrid-Marina V amp Martiacutenez Valdez H
Regulation of CD40 amp CD40 Ligand by the AT Hook Transcription Factor AKNA NATURE 410 383-387 2001
VPH
Juega AKNA un papel fisiopatoloacutegico en el desarrollo del caacutencer cervicouterino
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Madrid-Marina V Martiacutenez-Valdeacutes H y cols
Datos no publicados
Moleacutecula Control (GFP) AKNA
CD80 803 950
CD86 777 866
HLA-AB C 767 955
HLA ndash DR 819 955
AKNA aumenta la expresioacuten de CD80 CD86 HLA-I HLA-II AKNA aumenta la expresioacuten de CD80
CD86 HLA-I HLA-II en ceacutelulas Linfoides
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Genoma Humano
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Diferencias en expresioacuten geacutenica
Procesos bioquiacutemicos que confieren susceptibilidad o resistencia a
enfermedades
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido SNP
A
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Mutacioacuten no Sinoacutenima
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
0
20
40
60
80
CxCA
CIN
CxCA 1552 2963 75
CIN 2759 1111 1667
RR RQ QQ
Perales G y Burguete-Garciacutea A et al 2010
Mujeres que portan 2 copias del alelo
Q tiene mayor riesgo de
desarrollar CaCU que las
portadoras de 2 copias del alelo R
Arginina Glutamina
Polimorfismo de un solo nucleoacutetido en Akna
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
En Proceso de Patente
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g
T CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+ AKNA
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
DETECCIOacuteN DE LA PROTEIacuteNA IL-10 POR INMUNOHISTOQUIacuteMICA EN CANCER
CERVICOUTERINO
Alcocer-Gonzaacutelez JM Berumen J Tamez-Guerra R Gariglio P Hernaacutendez-Pando R Bermudez-Morales VH J Moreno amp
Madrid-Marina V 2006 In Vivo Expression of Immunosuppressive Cytokines in Human Papillomavirus-Transformed Cancer
Cells Viral Immunology 19(3)481-491
Proteiacutena soluble IL-10 producida
por liacuteneas celulares epiteliales
transformadas con HPV
0
50
100
150
200
250
300
350
400
C33A CASKI HELA
C33A
CASKI
HELA
Co
nc
ce
ntr
ac
ion
pg
ml
HPV-
C33A CaSki Hela CaCU NIC II
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
NORMAL BAJO
GRADO
ALTO
GRADO
CaCu
0
425
625
90
PORCENTAJE DE EXPRESIOacuteN DE IL-10
EVOLUCIOacuteN DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Porcentaje de
Expresioacuten de IL-2 (Th1)
EXPRESIOacuteN DE LA IL-10 (Th2) EN DIFERENTES ESTADIOS DEL CAacuteNCER CERVICOUTERINO
Po
rcen
taje
de P
acie
nte
s q
ue e
xp
resan
IL
-10
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
92
Correlacioacuten entre infeccioacuten por VPH en ceacutervix IL-10 y Caacutencer Cervicouterino
IL-10
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
D D
GANGLIO LINFAacuteTICO V Madrid 2008
INF-g T
CD4+
T CD4+
IL-2
CD40L
CD28-CD80
IL-12
T CD8+
T CD8+
IL-10
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
GC
AP1 SP1
YY1
YY1
GRE
GRE CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
E2 DE HPV
1
5acute 3acute
2675 pb
CAJA
PU
rE2 de HPV 31
Poli dI-dC
+ + +
COMPLEJO
DNAPROTEIacuteNA
DNA LIBRE
E2 + IL-10
RT-PCR IL-10
PM C+ C- C33 2g 3g
IL-10 RNAm
HPV 16 E2 pCMV16E2
CMV
Ceacutelulas C33
Conclusioacuten La proteiacutena E2 de VPH
se une al elemento regulador de E2
e induce la expresioacuten de IL-10
La proteiacutena E2 de VPH induce la
expresioacuten de IL-10
Bermuacutedez-Morales V 2011
HPV-E2
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
(5acute-GGGGCGG-3acute)
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
R A Z O N A M I E N T O R A Z O N A M I E N T O
3acute
GC
AP1 SP1 YY1 YY1
GRE
GRE
CAJA TATA
CAJA
PU
CAJAS
PU
TIIF
TIIF
AMPc
CAJA TATA
ACCACGTAGGGT
1 5acute
2675 pb CAJA
PU
PROMOTOR
DE IL-10
IL-10
HPV-E2
H I P OacuteT E S I S
Los polimorfismos en la regioacuten reguladora del gen de IL-10 se asocian
con la presencia de lesiones intra-epiteliales cervicales de bajo y alto
grado y con CaCU en pacientes infectadas con Papilomavirus Humano
HPV
E6E7
HPV
E6E7
REGIOacuteN ACTIVADORA REGIOacuteN REPRESORA
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
O B J E T I V O S
Analizar la asociacioacuten de polimorfismos del
promotor del gen de IL-10 con el riesgo de
desarrollar lesiones premalignas en ceacutervix y CaCU
Evaluar la expresioacuten del ARNm de IL-10 tanto a
nivel sisteacutemico como en ceacutervix y el nivel de
proteiacutena en suero en la poblacioacuten de estudio
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Estudio Transversal CAPASAM
Estudio Transversal INCan
LEI Sin LEI
N=204 N=166
CaCU
N=80
Sin LEI
N=166
Mujer mayor de 18 antildeos
No haber iniciado tratamiento
No Padecer de enfermedad autoinmune o con
un cuadro inflamatorio
Sin Co-infeccioacuten de transmisioacuten sexual
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Aislamiento de linfocitos
Extraccioacuten de ADN
Extraccioacuten de ARN
Separacioacuten de suero
Consentimiento Informado Cuestionario
Anaacutelisis de Polimorfismos
de IL-10
Secuenciacioacuten Anaacutelisis de
secuencia IL-10
Anaacutelisis de
SNP`s de regioacuten
promotora
RT-PCR PCR en tiempo
real
Deteccioacuten de
proteiacutena IL-10
por ELISA
RT-PCR
Anaacutelisis de
Expresioacuten del
ARNm de IL-10
PCR en
tiempo
real
Anaacutelisis de Expresioacuten del
ARNm de IL-10
Discriminacioacuten
aleacutelica
Extraccioacuten de ARN
Extraccioacuten de ADN
Muestra de exudado de ceacutervix
Resultado
colposcopia
citologiacutea y biopsia
Tipificacioacuten VPH por
RFLP y Secuenciacioacuten
MATERIALES Y MEacuteTODOS
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con lesiones intraepiteliales de cuello uterino (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA 105(52)70(42) 20(121-332) 0007 CT 94(46)75(452) 116(071-192) 053 AA 49(24)30(18) 207(110-389) 002 TT 46(226)34(205) 115(062-212) 064
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 50(245)66(40) 1 CC 64(314)57(343) 1 CA + AA 154(76)100(60) 202(126-325) 0003 CT + TT 140(685)109(657) 116(073-184) 051
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 155(76)136(82) 1 CC +CT 158(774)132(795) 1
AA 49(24)30(18) 137(079-239) 025 TT 46(226)34(205) 105(061-181) 084 Alelos Alelos
C 205(51)202(60) 1 C 222(54)189(57) 1 A 203(49)130(40) 132 (097-181) 007 T 186(46)143(43) 110(080-150) 053
p EHW 013 p EHW 031 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()Con LEI()Sin LEI
(n=204166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1 AG 66(323)62(373) 095(059-152) 084 GA 64(3137)53(3194) 128(078-207) 031 GG 13(6412(73) 102(042-244) 096 AA 10(49)11(662) 085(033-222) 075
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 125(613)92(554) 1 GG 130(6372)102(6144) 1
AG + GG 79(387)74(446) 096(061-150) 087 GA + AA 74(3627)64(3856) 120(076-190) 042 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 191(936)154(927) 1 GG + GA 194(95)155(9338) 1 GG 13(6412(73) 104(044-244) 092 AA 10(49)11(662) 078(030-199) 06
Alelos Alelos A 316(77)246(74) 1 G 324(79)257(77) 1 G 92(23)86(26) 101(071-145) 092 A 84(21)75(23) 108(074-158) 065
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad y genotipo VPH Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-592 -819 -1082 -1352) de la regioacuten promotora del gen de Interleucina 10 con caacutencer cervicouterino (CaCU) (-592 CA) (-819 CT)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA 50(625)70(42) 810(267-2456) 0001 CT 45(5625)75(452) 308(116-812) 002 AA 25(3125)30(18) 727(217-2436) 0001 TT 27(3375)34(205) 426(147-1231) 0001
Modelo Dominante Modelo Dominante
CC 5(625)66(40) 1 CC 8(10)57(343) 1 CA + AA 75(937)100(60) 783(266-2304) 0001 CT + TT 72(90)109(657) 344(135-873) 0001
Modelo Recesivo Modelo Recesivo CC + CA 55(687)136(82) 1 CC +CT 53(6625)132(795) 1
AA 25(3125)30(18) 146(068-315) 032 TT 27(3375)34(205) 185(088-388) 010 Alelos Alelos
C 60(37)202(61) 1 C 61(38)189(57) 1 A 100(63)130(39) 170 (106-271) 002 T 99(62)143(43) 158(099-253) 005
p EHW 013 p EHW 0310 (-1082 AG) (-1352 GA)
Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Genotipo n()CaCU()Sin LEI
(n=80166) RMa (IC95) Valor p Modelo Codominante
Modelo Codominante
AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1 AG 20(25)62(373) 056(026-119) 013 GA 17(2125)53(3194) 054(024-118) 012 GG 4(5)12(73) 074(018-301) 068 AA 3(375)11(662) 103(022-465) 096
Modelo Dominante Modelo Dominante AA 56(70)92(554) 1 GG 60(75)102(6144) 1
AG + GG 24(30)74(446) 059(029-119) 014 GA + AA 20(25)64(3856) 060(029-124) 016 Modelo Recesivo Modelo Recesivo
AA + AG 76(95)154(927) 1 GG + GA 77(9627)155(9338) 1 GG 4(5)12(73) 089(022-352) 087 AA 3(375)11(662) 121(027-539) 080
Alelos Alelos A 132(82)246(74) 1 G 137(86)257(77) 1 G 28(18)86(26) 068(038-122) 020 A 23(14)75(23) 071(038-132) 028
p EHW 072 p EHW 026 a Razones de Momios ajustadas por edad Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles plt005 plt005
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
ERU
CIN (n=204) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value
Rsup2
Systemic level 013 (009-018) 0001 012
Cervix level 052 (044-059) 0001 044
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age and HPV genotype
ERU Expression Relatives Units
ERU
CC (n=80) vs NCL (n=166)
szliga (IC95) P Value Rsup2
Systemic level 030 (025-036) 0001 042
Cervix level 095 (084-105) 0001 066
a Coeficients szlig of lineal regression ajusted by age
ERU Expression Relatives Units
Asociacioacuten de la expresioacuten del ARNm de IL-10 a
nivel sisteacutemico y a nivel del ceacutervix en LEI y CaCU
RE
LA
TIV
E I
L-1
0 m
RN
A L
EV
EL
S
AT
LO
CA
L L
EV
EL
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Asociacioacuten del nivel seacuterico de IL-10
en mujeres con LEI y CaCU versus sin LEI
Kwallis chi2(2) = 29268 Pr = 00001
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
LEI (n=204) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
186 (169-203) 00001 058
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad y genotipo VPH
Nivel de proteiacutena de IL-10 (pgml)
CaCU (n=80) versus no LEI (n=166)
szliga (IC95) Valor p Rsup2
355 (322-387) 00001 071
a Coeficientes szlig de regresioacuten lineal ajustados por edad
Torres-Poveda K BMC Proceedings 2012
Torres-Poveda K Infection Agents amp Cancer 2012
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
105
106
107
108
109
11
111
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 20 Pr = 036
Asociacioacuten SNP -592 CA con LEI y CACU
095
1
105
11
115
12
CC CA AA
UR
E I
L-1
0H
PR
T1
Kwallis chi2(2) = 1298 Pr = 000
IL-10
Torres-Poveda KJ Burguete-Garciacutea AI Cruz M Martiacutenez-Nava G Bahena-Romaacuten M Ortiacutez-Flores E Ramiacuterez A Loacutepez-
Estrada G Delgado-Romero K amp Madrid-Marina V Association of Interleukin-10 gene promoter polymorphisms and IL-10 gene
expression in human papillomavirus cervical lesions Infection Agents amp Cancer 2012
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
CG AT
Promoter
IL-10 Promoter
IL-10
IL-10 Promoter IL-10 Promoter
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
HPV-infected
Cells
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
HPV TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
HPV-infected
Cells
TGFβ1
IL-10
(1)
(34)
(2)
E6 amp E7 E2
AP1 AMP
c
TIIF TIIF YY1 YY1
GRE
CAJA TATA
CAJAS
PU CAJA TATA GRE CAJA
PU
CAJA
PU
2675 pb
3acute
ACGTAG
5acute
PROMOTOR
DE IL-10
HPV
IL-10 GC
ACC GGT
SP1
Human IL-10 amp TGFβ1 Promoter
(Sp1 regulatory Element)
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
1 Asociacioacuten del SNP -592 con LEI y CaCU Una copia del alelo de riesgo A
es suficiente para incrementar el riesgo de tener LEI y CaCU
2 Una copia del alelo A del SNP -592 del promotor de IL-10 es suficiente
para incrementar los niveles seacutericos de IL-10
3 Portar tres o maacutes alelos de riesgo de los SNP`s -592 -819 -1082 y -1352
tiene un efecto aditivo en el incremento del riesgo de tener LEI y CaCU
4 El SNPacutes -592 es un candidato potencial para predecir el riesgo de tener
LEI y CaCU
El uso de estos dos marcadores podriacutea ser uacutetil para individuos
susceptibles de padecer esta enfermedad y asiacute poder direccionar a estas
poblaciones los programas de prevencioacuten temprana de la misma
CONCLUSIONES IL-10
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
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Profra Berta Luz Teacutellez
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-Videoconferencias
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btellezinspmx
Genes de Susceptibilidad a caacutencer
cervicouterino en Meacutexico
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Anaacutelisis de asociacioacuten de los SNPs (-509 -800) de la regioacuten
promotora del gen de TGF-b1 con CaCU (-509) (CT) rs1800469
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
CC 3165253
CT 43044578 133 (07021-25214) 038
TT 25322892 142 (06959-29325) 033
Modelo Dominante
CC 316253
CT + TT 683747 136 (07582-24639) 029
Modelo Recesivo
CC + CT 74687108
TT 25322892 12 (06532-22042) 055
p EHW 022
(-800) (GA) rs1800468
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo Codominante
GG 8879506
GA 112237 030 (01101-08621) 002
AA 0123 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 8889506
GA + AA 1122494 041 (01592-10601) 006
Modelo Recesivo
GG + GA 88789506
AA 1122494 (-) (-)
p EHW 0550
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
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bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
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Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (-308) de la regioacuten promotora
del gen de TNF-α con CaCU (-308() (GA) rs 1800629
Genotipo
() sin LEI () con CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 869921
GA 12478 059 (02870-12485) 017
AA 0620 (-) (-)
Modelo Dominante
GG 86969512
GA + AA 1304788 057 (02751-1181) 013
Modelo Recesivo
GG + GA 9938100
AA 0620 (-) (-)
p EHW 075
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
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bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
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bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
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salud de la Mujer (Mor)
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Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
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Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IFN-γ -1615) de la
regioacuten promotora del gen de INF γ con CaCU IFN-γ CT rs2069705
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 423735
CT 442226 029 (01779-04868) 00001
TT 13437 016 (00619-04193) 00001
Modelo
Dominante
CC 42317358
CT +TT 57692642 026 (01637--04231) 00001
Modelo Recesivo
CC +CT 86549623
TT 1346377 025 (00988--06430) 0004
p EHW 066
a Razones de Momios ajustadas por
edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
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Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
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Profra Berta Luz Teacutellez
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Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-4 -590) de la regioacuten
promotora del gen de IL-4 con CaCU IL-4 CT rs2243250
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
CC 281963
CT 477429 147 (07607-28451) 025
TT 2423742 27 (13047-56114) 0007
Modelo Dominante
CC 28031963
CT +TT 71978037 185 (10019-34351) 004
Modelo Recesivo
CC +CT 75806258
TT 2423742 208 (11756-37078) 001
p EHW 058
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en
controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
INSP
Para la elaboracioacuten de constancias
favor de enviar lista de
participantes presenciales con
Profra Berta Luz Teacutellez
Videos y presentaciones anteriores en
httpwwwinspvirtualmx
-Videoconferencias
httpswwwfacebookcomespminsp
btellezinspmx
Anaacutelisis de asociacioacuten del SNP (IL-6 -573) de la regioacuten
promotora del gen de IL-6 con CaCU IL-6 GC rs1800796
Genotipo
() sin LEI () con
CaCU
(n=179172) RMa (IC95) Valor p
Modelo
Codominante
GG 454318
GC 422493 166 (10242-27169) 004
CC 123187 216 (10995-42715) 002
Modelo Dominante
GG 45453187
GC +CC 54556813 178 (11248-282) 001
Modelo Recesivo
GG + GC 87668125
CC 12341875 163 (08793-30574) 012
p EHW 051
a Razones de Momios ajustadas por edad
Prueba de Equilibrio Hardy-Weinberg en controles
plt005
Torres-Poveda K et al In progress 2013
Gen Polimorfismo
Tipo de
Citocina
Magnitud
(OR IC95)
Efecto
Referencia
TNF SNP regioacuten promotora
-308GA Th1 059 (0287-1249) Protector Torres-Poveda K et al 2013
TNF SNP regioacuten promotora
-376GA Th1 248 (098-625)
Riesgo Nieves-Ramirez ME 2011
IFN-g SNP regioacuten promotora
-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-10 SNP regioacuten promotora
-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
SNP regioacuten promotora
-573 CC Th2 216 (110-4272)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
HLA Clase II Haplotipos DQB10602 - 40 (16-102) Riesgo Hernaacutendez-Hernaacutendez DM
2009
HLA Clase II Haplotipos DRB11101- - 213 (16-498) Riesgo Madrid-Marina V 2010
AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
caacutencer cervicouterino en Meacutexico
Conclusiones Finales
Se demostroacute la presencia de citocinas inmuno-supresoras en pacientes con lesiones y CaCU
Dichas citocinas son inducidas por proteiacutenas del Papilomavirus
Estas contribuyen a una respuesta antiviral alterada de los linfocitos T
Contribuyen en parte a la persistencia del VPH y al desarrollo del CaCU
Existe susceptibilidad geneacutetica de las mujeres mexicanas a la infeccioacuten por VPH y al CaCU
Estas evidencias cientiacuteficas han ayudado en parte a la formulacioacuten de poliacuteticas puacuteblicas relacionadas con el control de CaCU
AGRADECIMIENTOS
bull Instituto Nacional de Salud Puacuteblica bull Ana Burguete
bull Kirvis Torres-Poveda bull Margarita Bahena bull Alfredo Lagunas
bull Oscar Peralta bull Viacutector H Bermuacutedez bull Esmeralda Ortiz bull Alejandro Zurita bull Abrahan Ramiacuterez bull Guillermo Perales bull Cinthya Diacuteaz Beniacutetez
bull IMSS (CM siglo XXI)
bull Dr Miguel Cruz Loacutepez
bull Dr Javier Torres Loacutepez
bull Centro Atencioacuten para
salud de la Mujer (Mor)
bull Dra Karina Salgado
bull Dra Guillermina Loacutepez
bull Instituto Nacional de
Cancerologiacutea
bull Dr Alex Garciacutea Carrancaacute
bull Dr David Cantuacute
bull TODAS LAS PACIENTES
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-1615CT Th1 029 (0178-0487)
Protector Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora -800
GA Th3 030 (0110-0862)
Protector
Torres-Poveda K et al 2013
TGF-b1 SNP regioacuten promotora
-509 TT Th3 311 (0702-2521)
Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
IL-4 SNP regioacuten promotora
-590 TT Th2 27 (1305-5611) Riesgo Torres-Poveda K et al 2013
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-592 CA Th2 a) 202 126ndash 325
b) 116 104-131 Riesgo a) Torres-Poveda K et al 2012
b) Ni J et al 2012
IL-6
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-573 CC Th2 216 (110-4272)
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2009
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AKNA R1119Q Motivo AT Hook - 41 (13-13) Riesgo Perales et al 2010
Genes de la Respuesta Inmune de Susceptibilidad a
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