RESUMEN

Este laboratorio se realizó con el fin de identificar los medios selectivos y diferenciales que permiten el crecimiento de ciertos microorganismos. Para esta práctica se realizaron siembras en los siguientes agares: agar Salado Manitol, agar Baid Parker (BP) , agar Mossel, agar Selectivo para Bacillus cereus, agar Cetrimide , agar Palcam, agar XLD ( Xilosa , lisina , desoxicolato), agar EMB , agar Chromocult, agar Hektoen, agar Makconkey . En cada uno de estos agares se sembraron cuatro microorganismos de los cuales dos eran gram positivos , y dos gram negativos entre ellos están: S.aureus, B.cereus, E.coli, Salmonella, Pseudomonas spp , Listeria spp.

También se realizaron siembras mixtas en caldos como: Caldo LMX, caldo G.C, para cada uno de ellas se trabajaron con los microorganismos anteriormente mencionados.

En cada uno de los agares y caldos selectivos se observó solo el crecimiento de un microorganismo específico, debido a los diferentes componentes de los agares y de los caldos.

INTRODUCCIÓN

Un medio de cultivo es aquella solución que contiene los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos bajo condiciones favorables de temperatura y pH. El medio de cultivo selectivo favorece el crecimiento de organismos pero también inhibe el crecimiento de otros. Este medio contiene compuestos químicos que favorece e inhibe el crecimiento de ciertos microorganismos, este medio también tiene ciertos tintes que provoca que ciertas bacterias fermentadoras de lactosa crezcan y se tiñen de dicho color característico del tinte. El medio de cultivo diferencial es el que facilita la detección de diferentes clases de

bacterias a base de cambios visibles en el medio de cultivo o diferencias en la apariencia de las colonias, este medio también utiliza ciertos tipos de tintes que tiñen ciertos tipos de bacterias.

Manitol Salado Agar.

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de estafilococos.Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productos cosméticos y otros materiales de importancia sanitaria.También, este medio puede utilizarse

para el cultivo de especies halófilas de Vibrio, si no se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas especies pueden no desarrollar.

Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina. Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura. Las colonias sospechosas, se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante, y el rojo fenol es el indicador de pH. Las bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol, producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el manitol.Los estafilococos coagulasa positiva

fermentan el manitol y se visualizan como colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o púrpura.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Extracto de carne

1.0Suspender 111 g de polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos.

  Pluripeptona

10.0

  d-Manitol 10.0

  Cloruro de sodio

75.0

  Agar 15.0

  Rojo de fenol

0.025

pH final: 7.4 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: rojo

Baird Parker

Medio de alta especificidad diagnóstica, selectivo y diferencial para el aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa positiva en

alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. En el medio de cultivo preparado y completo la peptona y el extracto de carne constituyen la fuente de carbono y nitrógeno, el extracto de levadura aporta vitaminas del complejo B, la glicina y el piruvato estimulan el crecimiento de los estafilococos.Este medio de cultivo es selectivo y diferencial debido al telurito de potasio y al cloruro de litio, los cuales inhiben el desarrollo de la flora acompañante. La yema de huevo permite demostrar la actividad lecitinásica.Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro y originan colonias de color grisáceo-negro, y dan reacción sobre la yema de huevo produciendo alrededor de la colonia una zona opaca que a menudo tiene una zona clara mas externa.Se pueden encontrar cepas no lipolíticas, que presentan igual características de colonias pero sin la zona opaca y clara.Se debe confirmar la presencia de S. aureus mediante pruebas bioquímicas.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Peptona de caseína

10.0Suspender 60 g del medio deshidratado en 940ml de agua destilada. Dejar en

Extracto de carne

5.0

reposo 5 a 10 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto. Distribuir y esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras) durante 15 minutos. Enfriar a 45°-50°C y

Extracto de levadura

1.0

Cloruro de litio

5.0

Agar 17.0

Glicina 12.0

Piruvato de sodio

10.0

pH final: 6.8 ± 0.2

Características del medio: Medio preparado: ámbar claro opalescente (sin el agregado de yema de huevo).

MOSSEL AGAR

para el recuento, la detección y el aislamiento de Bacillus cereus en los alimentos

 Este medio de cultivo es altamente adaptados a las propiedades de Bac.Cereus.a) Bac. cereus es manitol negativo. El contenido de manitol de la Malthus Permite Medio Acompañando la diferenciación de la

flora microbiana positivos-manitol que se identifican por un cambio de color del indicador rojo fenol a amarillo .b) Bac. cereus no se ve afectada por concentraciones de polimixina que inhiben la común. Acompañando la flora microbiana (Donovan, 1958). La adición de polimixina es necesario, howeve, si el material de la muestra se sospecha que contiene un alto número de acompañamiento microorganismos .c) Bac. Produce lecitinasa cereus. Los productos de degradación insolubles de lecitina de la yema de huevo se acumulan alrededor de las colonias Cereus para formar un precipitado blanco. Una reacción lecitinasa motorista con seguro insuficiente muy pronto en muchas cepas, las colonias pueden Cereus, por lo cual, a menudo de forma rápida Identificada antes de acompañar a los microorganismos resistentes a polimixina-han tenido la oportunidad

E.M.B. Agar.

Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.

Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento

selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Peptona 10.0 Suspender 36 g del polvo en un litro de agua   Lactosa 5.0

destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos hasta su disolución. Esterilizar en

  Sacarosa 5.0

  Fosfato dipotásico

2.0

  Agar 13.5

  Eosina 0.4

  Azul de metileno

0.065

pH final: 7.2 ± 0.2

Características del medio: Placas preparadas: color púrpura.

MAC CONKEY AGAR.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales

biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. 

Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Peptona 17.0 Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

  Pluripeptona 3.0

  Lactosa 10.0

  Mezcla de sales biliares

1.5

  Cloruro de sodio

5.0

  Agar 13.5

  Rojo neutro 0.03

  Cristal violeta 0.001

pH final: 7.1 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: rojo púrpura

Agar XLD

El medio de Xilosa Lisina Desoxicolato presentado en caja de Petri desechable preparado por BIOBACTER LTDA es un medio moderadamente selectivo utilizado para el aislamiento y diferenciación de patógenos entéricos principalmente especies de Shigella y salmonella. La Xilosa es incorporada al medio ya que todos los patógenos entericos son fermentadores de este carbohidrato, excepto los microorganismos pertenecientes al género Shigellae, lo cual permite con gran facilidad diferenciar las especies pertenecientes a este género. La lisina es adicionada básicamente para permitir la diferenciación de microorganismos del genero Salmonella, ya que sin lisina los microorganismos pertenecientes a este género fermentarían Rápidamente la xilosa y serian indistinguibles de las entero bacterias no patógenas que son fermentadoras de xilosa. Adicionalmente al medio le fue incorporado un indicador (Tiosulfato de sodio y Citrato férrico de amonio) para permitir la identificación de cepas productoras de H2S. El medio también es adicionado de Desoxicolato de Sodio como agente selectivo para inhibir todas las especies de microorganismos Gram positivos. De esta forma el medio es diferencial para las especies de Salmonella y Shigella. El agar XLD se prepara a partir del medio de cultivo deshidratado y tiene la siguiente Composición por litro:

Extracto de levadura 3.0 g, L-lisina 5.0 g, Lactosa 7.5 g, Sucrosa 7.5 g, Xylosa 3.5, Cloruro de Na 5.0g, Desoxicolato de Na 2.5g, Tiosulfato de Na 6.8g, Citrato férrico de amônio 0.80g, Rojo de fenol 0.08g, Agar 15g.

Se pueden presentar colonias rojas falsas positivas producidas por algunas especies de Proteus y Pseudomonas. La incubación en exceso de mas de 48 horas puede presentar resultados falsos positivos.Algunas especies de Salmonella pueden presentar colonias rojas sin centro negro, confundiéndose con especies de Shigella. Algunas especies de Proteus pueden presentar colonias con centro negro sobre este agar.

Bacillus Cereus Selectivo Agar.

Medio diagnóstico selectivo utilizado para el aislamiento y recuento de Bacillus cereus en alimentos.

Bacillus cereus, ha sido implicado en toxoinfecciones alimentarias, particularmente asociado al consumo de arroz contaminado, y también en algunos procesos infecciosos en seres humanos y animales.

En el medio de cultivo, el contenido de peptona es bajo (0.1%), y la adición de piruvato de sodio y emulsión de yema de huevo mejora el aislamiento y esporulación de esta bacteria. Para verificar la utilización del manitol, se usa un indicador de pH, azul de bromotimol. Este medio es selectivo, por el agregado del suplemento para Bacillus cereus

(código B03-606-32) con el que se obtiene una concentración final de 100 U de Polimixina B por ml de medio.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Peptona de carne

1.0Suspender 40,0 g de polvo en 950 ml de agua destilada. Dejar reposar 5 a 10 minutos. Calentar con agitación frecuente hasta completar disolución. Esterilizar por autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C y asépticamente agregar el contenido de 1 vial de suplemento selectivo para Bacillus cereus Britania código B03-606-32 reconstituido con 2 ml de agua destilada estéril. Luego agregar 50 ml de Emulsión Yema de Huevo Britania (código B03-602-61). Mezclar bien y distribuir en placas de Petri estériles.

  Manitol 10.0  Cloruro de sodio

2.0

  Sulfato de magnesio

0.1

  Fosfato disódico

2.5

  Fosfato monopotásico

0.25

  Azul de bromotimol

0.12

  Piruvato de sodio

10.0

  Agar 14.0

pH final: 7.2 ± 0.2

El diagnóstico primario se basa en la morfología y color de la colonia, en la precipitación de la lecitina hidrolizada y en la falta de utilización del manitol por Bacillus cereus. 

Las colonias típicas de B. cereus son crenadas, filamentosas de aproximadamente 5 mm de diámetro a las 24 horas de incubación, y tienen un color turquesa (peacock blue) rodeado por un precipitado de hidrólisis de yema de huevo. A las 48 horas de incubación presentan el color con centro grisáceo.

Estos hallazgos diferencian B. cereus de B. subtilis y B. licheniformis, pero pueden no diferenciar B. cereus de otras especies de Bacillus, tales como B. thuringiensis, B. anthracis, B. mycoides, y en estos casos, será necesario realizar mas ensayos para su identificación.Otros microorganismos que crecen bien en el medio son: Staphylococcus aureus, Serratia marcescens y Proteus vulgaris, los cuales se diferencian de B. cereus por la forma de la colonia, el color, y porque producen una reacción de aclaramiento sobre la yema de huevo, a diferencia del precipitado que produce B. cereus.

Bacillus megaterium y Bacillus coagulans son completamente inhibidos en este medio de cultivo.Se recomienda la realización de un examen microscópico para evaluar la presencia de glóbulos de lípidos en las células vegetativas, debido a que es una prueba rápida y confirmatoria de B. cereus.

Características del medio: Medio preparado: verde manzana

Agar Chromocult

Medio selectivo para la detección de Enterobacter sakazakii en leche en polvo y fórmulas en polvo para lactantes. La base en agar para Enterobacter sakazakii Chromocult® permite un buen crecimiento y formación de color intenso de colonias de E. sakazakii.

La adición de inhibidores y la temperatura de incubación de 44 °C reducen en gran medida el crecimiento de la mayoría de la flora acompañante Gram-positiva y Gram-negativa. E. sakazakii es positiva para ß-D-glucosidasa y crece formando colonias verde-azuladas en este medio. Incubación: 24 ± 2 horas a 44 ± 1 °C. La temperatura de incubación tiene una fuerte influencia sobre la sensibilidad y selectividad de este método.

Temperaturas superiores a 45 °C inhibirán el crecimiento de E. sakazakii. Temperaturas inferiores a 43 °C reducirá la inhibición de las bacterias acompañantes.

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Fácil interpretación en 24 horas. Únicamente Enterobacter sakazakii produce colonias de color turquesa, mientras que las demás bacterias se inhiben o crecen sin color.

Hektoen Entérico Agar.

Este es un medio ideal para el aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella spp., a partir de heces y alimentos.

El medio de cultivo contiene sales biliares que inhiben el desarrollo de la flora acompañante, y 2 sistemas indicadores: (i) azul de bromotimol y fucsina ácida como indicadores de la fermentación de carbohidratos, y (ii) el citrato de hierro como un indicador de la formación de SH2 a partir del tiosulfato.

El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibición de estos microorganismos por las sales biliares está disminuida por la adición de cantidades relativamente elevadas de peptona y carbohidratos.

El medio de cultivo, permite una buena diferenciación de las colonias e inhibe el desarrollo de algunos coliformes y otras bacterias no fermentadoras de lactosa, facilitando así la identificación de Salmonella y Shigella a partir de la muestra.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Proteosa peptona

12.0Suspender 76 g del medio deshidratado en un litro de agua destilada. Dejar reposar de 10 a

  Extracto de levadura

3.0

  Sales biliares

9.0

15 minutos. Calentar y hervir hasta lograr una disolución completa. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE.

  Lactosa 12.0  Sacarosa 12.0  Salicina 2.0  Cloruro de sodio

5.0

  Tiosulfato de sodio

5.0

  Citrato de hierro y amonio

1.5

  Agar 14.0  Azul de bromotimol

0.065

  Fucsina ácida

0.1

pH final: 7.5 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: color verde.

Cetrimide Agar Base.

Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y de otras especies del género.

La fórmula de este medio está desarrollada para favorecer la selección de P. aeruginosa y estimular la formación de pigmentos. Es éste un medio muy semejante al King A, en el cual el cloruro de magnesio y el sulfato de potasio promueven la formación de piocianina, pioverdina y piomelanina de P. aeruginosa. La cetrimida es un detergente catiónico que actúa como agente inhibidor, libera el nitrógeno y el fósforo de las células de casi toda la flora acompañante, aunque inhibe también algunas especies de Pseudomonas.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Peptona de gelatina

20.0Suspender 45,3 g del polvo por litro de agua destilada. Agregar 10 ml de glicerina. Dejar reposar 5 minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto. Distribuir en tubos o frascos y esterilizar en autoclave 15 minutos a 121°C.

  Cloruro de magnesio

1.4

  Sulfato de potasio

10.0

  Agar 13.6

  Cetrimida 0.3

pH final: 7.2 ± 0.2

Características del medio: Medio preparado: ámbar claro, opalescente con precipitado. 

Palcam Agar Base.

Medio de cultivo, que con el agregado de antimicrobianos, permite el cultivo y aislamiento selectivo de Listeria spp.

Medio de cultivo selectivo y diferencial, que contiene los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.Es diferencial para el desarrollo de Listeria spp, debido a que el producto de hidrólisis de la esculina en presencia de iones Fe3+ forma un compuesto fenólico de color negro.

Es selectivo para Listeria spp., por el agregado del Suplemento Selectivo para Palcam Agar Base, debido a que contiene antibióticos que inhiben total o parcialmente el desarrollo de la flora acompañante presente en la

muestra y permiten la recuperación de Listeria spp.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Columbia Agar Base

39.0Suspender 33 g de polvo en 500 ml de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos. Mezclar y calentar con agitación frecuente. Llevar a ebullición para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.Enfriar a 50 ºC y agregar asépticamente el contenido de un vial Suplemento Selectivo para PALCAM Agar base, reconstituido según instrucciones. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles.

D-Glucosa 0.5D-Manitol 10.0Esculina 0.8Citrato de Hierro y amonio

0.5

Rojo fenol 0.08Cloruro de litio

15.0

pH final: 7.2 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: rojo.

GC Agar Base.

Medio de cultivo empleado como medio basal para la preparación del medio Thayer-Martin original o

modificado, y como agar chocolate con o sin enriquecimiento.Es útil para la recuperación de N. gonorrhoeae, N. meningitidis y otros microorganismos exigentes en sus requerimientos culturales.

Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla en partes iguales de peptona de carne y peptona de caseína) es la fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el almidón soluble absorbe sustancias tóxicas indeseables para el desarrollo de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman un sistema buffer y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. 

Este medio de cultivo, puede ser suplementado con otros nutrientes o con antimicrobianos, lográndose un medio mas enriquecido o selectivo según el aditivo.

El agar base GC, en combinación con hemoglobina y el suplemento estéril de enriquecimiento Britalex (B03-600-21), se usa para el aislamiento de microorganismos exigentes. 

Si se desea un medio selectivo para N. gonorrhoeae, se puede además añadir mezcla antimicrobiana VCNT (B03-605-21) para inhibir el desarrollo de microorganismos Gram positivos y Gram negativos, excepto N. gonorrhoeae.

Fórmula (en gramos por litro)Pluripeptona 15.0Almidón soluble 1.0Fosfato dipotásico 4.0Fosfato monopotásico 1.0Cloruro de sodio 5.0

Agar 15.0pH final:7.2 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: color chocolate. 

Caldo L.M.X

Este medio está recomendado para el recuento de coliformes totales y fecales, por la técnica del número más probable. 

En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliforme, la fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

  Bilis de buey deshidratada

20.0Suspender 40 g del polvo deshidratado por litro de agua destilada. Disolver y distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham. Preparar además, el medio a doble

  Lactosa 10.0  Peptona 10.0  Verde brillante

0.0133

concentración. Esterilizar en autoclave a

pH final: 7.2 ± 0.2

Características del medioMedio preparado: verde esmeralda, transparente

Metodología

Cajas de petri:

En el laboratorio realizamos la práctica de medios selectivos y diferenciales, para este se utilizaron agares tales como:

Agar salado manitol Agar baird Parker (BP) Agar mossel Agar selectivo para bacillus

cereus Agar XLD (xilosa, lisina,

desoxicolato de sodio) Agar EMB Agar Chromocult Agar Hektoen Agar Macconkey

Y en cada medio se realizaron siembras con los siguientes microorganismos:

S.aureus (Gram +) Bacillus cereus( Gram +) E.coli (Gram - ) Salmonella (Gram -)

En el agar Cetrimide se realizó la siembra con los microorganismos:

S.aureus (Gram +) Bacillus cereus (Gram +) Seudomonas spp (Gram -) E.coli (Gram -)

En el agar Palcam se realizó la siembra con los microorganismos:

Listeria spp (Gram +) S.aureus (Gram +) Pseudomonas spp (Gram -) E.coli (Gram -)

Para realizar las siembras se dividió la caja de Petri en cuatro secciones la cual en cada una de ellas se sembró un microorganismo diferente por agotamiento, para realizar esta siembra se esterilizo el asa microbiológica, llevándola al mechero hasta el rojo vivo, seguidamente se flameo la boca del tubo que contenía el microorganismo y se tomó el pool correspondiente a inocular en el agar de la sección respectiva.

Tubos de ensayo:

En el caldo L.M.X se realizó siembras con los siguientes microorganismos:

E.coli Salmonella spp Pseudomonas S. aureus

En el caldo G.C se realizó siembras con los siguientes microorganismos:

S.aureus B.aureus Listeria E.coli

Para realizar las siembras en tubos de rectos se realizó una siembra mixta, en la cual se llevó a esterilizar el asa recta en la llama del mechero hasta el rojo vivo, respectivamente se flameo la boca del tubo, tomando el inoculo con el asa recta del pool microbiano.

Resultados:

Antes Después

Imagen #1 agar salado manitol hubo crecimiento

de S.aureus con color amarillo, B.cereus color al medio rosado, los otros dos microorganismos no crecieron.

Antes Después

Imagen # 2 agar Baird Parker hubo crecimiento de S.aureus con un viaje negro, los demás microorganismos no crecieron.

Antes Después

Imagen # 3 Agar mossel hubo crecimiento de B.cereus con un color rosado anaranjado y S.aureus de color dorado.

Antes Después

Imagen # 4 Agar selectivo para Bacillus cereus hubo crecimiento de B.cereus coloración verde azulado con un anillo blanco, aparte de esto el microorganismo S.aureus crecio

Antes Después

Imagen # 5 Agar Cetrimide hubo crecimiento de Pseudomonas spp con coloración verde fosforescente.

Antes Después

Imagen # 6 Agar Palcam hubo crecimiento de

Listeria spp con color negro, crecimiento de S.aureus de color dorado y crecimiento de E.coli

Antes Después

Imagen # 7 Agar XLD (Xilosa,Lisina,Desoxicolato) hubo crecimiento de Salmonella spp con coloración negro y Crecimiento muy mínimo de E.coli con un viaje

amarillo.

Antes Después

Imagen # 8 Agar EMB hubo crecimiento de E.coli con coloración azul oscuro y brillo verde metálico

Antes Después

Imagen # 9 Agar Chromocult hubo crecimiento de E.coli con pigmento azul-violeta, crecimiento mínimo de Salmonella spp. de color traslucido.

Antes Después Imagen # 10 Hektoen hubo crecimiento de E.coli con pigmentación rosada, crecimiento de Salmonella spp con pigmentación negra.

Antes Después

Imagen # 11 Agar Makconkey hubo crecimiento de E.coli con coloración fucsia y crecimiento de Salmonella sin ninguna coloración.

Antes Después

Imagen # 12 Caldo G.C cada uno de los tubos tomaron un color mucho más amarillo que normal

Antes Después

Imagen # 13 Caldo LMX hubo crecimiento de E.coli con un cambio de coloración de trasparente a un color azul verdoso

ANALISIS DE RESULTADOS

Imagen #1 agar salado manitol

hubo crecimiento de S.aureus con color amarillo, B.cereus color al medio rosado, porque la bacteria s aureus fermenta el manitol y vira el color amarillo.

Imagen # 2 agar Baird Parker

hubo crecimiento de S.aureus la cual redice de telurito a teluro y origina las colonias de color negro y alrededor de ellas una zona opaca

Imagen # 3 Agar mossel

hubo crecimiento de B.cereus este no se ve afectado por la polimixina con un color rosado anaranjado

Imagen # 4 Agar selectivo para Bacillus cereus

hubo crecimiento de B.cereus con un viraje de azul el cual contiene una cantidad mayo de polimixima e inhibe los demás microorganismos

Imagen # 5 Agar Cetrimide

este medio produce la formación de pigmentos el cual libera nitrógeno el cual produjo el crecimiento de Pseudónimas spp con coloración verde fosforescente.

Imagen # 6 Agar Palcam

la Listeria spp es uno de los microorganismos el cual hidroliza la esculina en presencia de iones férricos lo cual permite diferenciarse con un color negro.

Imagen # 7 Agar XLD (Xilosa, Lisina, Desoxicolato de sodio)

Este medio es preciso para aquellas bacterias Gram (-) y fermentadores de xilosa lisina con una producción de ácido sulfhídrico con el cual el medio las colores de color negro.

Imagen # 8 Agar EMB

este medio es selectivo para las bacterias Gram (+) y algunas Gram (-) los cuales utilizan la lactosa sacarosa el cual toma una coloración azul

Imagen # 9 Agar Chromocult

Hubo crecimiento de E.coli con pigmento azul-violeta, crecimiento el cual contiene leche y es capaz de fermentarlo

Imagen # 10 Hektoen

Hubo el medio contiene una fermentación por el microorganismo de E.coli con pigmentación rosada, crecimiento de Salmonella spp con una formación de SH2 el cual da una pigmentación negra.

Imagen # 11 Agar Makconkey

el medio es utilizado para bacterias Gram (-) y requerimientos oxigenicos facultativos la lactosa es el hidrato de carbono el cuál fermenta la lactosa y produce un color de fucsia.

Imagen # 12 Caldo G.C

Cada uno de los tubos tomó un color mucho más amarillo que normal el cual quiere decir que no hay crecimiento el ellos.

Imagen # 13 Caldo LMX

El medio presenta peptona los microorganismos que crecen es este medio son los coliformes los cuales fermentan la latosa contiene

CONCLUSIONES

Se puede concluir que mediante la realización de la práctica, se logró familiarizar con el uso y función de los medios especializados tales,( Agar salado manitol, Agar baird Parker (BP),Agar mossel, Agar selectivo para bacillus cereus ,Agar XLD (xilosa, lisina, desoxicolato de sodio),agar EMB, agar Chromocult, agar Hektoen, agar Macconkey) mediante el inoculo de microorganismos Gram positivos (S. aureus, B cereus, listera) y Gram negativos (E. coli, salmonella spp, pseudomonas ) obteniendo diferenciaciones de cada cultivo, teniendo en cuenta los componentes que hacen parte de dicho cultivos que permiten dicha diferenciación.

De igual manera, al momento de realizar el recuento, se logró identificar la presencia de gas en las cajas de Petri con coliformes, esto debido a las reacciones bioquímicas que se dan, en este caso, la fermentación de la lactosa en ácido láctico y gas. Esto permitió reconocer algunas de

las características metabólicas de ciertos microorganismos en medios de cultivos especializados.

Bibliografía

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