DROGAS CON ALCALOIDES DERIVADOS DE TRIPTOFANO

Estupiñan Gonzales, Katherine; Villar Calero, Kaysser; Lévano Oscorima, Lorena; Pinto Loayza, Pamela

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS, LIMA, PERÚ, 2015.FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICACATEDRA DE FARMACOGNOSIA Y MEDICINA TRADICIONALpamela.pinto.loayza@gmail.com

RESUMEN

Introducción: Los alcaloides que contienen el núcleo quinoleínico son derivados del aminoácido triptófano; y aquellos que poseen el núcleo oxindólico tienen como precursores al núcleo indólico al triptófano y triptamina. El primer grupo se encuentra en la corteza de la quina (Cinchona oficcinalis) y el segundo, en la corteza, raíz y hojas de la uña de gato (Uncaria tomentosa L.)Objetivos: Extraer e identificar alcaloides quinoleínicos y con núcleo oxindólico de Cinchona oficcinalis, y Uncaria tomentosa L.Metodología: Extracción mixta básica, análisis cualitativo, cromatografía en capa fina.Conclusiones: Se extrajo e identificó alcaloides quinoleínicos de Cinchona oficcinalis y Uncaria tomentosa L. usando extracciones mixtas y separándolas por cromatografía en capa fina; como la quinina y la especiofilina

Palabras clave: Alcaloides quinoleínicos, quinina, especiofilina, extracción, identificación.

ABSTRACT

Introduction: The alkaloids with quinoleinic core are derived of the amino acid tryptophan; and those with the oxindole nucleus have as precursors to the indole to tryptophan and tryptamine core. The first group was found in the bark of the cinchona (Cinchona oficcinali) and the second in the bark, roots and leaves of cat's claw (Uncaria tomentosa L.)Objectives: Extract and identify quinoleínicos and oxindole alkaloids oficcinali core Cinchona and Uncaria tomentosa L.Methods: Extraction mixed basic, qualitative analysis, thin layer chromatography.Conclusions: It was extracted and identified quinoleínicos alkaloids Cinchona and Uncaria tomentosa L. oficcinali using mixed extraction and separating them by TLC; as quinine and especiofilina

Keywords: quinoleínicos alkaloids, quinine, especiofilina, extraction, identification.

I. INTRODUCCION

Los alcaloides derivados de triptófano constituyen el grupo más numeroso de alcaloides. La mayor parte proceden de la triptamina, producto de la descarboxilacion del triptófano, que se une en casi todos los casos a otras unidades como son las unidades acetato, mevalonato, secologanosido (aldehído monoterpenico) y otras. Podemos por tanto hablar de varios subgrupos dentro de los alcaloides indolicos.

Alcaloides simples, derivados normalmente de la triptamina; alcaloides derivados de la β-carbolina, biogenéticamente formados por condensación de un aldehído o cetoácido con la triptamina; alcaloides procedentes de la ciclación de la triptamina, como la eserina; alcaloides derivados de ergolina, su estructura química corresponde a la unión de un indol con una quinoleina hidrogenada; alcaloides indol monoterpenicos procedentes de la unión de la triptamina con el secologanosido y los alcaloides quinoleinico, son pertenecientes a este grupo.

La quina (Cinchona oficcinalis) es una especie perteneciente al género Rubiaceae, son arboles originarios de la Cordillera Amazonica, las cortezas de

quina contienen como principios activos, quinina, quinidina, cinconina y cinconidina; esta planta se utilizan en el tratamiento de la malaria, la quinidina se utiliza como antifibrilante. La cinconina posee propiedades como un antiagregante plaquetario.

Uncaria tomentosa (uña de gato) es una liana trepadora que crece en bosques con luz abundante de diversos países de America del Sur como Peru. Contiene taninos esteroles y triterpenos. Como principio activo se consideran más de 0,9% de alcaloides indolicos: oxindoles tetraciclicos y pentaciclicos. La uña de gato posee propiedades inmuno estimulantes debidas a sus alcaloides.

En la actualidad se han realizado numerosos estudios de interés farmacológicos, se han comprobado su efecto antiinflamatorio, inmuno estimulante y antitumoral.

II. OBJETIVO:

Extraer e identificar alcaloides quinoleínicos y con núcleo oxindólico de Cinchona oficcinalis, y Uncaria tomentosa L.

III. METODOLOGÌA

1. EXTRACCIÓN DE ESPECIOFILINA Y RINCOFILINA EN CORTEZA DE UÑA DE GATO

Se pesó 3 g de droga seca y pulverizada, se formó una papilla agregando CaO y NH4OH, se llevó a sequedad, luego se extrajo dos veces con cloroformo usando 7,5 ml por cada extracción.

REACCIONES GENERALES PARA IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES

REACTIVO RESULTADO POSITIVO

Dragendorff pp. naranja

Mayer pp. blanco

Bouchardart pp. pardo oscuro

Bertrand pp. blanco

Sonnenchein pp. amarillo verdoso

Popoff Cristales característicos

REACCIONES PARTICULARES DE ESPECIOFILINA Y RINCOFILINA

REACCIÓN

PROCEDIMIENTO

REACCIÓN POSITIVA

Van Urk Mg de MP+ 3 gotas de reactivo de Van Urk

Coloración azul

2. EXTRACCIÓN DE QUININA Y CINCHONINA EN CORTEZA DE QUINA

Se pesó 2.5 g de droga seca y pulverizada, se agregó 50 ml de etanol de 96º, se agito y se llevó a baño maría por 15 minutos.

Se filtró el líquido y se agregó 15 ml de H2SO4 10% y se filtró nuevamente.Se alcalinizo con NaOH hasta llegar a pH 10, finalmente se extrajo dos veces con 7,5 ml de cloroformo.

REACCIONES GENERALES PARA QUININA Y CINCHONINA

REACCION PROCEDIMIENTO REACCION POSITIVA

Taleoquinina Mg de M.P + 4 gotas de H2SO4 (c) +agua de bromo+ NH4OH

Coloración verde

Eritroquinina Mg de M.P + 4 gotas de H2SO4 (c) +agua de +Ferrocianuro de bromo K+ NH4OH

Coloración roja

Tabla 1: Reacciones generales

Tabla 2: Reacciones particulares

Tabla 3: Reacciones particulares

Fluorescencia mg de MP+ 0.5 mL H2O+ H2SO4

Florescencia azul

Ácido láctico Mg de MP + 3 gotas de acido láctico

Coloración amarilla que vira a roja

3. CROMATOGRAFÍA:

Utilizando una mezcla de solventes (Benceno: acetato de etilo: dietilamina (7:2:1)) se arrastra los componentes por su polaridad y su solubilidad en la mezcla de solventes, y midiendo su Rf comparándolo con un estándar se puede identificar los alcaloides presentes en la muestra.

Tabla 4: Cromatografía del extracto de quina

Tabla 5: Cromatografía del extracto de uña de gato

MUESTRA Extracto cloroformo concentrado

Estándar Solución Quinina 0.1%

Solventes Benceno: acetato de etilo:dietilamina (7:2:1)

Revelador Dragendorff

REACTIVO Quina Uña de gato

Dragendorf

. ++ +++

Mayer

++ +++

Bouchardart

++ +++

Bertrand

++ +++

Sonnenchein

++ +++

Popoff

negativo+++( cristales caracteristicos)

Taninos

negativo

negativo

Blanco

MUESTRA Extracto cloroformo concentrado

Estándar Extracto etanólico concentrado

Solventes Benceno: acetato de etilo:dietilamina (7:2:1)

Revelador Dragendorff

RESULTADOS

REACCIÓN RESULTADO

Van Urk

La coloración azul solo se notó ni bien se agregó el reactivo y luego se desvaneció el color

Tabla 7: Reacciones particulares de especiofilina y rincofilina

Tabla 8: Reacciones particulares de quinina y cinchonina

Tabla 6: Reacciones generales

EXT cloroformico

EXT alcoholico

Rf MP ext cloroformico: 0.51

Rf MS ext alcoholico: 0.50

Tabla 10: Cromatografía del extracto de corteza de quina

Rf MP ext de quina: 0.62

Rf MS sol 0.1% de quinina: 0.59

EXT cloroformicoST

Tabla 9: Cromatografía del extracto de uña de gato

REACCION RESULTADO

Taleoquinina

negativoEritroquinina

Fluorescencia

Positivo Ácido láctico

I. DISCUSIÓN

La quinina con ácido sulfúrico forma dos tipos de sales; la sulfato de quinina que es una sal neutra, poco soluble en agua y el sulfato ácido de quinina que es una sal en solución acuosa con pH ácido, muy soluble en agua, es por la formación de estas sales y su reacción con agua de bromo y amoniaco que se fundamenta las coloraciones características de las reacciones de Taleoquinina o daleoquinina1 y Eritroquinina, esta última con la adición de ferrocianuro para generar la coloración roja 2,3. Para obtener resultados positivos es importante realizar la reacción con sumo cuidado.

Las técnicas de reconocimiento de alcaloides se basan en su capacidad, en estado de sal (extractos ácidos), de combinarse con el yodo y metales pesados como bismuto, mercurio, tungsteno formando precipitados. Éste es el fundamento de algunas de las reacciones generales, como por ejemplo, la reacción de Dragendorff que utiliza yoduro de potasio y bismuto. También se puede citar la reacción de Bertrand que utiliza al tungsteno como metal pesado4 y la de Mayer, la cual se emplea para la caracterización no específica de alcaloides. La mayoría de los alcaloides reaccionan dando un precipitado blanco amorfo y cristalino. El precipitado es una sal compleja, y podrá disolverse posteriormente en un solvente menos polar para su identificación. Por tanto, este reactivo se basa en la acidez de los alcaloides en forma de sales debido a que en medios básicos, el reactivo de Mayer no precipita5.

La Fluorescencia azul de la quinina, se intensifica cuando se le añade el ácido sulfúrico. Esto se debe a que la emisión fluorescente observada en una determinada especie está condicionada por la propia estructura molecular de la sustancia y por otros factores dependientes del medio en el que se trabaje. El espectro de fluorescencia de muchos compuestos aromáticos conteniendo grupos funcionales ácidos o básicos es sensible al pH. Los cambios en la emisión de los compuestos de este tipo provienen del número de especies resonantes diferentes que están asociadas con las formas ácidas o básicas de la molécula. Estas formas resonantes proporcionan mayor estabilidad al primer estado excitado produciéndose la fluorescencia a una mayor longitud de onda, 450nm en el caso de la quinina 6.

II. CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la importancia de los alcaloides oxindólicos en el tratamiento del cáncer?

Se ha demostrado que Uncaria tomentosa posee una fuerte actividad inmunoestimulante, y los extractos totales de la planta son más eficaces que los componentes aislados.

Ensayos recientes realizados con extractos del fármaco con un contenido aproximado de 6 mg/g de oxindoles totales (cuantificados mediante HPLC), indican que la Uncaria tomentosa estimula la producción de interleucinas 1 y 6 (IL-1, IL-6) por parte de los macrófagos alveolares en rata, en una relación dosis-dependiente.

También se ha probado que la uña de gato aumenta la actividad

fagocítica de los granulocitos neutrófilos y macrófagos y aumenta el número de monocitos en fases activas de la circulación periférica. No hay alteración en la proliferación de los linfocitos T en condiciones normales, pero sí hay un aumento en presencia de antígenos.

Los alcaloides oxindólicos pentacíclicos (sobre todo isomitrafilina y pteropodina) inducen la liberación del factor regulador de la proliferación de linfocitos en células endoteliales humanas, propiedad no atribuible a los alcaloides oxindólicos tetracíclicos, sino todo lo contrario, pues parecen reducir la actividad de los pentacíclicos de forma dosis-dependiente en estas células. Parece ser que los alcaloides oxindólicos tetracíclicos actúan sobre el sistema nervioso central, mientras que los pentacíclicos lo hacen sobre el sistema inmunitario, y que ambos grupos de compuestos se encuentran en dos quimiotipos distintos de la planta. En vista de que el mecanismo de acción de los alcaloides oxindólicos tetracíclicos y pentacíclicos puede ser antagónico entre sí, es de gran importancia la determinación del quimiotipo mediante el análisis y la adecuada estandarización de la planta7.

2. ¿Cuáles son los posibles adulterantes en muestras de Cinchona oficcinalis, y Uncaria tomentosa L?

La quina podría ser fácilmente adulterada por algunos ejemplares pertenecientes a su familia; por ejemplo: Cinchona calisaya, Cinchona hirsuta Ruiz, Cinchona lancifolia, Cinchona pubescens, Cinchona rugosa.

La uña de gato podría ser reemplazada o adulterada por: Uncaria gambir, Uncaria guianensis, Uncaria rhynchophylla.

III. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Arenas de Castaño I. Contribución al estudio analítico de los alcaloides. [Trabajo de tesis]. Colombia: Revista colombiana de ciencias químico farmacéuticas; 1968.

2. Castillo E, Martinez I. Manual de Fitoterapia. Editorial Elsevier Doyma S.L. Barcelona, 2007. p. 40-45.

3. De La Puerta, G. Química orgánica y general aplicada a la farmacia. Volumen 2. Ciudad de México.

4. González, C. NOCIONES DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL1ª edición. Ed. Universidad de Salamanca. 1999.

5. Bruneton J. Farmacognosia. Fitoquímica. Plantas medicinales. Editorial Acribia, S.A., 2001, p: 775-823.

6. Dewick, P.M. “Medicinal Natural Products – A biosynthetic Approach” 2nd ed. Ed. Jhon Wiley & Sons Ltd. England, 2006.

7. Morris HJ,  Marcos J, Castán L, Bermúdez RC. Plantas y hongos comestibles en la modulación del sistema inmune. Rev Cubana Invest Bioméd. 30 (4): 2011.Ciudad de la Habana.