Preparación de una muestra fija de bacterias para tinción’ y ‘Tinción simple con colorantes básicos’
Histología tinción (histology staining)
Transcript of Histología tinción (histology staining)
Histología
Tinción
M. Rojas
¿Qué es la tinción?
• Consiste en aplicar un colorante especial para resaltar ciertos componentes del tejido, tanto intra como extracelulares.
• Se unen a determinados componentes según distintos criterios: – pH (colorantes ácidos/colorantes básicos)– Anticuerpos específicos – Afinidad a determinados componentes
ColorantesTinción Se usa con
frecuencia paraNúcleo Citoplasma Eritrocitos Fibras
colágenasTiñe específicamente
Hematoxilina Tinción general junto a Eosina
Azul ----- ----- ----- Ácidos nucleicos (azul), RER (azul)
Eosina Tinción general junto a Hematoxilina
----- Rosa Anaranjado/rojo
Rosa Fibras elásticas (rosa), fibras reticulares (rosa)
Azul de toluidina (colorante metacromático)
Tinción general Azul Azul Azul Azul Gránulos de mastocitos (púrpura)
Tricrómica de Gomori
Tejidos conjuntivo y muscular
Gris/azul Rojo Rojo Verde Fibras musculares (rojo)
Tricrómica de Masson
Tejido conjuntivo Negro Rojo/rosa Rojo Azul/verde Cartílago (azul/verde), fibras musculares (rojo)
Tricrómica de Mallory
Tejido Conjuntivo Rojo Rojo pálido Anaranjado Azul intenso
Queratina (anaranjado), cartílago (azul), matriz ósea (azul intenso), fibras musculares (rojo)
ColorantesTinción Se usa con
frecuencia paraNúcleo Citoplasma Eritrocitos Fibras
colágenasTiñe específicamente
Weigert para elastina
Fibras elásticas Azul/negro ----- ----- ----- Fibras elásticas (azul/negro)
Azan de Heidenhain (azocarmín + azul de anilina)
Distinción entre las células y los componentes extracelulares
Rojo/púrpura
Rosa Rojo Azul Fibras musculares (rojo), cartílago y matriz ósea (azul intenso)
Impregnación argéntica
Fibras reticulares y fibras nerviosas
----- ----- ----- ----- Fibras reticulares (pardo/negro), fibras nerviosas (pardo/negro)
Wright Células de la sangre
Azulado/púrpura
Azulado/gris
Rojo/rosa ----- Gránulos de neutrófilos (púrpura/rosa), gránulos de eosinófilos (rojo brillante/anaranjado), gránulos de basófilos (púrpura intenso/violeta), gránulos de plaquetas (rojo/púrpura)
Orceína Fibras elásticas Azul intenso
----- Rojo brillante
Rosa Fibras elásticas (pardo oscuro), gránulos de mastocitos (púrpura), músculo liso (azul claro)
PAS (ácido peryódico-reactivo de Schiff)
Membrana basal, detección de carbohidratos
Azul ----- ----- Rosa Glucógeno y otros carbohidratos (magenta)
Colorantes ácidos y básicos
• Un colorante ácido es aquel que se une preferentemente a compuestos ácidos (catiónicos). Dichos compuestos presentan acidofilia (afinidad al colorante ácido).
• Un colorante básico se une preferentemente a compuestos básicos (aniónicos). Dichos compuestos presentan basofilia (afinidad al colorante básico).
Tinción de Rutina (H-E)• La tinción de rutina consta de
dos colorantes: hematoxilina y eosina. Teñir es un proceso que involucra el tratamiento de la muestra en una serie de pasos para obtener contraste de los componentes intra y extracelulares.
• La eosina es un colorante ácido, mientras que la hematoxilina es un colorante básico.
Tráquea (corte transversal). H-E
Azul de Toluidina
• Corte de riñón• Al centro, glomérulo
dentro de cápsula de Bowman
• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.
Tricrómica de Gomori
• Corte de músculo esquelético
• En rojo, los núcleos; azul, las fibras musculares (corte transversal)
• Paciente con distrofia muscular de Duchenne
Tricrómica de Masson• Corte de riñón• A la izquierda,
glomérulo dentro de cápsula de Bowman
• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.
• Se aprecia el tejido conjuntivo entre los túbulos (azul)
Tricrómica de Mallori
• Unión músculo tendinosa.
• Tendón, arriba a la izquierda. Músculo, abajo a la derecha.
Weigert para elastina
• Corte de arteria muscular (transversal)
• Entre la túnica media y adventicia, destacan fibras elásticas (onduladas)
Azan
• Tráquea de gato• Epitelio
pseudoestratificado ciliado, y tejido conjuntivo subyacente.
Impregnación argéntica
• Tejido linfático• Se aprecian las fibras
reticulares teñidas de pardo/negro
Wright
• Frotis de sangre• Se aprecian
eritrocitos, plaquetas, neutrófilos y linfocitos.
Orceína
• Fibrocartílago de pabellón auricular
• Se aprecian en rosa las fibras elásticas, alrededor de los condrocitos (células de cartílago).
PAS
• Corte de riñón• Al centro, glomérulo
dentro de cápsula de Bowman
• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.
• Se aprecia en rosa las membranas basales
Para el estudiante• Maneje al menos 4-5 tipos de tinción distintas. Se recomienda
– H-E– Azul de Toluidina– PAS– Tricrómicas– Weigert u Orceína
• Estudie el método de preparación de una muestra antes y durante la tinción. Puede encontrarlo en los libros recomendados (sitio web: www.booksmedicos.org)