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F.T.A.H. Tema 1
TEMA 1. EL LABORATORIO. ASPECTOS GENERALES
El laboratorio de análisis y diagnóstico clínico, como cualquier laboratorio, debe
esta organizado de forma que el trabajo en él sea el más cómodo,seguro y operativo
posible. Para ello se dispondrán una serie de áreas de trabajo, de limpieza y
almacenes para materiales, aparatos y reactivos.
Hay que tener en cuenta que en el laboratorio trabaja un equipo de personas que,
en cualquier momento, deberán poder disponer de un reactivo o localizar un
aparato,etc, por lo que cada cosa debe tener una ubicación determinada.; en el caso de
tener que sacar un material fuera de él, porque se esté reparando o por cualquier otro
motivo, deberá anotarse dónde se encuentra y quién es el responsable, con el fin de
reclamarlo si fuera necesario.
Para que el laboratorio sea seguro y evitar así cualquier tipo de accidente, ademásde estar equipado correctamente ( extintores, duchas de seguridad, material de
primeros auxilios, teléfono de emergencia,etc..) es preciso observar las normas de
seguridad e higiene.
Se tienen que utilizar las áreas destinadas para los distintos usos, como la campana
de extracción de gases, para trabajar con productos volátiles nocivos por inhalación, y
los materiales protectores, como los guantes para sustancias caústicas, corrosivas o
con riesgos biológicos, además de las gafas protectoras cuando haya riesgo de
salpicaduras, advirtiendo cuando haya peligro con carteles, rótulos o símbolos.
Existe una normativa de seguridad e higiene aplicable al trabajo en el laboratorio.
Símbolos de peligrosidad más comunes:
C Corrosivo E Explosivo O Comburente F Inflamable
F+ Extremadamente
inflamable
T Tóxico T+ Muy tóxico Xi Irritante
Xn Nocivo N Peligroso para el
medio ambiente material radiactivo
peligroso
☣ Material
biopeligroso.
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Las áreas básicas del laboratorio son el área de trabajo, el área de limpieza y el
área de almacenaje, que a su vez se divide en almacén de material, de reactivos y de
aparatos. En el área de limpieza se pueden distinguir zonas de desinfección, lavado y
secado.
● EQUIPOS E INSTRUMENTOS EN EL LABORATORIO
Los utensilios de uso cotidiano empleados en el laboratorio están fabricados
básicamente en vidrio o plástico, aunque también en otros materiales como el acero –
el material de vidrio está muy indicado y es frecuentemente utilizado debido a las
ventajas que proporciona (son transparentes, de fácil limpieza y uso, resistencia
térmica y química, etc,). En general, el material de vidrio suele ser incoloro. Sin
embargo, no todo el vidrio puede utilizarse en todos los casos, ya que algunos
soportan mal las temperaturas elevadas y no pueden ser calentados. Hay objetos de
vidrio de mucha diversidad, según su finalidad, su forma y tamaño.
Cuando se utiliza material de vidrio nuevo o ha estado almacenado mucho tiempo,
puede estar contaminado con esporas, por lo que es aconsejable su desinfección
previa. Todo material de vidrio roto o dudoso debe ser desechado.
Con respecto al material de plástico, debe tenerse en cuenta el tipo de plástico y el
uso que se le va a dar; en función de su uso puede ser desechable o reutilizable. El
material de plástico desechable, si ha estado en contacto con material biopeligroso
debe ser esterilizado en autoclave antes de desecharlo. Este tipo de material plásticono soporta altas temperaturas y suele utilizarse para contener cultivos o efectuar
seiembras, entre otras. El material de plástico reutilizable está disponible en probetas
o vaso de precipitados, pero no es adecuado para medir capacidades con exactitud ya
que se deforma, motivo por lo que es preferible medir siempre con material de vidrio.
Hay otros utensilios fabricados en plástico reutilizable, como los frascos, lavapipetas
o trompas de vacío.
El material de acero inoxidable tiene la ventaja de su gran resistencia mecánica y
térmica. Además, es reutilizable y se esteriliza fácilmente por calor seco (estufa) ocalor húmedo (autoclave).
Aparte de clasificar el material de laboratorio en función de su composición
(vidrio, plástico, acero, etc..) también se puede catalogar basándose en otros criterios,
por ejemplo, en función del uso que se le vaya a dar a los mismos. Se ha optado por
agrupar el material y los aparatos formando equipos de trabajo que resulten útiles
para una función determinada.
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● Material para procesos de purificación
Muchos líquidos reactivos o muestras no son apropiados para usarlos en ellaboratorio, debido a que contienen sustancias disueltas y materias en suspensión que
pueden interferir en el desarrollo de los análisis. Para conseguir productos útiles en el
laboratorio se pueden someter los reactivos o muestras a un proceso de purificación.
•• El desionizador . Es un dispositivo que emplea cartuchos o columnas con resina
de intercambio iónico; el líquido atraviesa el lecho de esta resina obteniéndose un
líquido de mayor calidad.
● Material de volumetrías
•• Las probetas: son recipientes graduados de vidrio y cilíndricos y con una base
opeana amplia. ( Mediremos el líquido por donde marque el menisco, con los ojos a
la altura del mismo).
•• Los matraces aforados: son recipientes de vidrio con forma de pera y cuello
largo, que pueden llevar tapón o no tenerlo. Están calibrados y marcan el volumen
señalado con una línea de envase. Se usan para preparar soluciones de concentración
conocida.
•• Las pipetas: son de vidrio alargadas y acabadas en punta. Se usan para
suministrar volúmenes o capacidades pequeñas con mucha exactitud.
•• Las micropipetas o pipetas de pistón: también llamadas pipetas automáticas. Secaracterizan porque la punta de plástico es desechable,así se evitan contaminaciones
y agiliza el trabajo. Se utilizan para dispensar pequeños volúmenes y son muy exactas
y precisas.
•• La prepipeta: es un dispositivo de plástico con émbolo y acople para pipetas
graduadas de vidrio, mediante el que se puede aspirar o dispensar líquidos. Se usa
para evitar el contacto directo de la boca con la pipeta. Es importante que el
acoplamiento sea hermético para poder enrasar correctamente.
•• Peras de goma: son para la aspiración y tienen la misma función que las
prepipetas.•• Los embudos: son de vidrio liso con un ángulo de 60º y un pico en bizel para
facilitar el vertido de líquidos.
● Material de pesadas
•• La balanza: para usos generales pueden ser válidas las balanzas mecánicas o
electrónicas, con una sensibilidad de 0'01g. Sin embargo, para pesar cantidades
menores de 2g se recomienda emplear balanzas analíticas electrónicas con una
sensibilidad de 0'001g. No se debe colocar la sustancia a pesar directamente sobre el platillo de la balanza.
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•• La espátula: es metálica y se usa en la pesada para arrastrar sólidos. Debe
estar escrupolósamente limpia y seca antes de ser utilizada.
••Vidrio de reloj: es un platillo de vidrio cóncavo; los hay de varios diámetros.
Se utiliza para colocar el material a pesar sobre el plato de la blanza.
● Material para efectuar la limpieza
El material de vidrio, una vez limpio, se lavará con agua desionizada en su
interior. Cuando el material está muy sucio, contiene restos de colorante o restos
orgánicos, hay que someterlo a un baño con alcohol clorídrico u otro producto.
•• Escobillón: se usa para la limpieza de los tubos de ensayo, matraces y
probetas, junto con agua y jabón líquido. Los hay de diversos tamaños.
•• La trompa de vacío : es un dispositivo metálico o de material plástico en
forma T que se conecta a un grifo de agua. Se usa para aspirar líquidos y limpiar el
interior de pipetas con agua jabonosa o agua desionizada.
•• Lavador automático de pipetas: es un dispositivo cilíndrico de material
plástico, usado para el lavado y enjuagado de pipetas. Se maneja conectado al grifo
del agua corriente y al desagüe.
•• Los escurridores: sirven para secar el material de vidrio limpio, como tubos o
matraces, a temperatura ambiente y en posición invertida.
•• La estufa de secado (horno Pasteur): se puede utilizar a temperatura
moderada para secar el material. El material de vidrio se coloca en su interior en
posición invertida y se somete a una temperatura de 180ºC durante treinta minutos.•• Lavadora: se trata de una máquina similar a un lavavajillas doméstico, pero
con todos los accesorios para lavar todos los materiales de vidrio del laboratorio.
● Material para llevar a cabo la esterilización
••Mechero Bunsen:debe estar conectado a una red de distribución de gas, cuyo
depósito estará situado en el exterior del edificio. Son utilizados con asiduidad al
favorecer una zona estéril a su alrededor. Se utiliza para esterilizar el asa de siembra
por flameado, entre otras cosas. Los hay independientes, conectados a una pequeña bombona de gas o a un cartucho. En su defecto, pueden utilizarse mecheros de
alcohol, o también, mecheros eléctricos, donde una resistencia incandescente se
calienta. Concluyendo, hay muchos tipos de mechero.
•• Horno Pasteur o estufa Poupinel : se trata de un armario aislado térmicamente
del exterior, provisto de una resistencia eléctrica y un termostato, en el que se
consiguen elevadas temperaturas elevadas temperaturas interiores. Se utilizan para la
esterilización por aire caliente y emplea calor seco a 170ºC-180ºC.
■ Protocolo de esterilización mediante calor seco:1. Preparar el material en paquetes cerrados.
2. Rotular, especificando el contenido y fecha de la esterilización.
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3. Colocar un trozo de cinta testigo.
4. Situar el material en el interior.
5. Abrir la ventanilla lateral.
6. Cerrar la puerta, colocar el mando a la temperatura deseada y conectar 7. Cuando empieza a realizar ciclos de encendido y apagado, cerrar la
ventanilla lateral y mantenerlo funcionando durante una hora.
8. Pasado el tiempo, apagar y esperar a que se enfríe para sacar el material.
No se debe abrir la puerta estando caliente el aparato, ya que el cambio
brusco de temperatura podría romper el material de vidrio.
•• Autoclave: Consiste en un recipiente con cierre hermético, en cuyo interior se
consigue una atmófera húmeda, alta temperatura y presión elevada con la intención
de destruir todos los microrganismos presentes. Su interior está dividido por una
rejilla que separa la parte reservada al agua destilada de la cámara de vapor; posee
una resistencia eléctrica para calentar el agua. Está dotado de manómetro, termómetro
y válvulas de seguridad; con el se puede esterilizar agua, medios de cultivo,
instrumental, objetos de goma, tela, etc.
■ Normas de esterilización por calor húmedo (autoclave):
Nos basaremos en un autoclave que realiza la purga automática de vapor
mediante el ciclo de autoclavado con un reloj temporizador, de forma que realiza todo
el ciclo de esterilización de modo automático.
1. Asegurarse de que el agua esterilizada es transparente, cubre laresistencia eléctrica y mantiene el nivel que indica el fabricante.
2. Introducir el material a esterilizar en la cesta metálica.
3. Depositar la cesta metálica en el autoclave.
4. Cerrar la tapa.
5. Cerrar las llaves de drenaje y vapor.
6. Ajustar el tiempo de esterilización.
7. Conectar a la red eléctrica y accionar el interruptor de encendido.
8. Esperar a que se complete el ciclo de esterilización.
9. Comprobar que la presión ha bajado a 0 atmósferas.10.Abrir la tapa con precaución.
11.Sacar la cesta con el material y atemperarlo.
12.Utilizar o guardar el material según convenga.
•• Bolsas de autoclave : Se utilizan para contener el material. Una vez
autoclavadas, pueden desecharse o incinerarse si el producto es peligroso.
•• Los pipeteros: Son recipientes metálicos cilíndricos o rectangulares, que se
utilizan para contener las pipetas y proceder a su esterilización.
●Material para la preparación de medios de cultivo.
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•• Los matraces Erlenmeyer : Son recipientes con forma de cono invertido,
fondo plano y cuello corto.
•• Placa calefactora con agitador.
••Trípode metálico y rejilla cerámica:Se utilizan cuando no se dispone en ellaboratorio de placas calefactoras. Sirven para soportar recipientes que son calentados
con un mechero Bunsen y evitar, en el caso de la rejilla cerámica, que la llama incida
directamente sobre el recipiente, logrando además, que el calor se reparta de manera
homogénea. Para homogeneizar el contenido del recipiente se usan varillas de vidrio.
•• Placas de Petri:Son recipientes de forma cilíndrica, compuestos por caja y
tapa, se utilizan para cultivar microrganismos sobre un medio de cultivo sólido y
apropiado. Existen de diferentes diámetros y de vidrio o plático, pero hoy día se
utilizan más éstas últimas, que son desechables y se comercializan pre-esterilizadas.
••Tubos de ensayo:Son tubos cilídricos de fondo esférico con distintas
capacidades y dimensiones, que se usan para contener soluciones, cultivos
microbiológicos o provocar reacciones químicas. Se colocan en gradillas de alambre
de acero inoxidable.
•• Pinzas aislantes y guantes aislantes: Las pinzas de madera o metálicas se
utilizan para sujetar tubos de ensayo, matraces, portaobjetos, etc.
••Gradillas: Soportan los tubos de ensayo en posición vertical, las hay con
diversos diámetros para tubos de distintos calibres. También existen gradillas para
pipetas de vidrio y pipetas de pistón. Están fabricadas en aluminio, hierro
galvanizado, hierro recubierto de plástico y en material plástico.
••Tapones: Se utilizan para tapar matraces de Erlenmeyer, tubos de ensayo ymatraces aforados. -Tipos de tapón: algodón graso, metálicos y plásticos.
●Material de incubación
•• Baños de incubación : Se componen de un recipiente o cubeta que contiene
agua destilada y un sistema de calefacción con termostato y agitador. Se pueden
regular a diferentes temperaturas.
•• Estufa de cultivo o incubadora: Es un armario aislado termícamente del
exterior, en el que podemos conseguir una temperatura interna constante, gracias a unsistema de calentamiento eléctrico y un termostato. Se accede al interior, a través de
una puerta metálica, pudiendo observar el contenido, a través de una puerta de cristal.
••Termómetro de vidrio: De escala adecuada se emplean para el control de la
temperatura en baños, estufas y frigoríficos. Su diferencia de gradación debe ser, al
meos, de 1ºC.
●Material de seguridad
•• Los guantes aislantes: se utilizan para sujetar los objetos calientes.•• Las gafas protectoras: se usan para protegerse los ojos de salpicaduras. Las
mascarillas constituyen una barrera de protección de las posibles inhalaciones de
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aerosoles en el ambiente de trabajo y suelen ser de un solo uso.
••Guantes de látex: actúan como barrera cuando se manipula material
biopeligroso.
•• La bata•• Los contenedores con símbolo de biopeligrosidad : son recipientes amarilos
de plástico, con cierre de seguridad que lleva expuesto el icono de biopeligrosidad.
Los hay de diversos tamaños.
●Material diverso
•• Frigorífico-congelador : generalmente es suficiente con un frigorífico
doméstico provisto de congelador, que mantenga en el espacio refrigerante una
temperatura interior uniforme entre 2ºC y 5ºC, y en el congelador una temperatura de
-24ºC; aunque los armarior congeladores pueden alcanzar temperaturas inferiores a
-70ºC. Los frigoríficos antiescarcha no son recomendables porque pueden producir
una desecación excesiva de los medios de cultivo.
•• Nevera portátily contenedores de frío: se utilizan en el transporte de líquidos,
muestras, reactivo, etc.
••Termómetro:
••Vaso de precipitados: es un recipiente de vidrio graduado con capacidad
aproximada; se utiliza para contener y calentar soluciones o preparar medios de
cultivo. Nunca se utiliza para determinar capacidades exactas.
•• Rotulador y lápiz graso: son especiales para marcar vidrio. Las marcasdeben soportar la manipulación sin borrarse, aunque el lavado y el fregado deben
permitir su eliminación. Todo el material debe ir rotulado adecuadamente para poder
identificarlo.
•• Papel de filtro
●Material para tinciones y observación al microscopio
•• Los portaobjetos: son láminas de vidrio planas rectangulares, con los cantos
biselados o sin biselar que se emplean para depositar sobre ellos las preparacionesque han de ser observadas al microscopio. Sus dimensiones en milímetros son de
50x25x2.
•• Pinzas para sujetar el portaobjetos: se pueden utilizar pinzas de madera o
pinzas especiales para portaobjetos.
•• Los cubreobjetos: son láminas de vidrio muy finos cuadrados o
rectangulares que se colocan sobre la preparación situada en el portaobjetos.
•• El cristalizador : es un recipiente de vidrio de forma cilíndrica y paredes
gruesas con poca altura que se utiliza en las tinciones para soportar las barras
paralelas. No se debe calentar. En su defecto, se pueden usar cubetas para recoger elsobrante de los colorantes que se depositan sobre los portaobjetos.
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•• Las barras paralelas de vidrio: son dos varillas de vidrio macizo unidas en
sus extremos por dos tubos de goma hueca. Se usan colocándolas sobre el
cristalizador como soporte de los portaobjetos.
••Los frascos de colorantes: de plástico o vidrio transparente o coloreado. Seusan para contener colorolantes. Las paredes coloreadas impiden el paso de la luz que
puede degradar el contenido de los frascos.
•• El frasco lavador : es un embase cilíndrico de plástico deformable con tapón
de rosca y un tubo de plástico curvado y hueco que atraviesa el tapón hasta el fondo
del frasco. Se usa para dispensar agua en el lavado de las tinciones.
••Microscopio óptico y aceite de inmersión: El aceite se utiliza para obsevar
preparaciones en el microscopio a gran aumento; usaremos el objetivo 100x.
●Material propio de hematología
•• Pipeta de dilución para eritrocitos (pipeta de Thoma): es una pipeta de
vidrio que tiene un bulbo en la parte superior y dentro de ella una perlta roja
mezcladora. Permite una dilución de sangre 1:200. La parte más larga (parte inferior
del bulbo) está dividida en 10 partes, una a la mitad del tubo de 0'5 y otra al final del
tallo, cerca del bulbo, representada por el 1. Posterior al bulbo hay una marca de 101
que indica la dilución total de los eritrocitos.
•• Pipeta de dilución de leucocitos: es una pipeta similar a la de los eritrocitos,
con la diferencia de que la perlita es blanca, el bulbo es más pequeño y la marca
superior es de 11; da una dilución de 1:20.••Contómetro:
▪ para eritrocitos: es un pequeño instrumento manual con una o dos llaves
(identificadores de células).
▪ para leucocitos: el contómetro para el recuento diferncial de leucocitos
tiene una llave para cada tipo de célula:
-neutrófilos (abastonados y segmentados)
-eosinófilos (lentes de Quevedo)
-basófilos
-linfocitos-monocitos (son los más grandes)
••Centrífuga para microhematocrito: la centrífuga que se utiliza en
hematología es la de hematocrito, es decir, para la determinación de hematocrito
sanguíneos en tubo capilares.
••Tubos capilares: son pequeños tubos desechables que se utilizan para la
determinación de hematocrito; pueden ser heparinizados o no heparinizados.
••Cámara de Neubauer(hemocitómetro o cámara de cuenta): consta de una
lámina rectangular de vidrio grueso en medio de la cual se elevan dos plataformas; en
cada una de éstas hay un área rayada; a uno y a otro lado de la plataforma, dos crestasde vidrio sostienen un cubreobjetos grueso sobre las áreas rayadas.
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••Sueros de hematología:
▪Albúmina bovina al 30%
▪Suero anti-A
▪Suero anti-B▪Suero anti-AB
▪Suero anti-D (Rh)
▪Suero anti-E
▪Suero anti-C
▪Suero anti-e
▪Suero anti-c
▪Suero antiglobulina de Cooms.
••Colorantes de hematología▪Azul de metileno
▪Colorante Giemsa
▪Colorante de Wright
▪Líquido de Türk
▪Colorantes para tinción de panóptico rápido; son tres y están enumerados
▪Líquido de Hayem.
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