Hplc vs Uhplc

7/22/2019 Hplc vs Uhplc

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2009 PerkinElmer 2009 PerkinElmer

2009 PerkinElmer

2009 PerkinElmer

Migracin de HPLC a UHPLC


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22

Sistema Conventional LC vs. UHPLC

Tiempo de anlisis

3 - 60 min

Tiempo de anlisis

1 - 8 min

Bomba

Flujo: 0.5 - 5 ml/min

Presin: 500 - 6,000psi

Baja o Alta presin en la

mezcla con gradiente

Presin Max: 6,000

Columnas : 3 a10m

Column ID: 4.6mm

Rango de temperatura:

4 - 90 C

Frecuencia de muestreo: 1 -

50 pts/ seg

Automuestreador

Flujo: 0.5 - 3 ml/min

Presin: 1000 - 15,000psi

Alta presin con gradiente

Binario

Presin Max: 15,000 psi

Columnas : sub 3m

Column ID:2.1mm

Rango de temperatura:

4 - 90 C

Frecuencia de muestreo: 1 -

100 pts/ seg

Detectors

Horno para Columnas

Analytical LC UHPLC

Columnas


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FLEXAR Ms posibilidades en los anlisis de HPLC

. Y en las presiones de la Bomba

18,000 PSI
http://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/FlexarFX10%20%20Y%20FX-15.pptxhttp://localhost/var/www/apps/conversion/tmp/scratch_1/FlexarFX10%20%20Y%20FX-15.pptx


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44

0 5 10 15 20 min.

Las isoflavonas en

productos nutracuticos se

pueden analizar con UHPLC al

menos seis veces ms rpido, con

una sensibilidad ms alta y

reduciendo al menos en un 90% el

uso de los solventes de la fase

mvil al compararlo con HPLC

convencional..

Convencional

HPLC

UHPLC

Beneficios de UHPLC

Green Productivity Mayor Rendimiento

Mucho Menos Solventes Mejor Deteccin

ahorra tiempo y dinero


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55 No tenga miedo de un UHPLC!!!

Los temores comunes de migracin a UHPLC

Tecnologa NuevaCosto del nuevo hardware

Robustez de las columnas sub-2mm

Alta Presin

Entrenamiento

Software

Conversin de Mtodos

Migracin a UHPLC es ms fcil de lo que la mayoria de la gente

piensa

El nuevo hardware se paga solo, con el incremento en la productividad

y reduccin de los costo de operacin.


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Hay 5 parmetros importantes

de un mtodo que hay que

tomar encuenta para transferir

un mtodo de HPLC a UHPLC.

Volumen Inyeccin (Vin j)

Velocidad de Flujo (F)

Tiempo de programaIsocratico (tiso)

Tiempo de programa

Gradiente (tgrad)

Pendiente Gradiente

Herramientas disponibles para simplificar la migracin de un Mtodo

Muchas referencias estn disponibles con una descripcin detallada para la

transferencia de un mtodo, incluyendo un libro de PerkinElmer titulado Guidelines

for the Use of UHPLC Instruments by D. Guillarme & J. Veuthey. White paper isavailable at:

http://las.perkinelmer.com/content/applicationnotes/wtp_guidelinesforuhplcinstruments.pdf

Calculadora para la transferencia de mtodos est disponible en PerkinElmer


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Transferencia de un Mtodo con Gradiente

Comparison of HPLC and the transferred

(calculated) UHPLC gradient programs

Step

HPLC

Time

UHPLC

Time %ACN

1 0 0 70

2 5 0.6 70

3 25 3.2 85

4 29 3.7 85

5 30 3.8 70

6 45 5.7 70

Disminucin del

Tiempo de anlisis8X

45 min Run 5.7 min Run

65

70

75

80

85

90

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Time(min)

%ACN

HPLC

65

70

75

80

85

90

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Time(min)

%ACN

UHPLC


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Aplicaciones de UHPLC

Nutracetico : Isoflavonas en Soya

10.00

20.00

30.00

40.00

50.00

60.00

70.00

80.00

90.00

100.00

110.00

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42

Peak List

1. Daidzin2. Glycitin

3. Genistin

4. Daidzein

5. Gylcitein

6. Genistein

1

2

3

4

5

6

PE Brownlee C18 150 mm x 4.6 mm, 5 mm

.

.

1 .

1 .

.

.

.

.

.

.

.

. 0 .5 1 .0 1 .5 2.0 2.5 3 .0 3 .5 4.0 4.5 5 .0 5 .5 6 .0 6.5

PE Brownlee C18

50 mm x 2.1 mm, 1.9 mm

Mejora en el rendimiento de 6X

.5 2.0 2.5 3.0

1

2

3

4

5

6


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Furanic Compounds Typically Found in Electrical Insulating Liquids

Method ASTM D 5837


10/131010


PE Brownlee Aqueous C18 250mm x 4.6mm, 5mm

Mezcla de Pesticidas

PE Brownlee C18 50mm x 2.1mm, 1.9mm

4X THROUGHPUT

IMPROVEMENT!


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Brownlee Aqueous C18 150mm x 4.6mm, 5mm

EPA Phenols in water.PE Brownlee C18

50mm x 2.1mm, 1.9mm

2.5X THROUGHPUT

IMPROVEMENT!


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Resumen

La Migracin de un sistema de HPLC a UHPLC, se requiere de un

sistema optimizado, no basta con el cambio de la columna.

La Conversin de un mtodo de HPLC a UHPLC es simple, utilizando la

calculadora de UHPLC disponible.

Incremento en la productividad de hasta 9 veces, al disminuir el tiempo

de anlisis

Menor consumo de fase mvil hasta 93%

Tecnologa Verde

Desarrollo de mtodos / optimizacin es mucho ms rpido debido a que

los tiempo de las corridas son ms corto en UHPLC

Los instrumentos se pagan solos, por el incremento en la productividad y

reduccin de los costos de operacin.

No tenga miedo de un UHPLC


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