body feed filtration=filtrado por adicin continua

Titulo de una solucin

El ttulo de una solucin es el peso de alguna substancia que equivale qumicamente a 1 ml de dicha solucin. As, una solucin de nitrato de plata, que posea un ttulo de 1 mg de cloruro, contiene nitrato de plata en cantidad suficiente para que cada mililitro de solucin reacciones completamente con dicho peso de ion cloruro. El ttulo se podr haber expresado tambin en miligramos o en gramos de cloruro de potasio, cloruro de bario, ioduro de sodio o de cualquier otro compuesto que reaccione con el nitrato de plata. La concentracin de las soluciones de los reactivos que se utilizan en los laboratorios industriales para el anlisis de rutina de muchas muestras, se suelen expresar con ventaja en funcin de su ttulo.

Filtracin con Tierra de Diatomeas: Conceptos innovadores de un solo uso para la clarificacion de cultivos celulares mamiferos de alta densidad.

Figura 1:principio de filtracin de filtracin cuerpo de alimentacin dinmico (DBF) con tierra de diatomeas (DE) (izquierda) y la filtracin convencional (derecha)

En la ultima decada, los fabricantes biofarmaceuticos han demostrado mejoras importantes en la produccion del anticuerpo monoclonal (Mab), obteniendo productos con concentraciones entre 5-10 g/l empleando la tecnica de alimentacion por fed-batch para cultivos celulares mamiferos.

Con bioreactores de 2.000 L ya disponibles en el mercado se hace cada vez ms posible la produccion de estas biomoleculas.Otros acontecimientos recientes en la industria biofarmacutica - por ejemplo, medicamentos para indicaciones ms pequeas y frmacos ms potentes que permiten dosis ms bajas - estimularn an ms la demanda de instalaciones de fabricacin ms pequeos y ms flexibles.

A pesar que el uso de la tecnologa en general ha madurado considerablemente a lo largo de los ltimos aos, algunas operaciones de unidad (p. ej., extracion de clulas) an necesitan ms atencin para hacerse ms econmicas y robustas.

Cuerpo de filtracin para fraccionamiento de plasma

Cuando miramos a otras industrias que tienen similares necesidades de proceso - como el fraccionamiento de plasma industria - nos encontramos con que suelen utilizar cuerpo de filtracin para la clarificacin de soluciones con alto contenido en slidos. El primer uso de tierra de diatomeas (DE) como una ayuda de filtro en el fraccionamiento de plasma humano se inform hace ms de cinco dcadas (3).Desde entonces, un nmero de procesos de fabricacin para la produccin de inmunoglobulina intravenosa (IVIG), albmina y factores de coagulacin se han desarrollado sobre la base de que la tecnologa (4-6).Fraccionamiento utiliza los principios de la precipitacin selectiva por el ajuste del pH, la fuerza inica, la adicin de alcohol, y los cambios de temperatura.Los precipitados se separan por filtracin en profundidad a menudo en combinacin con tierra de diatomeas, que se aade como una ayuda para aumentar rendimientos de filtro.

Recientemente, los principios de filtracin por cuerpo de alimentacin se han probado para la cosecha de cultivos de clulas, con resultados prometedores (7). Nuestro objetivo fue evaluar la tecnologa como un potencial de uso nico alternativa a las centrifugadoras y filtros de profundidad.Aqu se describen los hallazgos ms interesantes que hemos obtenido usando un nmero de lneas celulares y medios de cultivo, que fueron amablemente proporcionados por diferentes empresas de biotecnologa. Junto con Rentschler Biotechnologie GmbH, Sartorius Stedim Biotech se prob las condiciones optimizadas en un proceso de produccin de cultivo de clulas 600-L para evaluar la escalabilidad de la tecnologa de filtracin del cuerpo de alimentacin.

FUNCIONAMIENTO DE LA FILTRACION POR CUERPO DE ALIMENTACION

Cuando la concentracin de slidos o coloides es demasiado alta en lquidos biolgicos trbidos de proceso que necesitan clarificacin, la torta con filtro que se forma sobre la superficie de un filtro se hace impermeable y bloquea el filtro (la Figura(el Nmero) 1, el derecho). Adicin de tierras diatomeas DE altamente poroso crea una torta de filtro ms permeable, lo que impide el bloqueo u obstruccion (Figura 1, izquierda).

El importe mnimo de la DE para garantizar la filtracin suave depende de la concentracin de partculas.Experimentos a escala de laboratorio con muchos diferentes lneas celulares de mamferos, medios de cultivo, y viabilidades revel una correlacin entre el peso celular hmedo (WCW) y la cantidad requerida de DE a pH constante (datos no mostrados).Para todos los cultivos probados, la concentracin ptima DE estaba en el intervalo de 40-50% de WCW.En todos los casos, la relacin de coadyuvante de filtracin podra reducirse de manera significativa a una gama de 20-30% cuando el pH se redujo a pH 5.

La precipitacin de pH baja mejora resultados de clarificacin.

Diferencias de rendimiento entre acidificada (pH 4.3 a 5.5) y fluidos de cultivo de clulas neutrales para otras tecnologas de eliminacin de clulas, tales como microfiltracin (4) y la filtracin de profundidad (5) pueden explicarse por la precipitacin de partculas ms pequeas a niveles de pH ms bajos.La solubilidad de los desechos celulares y las impurezas cargadas negativamente tales como el ADN y las protenas de la clula husped (6) disminuyen a lo largo con el pH.La figura 2 muestra la media de distribucin de tamao de partcula por tres sobrenadantes de cultivo celular libre de clulas diferentes a pH neutro (lnea verde) y despus de que el pH de esas culturas se redujo a pH 5 (lnea roja).La reduccin del pH conduce a la formacin de partculas ms grandes y hace que las partculas submicrnicas tpica (