INGENIO Revista Facultad de Ingeniería de la … · la condición de época de lluvia en la zona,...

Facultad de Ingeniería de la Universidad Libre

INGENIO

Revista

Facultad de Ingeniería - Centro de Investigaciones

Revista No. 13 año 11 de 2014 - ISSN 1692-0767

13

1

DETERMINAR LA CAPACIDAD DE CARGA DEL EMBALSE DEL GUÁJARO,

COMO CONDICIÓN ESPECIAL PARA DECIDIR LA VIABILIDAD AMBIENTAL

DE CULTIVOS INTENSIVOS DE PECES EN JAULAS Y ESTABLECER LAS

ZONAS DONDE SE PUEDE DESARROLLAR ESTA ACTIVIDAD

Ernesto Torres Quintero1

Resumen

En desarrollo del Proyecto Gestión Integral del Recurso Hídrico, en la partes de Embalses se presenta un resumen de investigación en el tema de Embalses, al trabajo de Consultoría realizada por la Firma AITEC a un contrato realizado con la CORPORACIÓN AUTÓNOMA REGIONAL DEL ATLÁNTICO – CRA. El uso de jaulas y corrales para la cría de peces en aguas continentales constituye un método cada día más popular de piscicultura que entraña costos iniciales relativamente bajos y requiere el empleo de tecnologías y métodos de gestión relativamente sencillos. Estos métodos de cultivo que se realizan directamente en masas de agua difieren de las operaciones piscícolas basadas en tierra, como la cría en estanques y canales, por el hecho de constituir sistemas abiertos, en los que pueden producirse interacciones entre la unidad piscícola y el medio ambiente inmediato con pocas restricciones. A menudo, además, se practican en masas de agua de propiedad pública y utilizada con múltiples fines. Para la realización del estudio, el cual tiene por objeto: “Determinar la capacidad de carga del embalse del Guájaro, como condición especial para definir la viabilidad ambiental de cultivos intensivos de peces en jaulas y establecer las zonas donde se puede desarrollar esta actividad”, se ha realizado la recopilación de información en entidades como INDERENA, ICA, UNIVERSIDAD DEL NORTE, CRA, CARDIQUE, el IDEAM, ICA, Ministerio de Ambiente y Desarrollo Territorial, INCODER, entre otros. Adicional a lo anterior, se analizaron estudios realizados sobre el tema como se encuentra en la bibliografía. Se realizó el primer muestreo de agua en los puntos de interés del Embalse el Guájaro teniendo en cuenta la condición de época de lluvia en la zona, la segunda toma de muestras se desarrolló en el mes de enero de 2010, teniendo en cuenta las condiciones de sequía en la zona del embalse.

1 Ingeniero Civil Ernesto Torres Quintero Magister en Recursos Hidráulicos, Grupo de investigación

TECNOAMBIENTAL.

2

Abstract

Developing the Integrated Management Project Water Resources in parts of Reservoirs a summary of research presented in the subject of reservoirs, the consulting work done by the AITEC Signing a contract made with the Regional Autonomous Corporation ATLANTIC - CRA. The use of cages and pens for breeding fish in inland waters is an increasingly popular method of fish farming that involves relatively low start-up costs and requires the use of technologies and management methods relatively simple. These farming methods that are made directly into water bodies differ from land-based fish farming operations as breeding ponds and canals, by the fact that it is open system in which interactions can occur fish unit and the average immediate environment with few restrictions. Often also they practiced in water bodies publicly owned and used for multiple purposes. Palabras Claves

Embalses, Gestión Integral de Recurso Hídrico, piscicultura

Key words:

Reservoirs, Integrated Water Resource Management, fish farming

Introducción Varios estudios han demostrado que las jaulas y corrales, con sus estructuras, pueden afectar el carácter polivalente de las masas de agua, absorbiendo espacio que podría utilizarse para la pesca, el recreo o la navegación e interfiriendo con las corrientes y con el transporte de sedimentos. En algunos casos, los trabajos piscícolas han contribuido a introducir o a atraer al lugar predadores y otros organismos patógenos. Las repercusiones más importantes, sin embargo, se deben al método de cultivo utilizado. Las jaulas y corrales ofrecen varias ventajas respecto a otros métodos de cultivo, Dado que se colocan en masas de agua ya existentes y requieren inversiones de capital relativamente bajas y tecnología sencilla, gozan de gran popularidad entre los piscicultores y los extensionistas y en los programas de desarrollo. Además de utilizarse sobre todo para producir a bajo costo proteínas de buena calidad. Por otro lado, aumenta la preocupación por el impacto que estos métodos de piscicultura tienen en el medio ambiente. Se estima que el cultivo intensivo acelera la eutroficación, y a las elevadas promesas iniciales del cultivo extensivo en jaulas y corrales han seguido cifras de producción siempre menores.

3

Metodología Para la realización del estudio, el cual tiene por objeto: “Determinar la capacidad de carga del embalse del Guájaro, como condición especial para definir la viabilidad ambiental de cultivos intensivos de peces en jaulas y establecer las zonas donde se puede desarrollar esta actividad”, se ha realizado la recopilación de información en entidades como INDERENA, ICA, UNIVERSIDAD DEL NORTE, CRA, CARDIQUE, el IDEAM, ICA, Ministerio de Ambiente y Desarrollo Territorial, INCODER, entre otros. Adicional a lo anterior, se analizaron estudios realizados sobre el tema como se encuentra en la bibliografía. Se realizó el primer muestreo de agua en los puntos de interés del Embalse el Guájaro teniendo en cuenta la condición de época de lluvia en la zona, la segunda toma de muestras se desarrolló en el mes de enero de 2010, teniendo en cuenta las condiciones de sequía en la zona del embalse, posteriormente se realizó muestreo en Invierno, se realizó discusión de resultados analizando distribución temporal y espacial normatividad vigente, verificando si existía contaminación o no y así verificar si es probable colocar más jaulas de peces o ya excedía la Carga Máxima Probable.

Embalse de Guájaro A partir del uso de la ciénaga de Guájaro se conformó este embalse en el Departamento del Atlántico. Entre 1955 y 1956 construyeron un dique de 70 kilómetros de longitud para control de inundaciones y se desecó parte de una ciénaga manteniendo una superficie de agua de 16.000 hectáreas que se denominó embalse de Guájaro la longitud N-S es de 22 kilómetros y el ancho máximo 8 kilómetros, el cual almacena unos 410 Mm³, de los cuales 294 son embalse útil, en la cota 4.80 m.s.n.m. El embalse fue formado al modificarse una gran área del plano inundable de la cuenca del río Magdalena, por medio de la construcción de un terraplén de 11 kilómetros de longitud en los cauces de pequeñas ciénagas. Se construyó la nueva compuerta, los canales y bombas para el distrito de riego, cediendo la lucha campesina por la tierra. Información técnica del embalse Ubicación: Depto. del Atlántico, Municipio de Repelón. Área de superficie (ha) 16,000 Volumen (Mm3) 400 Volumen útil (Mm3) 230 Temperatura en la superficie 31°C Hacia el año 1965, el INCORA continuó con los programas de desecación de ciénagas y reforma agraria adjudicando a cada familia para riego de 6 a 8 hectáreas en secano para la agricultura y desde 1967 se vienen adjudicando de 12 a 15 hectáreas para la ganadería.

4

El embalse al modificarse formó una gran área del plano inundable de la cuenca del río Magdalena, por medio de la construcción de un terraplén de 11 km de longitud en los cauces de pequeñas ciénagas como Ahuyamal de 400 ha, Cocordo 140 ha, Cabildo 1,025 ha, Quintanilla 35 ha, Zarzal 110 ha, Playón de Hacha 420 ha, Cortadera 35 ha, Limipia 1,420 ha, Gallitos 225 ha, Puerco 190 ha, Manzanilla 40 ha, Verde 70 ha, Quemado 35 ha, y el Guájaro 4,780 ha, que en total sumaban 8,925 ha, y que en épocas de inundaciones daban lugar a unas 10,000 ha aprovechables para la pesca, cambiándose por un solo embalse, el Guájaro, con cerca de 16,000 hectáreas que tiene como función primordial el suministro de agua a toda la zona comprendida dentro del distrito de riego, actividad contradictoria en la mayoría de los casos con el desarrollo de la pesca.

Análisis capacidad máxima permisible en el embalse el Guájaro De acuerdo a la información recopilada en las visitas junto con la información de las empresas gestoras de esta actividad, se evaluó la cantidad de peces existentes en el embalse, las condiciones fisicoquímicas que actualmente presenta el embalse de acuerdo a los análisis de laboratorio de las tomas realizadas en Noviembre 11 y 12 de 2009, época de lluvia y Enero 26 de 2010, época de sequía, una vez analizada la información se describen a continuación los resultados tanto de la toma de época de lluvia como de época seca. Se identifica la proyección anual de peces de acuerdo a los municipios y asociaciones existentes en la zona, los resultados se presentan en los siguientes capítulos. En la recopilación de la información primaria y secundaria se tiene que en el embalse el Guájaro existen 12 organizaciones entre Asociaciones y Productores de tilapia, los cuales se encuentran ubicados en los municipios de Repelón, Aguada de Pablo y Sabana larga, siendo los mayores las ubicadas en el municipio de Repelón; Actualmente se encuentran sembradas 334 jaulas en el municipio de Repelón que hace referencia a 339.000 peces por año y ocupan un área de 2.112 m3. En Aguada de Pablo se encuentran sembradas 36 jaulas que hace referencia a 60.000 peces por año y ocupan un área de 216 m3. En Sabana larga se encuentran sembradas actualmente 40 jaulas que hacen referencia a 12.000 peces por año y ocupan un área de 240 m3.

5

Foto 1. Jaula de Peces en el Municipio de Repelón.

Fuente: Autor

Foto 2. Jaula para siembra de Peces Pequeños ubicada

dentro de otra Jaula en el Municipio de Repelón. Fuente: Autor

Resultados análisis físicos químicos realizados por la consultoría época de lluvia De la visita realizada a la zona objeto de estudio se identificó la información que se presenta en la tabla 1. Esta información permite hacer una comparación de la calidad del agua de acuerdo a la información recopilada de las entidades como el ICA, Inderena entre otros. A continuación se presentan los datos obtenidos en campo, del monitoreo de agua realizado en el Embalse del Guájaro.

6

Tabla 1. Parámetros tomados en el embalse el Guájaro.

Nº DEL PUNTO

COORDENADAS HORA pH

(und.) O.D.

(Mg/l)

TEMP. MUESTRA

(ºc)

TEMP. AMBIENTE

(ºc) OBSERVACIONES

Punto nº 1 Compuertas

10°24´36,15"

11:35 AM

6,63 4,3 29,7 34

Según Habitantes de la zona las compuertas las abrieron hace 3 días. Nivel 4,11

075°04´26,12"

Punto nº 2 10°27´29,66 N 12:12

M 7,28 3,4 31,1 34,5 No hay jaulas

075°06´45,55 O

Punto nº 3 Repelón

10°29´34,94 N 12:33 7,76 3,6 32,8 34,5

17 jaulas de peces 075°06´43,62 O


10°28´26 95 N

12:55 7,62 3,6 31,8 34,6

30 jaulas de peces. Mojarra roja (entrada jaulas)

75° 06´02,93 O


10°28´44,28 N 13:16 7,56 3,6 33,7 34,9

Varios cultivos de peces (salida jaulas)

75°06´02,93 O

Punto nº 6 Rotinet

10°31´36,98 N 13:40 7,54 3,2 34,3 34,2

25 jaulas de peces (sabana Grande)

075° 04´44, 070 O

Punto nº 7 Agua de Palo

10°31´26,14 N 14:19 7,25 3,9 34,2 34 No hay jaulas

075°00´33,4

Punto nº 8 La Peña

10°34´42,71 N 7,54 3,4 33,4 31

75°01´21,31 O

Fuente: La Consultoría De la anterior información se obtiene lo siguiente: La temperatura promedio oscila entre 31 °C y 34.9 °C encontrándose el valor mayor de 34.9°C cerca al municipio de Repelón, muestra tomada al medio día. Los valores de oxígeno disuelto varían entre 3.2 y 4.2 mg/L, cuando los valores son superiores a 4.2, las condiciones de oxigenación en el cuerpo de agua mejoran, facilitando los procesos de auto depuración disminuyendo la eutroficación por la contaminación; se puede determinar que el punto 1 correspondiente a compuertas, presenta un adecuado nivel de oxígeno, en cuanto a

7

los siete puntos restantes se evidencia que los niveles de oxígeno se encuentran por debajo del nivel mínimo permisible.

Mapa 1. Estaciones de referencia en el embalse del Guájaro.

8

El valor de PH varía entre 6.63 y 7.54. El valor promedio de profundidad de aguas del Embalse fue de 1.5 metros. Los cultivos de peces encontrados en el embalse durante el recorrido realizado, corresponden a Tilapia Roja (también llamada Mojarra Roja). Análisis comparativo de resultados fisicoquímicos2 objetivos de calidad del canal del dique Establecer los siguientes criterios de calidad con sus respectivos estándares, los cuales serán monitoreados año tras año, de manera que se pueda establecer una relación entre calidad del tramo o cuerpo de agua y la variación de las cargas contaminantes DBO5 y SST aportadas por los usuarios del cuerpos de agua como receptor de vertimientos puntuales. Los parámetros seleccionados son: OD, DBO5, SST, PH, TEMPERATURA, COLIFORMES FECALES, OLORES OFENSIVOS Y SUSTANCIAS DE INTERES SANITARIO.

Tabla 2. Objetivos de calidad para las cuencas hidrográficas de la jurisdicción para el quinquenio 2005-2010.

SISTEMAS Y PARÁMETROS

CANAL DEL DIQUE MUESTREO UNI-

NORTE 2009

OBJETIVO DE CALIDAD CONSUMO HUMANO

OD(mg/l) >4.0 mg/l 4,16 mg/l

DBO5(mg/l) <5.0 mg/l 3,9 mg/l

SST(mg/l) <1000 mg/l(No perceptibles) 310 mg/l

PH (mg/l) 7-9 7-10 mg/l

Temperatura(°C) De 7-9(°C) sobre la t(ambiente)

29-36 (°C)

Coliformes fecales NMP/100ml

<2.000 NMP/100 <2.000 NMP/100

Olores Ofensivos Ausentes Ausentes

Fuente: Resolución 000005, 1 de enero de 2006 CRA Oxígeno Disuelto (OD)

De acuerdo a los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009, Se puede determinar que las concentraciones para el año 2009 de oxígeno disuelto (OD) se encuentran en 310 mg/l, esto indica que se encuentra dentro del parámetro establecido por la CRA ya que este debe ser <1000m/l, aunque es de anotar que la aportación de sedimentos se encuentra en una tasa de 204.000 y 681.000 ton/año, considerando caudales entre 75 y 125 m3/s a través de las compuertas, por tal motivo se debe llevar un control riguroso en el manejo de las compuertas.

2 Resolución 000005, 1 de enero de 2006 CRA

9

DBO5 De acuerdo a los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009, Se puede determinar que las concentraciones para el año 2009 en el punto del Canal del Dique de DBO5, se encuentra en 3.9 mg/l, esto indica que se encuentra dentro del parámetro establecido por la CRA, ya que no se superan los 5 mg/l representando de esta manera un buen indicador para aguas limpias. Sólidos suspendidos totales (SST) De acuerdo a los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009. Se puede determinar que las concentraciones de sólidos suspendidos totales (SST) se encuentran por encima de 4 mg/l, esto indica que se encuentra dentro del parámetro establecido por la CRA, encontrando un buen indicador de recambio y oxigenación de las aguas. PH. De acuerdo a los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009. Se puede determinar que las concentraciones para el año 2009 de (pH) se encuentra en un promedio de (7-10) esto indica que no se encuentra dentro del parámetro de los objetivos de calidad. La sensibilidad de este parámetro está dada por la descarga de aguas residuales. Temperatura (°C) Se puede determinar que el parámetro de (T), es la adecuada ya que para el año 2009 se encuentra en un promedio de 29-36 °C y la temperatura media anual es de 26 °C. Con medidas máximas registradas de 29.9°C y mínimas de 25°C, entre octubre y noviembre. La climatología del departamento varía entre periodos de grandes lluvias y sequías. Coliformes Fecales De acuerdo a Los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009, Se puede determinar que el parámetro de (E. COLI) para el año 2009 se encuentra en un promedio de <2.000 NMP/100 esto indica que está dentro de los objetivos de calidad, indicando que no hay contaminación fecal. Olores Ofensivos De acuerdo a los objetivos de calidad y los parámetros de calidad de la Universidad del Norte para el año 2009. Se puede determinar que no hay olores ofensivos que afecten la calidad del aire.

10

Resultados análisis físicos químicos realizados por la consultoría en época de sequía (enero 2010) De la visita realizada a la zona objeto de estudio del embalse el Guájaro se tomó muestras de laboratorio correspondientes al periodo seco, (enero de 2010), por el Laboratorio Microbiológico de Barranquilla, en los sectores de Repelón, Aguada de Pablo, Villa Rosa y las compuertas y en el centro del embalse así: Resultados de análisis microbiológico Barranquilla

Tabla 3. Resultados del Segundo muestreo realizado el 26 de enero de 2010. Embalse del Guájaro –Atlántico.

DETALLE

PUNTOS DE MUESTREO

1-LA PEÑA

2-AGUADA DE PABLO

3-JAULAS REPELÓN

4-PORVENIR

5-MITAD DEL GUÁJARO

NMPColiformes 2 2 2 2 2

DBO5 mg/l 6,46 5,12 3,85 4,47 4,75

DQO mg/l 32 25,6 19,2 22,4 22,4

Fosforo mg/l 0,27 0,31 0,05 0,06 0,24

Nitratos mg/l 0,33 0,34 0,05 0,14 0,34

Nitritos mg/l 0,01 0,02 0,01 0,01 0,01

Nitrógeno Amoni mg/l

ND ND ND ND ND

Nitrógeno Total 1,4 1,29 0,84 1,12 1,23

O.D mg/l 7 6 7 7 6

PH unidades 8,01 7,96 7,32 7,66 7,42

Temperatura 30,1 30,6 31,2 30,8 31,2

Fuente: La Consultoría En la tabla 3 se puede observar que los valores de DBO5 en mg/L para esta temporada seca varían entre 6.5 y 5.8 mg/l, presentándose los mayores valores en las estaciones 1 y 2 los cuales hacen referencia a la estación la Peña y Aguada de Pablo, adicionalmente los menores valores se presentan en las estaciones 3 ,4 y 5 correspondientes a las estaciones, jaulas de Repelón, Porvenir y el centro del Guájaro, aquí se puede evidenciar que se sobrepasan los límites de los objetivos de calidad, los cuales deben ser < 5mg/l. En la tabla 3 se encontraron valores promedio de 24.32 mg/l, identificando el mayor en la estación de la peña el cual es de 32 mg/l y el menor en la estación Aguada de Pablo el cual pertenece a 9.2 mg/l.

11

De la tabla 3, Se puede observar que el fósforo se encuentra en un promedio de 0.18 mg/l, encontrando que ningún punto, sobrepasa el valor de 0.5mg/l, siendo no representativo, no afecta la calidad del agua. En la tabla 3, se puede observar que los valores de Nitratos varían entre 0.35 y 0.34, encontrando que las concentraciones en las estaciones no superan el 1.0mg/l y el valor permisible va hasta los 50mg/l, lo cual indica aguas con buena calidad. En la tabla 3, se puede evidenciar que los nitritos se detectaron en un promedio de 0.01 mg/l, el cual indica que no hay afectación en la perturbación del ecosistema. Se puede evidenciar que el punto que sobresale es el punto 2, con 0.02 mg/l de igual manera, la calidad del agua sigue siendo de buena frente a nitritos. En la tabla 3, se puede evidenciar que el Nitrógeno tiene un promedio de 1.17mg/l, encontrando que el mayor valor se encuentra en la estación de la Peña, y el valor menor en las jaulas ubicadas en el municipio de Repelón, este parámetro constituye el aumento de material flotante en el embalse ocasionando eutrofización en las aguas. En la tabla 3, se puede observar que los valores de oxígeno disuelto varían entre 7 y 6 mg/l, se puede evidenciar que lo niveles de oxígeno disuelto se encuentran en niveles mucho más altos lo que indica que la calidad del agua es buena. En la tabla 3, se observa que los valores de pH en el agua se encuentran en un promedio de (7.6 unidades), se encuentra que el pH no supera el límite de 7.6 unidades el cual demuestra que el pH se encuentra en excelentes condiciones, de acuerdo a Los objetivos de calidad y los parámetros de calidad se puede determinar que el promedio es de <2.000 NMP/100 esto indica que se encuentra dentro de los objetivos de calidad, indicando que no hay contaminación fecal. Metodología de evaluación de la capacidad de carga en el embalse el Guájaro. El análisis de capacidad de carga se puede determinar de acuerdo a los parámetros fisicoquímicos de DBO5 y los parámetros de calidad del OD obtenidos por AITEC mediante muestreos de laboratorio, y de acuerdo a la comparación de datos obtenidos por el “Estudio y evaluación del impacto de la actividad camaronicultivo en agua dulce sobre la capacidad de carga del embalse el Guájaro”. Partiendo de la identificación de cada una de las zonas de estudio y los resultados fisicoquímicos, se relacionan con los parámetros utilizados en la siguiente tabla:

12

Tabla 4. Resultado consolidado del cálculo de la CMP para las nueve estaciones.

MÁXIMA MÍNIMA MÁXIMA MÍNIMA

1 30,5 6,5 3,0 4,36 6 11,55 4,10 7,2 2,6

2 31,0 4,7 6,5 4,86 2 10,12 3,56 6,3 2,2

3 31,0 5,9 6,4 4,04 3 12,23 4,30 7,6 2,7

4 31,2 9,6 7,0 4,25 7 11,65 4,08 7,3 2,5

5 31,7 7,7 7,2 4,52 6 10,85 3,77 6,8 2,3

6 30,9 7,7 6,9 4,48 6 11,13 3,92 6,9 2,4

7 30,6 8,0 8,3 4,04 5 12,37 4,38 7,7 2,7

8 30,7 9,5 7,4 4,32 7 11,59 4,09 7,2 2,5

9 30,8 10,0 5,9 4,67 8 10,65 3,76 6,6 2,3

ESTACIÓN TEMPERATURADBO5

(mg/L)

OXIGENO

DISUELTO

(mg/L)

CARGA MÁXIMA PERMITIDA

COMO DBOu (mg/L)

CARGA MÁXIMA PERMITIDA

COMO DBO5 (mg/L)

OXIGENO

DISUELTO

REQUERIDO

(mg/L)

TIEMPO DE

RECUPERACIÓN

(d)

Fuente: Estudio de evaluación del impacto de la actividad de camaronicultura en agua dulce sobre la capacidad de carga del embalse el Guájaro. Se realiza la siguiente tabla para determinar cuál es la capacidad de carga permisible; ya sea máxima o mínima para cada una de las estaciones de estudio, teniendo en cuenta los niveles de DBO5, OD, OD requerido, Temperatura, Tiempo de recuperación en días y analizando que parámetros se encuentran dentro o fuera del rango. Tabla 5. Análisis de los resultados fisicoquímicos tomados en noviembre, comparados con la

capacidad de carga máxima permisible.

Puntos De Muestreo

Tem °C

R / DBO5 mg/l

R / OD mg/l

C.M.P(DBOU) mg/l

C.M.P(DBO5) mg/l

O.D, REQ (mg/l)

T DE REC (d)(mg/l) Max Min Max Min

Punto 1 (compuertas)

29,7 2,68 4,3 11,55 4,1 7,2 2,6 4,36 6

Punto 2 31,1 2,33 3,4 10,12 3,56 6,3 2,2 4,86 2

Punto 3 (Repelón)

32,8 2,6 3,6 12,23 4,3 7,6 2,7 4,04 3

Punto 4 (Repelón)

31,8 2,62 3,6 11,65 4,08 7,3 2,5 4,25 7

Punto 5 (Repelón)

33,7 2,3 3,6 10,85 3,77 6,8 2,3 4,52 6

Punto 6 (Rotinet) 34,3 3 3,2 11,13 3,92 6,9 2,4 4,48 6

Punto 7 (Aguada de Pablo)

34,2 4,55 3,9 12,37 4,38 7,7 2,7 4,04 5

Punto 8 (La Peña)

33,4 2,83 3,4 11,59 4,09 7,2 2,5 4,32 7

Punto 9 (Luruaco)

28,9 5,53 3,4 10,65 3,76 6,6 2,3 4,67 8

Fuente: La Consultoría

13

Análisis de resultados primer muestreo: PUNTO 1 COMPUERTAS: La DBO5 obtenida de laboratorio es de 2.68mg/l, este valor se encuentra próximo al rango mínimo de capacidad de carga permisible, con respecto a los valores establecidos en los objetivos de calidad, se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 4.3mg/l, este valor se encuentra próximo al rango mínimo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 29.7 °C, la cual se encuentra dentro del rango óptimo para el buen desempeño de la tilapia. Es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 6 días; debido a que las condiciones se encuentran muy a ras de los rangos mínimos permitidos de capacidad de carga permisible se recomienda no adelantar proyectos de cultivos de peces en jaula en este punto; Ya que esto imposibilita el recambio de oxígeno al embalse, disminuyendo el proceso normal del mismo. PUNTO 2: La DBO5 obtenida de laboratorio es de de 2.33mg/l, este valor se encuentra próximo al rango mínimo de capacidad de carga permisible, con respecto a los valores establecidos los objetivos de calidad se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.4mg/l, este valor se encuentra fuera de los parámetros establecidos en la capacidad de carga permisible. La temperatura en este punto se encuentra en 31.1°C, la cual se encuentra dentro del rango óptimo para el buen desempeño de los cultivos de peces en jaulas, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 2 días; debido a que las condiciones no se encuentran dentro de los parámetros establecidos se recomienda no establecer cultivos de peces en jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse ya que cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. PUNTO 3 REPELON: Coordenadas 10º29´34,94´ N y 075º06´43.62´´O. Se tiene una DBO5 de 2.6mg/l, lo cual indica que se encuentra fuera del rango de capacidad de carga permisible, en cuanto a los parámetros establecidos por los objetivos de calidad, se encuentra dentro del parámetro. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.6mg/l, este valor se encuentra fuera de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 32.8 °C, lo cual indica que esta fuera del rango pues supera la temperatura máxima permitida, hay que tener en cuenta que aunque la temperatura se encuentra por encima de las condiciones óptimas, las especies se podrían adaptar a esta. Es importante tener en

14

cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 3 días; debido a que las condiciones no se encuentran dentro de los parámetros establecidos se recomienda no sembrar cultivos de peces en jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse, cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. En este punto se encuentran 17 jaulas de peces en las cuales se debe tener en cuenta los niveles de oxígeno, ya que estos no se encuentran dentro de los parámetros óptimos de acuerdo a los objetivos de calidad, afectando de esta forma la producción. Se recomienda de igual manera no seguir cultivando más jaulas de peces, ya que el oxígeno disuelto se encuentra muy bajo y esto aumentaría el proceso de eutrofización del embalse, se deben seguir los pasos de la guía ambiental para cultivo de peces en jaulas para no continuar deteriorando las zonas de cultivo. PUNTO 4 REPELON: Coordenadas 10º28´26,95´ N y 075º06´02.93´´O. Se tiene una DBO5 de 2.62mg/l, lo cual indica que se encuentra sobre el rango mínimo de capacidad de carga permisible con respecto a los valores establecidos por los objetivos de calidad, se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.6mg/l, lo cual indica que se encuentra fuera de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 31.8 °C, la cual esta dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 7 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran casi sobre el limite se recomienda no sembrar cultivos de peces en jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo. Cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. En este punto se encuentran 30 jaulas de peces, en las cuales se debe tener en cuenta los niveles oxígeno ya que estos no se encuentran dentro de los parámetros óptimos de acuerdo a los objetivos de calidad, afectando de esta forma la producción. De igual manera, el oxígeno disuelto se encuentra muy bajo y esto aumentaría el proceso de eutrofización del embalse, se deben seguir los pasos de la guía ambiental para cultivo de peces en jaulas para no deteriorar esta zona de cultivo. PUNTO 5 REPELON: Coordenadas 10º28´44,28´ N y 075º06´02.93´´O. Se tiene una DBO5 de 2.3mg/l, lo cual indica que se encuentra sobre el mínimo de capacidad de carga permisible, con respecto a los objetivos de calidad, se encuentra dentro parámetro establecido.

15

En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.6mg/l, este valor se encuentra fuera de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 33.7 °C, la cual está por encima del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 6 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran por encima del límite y que de acuerdo a la información recopilada en campo en este sector se encuentra la mayoría de la jaulas sembradas, se recomienda no permitir la instalación de más jaulas en esta zona, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo. PUNTO 6 ROTINET: Coordenadas 10º31´36,98´ N y 075º04´44.07´´O. Se tiene una DBO5 de 3mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango mínimo de capacidad de carga permisible, de igual manera se encuentra dentro del rango de los parámetros establecidos por los objetivos de calidad. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.2mg/l, este valor se encuentra por debajo de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 34.3 °C, la cual esta por encima del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 6 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran por debajo del rango se recomienda evitar la ubicación de jaulas en este, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo, cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. En este punto, se encuentran 25 jaulas de peces en las cuales se debe tener en cuenta que aunque el oxígeno no se encuentra en lo adecuado, no afecta la producción de las mismas. Se recomienda de igual manera no instalar mas proyectos productivos de jaulas en esta zona, ya que el oxígeno disuelto se encuentra por debajo del rango y esto aumentaría el proceso de eutrofización del embalse, se deben seguir los pasos de la guía ambiental para cultivo de tilapia para no deteriorar esta zona de cultivo. Se recomienda a la Autoridad Ambiental abstenerse de otorgar mas permiso para la ubicación de jaulas en esta zona, ya que el oxígeno disuelto se encuentra muy bajo y esto afectaría la eutrofización del embalse, se deben seguir los pasos de la guía ambiental para cultivo de tilapia para no deteriorar esta zona de cultivo. PUNTO 7 AGUADA DE PABLO: Coordenadas 10º31´26,14´ N y 075º00´33.04´´O. Se tiene una DBO5 de 4.55mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible, de igual manera se encuentra dentro de los objetivos de calidad. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.9mg/l, este valor se encuentra por debajo de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este

16

punto se encuentra en 34.2 °C, lo cual indica que se encuentra por encima del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 5 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran por debajo del rango se recomienda evitar la instalación de proyectos productivos con jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo, cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. PUNTO 8 LA PEÑA: Coordenadas 10º34´42,71´ N y 75º01´21.31´´O. Se tiene una DBO5 de 2.83mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango mínimo de capacidad de carga permisible, de igual manera se encuentra dentro del parámetro establecido por los objetivos de calidad. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.4mg/l, este valor se encuentra por debajo de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto es 33.4°C, lo cual indica que se encuentra por encima del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 7 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran por debajo del rango se recomienda evitar la instalación de jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo, cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. PUNTO 9 LURUACO: Se tiene una DBO5 de 5.53mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible, de igual manera se encuentra dentro del parámetro establecido por los objetivos de calidad. En cuanto a la DBOu, el valor es de 3.4mg/l, este valor se encuentra por debajo de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto es 28.9°C, la cual se encuentra por encima del rango mínimo, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 8 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran por debajo del rango se recomienda abstenerse de cultivar jaulas en este punto, ya que estas condiciones imposibilitan el recambio de oxígeno al embalse y esto impediría el proceso normal del mismo, cuando los niveles de oxígeno son bajos o se mantienen por periodos prolongados se disminuye el metabolismo y crecimiento de los peces. A continuación se presenta la imagen de los puntos de muestreo fisicoquímicos, con el fin de ubicar los puntos en donde se tomaron las muestras de agua, en el Embalse el Guájaro. Los puntos para realizar el monitoreo se escogieron teniendo en cuenta el “Estudio y evaluación del impacto de la actividad camaronicultivo en agua dulce sobre la capacidad de carga del

17

embalse el Guájaro” y las zonas en las que hay siembra de jaula de peces. Los puntos en donde se realizaron los muestreos son: Zona de Compuertas, La Peña, Luruaco, Aguada de Pablo, Porvenir, Centro del Guájaro, Rotinet y Repelón. A continuación se presenta la tabla 9, con el fin de determinar la capacidad de carga permisible, ya sea máxima o mínima para cada una de las estaciones de estudio, teniendo en cuenta los niveles de DBO5, OD, OD requerido, Temperatura, Tiempo de recuperación en días y analizando que parámetros se encuentran dentro y fuera del rango.

Tabla 6. Análisis de los resultados fisicoquímicos tomados el 26 de enero de 2010, comparados con la capacidad de carga máxima permisible.

Puntos De Muestreo

Tem °c

R / DBO5 mg/l

R / OD mg/l

C.M.P(DBOU) mg/l

C.M.P(DBO5) mg/l

O.D, REQ(mg/l)

T DE REC (d)(mg/l) Max Min Max Min

Punto 1 (La Peña)

30,1 6,46 7 11,59 4,09 7,2 2,5 4,32 7

Punto 2 (Aguada de Pablo

30,6 5,12 6 12,37 4,38 7,7 2,7 4,04 5

Punto 3 (Jaulas Repelón)

31,2 3,85 7 10,85 3,77 6,8 2,3 4,52 6

Punto 4 (Villa Rosa)

30,8 4,47 7 11,55 4,1 7,2 2,6 4,36 6

Punto 5 (Centro del Guájaro)

31,2 4,75 6 12,23 4,3 7,6 2,7 4,04 3

Fuente: La Consultoría Estos análisis se tomaron en época seca, encontrando que se puede determinar lo siguiente: PUNTO 1 LA PEÑA: Se tiene una DBO5 de 6.46mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango mínimo de capacidad de carga permisible, en cuanto a los parámetros establecido por los objetivos de calidad, no se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 7.0mg/l, este valor se encuentra dentro de los parámetros establecidos tanto en el modelo de capacidad de carga permisible, como en los objetivos de calidad. La temperatura en este punto es 30.1 °C, la cual se encuentra dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 7 días; dado que las condiciones de oxígeno se encuentran dentro de los parámetros es posible contemplar la posibilidad de sembrar jaulas con peces.

18

PUNTO 2 AGUADA DE PABLO: Se tiene una DBO5 de 5.12mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible, en cuanto a los objetivos de calidad, no se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 6.0mg/l, este valor se encuentra dentro de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 30.6 °C, la cual se encuentra dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 5 días; dado que las condiciones de oxígeno se encuentran dentro de los parámetros es posible contemplar la posibilidad de sembrar jaulas con peces. PUNTO 3 JAULAS REPELÓN: Se tiene una DBO5 de 3.85mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible y dentro de los valores de los objetivos de calidad. En cuanto a la DBOu, el valor es de 7.0mg/l, este valor se encuentra dentro de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto se encuentra en 31.2 °C, la cual esta dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua es de 6 días; dado que las condiciones de oxígeno se encuentran dentro de los parámetros es posible contemplar la posibilidad de sembrar jaulas con peces. PUNTO 4 VILLA ROSA: Se tiene una DBO5 de 4.47mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible, en cuanto a los parámetros establecidos en los objetivos de calidad, esta se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 7.0mg/l, este valor se encuentra dentro de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto es 30.8°C, la cual se encuentra dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 6 días; dado que las condiciones de oxígeno se encuentran dentro de los parámetros es posible contemplar la posibilidad de sembrar jaulas con peces. PUNTO 5 CENTRO DEL GUÁJARO: Se tiene una DBO5 de 4.75mg/l, lo cual indica que se encuentra dentro del rango de capacidad de carga permisible, en cuanto a los parámetros establecidos por los objetivos de calidad este valor, se encuentra dentro del rango. En cuanto a la DBOu, el valor es de 6.0mg/l, este valor se encuentra dentro de los parámetros establecidos en el modelo de capacidad de carga permisible, la temperatura en este punto es 31.2°C, la cual se encuentra dentro del rango, es importante tener en cuenta que el tiempo de recuperación en el cuerpo de agua en este punto es de 3 días; Dado que las condiciones de oxígeno se encuentran dentro de los parámetros es posible contemplar la posibilidad de sembrar jaulas con peces.

19

Evaluación cantidad de jaulas y peces en el embalse el Guájaro correspondiente a siembra de tilapia. De acuerdo a la información recopilada por la empresa contratante se definen las cantidades de peces producidos en toneladas por cada una de las organizaciones a nivel mensual para sus diferentes fases, de igual manera el área requerida para la siembra, la cantidad de jaulas utilizadas y los municipios en los cuales se desarrollan estas actividades:

Tabla 7. Evaluación condiciones actuales embalse el Guájaro Municipio de Repelón.

Actividad o Proyecto

PUNTO DE UBICACIÓN

(QUE EMPRESAS CULTIVAN O QUIENES

Producción De Peces en Jaulas (peces*año)

unidad

Área Requerida para el cultivo en m2

Cantidad de jaulas que se encuentran

Cantidad de peces por jaula

Alimentación con Concentrado

Tilapia Roja

Municipio de Repelón

Asociación de productores piscícolas del municipio de Repelón APIMUR, Productor: Antonio Cabello Escobar,

54000 anual 198 33

Fase 1: 500 *m3 3 jaulas

Fase 1: 34% 6 veces al día. 132 bult.

Fase 2: 250*m3 6 jaulas



Fase 3: 3 veces al día. 333 Bult.

Tilapia roja.


Tilapias de Repelón

35000 anual 240 40

Fase 1: 456*m3, 4 jaulas





Fase 3: 4 veces al día. 199. Bult.

Tilapia Roja


Asociación agropecuaria piscícola y medio ambiental de Repelón. Productor: Adolfo Osorio Ramírez

19000 anual 216 36







Tilapia Roja


Asociación de piscicultores del Embalse del Guájaro. Productor: José Escobar

204 34





20


PUNTO DE UBICACIÓN



unidad





Ruiz Fase 3: 109*m3, 24 jaulas


Tilapia roja


Asociación de piscicultores del municipio de Repelón, ASOPAMUR, Productor: Mafaldo Cabarcas Ortiz

54000 anual 204 34

Fase 1: 500*m3, 4jaulas





Fase 3: 3 veces al día. 333. Bult

Tilapia Roja


Asociación de Piscicultores de Repelón, Productor: Mariano Díaz Escobar.

15000 anual 168 28


Fase 1: 34% 7 veces al día. 16 Bult.




Fase 3: 4 veces al día. 101 butl

Tilapia Roja


Productores Acuícolas E.A.T., Productor: Pedro Suárez Sarmiento

60000 258 43






Fase 3: 3 veces al día. 408 butl.

Tilapia Roja


Asociación agropecuaria piscícola y medio ambiental de Repelón, Productor: Ubaldo Sanjuán Zamora

18000 anual 192 32







Tilapia Roja


Asociación de piscicultores de Repelón – Paraíso “ACUIR”, Productor:

54000 anual 192 32



Fase 2:250*m3, 10 jaulas


21


PUNTO DE UBICACIÓN



unidad





Wilder Garcia Almanza



Tilapia Roja


Asociación de acuicultores de Repelón, Productor: William Villa Ortiz

30000 anual 22


Fase 1: 34% 6 veces al día. 72Bult.






Tabla 8. Evaluación condiciones actuales embalse el Guájaro Municipio de Aguada de Pablo – Sabana Larga.


PUNTO DE UBICACIÓN



unidad





Tilapia roja

Aguada de Pablo-Sabana larga

Agropecuaria Mogut

12000 anual 240 40

Fase 1: 1000*m3

El alimento suministrado será concentrado de entre 40 y 38% de proteína a 34 y 24% de proteína. La

Fase 2: 415*m3

Fase 3: 208*m3


22

Tabla 9. Evaluación condiciones actuales embalse el Guájaro Municipio de Aguada de Pablo.


PUNTO DE UBICACIÓN



unidad





Tilapia roja

Aguada de Pablo

Nauplius Agroindustria

60000 ton *año

216 36

Fase 1: 1000*m3

Se alimentará 3 veces al día.

Fase 2: 415*m3

Fase 3: 208*m3


Tabla 10. Alimentación diaria de peces.

ESTACIÓN Cantidad Bulto x día

Cantidad Ton /Día

Cantidad Ton / Año

APIMUR 689 bultos 34,45 12574,25

Agropecuaria Mogut 689 bultos 34,45 12574,25

Nauplius Agroindustria 689 bultos 34,45 12574,25

Tilapias de Repelón 334 bultos 16,7 6095,5

Aso agrope piscícola y ambiental. 171 bultos 8,55 3120,75

Aso de piscicultores del Embalse del Guájaro

171 bultos 8,55 3120,75

ASOPAMUR 689 bultos 34,45 12574,25

Aso de Piscicultores de Repelón 171 bultos 8,55 3120,75

Productores Acuícolas E.A.T., 843 bultos 42,15 15384,75

ACUIR 689 bultos 34,45 12574,25

Aso de acuiculturas de Repelón 382 bultos 19,1 6971,5


23

Ubicación de nuevos puntos3 Se deben reunir ciertas condiciones que cumplan en mayor o menor grado, para realizar esta actividad Piscícola de cultivo de peces en jaulas en el Embalse el Guájaro como se muestra en la tabla 15. A continuación se describen los factores que se deben tener en cuenta al momento de seleccionar un lugar para cultivo en jaulas. Factores que inciden en la calidad del producto elaborado y en la sostenibilidad de la actividad. 1) Buena Calidad de las aguas evitando lugares de alta concentración de contaminantes. La concentración de oxígeno disuelto debe ser normalmente alta >70% de saturación. Se debe tener en cuenta temperatura, salinidad, oxígeno disuelto, turbidez, sólidos en suspensión y contaminantes. 2) Buena renovación de las aguas: la corriente en la zona debe ser suficiente para evitar que las acumulaciones de productos de desecho (heces y restos de comida) generen desoxigenación del agua. La corriente debe favorecer la dispersión, difusión y mezcla de los residuos. La velocidad y dirección de la corriente se debe tomar mínimo durante 30 días y cada 10 minutos a varias profundidades. Factores que inciden en la seguridad de las jaulas: Oleaje: Se encuentra relacionado con la resistencia de las jaulas y con el estrés al que se ven sometidos los peces, por tanto con la supervivencia de la actividad. Se debe asegurar la frecuencia de las alturas del embalse.

3 Impactos Ambientales de la Acuicultura y la Sostenibilidad de esta actividad, Instituto Español de Oceanografía 2002, 41-49.

24

Tabla 11. Factores que se deben tener en cuenta al momento de seleccionar un lugar para cultivo en jaulas.

FACTOR BUENO MEDIO MALO

Exposición Parcial Abrigado Expuesto

Oleaje de 1 a 3m <1m >3m

Profundidad >30m de 15 a 30m <15m

Velocidad Corriente >15cm/s 5 a 15cm/s <5cm/s

Contaminación aguas Bajo Medio Alto

Temperatura Máxima 22 a 24 ºC 24 a 27 ºC >27ºC

Temperatura Mínima 12ºC 10ºC 8ºC

Salinidad media 25 a 35 USP 15 a 25 USP <15USP

Salinidad de fluctuación <5USP 5 a 10USP >10 USP

Oxígeno disuelto(%saturación >100% de 70 a 100% <70%

Turbidez, sólidos en suspensión Bajo Moderado Alto

Pendiente >30% 10 a 30% <10%

Sustrato Arena o grava Mezcla Fango

Estado Trófico Oligotrófico Mesotrófico Eutrófico

Depredadores No Algunos Abundantes

Fuente: Impactos ambientales de la acuicultura y la sostenibilidad de esta actividad, Instituto Español de Oceanografía 2002, 41-49.

Análisis para la ubicación de nuevas jaulas:

Tabla 12. Aumento de jaulas.

PUNTOS DBO5 Max

DBO5 Min

Promedio Medidas Enero 2010

Medidas Noviembre 2009

% Aumento Máx. Noviembre

% Aumento Máx. Enero

% Aumento Jaulas en 2010

Punto 1 (Compuertas)

7,2 2,6 4,9 2,68 2,68 63% 63% 45%

Punto 2 6,3 2,2 4,25 2,33 2,33 63% 63% 45%

Punto 3 (Repelón) 7,5 2,7 5,1 4,47 4,47 65% 40% 12%

Punto 4 (Repelón) 7,3 2,5 4,9 4,47 4,47 64% 39% 9%

Punto 5 (Repelón) 6,8 2,3 4,55 4,47 4,47 66% 34% 2%

Punto 6 (Rotinet) 6,9 2,4 4,65 4,47 4,47 57% 35% 4%

Punto 7 (Aguada de Pablo)

7,7 2,7 5,2 5,12 5,12 41% 34% 2%

Punto 8 (La Peña) 7,2 2,5 4,85 6,46 6,46 10% 10% -33%

Punto 9 (Luruaco) 6,6 2,3 4,45 5,53 5,53 16% 16% -24%

PROMEDIO 60% 40% 17%

Fuente: Consultoría

25

Teniendo en cuenta los análisis fisicoquímicos, encontrados en cada uno de los puntos se llegó a la conclusión de implementar nuevas jaulas de peces de esta manera: De acuerdo a la tabla 12, en los puntos 8 y 9, no es recomendable aumentar el número de jaulas, debido a que en estos puntos se sobrepasan los valores promedio de contaminación por DBO5. En los demás puntos se podría aumentar teniendo en cuenta no sobrepasar ni estar sobre esos topes (máximos y mínimos), por ello se recomendó en cada uno de los puntos utilizar el un valor ajustado de acuerdo a los valores promedio de la DBO en cada uno de los puntos, y que se identifican en la tabla e16 en la casilla % de aumento de jaulas. Zona de compuertas, para la siembra de peces se recomienda aumentar la siembra en un 45% lo cual sería de 150 jaulas, el 63% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 3, se recomienda aumentar en un 12% lo cual correspondería a 40 jaulas, el 40% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 4, se recomienda aumentar en un 9% lo cual correspondería a 30 jaulas, el 39 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 5, se recomienda aumentar en un 2% a 7 jaulas, el 34 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Rotinet, se puede realizar un aumento de 4% que corresponde a 13 jaulas, el 39 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona Aguada de Pablo, se puede realizar un aumento de 2% que corresponde así: actualmente hay 334 jaulas se puede llegar a 13 jaulas, el 34% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Siempre y cuando se estén controlando los siguientes aspectos fisicoquímicos ya que si no, estos afectarían la calidad del embalse acelerando su estado de eutrofización y la producción de peces se reduciria. Se debe estar monitoreando los niveles de oxígeno en los puntos realizados en el primer muestreo, ya que los valores no superan los 4mg/L, esto indica que el nivel de oxígeno disuelto no es el adecuado lo cual afectaría a los peces.

26

De igual manera, se debe estar monitoreando la DBO5 que aunque se encuentra dentro del rango de los <5mg/l esta se encuentra directamente relacionado con el oxígeno disuelto, y con otros factores que podrían afectar el embalse. Se debe tener en cuenta que en la parte norte hay presencia de amonio, lo cual puede deberse a sobrealimentación en los cultivos de tilapia en jaulas y material orgánico de las camaroneras lo cual afectaría la producción de los peces por tal motivo se debe tener en cuenta los procesos de alimentación de acuerdo a la “guia basica de cultivo de peces en jaulas”.

27

Tabla 13. Cantidad de peces en jaulas.

Fuente: consultoría

UBICACIÓN EMPRESA PRODUCCIÓN MES

PRODUCCIÓN AÑO

ÁREA JAULAS CANTIDAD DE PECES x JAULA

Municipio Repelón

APIMUR 4,500 peces 54,000 peces 198 m3 33

Fase 1: 500*m3

Fase 2: 250*m3

Fase 3:150*m3

Agua de Pablo/sabana larga

Agropecuaria Mogut

1,000 peces 12,000 peces 240 m3 40

Fase 1:1000*m3

Fase 2:415*m3

Fase 3:208*m3

Agua de palo Nauplius Agroindustria

5,000 peces 60,000 peces 216 m3 36

Fase 1:1000*m3

Fase 2: 415*m3

Fase 3: 208*m3

Municipio Repelón

Tilapias del Repelon

2,916 peces 35,000 peces 240 m3 40

Fase 1:1456*m3

Fase 2:276*m3

Fase 3: 300*m3

Municipio Repelón

Asociación de piscicultores del Guájaro

1,583 peces 19,000 peces 216 m3 36

Fase 1:500*m3

Fase 2:270*m3

Fase 3: 131*m3

Municipio Repelón

ASOPAMUR 4,500 peces 54,000 peces 204 m3 34

Fase 1:750*m3

Fase 2:450*m3

Fase 3: 109*m3

Municipio Repelón

Asociación de piscicultores del Repelón

1.250 peces 15,000 peces 168 m3 28

Fase 1:833*m3

Fase 2:450*m3

Fase 3: 109*m3

Municipio Repelón

Productores acuícolas E.A.T.

5,000 peces 60,000 peces 258 m3 43

Fase 1:500*m3

Fase 2:250*m3

Fase 3:150*m3

Municipio Repelón

As. agrícola y psicola medioambiental

1,500 peces 18,000 peces 192 m3 32

Fase 1:1000*m3

Fase 2:225*m3

Fase 3:158*m3

Municipio Repelón

ACUIR: AS. De piscicultores del paraíso

4,500 peces 54,000 peces 192 m3 32

Fase 1:500*m3

Fase 2:250*m3

Fase 3:150*m3

Municipio Repelón

Asociación de acuiculturas

2,500 peces 30,000 peces 192 m3 32

Fase 1:500*m3

Fase 2:250*m3

Fase 3:150*m3

28

Se debe tener en cuenta que en la zona norte del Embalse el Guájaro, su dureza y la alcalinidad es muy alta, sobretodo donde están ubicadas las canteras y donde el recambio de aguas es mínimo, por tal motivo es fundamental el manejo de las compuertas. Si se diera un mejor manejo de las compuertas, la calidad del agua mejoraría y por tal motivo se podrían disponer de nuevas jaulas, convirtiendo el embalse en un cuerpo de agua homogéneo durante los periodos de lluvia y diferenciado para los periodos secos, permitiendo un intercambio natural de las corrientes. En la parte sur del embalse hay presencia de coliformes totales y fecales principalmente en el área donde vierten las aguas de Repelón y Villa Rosa. De igual forma, este valor se encuentra alto en el punto medio donde converge el cultivo de tilapia de Repelón, por tal motivo se aconseja manejar estos vertimientos para nuevas jaulas en estas zonas.

29

CONCLUSIONES Se puede evidenciar que no se puede aumentar el número de jaulas en los puntos 8 y 9, debido a que sobrepasan los valores promedio de contaminación por DBO5. En los demás puntos se podría aumentar teniendo en cuenta no sobrepasar ni estar sobre esos topes (máximos y mínimos), por ello se recomendó en cada uno de los puntos utilizar el un valor ajustado de acuerdo a los valores promedio de la DBO en cada uno de los puntos, y que se identifican en la tabla e16 en la casilla % de aumento de jaulas. Zona de compuertas, para la siembra de peces se puede aumentar la siembra en un 45% lo cual sería de 150 jaulas. Zona de Repelón punto 3, se puede aumentar en un 12% lo cual correspondería a 40 jaulas. Zona de Repelón punto 4, puede aumentar en un 9% lo cual correspondería a 30 jaulas, Zona de Repelón punto 5, se puede aumentar en un 2% a 7 jaulas. Zona de Rotinet, se puede realizar un aumento de 4% que corresponde a 13 jaulas. Zona Aguada de Pablo, se puede realizar un aumento de 2% que corresponde así: actualmente a 13 jaulas. Siempre y cuando se estén controlando los siguientes aspectos fisicoquímicos ya que si no, estos afectarían la calidad del embalse acelerando su estado de eutrofización y la producción de peces se reduciría. Se debe estar monitoreando los niveles de oxígeno en los puntos realizados en el primer muestreo, ya que los valores no superan los 4mg/L, esto indica que el nivel de oxígeno disuelto no es el adecuado lo cual afectaría a los peces. De igual manera, se debe estar monitoreando la DBO5 que aunque se encuentra dentro del rango de los <5mg/l esta se encuentra directamente relacionado con el oxígeno disuelto, y con otros factores que podrían afectar el embalse. Se debe tener en cuenta que en la parte norte hay presencia de amonio, lo cual puede deberse a sobrealimentación en los cultivos de tilapia en jaulas y material orgánico de las camaroneras lo cual afectaría la producción de los peces por tal motivo se debe tener en cuenta los procesos de alimentación de acuerdo a la “guia basica de cultivo de peces en jaulas”. Se debe tener en cuenta que en la zona norte del Embalse el Guájaro, su dureza y la alcalinidad es muy alta, sobretodo donde están ubicadas las canteras y donde el recambio de aguas es mínimo, por tal motivo es fundamental el manejo de las compuertas. Si se diera un mejor manejo de las compuertas, la calidad del agua mejoraría y por tal motivo se podrían disponer de nuevas jaulas, convirtiendo el embalse en un cuerpo de agua homogéneo durante los periodos de lluvia y diferenciado para los periodos secos, permitiendo un intercambio natural de las corrientes.

30

En la parte sur del embalse hay presencia de coliformes totales y fecales principalmente en el área donde vierten las aguas de Repelón y Villa Rosa. De igual forma, este valor se encuentra alto en el punto medio donde converge el cultivo de tilapia de Repelón, por tal motivo se aconseja manejar estos vertimientos para nuevas jaulas en estas zonas. Del análisis realizado a los puntos de muestreo tomado en enero, época de verano (sin lluvia), se pude identificar que los 5 puntos de muestro presentan condiciones estables para la siembra de peces, de acuerdo a la demanda de oxígeno y temperatura, en estos existe la posibilidad de nuevas siembras de peces, siempre y cuando se cumpla con las condiciones dadas. De acuerdo a la información de campo se identificó en el trayecto de la vereda la Peña hacia compuertas, la ubicación de viviendas en la rivera del embalse, lo cual genera contaminación de tipo antrópico. En el sector de las compuertas se identificó que éstas no se encuentran en buen estado pues permiten el reflujo del caudal hacia el canal, claro está que esta condición también se debe a la diferencia de niveles del embalse con respecto al canal, lo cual permite que cuando los caudales son muy bajos en el canal el agua del embalse se devuelva, esta condición no es muy favorable para la siembra de peces en ese sector, pues los recambios de corriente genera en los peces estrés lo cual pude generar la muerte de los mismos. Se identificó en la zona de compuertas y el municipio de Repelón actividades agropecuarias y ganaderas, este factor es importante manejarlo, controlando y monitoreando los sistemas de manejo y tratamiento de vertimientos líquidos, ya que puede estar generando contaminación al embalse por heces fecales del ganado y productos químicos de la agricultura, lo cual afecta directamente el cuerpo de agua acelerando los procesos de eutroficación por nutrientes. De acuerdo al Índice de Calidad del Agua para la identificación del nivel de eutroficación se puede determinar que el 90% de este se encuentra en un nivel medio de eutroficación, esta situación se analiza como un indicativo de la contaminación de un cuerpo de agua, lo cual se ve influenciado en ciertas zonas, por condiciones muy bien determinadas como la profundidad, el oxígeno disuelto, el DBO5, el pH, y la temperatura, pueden llegar a aumentar, si aumenta la sobre explotación del embalse. Lo que define la eutroficación son básicamente el fósforo (P) y el nitrógeno(N). Los Valores de P y N se presentan en un rango de 0.20mg/l, lo cual es equivalente a descargar más de 2,3 gramos de P y N por metro cuadrado por año, lo que define un embalse en condiciones medianas de eutroficación, es urgente diseñar un plan de monitoreo de P y N de tal forma que se empiece a construir un cuadro sistemático de registros de estos nutrientes. Aunque la DBO5 en más del 80% del embalse se encuentra dentro del rango de los <5mg/l, se puede determinar que las aguas son moderadamente limpias, pero este se encuentra directamente relacionado con el oxígeno disuelto, por lo que cuando los niveles de la DBO son altos, los niveles de oxígeno (OD) disminuyen y por tal motivo el oxígeno que está disponible

31

en el agua es consumido por las bacterias. Esto ocasiona que los peces y otros organismos acuáticos tiendan a no sobrevivir en las condiciones actuales de acuerdo al análisis de laboratorio desarrollado por el contratante. Del análisis realizado a los puntos de muestreo tomado en enero (época seca), se pude identificar que los 5 puntos de muestro presentan condiciones estables para la siembra de peces, de acuerdo a la demanda de oxígeno y temperatura. La temperatura promedio oscila entre 31 °C y 34.9 °C encontrándose el valor mayor de 34.9 °C cerca al municipio de Repelón, muestra tomada al medio día. Los valores de oxígeno disuelto varían entre 3.2 y 4.2 mg/l, el valor mayor de 4.2 es el punto de las compuertas, en donde se espera se encuentren los mejores valores respecto a la contaminación y el menor valor corresponde al Punto Rotinet, en donde se encuentran 25 Jaulas de Peces en el Municipio de Repelón El valor de pH varía entre 6.63 y 7.54. El valor promedio de profundidad de aguas del Embalse fue de 1.5 metros. Los cultivos de peces encontrados en el embalse durante el recorrido realizado, corresponden a Tilapia Roja (Oreochromis sp). De acuerdo a las visitas de campo realizadas al Embalse, se evidencio la existencia de Tilapia (Oreochromis sp) en los municipios de: Repelón, Aguada de Pablo, y Sabana larga. Actualmente de acuerdo a la información levantada en campo existen entre estas tres zonas (Repelón, Aguada de Pablo, y Sabana Larga), 410 jaulas sembradas, de las cuales 334 se encuentran en Repelón, 36 en Aguada de Pablo y 40 en Sabanalarga. Los peces que actualmente se encuentran en el embalse son 339.000, de los cuales 60.000 se encuentran Aguada de Pablo y 12.000 en Sabanalarga. La siembra de tilapia se encuentra distribuida en 12 asociaciones así:

Municipio Repelón.

Asociación de productores piscícolas del municipio de Repeló APIMUR, Productor: Antonio Cabello Escobar.

Tilapias de Repelón.

Asociación agropecuaria piscícola y medio ambiental de Repelón. Productor: Adolfo Osorio Ramírez.

Asociación de piscicultores del Embalse del Guájaro. Productor: José Escobar Ruiz.

Asociación de piscicultores del municipio de Repelón, ASOPAMUR, Productor: Mafaldo Cabarcas Ortiz.

32

Asociación de Piscicultores de Repelón, Productor: Mariano Díaz Escobar.

Productores Acuícola E.A.T., Productor: Pedro Suárez Sarmiento.

Asociación agropecuaria piscícola y medio ambiental de Repelón, Productor: Ubaldo Sanjuán Zamora.

Asociación de piscicultores de Repelón – Paraíso “ACUIR”, Productor: Wilder García Almanza.

Asociación de acuicultores de Repelón, Productor: William Villa Ortiz.

Municipio Aguada de Pablo-Sabana Larga

Agropecuaria Mogut.

Municipio Aguada de Pablo

Nauplius Agroindustria.

33

RECOMENDACIONES En los puntos 8 y 9 correspondiente a la Peña y al Luruaco, no es recomendable aumentar el número de jaulas, debido a que en estos puntos se sobrepasan los valores promedio de contaminación por DBO5. En los demás puntos se podría aumentar teniendo en cuenta no sobrepasar ni estar sobre esos topes (máximos y mínimos), por ello se recomendó en cada uno de los puntos utilizar el un valor ajustado de acuerdo a los valores promedio de la DBO en cada uno de los puntos, y que se identifican en la tabla e16 en la casilla % de aumento de jaulas. Zona de compuertas, para la siembra de peces se recomienda aumentar la siembra en un 45% lo cual sería de 150 jaulas, el 63% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 3, se recomienda aumentar en un 12% lo cual correspondería a 40 jaulas, el 40% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 4, se recomienda aumentar en un 9% lo cual correspondería a 30 jaulas, el 39 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Repelón punto 5, se recomienda aumentar en un 2% a 7 jaulas, el 34 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona de Rotinet, se puede realizar un aumento de 4% que corresponde a 13 jaulas, el 39 % está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Zona Aguada de Pablo, se puede realizar un aumento de 2% que corresponde así: actualmente hay 334 jaulas se puede llegar a 13 jaulas, el 34% está dado para un análisis de siembra en condiciones buenas, máximas de DBO, lo cual no sería recomendable pues las condiciones de calidad del embalse no son las óptimas. Siempre y cuando se estén controlando los siguientes aspectos fisicoquímicos ya que si no, estos afectarían la calidad del embalse acelerando su estado de eutrofización y la producción de peces se reduciria. Se deben tener en cuenta la cantidad y calidad de alimento ya que este repercute directamente sobre la calidad del agua y sobre el crecimiento de los peces. De igual manera, se debe tener en cuenta una serie de factores que definen la calidad tales como: recambio de oxígeno,

34

parámetros fisicoquímicos, biológicos, temperatura, desechos, capacidad de auto purificación del embalse, sin dejar de lado las recomendaciones de la guía ambiental para cultivo de tilapia. Se debe implementar el plan de seguimiento control y contingencia de acuerdo a: indicadores de nitrógeno, fósforo, DBO5, temperatura, análisis de alcalinidad y dureza densidad del cultivo, Manejo de las compuertas, vigilancia de piscicultura indiscriminada, manejo de sedimentos entre otras actividades que se recomiendan en la guía ambiental de piscicultura. Toda descarga de residuos líquidos industriales o agroindustriales que se estén generando en los perímetros del embalse y que se estén vertiendo ya sea directa o indirectamente al embalse, debe implementar, operar, controlar y monitorear e implementar sistemas de manejo y tratamiento de vertimientos líquidos. Se debe trabajar conjuntamente con las organizaciones que cultivan tilapia para tener un compromiso en cuanto al desarrollo de actividades que mitiguen aquellos impactos generados por esta producción. Es importante tener en cuenta que en este momento las condiciones de caudal en el embalse se encuentran altamente reducidas por “el fenómeno del niño”, lo cual favorece para que los procesos de auto-depuración sean lentas o no se presenten. De acuerdo al análisis y la información consultada en el documento guía de camaronicultura, se podría optar por el manejo de estos cultivos en sistemas que se encuentren instalados fuera del embalse, ya que éste permite controlar las condiciones de calidad de agua antes de ser vertidas al mismo, por medio de sistemas de tratamiento de agua residual PTAR (Planta de Tratamiento de agua residual). Se recomienda tener mayor autoridad ambiental en el embalse, de igual manera hacer mayor seguimiento, a los sistemas de tratamiento de aguas residuales entre otros, para solucionar, mitigar y compensar la problemática actual del embalse. Se recomienda hacer un buen manejo de las compuertas, ya que el manejo de estas influye en la calidad del agua del embalse. Se recomienda realizar análisis periódicos de agua en el embalse el Guájaro en cada una de las zonas de acuerdo a su calidad fisicoquímica para tener en cuenta las condiciones del embalse ya que es importante para los procesos de siembra. De igual manera se recomienda realizar un modelo más ajustado a las características actuales del embalse, teniendo en cuenta aspectos como el cambio climático, el fenómeno del niño, entre otros.

35

Bibliografía 2001 IDEAM. Adscrito al Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial de Colombia. Sistema Nacional Ambiental Acuicultura y Aprovechamiento del agua para el desarrollo rural, Cultivo de peces en jaulas, Internacional center for aquaculture and aquatic environments, Auburn University, Alabama. Guía técnica para cultivo de Tilapia en Estanques., Ministerio de Agricultura y Ganadería, abril 2000. Guía Ambiental del sector Piscícola, Corporación para el desarrollo sostenible del área de manejo especial la macarena, Departamento del meta Colombia. Informe preliminar plan de ordenación de la pesca y la acuicultura del embalse del Guájaro (Atlántico) ICA 2008. Plan de Manejo Ambiental de ciénagas del totumo, Guájaro y el jobo en la ecorregión estrategia del canal del dique convenio Nº 201680. Piscicultura en jaulas y corrales Modelos para calcular la capacidad de carga y las repercusiones en el ambiente, Malcolm C.M. Beveridge, Becario André Mayer de la FAO IFDR, College of Fisheries University of the Philippines, Diliman, Quezon City, República de Filipi Impactos ambientales de la acuicultura y la sostenibilidad de esta actividad, instituto español de oceanografía 2002, 41-49. Beveridge, M.C.M., 1986 Piscicultura en jaulas y corrales. Modelos para calcular la capacidad de carga y las repercusiones en el ambiente. FAO Doc. Téc. Pesca, (255): 100p. Estudio de evaluación del impacto de la actividad de camaronicultura en agua dulce sobre la capacidad de carga del embalse del guájaro; Asociación de Camaronicultores del Guájaro-Asocaguas, módulo IV guía para el desempeño ambiental. Resolución 000005, 1 de enero de 2006 CRA UNIVERSIDAD DEL NORTE, Embalse del Guájaro diagnostico hidráulico y ambiental de las condiciones actuales, Barranquilla, junio de 2009. Infografía http://www.sra.gob.mx/internet/informacion_general/programas/fondo_tierras/manuales/Cultivo__tilapia_estanques__r_sticos.pdf file:///C:/Documents%20and%20Settings/139genel138/Mis%20documentos/EMBALSE%20GUÁJARO/Peces%20cultivables.html file:///C:/Documents%20and%20Settings/139genel138/Mis%20documentos/EMBALSE%20GUÁJARO/Peces%20cultivables.html

http://www.sra.gob.mx/internet/informacion_general/programas/fondo_tierras/manuales/Cultivo__tilapia_estanques__r_sticos.pdf

http://www.sra.gob.mx/internet/informacion_general/programas/fondo_tierras/manuales/Cultivo__tilapia_estanques__r_sticos.pdf

../Configuración%20local/Archivos%20temporales%20de%20Internet/Content.IE5/139genel138/Mis%20documentos/EMBALSE%20GUAJARO/Peces%20cultivables.html

../Configuración%20local/Archivos%20temporales%20de%20Internet/Content.IE5/139genel138/Mis%20documentos/EMBALSE%20GUAJARO/Peces%20cultivables.html

1 1

UNA APROXIMACIÓN HOLÍSTICA A LAS METODOLOGÍAS AGILES DESDE LA PROGRAMACIÓN EXTREMA

Una aproximación holística a las metodologías agiles desde la Programación eXtrema

Paula Andrea Pardo Clavijo1, Santiago Triana Hernández2, Néstor Gabriel Forero Saboya3

UNIVERSIDAD LIBRE

[email protected] [email protected] [email protected]

RESUMEN

La Programación eXtrema (XP) dentro de los paradigmas de desarrollo de software, constituye un escenario novedoso por su integridad y calidad para la factoría de software, al integrar como elemento diferenciador las entidades de interacción, participación del usuario e importancia de la respuesta frente al cambio, las diferentes fases que tiene la programación extrema registran los principios de oportunidad, efectividad y calidad que deben caracterizar a cualquier proyecto que se construye como respuesta a los requerimientos funcionales establecidos por una organización. Desde su integridad y naturaleza estructural, se procede, en este artículo, a realizar un tratamiento inductivo de la programación extrema que da como resultado una aproximación holística a las metodologías agiles. Algunos de los aspectos considerados son las fases metodológicas resaltadas en la XP, precediendo el proceso de desarrollo, al exaltar los valores y principios declarados en el manifiesto ágil, enmarcando los procesos que maneja, su estilo de desarrollo en la producción de software y la interacción con el cliente.

Palabras Claves. Metodología ágil, Planificación, Programación Extrema, Software.

ABSTRACT

Extreme Programming within software development paradigms, is a novel scenario for integrity and quality to the software factory, as a differentiator by integrating entities interaction, user participation and importance of the response to changes or modifications, the different phases recorded involving the principles of opportunity, effectiveness and quality that should characterize any project that is built in response to a functional requirement established by an organitation<.

Since its integrity and structural nature, we proceed in this article to make inductive treatment resulting in a holistic approach of agile methodologies.

Some of the aspects considered are highlighted methodological phases in XP prefacing methodology development process, to promote the values and principles stated in the Agile Manifesto, framing processes that are handled in this, his style of development in software production and the interaction with the customer.

Keywords. Agile Methodology, Planning Extreme Programming, Software.

I. INTRODUCCIÓN

finales de la década de los 90´s, múltiples metodologías empezaron a llamar la

atención del público en general, cada una compuesta por diferentes ideas tradicionales y a la vez innovadoras, exaltando la cooperación entre los equipos de programación y los usuarios,

buscando la comunicación personalizada para omitir la extensa documentación.

A principios del siglo XXI se reunieron varios desarrolladores de productos de software de diversa índole, con el fin de establecer qué elementos tenían en común dentro de su quehacer ingenieril. De esta reunión se acuño el término "agile" cobijado y declarado en el “Manifesto for

A

__________________________ 1

Ingeniera de sistemas egresados de la Universidad Libre. Estudiante de Master en Administración y gestión de empresas Universidad de La Rioja. 2

Ingeniera de sistemas egresados de la Universidad Libre, programa de ingeniería de sistemas Sede Bosque Popular. 1

Ingeniero Industrial; MS.C. En Ingeniería Telemática; candidato a Ph.D. En Ingeniería Telemática, Universidad de Vigo. MS.C En Ingeniería Industrial, Universidad Distrital.

2 2


Agile Software Development”, en donde uno de los apartados más significativos es la declaración que compartía el valor del desarrollo, en el cual se resalta: Los individuos y la interacción por encima de los procesos y herramientas. El software que funciona por encima de la documentación abarcadora. La colaboración con el cliente por encima de la negociación contractual. La respuesta al cambio por encima del seguimiento de un plan. El origen de las metodologías tradicionales de programación, la declaración de la rebelión a los estándares rígidos de la absurda regla de estipular previamente la totalidad de los requerimientos de desarrollo; condujo a nuevos proyectos “ágiles”, cómo cualquier empeño humano, algunos exitosos y otros fallidos. Pero lo que llamo la atención era cómo los clientes y los programadores amaban el desarrollo de su proyecto, este era el camino que los desarrolladores de software buscaban. Sin embargo, en muchas ocasiones, es distante la dinámica con la cual se asume la creación de software, es por ello que en el presente artículo se abordara la programación extrema en pro de realizar una aproximación holística a las metodologías agiles. II. LA PROGRAMACIÓN EXTREMA (XP)

La Programación Extrema está clasificada dentro de la rama de las metodologías agiles; en las que se da prioridad a las tareas que dan resultados directos, reduciendo aquellos procesos a los cuales se somete el desarrollo. La XP se compone de un conjunto de prácticas que a lo largo de los años han demostrado ser las mejores prácticas de desarrollo de software, llevadas al extremo [1]. Los cambios de paradigmas y las abundantes críticas presentadas con respecto al formalismo de las metodologías tradicionales, al ser dispendiosas, engorrosas y en muchos casos inocuas, al no brindar una buena solución, provoco la búsqueda de alternativas en el desarrollo del software como, por ejemplo, Lean Software Development (LSD), Programación Extrema (XP), Scrum y Crystal Clear [2].

Los componentes de XP como originalmente los propuso Kent Beck [3] son conocidos en el campo de la ingeniería de software desde sus inicios, sin embargo, XP pretende dar otro enfoque al desarrollo, empleando diferentes stakeholders tales como un equipo de gestión, un equipo de desarrollo y un grupo de clientes. La innovación con respecto a las metodologías tradicionales se fundamenta en la relación existente entre el desarrollador y el cliente apoyados por un grupo de gestión, enfatizando la captura y validación de requerimientos [4].

A. Objetivos de la programación extrema.

Los objetivos esperados dentro de los proyectos de desarrollo de software al emplear una metodología como XP, dependen de la gestión que desee realizar el grupo de trabajo; aunque se pueden identificar algunos elementos comunes entre diferentes proyectos como los que se destacan a continuación [5]:

o Establecer las mejores prácticas de Ingeniería de Software en el desarrollo de proyectos.

o Optimizar la ejecución de los proyectos. o Garantizar la Calidad del Software

desarrollado, haciendo que este supere las expectativas del cliente.

o Potenciar al máximo el trabajo en equipo. o Satisfacer los requerimientos del cliente

brindándole el software que requiere.

B. Fases de la Metodología XP

Al implantar la metodología XP, se resaltan cuatro (4) fases, como se ilustra en la Figura 1, en donde se aprecia la planificación del desarrollo como la primera fase, precediendo al diseño, la codificación y las pruebas de usuario, cabe resaltar que cada una de estas fases enmarca un conjunto de trabajos específicos [6].

3 3


Figura1. Fases del proceso de desarrollo de la metodología XP.

Fuente: http://www.slideshare.net/edgarespinoza/programacion-

extrema

A continuación se describe a groso modo el objetivo de cada fase.

1. La Planificación: Se debe alcanzar una relación entra la parte empresarial y la técnica, para esto se cuenta con varios niveles como son: la historia de usuarios, plan de entregas, velocidad de proyecto, iteraciones, rotaciones y reuniones. Aquí se pretende determinar el alcance de la siguiente versión [7].

2. Diseño: En esta fase se encuentran varios elementos integradores que contribuyen al desarrollo del producto de software, como es el caso de las metáforas, las tarjetas CRC (clase, Responsabilidades y Colaboración), soluciones puntuales, la refactorización y el reciclaje, haciendo que cada uno de los procesos sea mejor [8].

3. Desarrollo o Codificación: En este punto se

definen las parejas de programación para realizar las diferentes versiones del proyecto. Otro elemento importante es la integración continua; donde cada día hay que integrar o unir el código realizado y probar la versión resultante. Finalmente la propiedad colectiva, donde cualquier integrante del equipo, puede realizar cambios en el código sin restricción alguna, en caso de considerarlo conveniente, ya que nadie es dueño del código, esto con el fin de que todos los integrantes conozcan y sepan que modificaciones ha tenido.

4. Pruebas: XP define dos tipos de pruebas: a) La prueba unitaria que hace referencia a la funcionalidad del código paso a paso, evitando errores ocasionados por la modificación de este. b) La prueba de

aceptación que tienen como propósito evaluar si el producto final puede adaptarse a otros ambientes, por otro lado, también resalta las funcionalidades que poseen mayor importancia desde la perspectiva del usuario [9].

C. Proceso de desarrollo

Está inscrito en las cuatro (4) fases discutidas en el apartado anterior. La piedra angular de la metodología es su proceso de desarrollo centrado en el cliente, es por allí donde comenzará este análisis [10].

1. Relación con el cliente: En XP se considera al cliente como parte del equipo, siendo un apoyo en el proceso de desarrollo, al abordar las historias de los usuarios, asistir a las reuniones de planificación y retroalimentar el proceso de desarrollo, definiendo los requisitos de una forma ordenada durante el tiempo establecido para el proyecto [11].

Este proceso se da en un escenario tal y como se muestra en la Figura 2, donde el cliente describe su trabajo a través de las llamadas historias de usuario, derivando en el establecimiento de las dificultades técnicas de cada una.

4 4


Figura 2. Escenario de exploración y la relación con el cliente, en

el proceso de desarrollo de software por medio de la programación

extrema.Fuente:http://www.slideshare.net/edgarespinoza/programa

ción-extrema

2. Planificación del proyecto: Las historias de usuario planteadas por el cliente conforman el pilar que rige este proceso, al reflejar las necesidades del proyecto.

Se debe establecer un escenario de planificación como se observa en la Figura 3, que estipule los pasos del proyecto, dando los espacios para realizar las reuniones con todo el equipo de desarrollo para identificar problemas, proponer soluciones y señalar aquellos puntos en los que se hará mayor énfasis [12].

Figura 3. Escenario de planificación en cuanto a entrega. Fuente:

http://www.fcad.uner.edu.ar/jai/6JAI/XP_6JAI.pdf

Las interacciones se afianzan en las historias de usuarios recopiladas durante los anteriores procesos, así se iniciara definiendo el orden de las tareas a cumplir por los equipos de desarrollo, escenario que se ve representado en la Figura 4.

Figura 4. Escenario de inicio de interacción. Fuente:


3. Programación y pruebas:

La programación se realiza en parejas, tal y como se puede apreciar en la Figura 5, teniendo en cuenta las historias de usuario recolectas y las tareas predestinadas en cada una de ellas, con esto se generara la versión que pasara a las pruebas de aceptación. Más de una pareja puede realizar una misma tarea, inicialmente se considera redundante el proceso, pero a medida que se va avanzando en el desarrollo, se vera su utilidad, al servir cada desarrollo como elemento de contraste, garantizando la calidad de la versión del producto obtenido.

Figura 5. Escenario de programación, en el cual se resalta el

proceso en equipo. Fuente:

http://www.slideshare.net/edgarespinoza/programación-extrema

Una vez se programa se pasa a un escenario de prueba ilustrado en la Figura 6, el cual tiene como propósito corregir errores, para luego definir nuevas historias de usuario en el caso de ser necesarias dentro del desarrollo del proyecto.

5 5


Figura 6. Escenario de pruebas de aceptación. Fuente:


III. VALORES DE LA PROGRAMACIÓN

EXTREMA

XP como metodología se rige por los valores declarados en el manifiesto ágil ilustrados en la Figura 7, los mismos que orientan el desarrollo de los proyectos que cada equipo lidera. Debido a la naturaleza social y humana de XP, resulta frecuente que a la lista de valores inicialmente declarada se le sumen otros intrínsecos de cada equipo de desarrollo [13].

Figura 7. Valores de la programación extrema. Fuente: Los

autores del presente artículo

A continuación se examinan los valores preponderantes en los proyectos desarrollados con la programación extrema.

1. La Comunicación: En el espacio de trabajo debe existir una excelente comunicación, que le permita a los equipos desarrolladores intercambiar información veraz y confiable, de manera continua, rápida y oportuna.

2. La Simplicidad: A medida que el proyecto se va desarrollando en relación al proceso y a la codificación se recomienda dar un enfoque simple, que contribuya al funcionamiento de éste en cualquier contexto [14].

3. La Retroalimentación: Como equipo de

trabajo cada uno de los involucrados debe hacer parte de un todo, sin dejar a un lado las funciones que debe desempeñar como ente individual, encaminado a el objetivo del

proyecto, sin descartar la importancia que posee el proceso de retroalimentación realizado por los actores que intervienen, para lo cual se exigen pruebas, integraciones, versiones y entregas frecuentes.

4. El Coraje: Las personas pertenecientes al

equipo de trabajo deben dar sus opiniones si así lo consideran, expresando su punto de vista con respecto al desarrollo del proyecto, cumpliendo con su función a cabalidad al sugerir nuevas e innovadoras soluciones [15].

5. La Valentía: Programa para hoy y no para

mañana.

6. El Respeto: Es de gran importancia trabajar como equipo, sin tomar decisiones individualistas.

IV. PRINCIPIOS DE LA PROGRAMACIÓN

EXTREMA

Son las prácticas o directrices que deben llevarse a cabo al implementar el modelo metodológico de XP en cualquier proyecto de desarrollo de software. Inicialmente se manejaron doce (12) principios que con el tiempo se han enriquecido con nuevos elementos [16].

1. La mayor prioridad es la satisfacción del

cliente: Realizar un producto que satisfaga los requerimientos del cliente de manera que cumpla con las expectativas de él.

2. Bienvenidos los cambios, aún después del

desarrollo: Los procesos ágiles entrelazan los cambios con el desarrollo como ventaja competitiva, con un diseño pequeño y flexible que se ajusta a las nuevas exigencias del cliente aun después de la entrega.

3. Entregas de software frecuentes: Al establecer prioridades se realizan entregas oportunas con períodos desde dos (2) semanas hasta dos (2) meses, teniendo en cuenta los

6 6


ciclos de desarrollo, lo cual mejora la funcionalidad progresiva en tiempos de iteración cortos.

4. Se debe trabajar en equipo: La labor se debe realizar diariamente y en estrecho vínculo entre los clientes y los programadores durante todo el proyecto. Los requerimientos para un desarrollo a la medida son únicos, por ello, requieren de la consulta permanente y directa entre los miembros del equipo de trabajo.

5. Construya los proyectos alrededor de

individuos motivados: La confianza en los conocimientos que aplique cada una de las personas que integra el equipo de desarrollo, es la única alternativa viable para el logro de los resultados deseados.

6. Obtener la información de manera

personalizada: Trate directamente con el cliente sobre cada requerimiento, evitará ruidos y distorsión en el flujo de la información.

7. El software que se trabaja es la mejor

medida del progreso: Los resultados del proyecto están dados en función de la operación del software. Las funcionalidades requeridas y que han sido satisfechas en el tiempo estimado, son los indicadores del cliente.

8. Los procesos ágiles promueven los

desarrollos sostenibles: Los objetivos del desarrollo se deben alcanzar con la ejecución del trabajo dentro de las horas definidas, en ningún caso con tiempos extra, ya que se tiene un período para realizar las tareas asignadas a cada equipo de desarrollo; como punto importante esta metodología busca realizar el proyecto en el menor tiempo posible.

9. El buen diseño mejora la agilidad: Una de las características más importantes del diseño debe ser la flexibilidad, en pro de permitir la

fácil incorporación de nuevos requisitos funcionales, así se evita costos elevados y perdida de tiempo en el proyecto.

10. La simplicidad: El arte de aumentar el

volumen de trabajo sin hacer de más, es esencial. El software debe cumplir con los requerimientos solicitados y con el menor esfuerzo en la programación.

11. Las mejores arquitecturas: Surgen de la

organización del equipo, en donde las relaciones dinámicas entre los miembros da como resultado mejores diseños de conformidad con los requerimientos.

12. Continua reflexión en búsqueda de la

eficacia: La ventaja del método radica en la simplicidad y la flexibilidad de su estructura fácilmente modificable como consecuencia directa de los resultados de la retroalimentación iterativa de su proceso.

El enfoque de XP respecto a estas doce prácticas debe presentar sinergia entre todas ellas cuando se adoptan como un todo, ya que al implementar solamente una, todo el enfoque metodológico corre el riesgo de fracasar [17].

V. Comparativa de las metodologías

tradicionales y las metodologías agiles

Aplicar una nueva metodología en un equipo de desarrollo obliga a aprender los diferentes componentes que maneja dicha metodología, haciendo que el equipo inicie un estilo diferente de trabajo, lo cual es un cambio de paradigma que implica el abandonando de técnicas usadas para el desarrollo del proyecto. La ingeniería de software distingue dos tipos de metodologías (las tradicionales y las agiles) que dependiendo del proyecto a realizar se pueden seleccionar alternativamente, lo cual es de gran importancia para alcanzar el éxito del producto. A continuación se presenta un paralelo resumido y

7 7


enmarcado en los aspectos preponderantes de estos dos tipos de metodologías [18].

A. Metodologías Tradicionales

También nombradas bajo la denominación de metodologías pesadas o metodologías formales. La razón de este calificativo es su énfasis en el manejo de una extensa documentación muy detallada de todas y cada una de las etapas del proyecto de desarrollo de software.

No menos importante es el impacto que tienen los costos al momento de realizar un cambio en el desarrollo del plan general del proyecto debido a la deficiencia en la flexibilidad y la baja capacidad de adaptación de estas metodologías para manejar los cambios.

Uno de las principales críticas que ha tenido este tipo de metodologías es frente al nivel de satisfacción real de los clientes, debido a que en ocasiones los resultados obtenidos no se corresponden con las funcionalidades esperadas del producto final [19].

B. Metodologías Agiles

En contraposición a las metodologías tradicionales, las metodologías agiles, desarrollan una documentación mínima y a la medida de los requisitos de cada programa a elaborar, con lo cual, el proceso documental se hace muy liviano.

El impacto de los costos sobre el proyecto al momento de realizar un cambio es mínimo, debido a que su alcance sobre el plan general del proyecto es prácticamente nulo, esto es gracias a la alta flexibilidad y su alta capacidad de adaptación al cambio.

Finalmente, el nivel de satisfacción real de los clientes, es considerablemente alto debido a que los resultados obtenidos siempre se corresponden con las funcionalidades esperadas del producto final, dado que el desarrollo y las pruebas se hacen en conjunto entre el cliente y el equipo de desarrollo, hasta la aceptación del producto [20].

La Tabla 1 contiene un paralelo comparativo entre los dos tipos de metodologías:

Tabla 1. Comparativa entre metodologías tradicionales y metodologías agiles.

METODOLOGÍAS TRADICIONALES METODOLOGÍAS AGILES

Predictivas. Adaptativas. Orientación al proceso. Orientada a la gente. Se tiene un plan fijo inicial equivalente a un proyecto exitoso que a su vez equivale a un valor demostrable.

El valor para el cliente es cambiante, por lo tanto, el plan debe revaluarse para cambiar y ajustarse a las nuevas necesidades.

El cambio es visto como una desviación del plan y por lo tanto un alejamiento del éxito del proyecto.

El cambio es aceptado y tratado tan eficientemente como sea posible y teniendo en cuenta su impacto.

Prevención de cambios mediante fases de análisis y diseño muy largas.

Facilita los cambios mediante fases de análisis y rediseño iterativos.

El software no está disponible al cliente hasta etapas avanzadas del proceso.

El cliente dispone del software desde el inicio del proceso, lo evalúa y usa mientras va creciendo y mejorando

Los requerimientos se obtienen de forma detallada una única vez al principio del proceso, se previenen los cambios mediante la firma del cliente de dichos requerimientos.

Los requisitos son genéricos y se acercan a las necesidades del negocio durante la continua interacción entre los desarrolladores y el cliente.

Las personas son componentes intercambiables del proceso.

Las personas determinan el éxito del proceso.

Las decisiones sobre el desarrollo se han tomado desde el principio por los analistas y gestores del proyecto.

Los desarrolladores toman decisiones sobre el diseño a medida que avanza el proceso, a su vez está sujeto a cambios.

Dentro del plan del proyecto el diseño es temprano, largo y detallado, normalmente no sujeto a cambios.

El diseño es corto y constante, sucede para cada interacción y presta atención a la retroalimentación de

8 8


METODOLOGÍAS TRADICIONALES METODOLOGÍAS AGILES

las interacciones anteriores. El proceso es complicado y difícil de cambiar. Incluye reglas rígidas aplicables a todo tipo de proyecto.

El proceso es simple y fácil de cambiar. Incluye un conjunto de reglas mínimas necesarias para un proyecto y facilita agregar otras a la medida.

La rigidez del proceso cohíbe la creatividad y la innovación.

La creatividad y la innovación se alimentan por la flexibilidad del proceso.

La comunicación con el cliente se hace por medio de interventores o terceros, con lo cual, se retrasan las comunicaciones y se distorsiona el mensaje original.

La comunicación es personal y eso agiliza el proceso de desarrollo, además, de conservar la fidelidad del mensaje original.

El cliente es un componente externo al proyecto de desarrollo y que se encarga de fijar los requerimientos y validar los resultados.

El cliente es parte integral del proyecto de desarrollo y trabaja en grupo con el equipo de desarrollo hasta su conclusión.

La entrega del proyecto es única y cuando está completamente terminado, listo para pasar a la fase de pruebas.

La entrega es frecuente y en pequeños paquetes, fáciles de evaluar e implementar de una vez en producción.

La corrección de las fallas en el período de pruebas es de hecho lenta y dispendiosa debido a los canales de comunicación y lo laxa de la entrega.

La corrección de errores es más rápida y eficiente porque se evalúan pequeñas partes funcionales con cada versión y en concurso de cliente y desarrolladores.

Se desarrollan funcionalidades que en muchas ocasiones no entraran en producción hasta mucho tiempo después de la implementación.

Se desarrollan únicamente las funcionalidades necesarias en el momento en que sean requeridas (justo a tiempo).

El diálogo entre clientes, patrocinadores y desarrolladores es complejo porque no se maneja la misma terminología entre ellos.

El diálogo entre clientes, patrocinadores y desarrolladores se simplifica porque manejan lenguaje metafórico.

Los desarrollos producen códigos complejos y difíciles de leer.

Los desarrollos entregan productos más sencillos y fáciles de leer.

Los desarrollos de cada programa los realiza un programador en solitario.

Los desarrollos de cada programa los realiza una pareja de programadores que se rotan.

El entrenamiento para los programadores se imparte en cursos especialmente establecidos.

El entrenamiento para los programadores es de carácter cruzado (gracias a la rotación).

Las versiones de las soluciones son intocables hasta la liberación definitiva de una nueva versión.

Las versiones de las soluciones están en permanente evolución y se alteran a cada momento durante el desarrollo.

Algunos programas pueden presentar redundancia o funcionalidades inútiles y no se pueden actualizar sus diseños oportunamente.

Los programas son actualizados permanentemente y modificados sus diseños, gracias a la refactorización.

La retroalimentación es lenta y en ocasiones está desactualizada.

La retroalimentación es inmediata y siempre corresponde a lo que se está haciendo.

La prioridad es el cumplimiento del contrato. La prioridad es la satisfacción del cliente. Se involucran individuos que no están motivados con el proyecto.

Solamente se involucran las personas motivadas con el proyecto.

Los proyectos se terminan y los desarrollos cesan de inmediato.

Los desarrollos son sostenibles y capaces de sostener su marcha para emprender nuevos proyectos.

Las reuniones de evaluación para el proyecto se ajustan al cronograma inicial.

Las reuniones son diarias y de no más de 20 minutos.

Fuente: Realizada por los autores del presente artículo, luego de una respectiva investigación.

VI. CONCLUSIONES

Los procesos de la Programación eXtrema son conocidos desde los orígenes de la ingeniería de software, la diferencia de esta metodología es que da prioridad a las tareas que dan resultados

directos.De igual forma, el conjunto de prácticas de las cuales se compone el proyecto de XP, son aquellas que a lo largo de la historia han demostrado ser las mejores prácticas de desarrollo de software, la diferencia radica en que son llevadas al extremo.

9 9


En la programación extrema, la relación con el cliente se mejora sustancialmente, debido principalmente al grado de compromiso y nivel de dedicación que conllevan pertenecer al equipo; el contacto directo entre los componentes humanos del proyecto, agiliza las comunicaciones y disminuye los ruidos, permitiendo una rápida respuesta del grupo de desarrollo a los cambios de valores del cliente.

La adaptabilidad y la evolución son parte fundamental de la existencia en nuestro entorno, el enfoque simplista hacia los cambios en un modelo metodológico va en oposición a la realidad que nos rodea y es nuestra opción mantenernos inmersos en el error o corregir dicha situación.

Al utilizar metodologías agiles como la programación extrema, los proyectos de desarrollos se hacen modulares e incrementales, haciendo que cada entrega sea el punto de partida para un nuevo proyecto de desarrollo.

AGRADECIMIENTOS

Nos gustaría que estas líneas sirvieran para expresar los más profundo y sincero agradecimientos a todas las personas que con su ayuda han colaborado en la realización del presente trabajo, en especial al Ing. Luis Carlos Torres, quien nos ha inculcado de diferentes formas la razón de ser de la profesión.

Al ingeniero Pedro Forero por la orientación, el seguimiento y la supervisión continúa del presente escrito. Especial reconocimiento merece el interés mostrado por este artículo y las sugerencias recibidas del docente y amigo Néstor Forero, con el que nos encontramos en deuda. También nos gustaría agradecer la ayuda recibida del ingeniero Jairo Cortes por su amistad y colaboración, de la misma forma al ingeniero Fabián Blanco.

Un agradecimiento muy especial merece la comprensión, paciencia, ánimo y apoyo de nuestros familiares.

A nuestra alma mater por acogernos en sus instalaciones, y tomar la gran responsabilidad de formarnos como personas e íntegros profesionales.

A todos ellos, muchas gracias.

REFERENTES

[1] Fowler. Martin. "Refactoring: Improve the Design of Existing Code". Addison-Wesley Pub Co, ISBN: 0201485672, 1a edición junio 1999

[2] Highsmith. Jim. “Extrme Programming Agile project Advisory Servervice White paper”. 37 Broadway,Arligton 2000. [3] Beck, K. (1999). “Extreme Programming Explained”. Adisson-Wesley. Capitulo 7.

[4] Calero S. Manuel. “Una explicación de la programación extrema (XP)” V Encuentro usuarios xBase 2003 MADRID. Recuperado el 19 – 09 – 2012 de http://www.willydev.net/descargas/prev/ExplicaXP.pdf

[5] Bautista M. Jose (). “Programación extrema (XP) Extreme Programming (XP)”. Recuperado el 19 – 09 – 2012 de http://www.ingenieriadesoftware.mex.tl/images/18149/PROGRAMACI%C3%93N%20EXTREMA.pdf

[6] Gómez. Daniel. Aranda. Elisabet y Fabrega. Jordi “Programación Extrema”. Recuperado el 19 – 09 – 2012 de http://eisc.univalle.edu.co/materias/WWW/material/lecturas/xp.pdf

[7] Kumar G. Pavan. “Build your Project using Extreme Programming”. (Referencia de un artículo). 2009.pp.2-3.

10 10


[8] Joskowicz. José. “Reglas y Prácticas en eXtreme Programming”. 2008.pp.11-12.

[9] Smith. Suzanne. “WHAT WE CAN LEARN FROM EXTREME PROGRAMMING”. 2011. pp.145.

[10] Tixi. Juan, Diciembre 2008. Previa a la obtención de grado. “Análisis, diseño y desarrollo de un sistema de constatación física de bienes para la dirección financiera de la ESPE usando dispositivos móviles y la plataforma .Net”. Escuela Politécnica Del Ejército.pp.20-28. Recuperado el 19 – 09 – 2012 de http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/1054/1/T-ESPE-021868.pdf

[11] Robles. Gregorio. “Programación Extrema y Software Libre”. Universidad Rey Juan Carlos – Madrid.2002.pp.3-7.

[12]Molpeceres. Alberto. “Procesos de desarrollo: RUP, XP y FDD”. 2002.pp.1.

[13]. Berrueta. Diego. “Programación extrema y software libre”. 2006. pp.1.

[14] Cortizo P. José Carlos. “eXtreme Programming”. pp.28.

[15]Cunningham.Ward.“Extreme Programing ”. O’Reilly & Associates. 2003. pp.10

[16] M.C. Campos. “Programación Extrema: Prácticas, Aceptación y Controversia”. 2006. pp58-59.

[17] Robles. Gregorio. “Programación Extrema y Software Libre”. Universidad Rey Juan Carlos – Madrid. 2002. pp.2-3.

[18] Roberth G. Figueroa. “Metodologías Tradicionales vs. Metodologías Agiles”. Universidad Técnica Particular de Loja, Escuela de Ciencias en Computación. pp.1-4.

[19] Laboratorio Nacional de Calidad del Software. “Ingenieria del software: Metodologias y Ciclos de vida”. 2009. [20] Reynoso, Carlos. “Métodos Heterodoxos en Desarrollo de Software”. Universidad de Buenos Aires.2004.pp.12-55.

1

APROXIMACIÓN AL ESTADO DEL ARTE DE LA SOLDADURA EN

COLOMBIA Y SU COMPARACIÓN A NIVEL INTERNACIONAL

Héctor Fernando Rojas Molano1 , Hivo Alfonso Patarroyo Pulido2

Resumen

En los últimos años en Colombia el notable

aumento de proyectos de infraestructura e

ingeniería ha aumentado la demanda de

profesionales calificados, capaces de

responder con eficiencia y competitividad en

campos como el diseño, construcción,

control e inspección de estructuras y

componentes soldados.

En Colombia el consumo de acero es uno de

los más bajos de América Latina pero gracias

al auge de proyectos de infraestructura y

crecimiento de la construcción el país ha

multiplicación de la demanda de talento

humano en el sector de la soldadura. En el

país, este mercado mueve alrededor de

150.000 millones de pesos al año y genera

más de 150.000 empleos directos y cerca de

200.000 indirectos; la industria de la

soldadura ha evolucionado constantemente

con la aplicación de nuevos equipos

proceso y materiales cuyo avance está

directamente ligado con el desarrollo

tecnológico e incorporación de mejores

métodos en la producción manufacturera

nacional.

1 Universidad Libre Facultad de Ingeniería Seccional Bogotá – [email protected] 2 SENA Centro de Materiales y Ensayos Regional Distrito Capital – [email protected]

Este documento hace una aproximación al

estado del arte la tecnología de la soldadura

en Colombia y lo compara con los avances

internacionales.

Abstract

In recent years in Colombia the significant

increase in infrastructure and engineering

projects it has increased the demand for

qualified professionals able to respond

efficiently and competitiveness in areas such

as design, construction, inspection and

control structures and welded components.

In Colombia steel consumption it is one of

the lowest in Latin America but thanks to the

boom in infrastructure projects and

construction growth the country has

multiplication in demand for human

resources in the field of welding. At home,

this market moves about 150,000 million

pesos a year and generates more than 150,000

direct jobs and 200,000 indirect; the welding

industry has constantly evolved with the

implementation of new equipment and

materials process whose progress is directly

2

linked with technological development and

incorporation of best practices in national

manufacturing output.

This document makes an approach to the

state of the art welding technology in

Colombia and compares it with international

developments.

Palabras Clave: Tecnología en soldadura,

Arco Pulsado. MIG Pulsado, brecha

tecnológica.

Key words: Technology in welding, pulsed

arc. Pulsed MIG, technological gap.

Introducción

La tecnología de los procesos de soldadura

conforme a lo que indica la Asociación

América de Soldadura (AWS) y la Asociación

Colombiana de Soldadura y Ensayos

(ACOSEND), agrupan tecnologías tales

como Material Base, Procesos, Metales de

Aporte, Gases, Equipos, Aseguramiento de

la calidad y Tecnologías recurrentes, las cuales

están a su vez con múltiples subdivisiones y

cada una de ellas es un campo vasto de

investigación, desarrollo, innovación,

formación y comercialización.

Los desarrollos de aplicaciones para obtener

uniones soldadas que cumplan requisitos de

códigos internacionales o regulaciones

gubernamentales toman referentes en los

avances de la microelectrónica, software y

nuevos materiales metálicos.

Obras como mega proyectos, requieren de

confluencia tecnología y análisis

interdisciplinarios, generando nuevos

conocimientos que se traducen en la

aplicación y desarrollo de hardware que en

soldadura se denomina procesos sinérgicos

de soldeo.

El retraso tecnológico, que en décadas

anteriores comparativamente tenia Colombia

con países del primer mundo, en este

momento no existe, basta con consultar u

motor de búsqueda en internet y por medio

de una simple transacción bancaria tener el

equipo y su tecnología en el país en termino

de días o semanas, lo cual hace que en el

campo de soldadura, Colombia cuente con

el top de la tecnología en tiempo real, aquí y

ahora.

3

En el país se construyen mega proyectos en

infraestructura y comunicación que

requieren talento humano formado y

certificado de talla mundial, que pueda

brindar soluciones prácticas y oportunas con

el empleo del conocimiento en tecnologías de

soldadura.

Mega proyectos colombianos

Colombia se encuentra desarrollando mega

proyectos con un valor que sobre pasa los 35

billones de pesos entre los cuales se

encuentran:

Ruta del sol con inversión de 14.2 billones de

pesos el cual reducirá de 25 horas el trayecto

de Bogotá a la costa Atlántica en 12 horas,

asegurando la importación y exportación de

bienes y el auge del turismo en este

importante eje comercial y empresarial en el

país.

Autopista transversal de Américas, con

inversión de 8.5 billones de pesos, creara un

corredor entre panamá, Colombia y

Venezuela. Integrando los puestos en el

océano pacifico y el atlántico, tiene un tiempo

de ejecución de 9 años.

Desarrollo de un Satélite para

telecomunicaciones con una inversión de

507 millones de pesos

Modernización de la red pública de televisión

y radio con inversión de 150.000 millones

dólares.

Sistema Férreo Central con inversión de 1.3

billones de pesos.

Refinería de Cartagena, REFICAR, la cual

construirá 12 nuevas unidades de producción

de derivados del petróleo y aspira que el

máximo pico de empleo será para el año 2015

de unos 6 mil trabajadores de los cuales se

espera contratar a más de 2.000 mil

soldadores, armadores y tuberos. La

inversión del mega proyecto será más de

3.842 millones de dólares.

Pacific Rubiales, empresa Colombo

Canadiense, la cual produce y exporta en red

con una producción diaria bruta de 163.877

barriles de petróleo pesado solo en la zona de

los Llanos Orientales.

Oleoducto Bicentenario (OBC), el oleoducto

de mayor longitud que será construido en

Colombia, el cual se desarrollara en cuatro

fases y se espera que finalice en diciembre de

2012. La inversión inicial será de 560

millones de dólares, contara con una

longitud de 235Km en tubería con diámetro

de 24 pulgadas con una capacidad neta bruta

de 330.000 bpd.

Según reuniones entre el Centro de Materiales

y Ensayos del SENA con funcionarios de

Ecopetrol, CBI, Schared Camargo y

Cotecmar, la necesidad de contar con talento

humano en tecnologías en soldadura es de

vital importancia para el éxito de estos mega

proyectos, debido a que el país presenta una

marcado déficit de soldadores, operarios de

soldadura, paileros, montadores, inspectores

e instructores certificados y profesionales en

control de la corrosión.

4

Las tecnologías en soldadura, inspección y

control de la corrosión que estos proyectos

requieren se encuentran disponibles en el país

y están a la espera que realizar procesos de

formación y entrenamiento para posicionarse

a escala industrial.

Tendencias Mundiales en procesos de

soldeo

En análisis separados de la Asociación

Americana de Soldadura (AWS) y de DVS

en Alemania, se espera que los siguientes

procesos sean los de mayor crecimiento en la

década de 2010 a 2020:

Soldadura de metal bajo gas protector en

alambre sencillo, tandem, twin de sección

circular o sección rectangular.

Soldadura por láser

Soldadura por láser híbrida

Desarrollo de aplicaciones como TIG y

MIG Braizing

Proceso CMT que permite soldeo entre

metales disimiles (Acero-Aluminio) Soldeo

por fricción en acero y aluminio Soldeo por

explosión

Así mismo, el empleo de fuentes de poder

para soldadura con tecnologías de control

de onda y manejo de pulsos con la tecnología

sinérgica que permiten el manejo de la

tensión superficial del charco de soldadura,

como lo son equipos:

Pipe Pro con tecnologia RMS STT( Steel

tranfer technology) CMT (Cold Metal

Transfer)

Estas fuentes de poder semiautomáticas

permiten desarrollar aplicaciones de soldeo

exigentes con talento humano en niveles

básicos de soldadura.

La independización de la mano de obra del

soldador es una tendencia marcada, por ello

la tecnología mundial migra a procesos

atomatizados tales como soldadura MIG y

FCAW orbital para la construcción de

oleoductos y procesos robotizados en la

manufactura de bienes de capital y de

automoción.

La aplicación en países del primer mundo o

desarrollados de soldadura en metales de

aleaciones en aluminio, titanio, magnesio y

aceros inoxidables y aceros de alta resistencia

HSLA, se encuentran con el desarrollo de

consumibles que aseguren la compatibilidad

metalúrgica o soldabilidad.

Los procesos de inspección de las uniones

soldadas como técnica de ultrasonido Face

Array, termografía pasiva y activa,

metalografia por réplica, fluoroscopía de

rayos X, así como procesos de inspección

visual remota se encuentran en pleno furor.

Las técnicas de protección contra la

corrosión y cálculos de vida residual en

consonancia con prevención desde la

aplicación de la tecnología, impactan de

forma importante el campo laboral mundial.

La formación del nuevo talento humano y la

actualización del existente, se realiza en los

países de Europa y Norte América conforme

a guías y normas establecidas y realizadas en

centros de formación acreditados (ATF), por

5

la Asociación Americana de Soldadura

(AWS), para el caso de Estados Unidos,

Canadá y México.

Al respecto de las normas y trabajo seguro se

encuentran las recomendaciones dadas por

OSSHA y la norma ANZI Z49-1, que son de

estricto cumplimiento.

Estado actual en los procesos de soldeo

en Colombia

En entrevistas realizadas al director Ejecutivo

de la Asociación Colombiana de Soldadura y

Ensayos (ACOSEND), comenta que se han

realizados estudios sectoriales en soldadura y

el más reciente se realizó en el año 2006 a

cargo del Centro Colombo Alemán de

Soldadura, Centro que funge como secretaria

de la mesa sectorial de soldadura, se presenta

una tendencia a los procesos

semiautomatizados con protección con gas o

polvo.

Comparada esta tendencia del año 2006, con

empresarios privados y empresas

gubernamentales como COTECMAR, ellos

estratifican las empresas dedicadas a la

construcción metálica en; empresas

pequeñas, medianas y gran empresa.

La tecnología empleada en la pequeña

empresa está basada en equipos de soldadura

manual, corte con oxipropano y biselado

con pulidora y disco abrasivo, se caracteriza

este segmento en no calificar procesos de

soldeo, no contar con inspectores de

soldadura ni realizar trazabilidad de a los

productos terminados, el nivel de escolaridad

es mínimo y generalmente emplean

soldadores empíricos. Para la elaboración

de estructuras no cuentan con cálculos de

resistencia de materiales ni dinámicos, se

realizan por referencias a trabajos anteriores.

Al respecto de cumplimiento de regulaciones

y protección al personal profesionalmente

expuesto, se deja de lado y la tendencia a

sufrir accidentes y generar enfermedades

profesionales debido al trabajo con metales es

de alto impacto.

En el segmento de la mediana empresa, se

presenta una tendencia a realizar

prefabricados en taller con el empleo de

tecnologías semiautomáticas, tipo MIG, las

actividades de inspección y calificación de

procedimientos, solo se realizan cuando el

cliente las solicita, el empleo de talento

humano es de nivel técnico o empíricos

quienes han sido calificados en otros

empresa, generalmente en proyectos

petroleros o de infraestructura. Este tipo de

empresas manejan planos de taller y de

fabricación, que generalmente son enviados

por arquitectos calculistas.

El segmento de gran empresa, se caracteriza

por realizar proceso de calificación de

procedimientos y soldadores, generalmente

subcontratando a inspectores o empresas

dedicadas a inspección y ensayo, cuentan con

inspectores certificados y se realiza

interventora por terceros, hay trazabilidad de

las uniones soldadas y generalmente se

enmarcan en sistemas de calidad. Estas

empresas realizan por subcontración con

calculistas y aportan planos de fabricación

detallados. El empleo de procesos

semiautomatizados, mecanizados como

6

tecnologías típicas, este tipo de empresas

cuenta con procesos robotizados para

soldadura y corte.

La brecha tecnológica en Colombia

Esta condición se encuentran en países que

presentan diferencias de desarrollo

tecnológico en el área de la soldadura, pues

debido al incremento comercial, las zonas de

libre comercio y los acuerdos entre países

(Unión Europea), concurren en puntos

determinados por el uso de normas de

producto, lo cual logra equilibrio en el acceso

a la tecnología.

En este orden de ideas, los industriales

colombianos de empresas medianas y

grandes pueden tener acceso a la tecnología

pero no la utilizan en su totalidad, pues

carecen de formación específica en el empleo

de la misma.

En cuanto al uso de la tecnología en

soldadura, esta se tipifica en el empleo de

equipos, procedimientos calificados y

desarrollo de aplicaciones, los empresarios

colombianos, ven a la soldadura como una

actividad productiva más, la cual funciona

como una operación de una máquina

herramienta, la cual basta con la

incorporación de un nuevo equipo y

presuponen que el soldador lo opere, esto

hace que la característica de formación

permanente y empleo de normas se limite a lo

estrictamente requerido por un contrato.

Desde el punto de vista de la calidad, mientras

las empresas de países desarrollados solo

permiten la aplicación de soldadura a

soldadores certificados, en cualquier tamaño

de empresa, en Colombia, se permite soldar a

toda aquella persona que dice saber,

obviamente que en tanto la empresa por

intermedio de terceros solicite talento

humano certificado ella lo exigirá, de lo

contrario no.

El papel del SENA

Para que Colombia corte esta brecha

tecnológica que tiene con los países

desarrollados, es necesario que se invierta

formación de instructores, en certificaciones

bajo AWS y en recursos tecnológicos, los

cuales deben ser suministrados a todos los

centro de formación según la vocación de

cada regional, en documentos enviados por

diferentes directores regionales, se marca

una tendencia al uso de tecnologías

protegidas por gas y procesos manuales con

equipos que en promedio superan 20 años.

Todos los centros de formación deben contar

con equipos sufrientes y gestión de

consumibles y materiales de aporte

proporcionales a la competencia

internacional a desarrollar, en ambientes con

distribución en planta conforme los

requisitos de los ATF. Los programas de

formación deben ser articulados por un red

nacional de soldadura, liderada por un equipo

técnico interdisciplinario, donde confluyan

inspectores CWI, educadores CWE y

expertos en soldadura, para desarrollar

conforme a los criterios de las guías QC de

AWS el itinerario de formación.

Así mismo, el papel de formado y certificador

que tiene el SENA se debería dividir, para

que un órgano independiente realice este

proceso, y el SENA retorne a su misión

7

constitucional de la formación. Con esta

implementación, se tendría un estado real del

impacto en la formación y se podrían

emprender acciones de mejora continua a los

proceso de formación. Este modelo es el

aplicado en Alemania y en estados unidos.

Referencias

1. Memorias del V congreso Colombiano de

Soldadura Octubre de 2004

2. Memorias del VI congreso Colombiano

de Soldadura Octubre de 2010

3. www.aws.org

4. www.weld-ed.org

5. www.iiw-iis.org

6. http://www.pacificrubiales.com/archi

vos/investor/PRE_presentation_Febr

uary_1_2011.pdf

7. www.dinero.com/negocios/oleoducto-

bicentenario-sera-construido-

socios_79739.aspx

8. www.infraestructura.org.co

9. AWS D1.2 – Structural Welding Code –

Aluminum

http://www.aws.org/

http://www.weld-ed.org/

http://www.iiw-iis.org/

http://www.infraestructura.org.co/

1

ANÁLISIS DE LA INFECCIÓN DE VELLOSIDADES AISLADAS DE RATÓN LACTANTE POR EL ROTAVIRUS HOMÓLOGO

ECwt LUEGO DE CHOQUE TÉRMICO

Manuel Ricardo García A1; Carlos A Guerrero F2 Resumen Los rotavirus son agentes infecciosos capaces de causar enfermedades del tracto gastrointestinal en el hombre y animales de interés económico como porcinos, bovinos y aves. Los rotavirus son capaces de transmitirse entre el hombre y los animales, además que su incidencia en las poblaciones humanas no depende estrictamente de las condiciones de higiene. La proteína Hsc70 se localiza en la membrana citoplasmática y está implicada como receptor rotaviral en las líneas celulares MA104 y en las células intestinales aisladas de ratón lactante, es probable que al someter las células al choque térmico se aumente su expresión a nivel de membrana y esto se correlacione con un aumento en la infección. Este trabajo buscó analizar la infección de vellosidades aisladas de ratón lactante por el virus ECwt luego del choque térmico. Encontramos que los enterocitos de las vellosidades aisladas del intestino de ratón se mantienen viables por encima del 90% en condiciones de choque térmico e infección; Los niveles de la proteína Hsc70 a nivel de membrana y citoplasmática aumentan aproximadamente 5 veces cuando se someten los enterocitos a choque térmico. Al comparar la infección evaluando los antígenos virales, en células con y sin choque térmico se encontró que no hay diferencias. Sin embargo, al evaluar la producción de viriones infecciosos re-infectando vellosidades con el lisado procedente de células infectadas con y sin choque, se encontró mayor número de viriones en las vellosidades que previamente habían recibido choque térmico, en especial al evaluar a las 4 y 8 h.p.i. Esto sugiere que las proteínas relacionadas con el choque térmico favorecen el ensamblaje de viriones. La proteína Hsp70 no se expresa a nivel de membrana, pero el choque térmico aumenta su expresión entre 40 y 60 veces a nivel membranal y citoplasmático respectivamente. La infección por rotavirus aumenta 15 veces la cantidad de células que expresan la proteína, aunque no hubo un aumentó por encima de estos niveles cuando ambos tratamientos se combinaron. Abstract Rotaviruses are infectious agents capable of causing diseases of the gastrointestinal tract in humans and animals of economic interest as pigs, cattle and poultry. Rotavirus is capable of transmission between humans and animals, in addition to its impact on the human population does not depend strictly hygienic conditions. The Hsc70 protein is localized in the cytoplasmic membrane and is implicated as rotavirus receptor in cell lines MA104 and intestinal cells isolated from suckling mouse, is likely to subject the cells to heat shock expression is increased level of membrane and this correlated with increased infection. This study sought to analyze the infection of suckling mouse-isolated villi by ECWT virus after heat shock. We found that the enterocytes of the intestinal villi isolated mouse remains viable above 90% under thermal shockand infection; Levels HSC70 level and

1 Pontificia Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias Básicas, Bogotá. 2 Departamento de Ciencias Fisiológicas, Facultad de medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá. Correspondencia a: Carlos A. Guerrero MD, MSc, PhD. Profesor de Medicina, Departamento de Ciencias Fisiológicas, Facultad of Medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá, Colombia. Dirección: Carrera 45 # 26-85, Bogotá D.C. [email protected]. Teléfono: -3165000 Ext. 15052

mailto:[email protected]

2

cytoplasmic membrane increases about 5-fold when enterocytes are heat shock. Comparing evaluating infection viral antigens in cells with and without heat shock found no differences. However, in assessing the production of infectious virions re-infecting villi with the lysate from infected cells with and without shock, as many virions was found in the villi had previously received thermal shock, especially when evaluating the 4 and 8 hpi. This suggests that proteins related to the heat shock favor virion assembly. Hsp70 protein is not expressed at membrane level, but the thermal shock increases expression between 40 and 60 times respectively membrane and cytoplasmic level. Rotavirus infection increases 15 times the amount of cells expressing the protein, although there was no increased above these levels when both treatments were combined. Palabras claves: vellosidades, ratón, rotavirus, ECwt, humanos y animales. Key words villi, mouse, rotavirus, ECwt, humans and animals. Introducción

La diarrea es una de las enfermedades infantiles más comunes tanto en naciones desarrolladas como en vías de desarrollo. Una de las causas es infección por rotavirus cuya transmisión es oral-fecal. Esta afección gastrointestinal está diseminada en todo el mundo principalmente durante los dos primeros años de vida. Una estrategia optima para el manejo de la diarrea infantil consiste en la terapia de rehidratación oral, correcta alimentación, no uso de antidiarreicos y cuidados adecuados por parte de la madre o cuidador del paciente. La sintomatología comienza con vómito seguido por la diarrea acuosa, esta puede ser blanda y de corta duración o severa con deshidratación secundaria. Son frecuentes la fiebre y el dolor abdominal. El vómito y la fiebre cesan durante los 2 a 3 días iniciales de la enfermedad y la diarrea suele persistir durante 4 ó 5 días. Las infecciones tienden a ser más severas en niños entre 3 y 24 meses de edad, asimismo los niños infectados por rotavirus durante los 3 primeros meses de edad suelen ser asintomáticos probablemente debido a los anticuerpos maternos. De igual manera las personas con infecciones repetidas pueden ser asintomáticas o presentar síntomas leves debido a la inmunidad adquirida por infecciones anteriores (Desselberger & Gray, 2005; OPS, 2007)

El virus conserva su patogenicidad y viabilidad por horas e incluso días en manos y superficies sólidas, de manera que las manos, juguetes e incluso alimentos contaminados pueden actuar como medios para la diseminación del virus. La excreción aproximada de 108 a 1011 partículas por gramo de heces, su permanencia en el agua potable y recreativa, la incapacidad de los desinfectantes de contacto y jabones para mano para remover eficientemente la carga viral infectiva de superficies, la infección cruzada con animales, y la excreción de virus en heces incluso antes de que comiencen los síntomas de diarrea, hace que los rotavirus se conviertan en un agente que afecta todos los estratos sociales y esté ampliamente distribuido en el mundo (Vasickova et al., 2005)

Las infecciones predominan en invierno en países templados, mientras que en los países tropicales las afecciones suelen ocurrir durante todo el año con probables picos mayores durante la época de lluvia (OPS, 2007). En general, los genotipos más frecuentemente identificados en Bogotá, Cali y Barranquilla fueron G3 [P8] (32,7%), G2P [4] (21,1%) y G1P [8] (19,1%) además de algunos genotipos mixtos en 8,5% de las muestras (Cáceres et al., 2006)

3

Los rotavirus conforman el género Rotavirus dentro de la familia Reoviridae, se caracterizan por (i) tener partículas maduras de 100nm de diámetro con tres capas concéntricas de proteína icosahédrica, (ii) 60 espículas proteicas que se proyectan de la capa externa, (iii) requerimientos de calcio para mantener la integridad estructural de la capa externa, (iv) presencia de RNA polimerasa dependiente de RNA y otras enzimas capaces de producir transcritos (v) genoma de 11 segmentos de RNA doble cadena, (vi) posible recombinación genética entre virus del mismo grupo, (vii) la replicación viral se lleva a cabo en el citoplasma, (viii) el clivaje del polipéptido de las espículas de la cápside mejora la infectividad in vitro (ix) las partículas virales se forman mediante gemación a través del retículo endoplasmático para producir partículas con envoltura, la cual se pierde posteriormente antes de ser liberadas por lisis o transporte vesicular no clásico en células epiteliales polarizadas. El nombre rotavirus se refiere a que las partículas icosahédricas parecen ruedas con sus espículas a modo de radios en una rueda, existen como TLPs (con sus tres capas intactas) y DLPs sin la más externa, por lo que estos son incapaces de una infección exitosa dado que carecen de los dominios con receptores celulares (Estes & Kapikian, 2007).

Existen 7 grupos de rotavirus (A a la G) de los cuales A, B y C infectan animales y humanos por

igual mientras que los demás sólo se han reportado en animales, a pesar de la capacidad que tienen estos agentes infecciosos de reorganización genómica entre cepas relacionadas. Los rotavirus del grupo A son los causantes de episodios diarreicos en niños y en crías de mamíferos y aves, el grupo B agrupa a agentes causantes de epidemias de diarrea severa en adultos chinos, y por último están los del grupo C que son detectables esporádicamente en las heces de niños durante epidemias familiares (Estes & Kapikian, 2007) Los rotavirus hacen uso de por lo menos dos receptores distintos para interactuar con sus células hospederas, los de adhesión que le permiten unirse a la superficie celular, y los de entrada que permiten la internalización de las partículas virales para iniciar el ciclo replicativo. Estos últimos también reciben el nombre de co-receptores, de posteriores a la unión, fusión o de entrada (López & Arias, 2004; López & Arias, 2006)

El proceso de entrada de los rotavirus a la célula es poco conocido y aunque podría darse por penetración directa mediada por la proteína VP5* (Denisova et al., 1999), la entrada por medio de endosomas le permite desprenderse de este por la baja concentración de Ca2+ en los compartimentos endosómicos antes de ser llevados a lisosomas para la pérdida de la primera capa y conversión en DLP. La liberación de esta DLP transcripcionalmente activa en el citoplasma genera una producción de transcritos mRNA (+) a través de los canales de las vértices de la cápside.

La familia de proteínas denominadas genéricamente como proteínas de choque térmico o HSPs (por

sus siglas en ingles “Heat Shock Proteins”) ayuda en el plegamiento, transporte y ensamble de otras proteínas, por lo cual se les conoce como chaperonas. La proteína “Heat Shock Protein Cognate” Hsc70 pertenece a la familia de proteínas de 70 kDa (HSP’s70) y se identificó primero en células sometidas a estrés, aunque posteriormente se encontró también en células no estresadas. Está compuesta de dos dominios principales: un dominio de ATPasa que tiene una estructura terciaria similar a la actina (Flaherty, et al. 1990) y un dominio carboxi – terminal que tiene una estructura secundaria similar al dominio de unión a péptidos del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) de clase I. (Becker & Craig, 1994; Bruce & Churchich, 1997; Kiang & Tsokos, 1998; Daugaard et al., 2007)

4

Las principales funciones que se han descrito para Hsc70 son citoplasmáticas y se desconoce aún cómo esta proteína se transporta y se ancla en la membrana citoplasmática. Se ha encontrado por citometría de flujo e inmunofluorescencia, que la proteína Hsc70 está en la superficie de la membrana citoplasmática de algunas líneas celulares y células tumorales, así como en células normales luego de someterlas a choque térmico. Entre las funciones básicas se encuentra la solubilización de agregados proteicos denaturados, restauración de la estructura/ función proteica luego del estrés térmico y eliminación de proteínas irreparables a proteasomas u organelos de degradación (Becker & Craig, 1994; Bruce & Churchich, 1997; Kiang & Tsokos, 1998; Daugaard et al., 2007)

Estudios realizados sugieren que durante el proceso de entrada de múltiples pasos del Rotavirus a la célula, la partícula viral además de utilizar las proteínas de la cápside externa VP4 y VP7 también utiliza la proteína VP6 la cual se une a moléculas receptoras como Hsc70. Probablemente en cada interacción se inducen cambios conformacionales en las proteínas del virión y en las proteínas receptoras exponiendo diferentes dominios de VP4, VP7 y VP6, lo cual facilita la entrada del virus a la célula (Guerrero et al., 2002; Gualtero, et al., 2007). Partimos del raciocinio que la proteína HSC70 se localiza en la membrana citoplasmática y está implicada como receptor rotaviral en las líneas celulares MA104 y en las células intestinales aisladas de ratón lactante, es probable que al someter las células al choque térmico se aumente su expresión a nivel de membrana y esto se correlacione con un aumento en la infección. Por esta razón este trabajo busca analizar la infección de vellosidades aisladas de ratón lactante por el virus ECwt luego del choque térmico. Para esto, determinamos la viabilidad de las células aisladas del intestino delgado de ratón lactante. Evaluamos la expresión de antígenos virales en diferentes tiempos post-infección con el virus ECwt en vellosidades aisladas sometidas a choque térmico y evaluamos la expresión de la proteína Hsc70 en la membrana citoplasmática luego de someter las células aisladas de ratón lactante al choque térmico

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño experimental El primer factor de diseño es la infección de los enterocitos de ratón con el rotavirus homólogo

silvestre ECwt, los niveles de este factor son infectados y no infectado. El segundo factor de diseño es el choque térmico de los enterocitos aislados, los niveles de este factor son con choque y sin choque. Se combinarán todos estos niveles así: choque térmico no infectado (Ch NI), sin choque térmico infectado (NCh Inf) y con choque térmico e infectadas (S Inf).

Sujetos experimentales, virus y anticuerpos Los sujetos experimentales fueron ratones lactantes cepa ICR de 10 a 12 días, obtenidos de Instituto

Nacional de Salud, sin distinción de sexos para mantener las condiciones aleatorias que podrían surgir in vivo. La cepa homóloga ECwt (EDIM CAMBRIDGE Wildtype) P17 G3 se obtuvo como donación del Dr. Harry Greenberg del Stanford University, a partir de una muestra proporcionada por el Dr. Manuel Franco del Instituto de Genética de la Pontificia Universidad Javeriana. También se utilizó la cepa heteróloga RRV (rotavirus de simio Rhesus) donada por el Dr Carlos Arias del Instituto de Biotecnología de la UNAM, México. Los dos virus fueron replicados en el laboratorio de Biología Molecular de Virus de la unidad de Bioquímica de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Colombia.

5

Para todos los ensayos se agregaron los rotavirus RRV (MOI de 9) y ECwt (MOI de 5), previamente activados con tripsina (1μg/ml) durante 30 minutos a 37 OC. Para la infección se utilizó una dilución 1:1 v/v de RRV (cuyo título en células MA104 fue de 4.3 X106 UFF/ml). El rotavirus ECwt se tituló en cultivo de vellosidades y se usó en dilución 1:10 v:v (título aproximado de 8 x 106 UFF/ml, titulado en vellosidades aisladas). Como control de especificidad viral se utilizó el virus denominado Reovirus, que pertenece a la misma familia de rotavirus (Reoviridae), también produce diarrea, aunque los síntomas son leves, respecto a rotavirus, pero el mecanismo de infección es diferente. Obtención de enterocitos separados de las vellosidades Esta metodología fue probada para intentar obtener una mayor cantidad de células a partir del intestino de ratón y para ver qué tan factible podría resultar el trabajo con los enterocitos de forma individual, lo cual podría facilitar el conteo con inmunocitoquímica y además establecer cómo responden las células a la separación entre sí. Para aislar enterocitos del intestino delgado se siguió una metodología descrita por varios autores (Weiser, 1973; Whitt & Savage, 1988, Simmy et al., 2001. Santana 2009). El proceso se llevó a cabo en cabina de flujo laminar bajo condiciones de esterilidad. Luego de sacrificar los animales por dislocación cervical (Beaver et al, 2001), la piel del abdomen se limpió con alcohol y se cortó de forma longitudinal. Se ubicó el píloro y se cortó el extremo distal del intestino delgado, se extrajo y se mantuvo en Medio Esencial Mínimo EAGLE modificado (MEM). Se puso una jeringa por el extremo más ancho (duodeno) y se lavó con 5 ml de medio de cultivo con antibiótico y antimicótico (Kanamicina: 100µg/ml, Ampicilina: 100µg/ml y Anfotericina B: 2,5 µg/ml). Para obtener enterocitos aislados de las vellosidades, el intestino se lavó con 5 ml de medio con antibiótico y EDTA 3 mM. El intestino se cortó en forma longitudinal, luego se cortó en fragmentos de más o menos 0.5 cm, en una caja de Petri con 7 ml de medio de cultivo que contenía EDTA 3 mM, Ditiotreitol (DTT) 1mM y antibiótico. Los fragmentos se recuperaron en un tubo de centrífuga de 15 ml y se incubó por 30 minutos a 37 oC con agitaciones de 400 rpm. Obtención de vellosidades intestinales

Para obtener las vellosidades completas, se siguió la metodología estandarizada en el laboratorio (Santana 2009). Para esto, se sacrificó el ratón lactante, se extrajo el intestino, se lavó con 5 ml de medio de cultivo con antibiótico y EDTA 1,5 mM. El intestino se cortó en forma longitudinal, luego se cortó en fragmentos de más o menos 0.5 cm, en una caja de Petri con 7 ml de medio de cultivo que contenía EDTA 1,5 mM y antibiótico. Los fragmentos se recuperaron en un tubo de centrífuga de 15 ml y se incubó por 15 minutos a 37 oC con agitaciones de 400 rpm. Con una punta de micropipeta de 1 ml cortada en el extremo terminal, se disgregó dentro de cada tubo las células, luego se pasaron, con la misma punta, por una malla estéril (1mm2 de poro) que estaba sobre una caja de Petri. Los fragmentos que no pasaron nuevamente se colocaron en el tubo de centrífuga con 5 ml de medio con EDTA 1,5 mM y antibiótico, realizando una segunda extracción bajo las mismas condiciones. Las vellosidades que pasaron el poro de la malla la primera vez se recuperan y se mezclan con la segunda extracción. La mezcla se centrifugó durante 10 minutos a 3000rpm para retirar el medio con EDTA. Se descartó el sobrenadante y el precipitado se resuspendió en 5 ml de medio con antibiótico para lavarlos. El procedimiento se repitió tres veces. Las células obtenidas se mantuvieron en medio de cultivo sin EDTA a 4 OC hasta realizar la infección con los rotavirus.

6

Viabilidad por Medio de Tinción con Azul de Tripán Para determinar la viabilidad de los enterocitos aislados de las vellosidades o de las vellosidades integras aisladas del intestino, en función de la integridad membranal, se realizó la técnica con azul de tripán. El azul tripán es un coloide que se introduce en el interior de las células que presentan ruptura en la membrana. Se usó Azul de Tripán 93595 (Sigma Aldrich) en solución para microscopía. Se puso Azul de Tripán y vellosidades intestinales o enterocitos aislados de las vellosidades, en proporción 1:1 por 1 minuto y se contaron las células sin teñir (viables) y células de color azul (no viables) en 10 campos representativos para cada uno de los tiempos post-extracción. Esta metodología se aplicó a las células utilizadas en todos los experimentos que se describen en este trabajo. Tinción Celular con Hoechst 33342 (Sigma Aldrich) Este colorante se ubica de forma intercalada entre las cadenas de DNA y permite evidenciar señales de fragmentación del material nucléico consideradas como señales terminales de un proceso apoptótico. Para esto, las células se fijaron con metanol, luego se aplicó el colorante diluido 1:200 por 20 min en cámara oscura, de una solución stock de Hoechst 1 mg/ mL en agua estéril. Las células fueron analizadas en un microscopio de fluorescencia (Van Guard). Esta metodología se aplicó a las células utilizadas en todos los experimentos que se describen en este trabajo. Ensayos de Choque Térmico Para el ensayo de Choque Térmico, los enterocitos aislados de las vellosidades o las vellosidades integras aisladas del intestino, se pusieron en un baño de María a 42ºC por 30 minutos y luego se incubaron por 30 minutos a 37ºC en ambiente con CO2 al 5% para que las células se restablecieran luego del choque térmico. Las células se utilizaron para los diferentes procedimientos descritos en el trabajo. Infección de vellosidades aisladas con el virus ECwt, RRV y Reo, con o sin choque térmico. Se quiso comparar la capacidad replicativa del rotavirus ECwt y RRV en vellosidades aisladas de intestino de ratón con y sin choque térmico. Para esto, las vellosidades aisladas del intestino se dividieron en dos fracciones: una recibió choque térmico y otra no, la cual se mantuvo a 37°C y se denomina control. Posteriormente se fraccionaron según las necesidades experimentales (variables a examinar). Las vellosidades con y sin choque térmico se sembraron en cajas de 96 pozos y se les

agregó el rotavirus ECwt (MOI de 5), RRV (MOI de 9) que se había activado con tripsina (1g/ml) durante 30 minutos a 37 OC. Luego se cosecharon en los siguientes tiempos: 0, 2, 4, 6, 8, 10 y 12 horas; cada punto se realizó por triplicado y se repitió tres veces. En algunos experimentos las vellosidades se cosecharon todas al cabo de 12hs. Las vellosidades cosechadas se analizaron mediante las técnicas de ELISA o inmunocitoquímica.

7

Infección de vellosidades aisladas utilizando lisados provenientes de vellosidades infectadas con virus ECwt o RRV con o sin choque térmico. Es importante determinar si existen diferencias en la capacidad infectiva de lisados provenientes de células sometidas a choque térmico, respecto a las que no lo recibieron y que fueron infectadas. Es decir, se quiso determinar si existen diferencias en la cantidad de viriones ensamblados en cada uno de estos tratamientos. Para esto, las vellosidades aisladas con o sin choque térmico fueron infectadas y cosechadas en los tiempos 0, 4, 8 y 12 h.p.i. (horas post infección). Luego fueron congeladas (-

20°C) y descongeladas dos veces. Posteriormente, se activaron con tripsina (1g/ml) durante 30 minutos a 37 OC. De otro lado, nuevamente se aislaron vellosidades, según la técnica descrita, y estas se pusieron en caja de 96 pozos. A estas nuevas vellosidades se le adicionó el lisado cosechado en cada una de las horas señaladas anteriormente en la siguiente proporción: el lisado que contenía ECwt se aplicó en una dilución 1:5 (v:v) y el que contenía RRV se aplicó en dilución 1:1 (v:v). Las vellosidades infectadas con el lisado se cultivaron a 37°C durante 12hs. Transcurrido este tiempo, se cosecharon a las 12 h.p.i. y se fijaron para evaluar la infección por inmunocitoquímica, utilizando Acs contra proteínas estructurales de los rotavirus. Ensayo de ELISA de Captura Las vellosidades aisladas, con y sin choque térmico, infectadas y/o no infectadas, cosechadas para analizarlas mediante la técnica de ELISA fueron congeladas a -20°C hasta la realización de la técnica. Posteriormente, se congelaron y descongelaron 3 veces, se puso buffer de lisis RIPA (NaCl 150mM, Nonident-P40 1%, Ácido Deoxicólico 0.5%, SDS 0.1% y Tris 50mM pH 8.0) en proporción 1:10. La placa de ELISA contenía Ac de captura en una dilución 1: 500 (contra RRV hecho en Conejo) o 1:500 (contra ECwt generado en Cobayo) y se incubó a 37ºC por 1 hora y luego a 4ºC durante toda la noche. Se lavó tres veces con PBS 1X (pH 7.0) para retirar el anticuerpo que no se unió a la caja, cada lavado fue de 3 minutos. Posteriormente se adicionó leche descremada al 5% en PBS 1X y se dejó 1 hora a 37ºC para bloquear. Luego se puso el lisado de las vellosidades cosechadas, con azida de sodio, y se incubó a 37ºC por dos horas. Se colocó el Ac primario 1: 1000 de origen animal diferente al usado como Ac de captura diluido en PBS 1X + Ázida de Sodio, se dejó 2 horas a 37ºC. Se lavó tres veces con PBS 1X para retirar el Ac que no se unió. Se puso el Ac. secundario 1: 3000 (100 µg/mL Santa Cruz) conjugado con peroxidasa, de origen animal igual al Ac primario, en PBS + Leche descremada al 0.5% y se incubó 1 hora a 37ºC. Se lavó tres veces con PBS 1X y se reveló con peroxidasa en tampón citrato (ácido cítrico 0.1M, citrato sódico 0.1M) y OPD (orto-fenilendiamina dihidrocloruro) 0.001g/ml y se leyó a 492nm (Biorad®). La absorbancia de las células no infectadas se restó a todas las demás absorbancias, las cuales corresponden al delta (Δ) de la absorbancia que se graficó. Inmunocitoquímica Las vellosidades aisladas, con y sin choque térmico, infectadas y no infectadas, cosechadas para analizarlas mediante la técnica de inmunocitoquímica se prefijaron con Metanol – Ácido Acético (3:1

v/v) por 5 minutos, adicionando 10 l - 50 l al medio con células. Se centrifugó a 3000g a por 10 minutos y se descartó el sobrenadante. Posteriormente las células se fijaron adicionando Metanol – Ácido Acético por 20 minutos a 0ºC. El precipitado se centrifugó a 3000g a 4ºC por 10 minutos, se descartó el sobrenadante y se lavó tres veces con PBS 1X, cada lavado con 1mL. Se guardó la muestra en PBS + Ázida de Sodio a 4ºC para evitar la proliferación de hongos y bacterias, de esta

8

forma quedan listas las células para realizar Inmunocitoquímica. Las vellosidades se colocaron sobre laminillas cubreobjetos (4x4mm), posteriormente se secaron a 50ºC para que se adhirieran a la laminilla. Luego se puso Ac primario contra las proteínas no estructurales NSP4 1:400 o NSP5 1:500 o contra proteínas estructurales de ECwt o RRV en dilución 1:2000, generados en conejo. El Ac se incubó por 1 hora a 37ºC manteniéndolos en cámara húmeda. Se lavó el exceso de anticuerpo tres veces con PBS 1X por goteo suave, sin dejar secar las células se puso Ac secundario conjugado con peroxidasa 1:3000 de un stock 200 ug/0.5ml (Santa Cruz) por 1h a 37ºC en cámara húmeda. Se lavó tres veces con PBS 1X por goteo suave y se reveló utilizando como sustrato amino etil carbazol 0,64 mg/ml (AEC) en buffer acetato (acetato de sodio 0,030 M-ácido acético 0.012 M) y peroxido de hidrógeno al 0,36%. El AEC se preparó previamente a 4 mg/ml en dimetilformamida. Las células se incubaron hasta detección de coloración roja en las células infectadas. Los controles fueron células infectadas e incubadas con Acs no relacionados y células no infectadas incubadas con Acs contra rotavirus. Las vellosidades se analizaron en un microscopio de luz a 40x (Van Guard). Se tomaron fotos de 10 campos representativos y a partir de estas imágenes se estableció el porcentaje de células infectadas relacionando las células positivas/células positivas + negativas x100. Citometría de Flujo Para determinar la presencia o ausencia de las proteínas de choque térmico HSC70 y HSP70 en la membrana citoplasmática y en el interior de los enterocitos aislados se utilizó la citometría de flujo. Para esto, las vellosidades aisladas se fijaron con para-formaldehido (Sigma) al 4% en PBS 1X durante 30 min a 37°C, se realizaron dos lavados con PBS 1X. Para disgregar los enterocitos de las vellosidades se adicionó PBS 1X con EDTA (4.5mM) durante 1 h a 37°C y luego toda la noche a 4°C. Luego se realizaron tres lavados, re suspendiendo las células con vórtex durante cinco minutos entre lavado y lavado, se eliminaron los cúmulos evidentes en suspensión, y en el caso de las células destinadas a la detección de HSC70 y HSP70 intracelular se pusieron en TritónX100 0.2% por 5 min o con saponina 0.25% 30 min a 4ºC. Posteriormente, las células se incubaron con anticuerpos contra HSC70 (SC1059 Santa Cruz) o contra HSP70 monoclonales (8μg/ml, ZYMED) o policlonales (4μg/ml, SC1060 Santa Cruz). Los anticuerpos se dejaron 1h a 37°C, se lavaron tres veces y se incubaron con el anticuerpo secundario, según la especie, conjugado-FITC (Santa Cruz). Se detectó la fluorescencia en un citómetro de flujo FACSCALIBUR (Beckton Dickinson) y se analizaron los datos por medio del programa CELLQUEST con los parámetros apropiados. Los resultados mostrados corresponden a 3 experimentos independientes para cada una de las proteínas evaluadas.

9

Resultados Ensayo de Viabilidad con azul de tripán Los resultados del ensayo mostrados en la figura 1A se refieren a la extracción de vellosidades intestinales empleando una concentración de EDTA 1.5mM; como se puede apreciar la viabilidad de las células durante las 12h que duró el experimento, es superior al 90% para todos los tratamientos. La mayoría de las células teñidas con azul de tripán durante los ensayos de viabilidad eran las del ápice de la vellosidad. La tendencia a disminuir la viabilidad en las células infectadas, que resulta probablemente de la ruptura parcial de las membranas en las células cuando el virus empieza a salir, puede haber ocurrido, dado que desde las 8h se empezaron a observar detritos celulares en todos tratamientos.

Figura 1. Viabilidad de las Vellosidades aisladas. A. Las vellosidades de 3 ratones ICR fueron extraídas usando EDTA 1.5mM y se mezclaron, se dividieron en tres fracciones. Una fracción recibió choque térmico por 30min a 42ºC (barra gris), otra se infectó con el rotavirus ECwt (barra negra), y la otra se cultivo directamente, sin choque térmico ni infección y que denominamos control (barra blanca); las muestras se incubaron a 37ºC en una atmósfera de CO2 y fueron cosechadas en los tiempos indicados. El azul de tripán y las vellosidades intestinales se pusieron en proporción 1:1 por 1 minuto. Se contaron las células sin teñir (viables) y células de color azul (no viables) en 10 campos representativos. B. Viabilidad de los enterocitos separados de las vellosidades. Para separar los enterocitos de las vellosidades, estas fueron extraídas y los enterocitos se separaron usando EDTA 3 mM. Los enterocitos se mezclaron y se dividieron en dos fracciones: una se infectó con el rotavirus ECwt (barra negra), y la otra no se infecto (control, barra blanca). C. Tinción de Hoechst 33342. Evaluación de la fragmentación del DNA en enterocitos separados de las vellosidades con EDTA 3 mM. Los enterocitos de 3 ratones ICR fueron extraídos usando EDTA 3 mM, se mezclaron y se dividieron en dos fracciones: una se infectó con el rotavirus ECwt (barra negra), y la otra no se infecto (control, barra blanca). Se adicionó el Hoechst (5 μg/ml) por 20 minutos, protegido de la luz y se observaron en un microscopio de fluorescencia (Van Guard). Para explorar la posibilidad de que se obtuviera mayor cantidad de células usando el doble de la concentración usual de EDTA (3.0mM), y que los enterocitos completamente disgregados de la vellosidad intestinal pudieran ser más fáciles de contar al realizar las inmunocitoquímicas, se realizó el experimento mostrado en la figura 1B. En este ensayo se encontró que transcurridas las 2 primeras horas, la viabilidad de los enterocitos estaba alrededor de 90% para las enterocitos control (no infectadas) y cerca al 100% para las infectadas.

10

El descenso en la viabilidad de los enterocitos separados de las vellosidades desciende gradualmente, alcanzando un valor cercano al 50% para las 5h en ambos tratamientos. Pasadas las 10h, se observó que la viabilidad de las células para ambos tratamientos era cercano al 10%, y para las 12h los valores obtenidos eran del 5% para ambos tratamientos. Fue una sorpresa encontrar que hay tendencia a un mayor porcentaje de células viables de los enterocitos infectados, observada a lo largo del experimento, dado que a priori se esperaba lo contrario. Se evaluó la integridad del DNA nuclear cuando los enterocitos son disgregados completamente empleando EDTA 3 mM y se analizó la diferencia en la fragmentación del DNA nuclear en los enterocitos aislados de las vellosidades infectadas y no infectadas. Para las 10h de cultivo, los enterocitos infectados tienen menor porcentaje de fragmentación respecto a los no infectados. Durante las primeras 10h los enterocitos infectados no alcanzan el 50%, mientras que los no infectados lo alcanzan entre 7 y 8 h. A las 11 - 12h la fragmentación del DNA es similar en los dos tratamientos. La figura 1C muestra que el porcentaje de células con fragmentación del DNA nuclear, como indicio de un posible proceso apoptótico, en los enterocitos no infectados tiene 10-30% más fragmentación que las infectadas. En conjunto, los resultados indican que los enterocitos infectados muestran una tendencia clara a disminuir la apoptosis, sugiriendo que el virus puede tener una acción anti-apoptótica en las primeras 6-8 horas de infección. Infección de vellosidades aisladas con el virus ECwt, RRV y Reo, con o sin choque térmico. Se quiso explorar la idea de si al dar choque térmico (42ºC por 30 min), se sobre expresaba la proteína Hsc70 en la membrana de las vellosidades intestinales de ratón y al existir más receptores en la membrana celular se aumentaba la infección. La figura 2A indica que no hay diferencias en la infección entre las células que recibieron el choque térmico de las que no lo recibieron. Cabe aclarar que esta técnica permite evaluar la cantidad total de antígenos virales presentes, pero no necesariamente de partículas infectivas ensambladas.

11

Figura 2. Detección de antígenos virales en vellosidades infectadas A. ELISA de captura de la infección de vellosidades aisladas con los virus ECwt, RRV y Reo. Se extrajeron las vellosidades intestinales de 3 ratones ICR con 1.5mM de EDTA, se mezclaron y luego dividieron en porciones para cada uno de los tratamientos. Unas se sometieron a choque térmico por 30 min a 42ºC, y luego a 37ºC por 30 min como periodo de restablecimiento; otra porción se mantuvo a 37ºC. Luego las vellosidades se infectaron con los rotavirus ECwt (homólogo), RRV de simio Rhesus (heterólogo) y Reo (reovirus) por un periodo de 12h, luego se congeló y descongeló la muestra tres veces. La placa de ELISA se incubó con un Ac de captura generado en cobayo (1:1000), se bloqueó, se adicionó el lisado y se puso el Ac primario contra proteínas estructurales (1: 3000 de conejo). Se lavó y se puso Ac secundario HRP anticonejo (0.08 mg/ml). Se reveló con OPD en tampón citrato y se leyó a 492nm en un lector Biorad®. Inmunocitoquímica. B. Proteínas estructurales. Se procedió como se menciono en A, luego se infectaron las vellosidades con el virus ECwt y se cosecharon las muestras cada 2 horas hasta completar 12h y se fijaron con metanol-ácido acético 3:1. Se pusieron sobre una lámina cubreobjetos y se mantuvo a 50ºC durante 30 min. Se adicionaron Anticuerpos por 1h contra proteínas estructurales del virus. Se lavó, se adicionó Ac secundario anticonejo acoplado a peroxidasa (0.13 mg/ml), y se reveló con amino etil carbazol por 1h. Las laminillas cubreobjetos se pusieron en una lámina portaobjetos y se contaron las células de 10 campos representativos con el objetivo de 40x. El experimento se realizó 3 veces, cada uno con 3 repeticiones. C. Proteína no estructural NSP4. Todo el procedimiento es similar a lo descrito en B, excepto el anticuerpo que es anti-NSP4. El * indica diferencias estadísticamente significativas por medio de la prueba t de Student con α 0.05. D. Proteína no estructural NSP5. Todo el procedimiento es similar a lo descrito en B, excepto el anticuerpo que es anti-NSP5. El * indica diferencias estadísticamente significativas por medio de la prueba t de Student con α 0.05 La figura 2B indica que, en términos generales, no hay diferencias en la infección entre las células que recibieron el choque térmico de las que no lo recibieron. Al igual que con la técnica de ELISA, esta evalúa la cantidad total de antígenos virales presentes, pero no necesariamente de partículas infectivas ensambladas. Indica que la cantidad de células infectadas iniciales es de alrededor del 25% para las

12

primeras 2h, aumentando cerca del 10% por cada par de horas adicionales que transcurren hasta alcanzar un punto cercano al estancamiento de la replicación viral alrededor de las 8 y 10h post infección, para aumentar ligeramente durante las últimas dos horas, culminando en un 75-84% de células infectadas al cabo de 12h. Al analizar la infección utilizando anticuerpos contra proteínas no estructurales (NSP5 y NSP4) no se observan grandes cambios respecto a lo observado al analizar las proteínas estructurales. Sin embargo, al examinar en detalle la figura 2C se observa que a partir de las 2h post infección hay un 32% de células infectadas en el tratamiento sin choque y 49% para el choque térmico. Sin embargo, la tendencia se revierte a las 4 h.p.i., con una diferencia de 10% entre ambas y a las 6 hpi con una diferencia del 3%. Esta misma diferencia se mantiene a las 8 hpi pero a favor de las células con choque térmico. A las 10 y 12 h.p.i. existe una mayor proporción de células infectadas con el choque térmico, con valores de casi 20% de diferencia a las 10 h.p.i. y de 12% e a las 12 h.p.i. Al examinar en detalle la figura 2D se observa que a partir de las 2 h.p.i. la infectividad del virus es de 40% en las células sin choque y de 57% con el choque térmico. A las 4hpi la tendencia se mantiene 64% sin choque y 70% con el choque térmico. A las 6hpi la tendencia se revierte y se observa una mayor proporción de células infectadas en ausencia de choque térmico (71%) en comparación con el 64% observado con el choque térmico. A las 8, 10 y 12 h.p.i. la infectividad de las células con choque es de 75% y las de sin choque de 58%, 60% y 75% respectivamente. Infección de vellosidades aisladas utilizando lisados provenientes de vellosidades infectadas con los rotavirus ECwt o RRV, con o sin choque térmico. Dado que en las técnicas de ELISA o inmunocitoquímica se evalúa la cantidad total de antígenos virales presentes, pero no necesariamente de partículas infectivas ensambladas, es importante determinar si existen diferencias en la capacidad infectiva de lisados provenientes de células sometidas a choque térmico, respecto a las que no lo recibieron y que fueron infectadas.

13

Figura 3. Re-infección. Inmunocitoquímica evaluando la infección de vellosidades aisladas utilizando lisados virales provenientes de vellosidades infectadas con virus ECwt o RRV, con o sin choque térmico. Se extrajeron las vellosidades intestinales de 3 ratones ICR con 1.5mM de EDTA, se mezclaron y luego dividieron en porciones para infectar y cosechar en los tiempos 0, 4, 8 y 12 h.p.i., luego fueron congeladas (-20°C) y descongeladas dos veces. Después, se activaron con

tripsina (1g/ml) durante 30 minutos a 37 OC. Posteriormente, a vellosidades recién aisladas se le adicionó el lisado cosechado en cada una de las horas señaladas en la siguiente proporción: el lisado que contenía ECwt se aplicó en una dilución 1:5 (v:v) y el que contenía RRV se aplicó en dilución 1:1 (v:v). Las nuevas vellosidades infectadas con el lisado se cultivaron a 37°C durante 12hs. Se cosecharon a las 12 h.p.i. y se fijaron para evaluar la infección por inmunocitoquímica, utilizando anticuerpos contra proteínas estructurales de los rotavirus. Las células infectadas se contaron en 10 campos representativos con el objetivo de 40x (VanGuard). El experimento se realizó 3 veces, cada uno con 3 repeticiones. Los lisados se habían infectado con: A. ECwt. B. RRV Los resultados de la figura 3 muestra que hay una tendencia hacia mayor infección en los lisados provenientes de vellosidades que fueron sometidas a choque térmico respecto a las que no lo recibieron. En la figura 3A a las 0 h.p.i. el porcentaje de células infectadas con el lisado procedente de células infectadas (ECwt) y sometidas a choque térmico, es 5 veces mayor que las que provenientes de lisados sin choque. A las 4hpi y 8hpi la diferencia es del 15% y 10% entre infectadas con choque e infectadas sin choque. A las 12hpi no se observan diferencias. La figura 3B a las 0 h.p.i. el porcentaje de células infectada con el lisado procedente de células que fueron infectadas (RRV) y sometidas a choque térmico, generó un 25% más vellosidades infectadas en comparación con las infectadas sin choque. A las 4 h.p.i. y 8 h.p.i. la diferencia es aproximadamente del 20% entre infectadas con choque e infectadas sin choque. A las 12 h.p.i. la diferencia es aproximadamente del 5% entre infectadas con choque e infectadas sin choque. La proteína Hsc70 aumenta su expresión en vellosidades infectadas con ECwt y en choque térmico, o cuando se combinan los dos procedimientos. Al hacer los ensayos de infección en células sometidas a choque térmico se buscaba aumentar la expresión de la proteína de choque térmico Hsc70 en la membrana del enterocito y con esto explorar si el virus aumentaba su infección. Se evaluó por citometría de flujo (FACS) si la proteína Hsc70 se sobre expresa o no, luego del choque térmico, dado que ésta es constitutiva. Como punto de

14

referencia se examinó la proteína inducible Hsp70, homóloga de Hsc70. Igualmente se examinó si la infección con el rotavirus modifica la expresión de estas proteínas. Al analizar enterocitos que no fueron sometidos a choque térmico, correspondientes a la figura 4, se observa que el porcentaje de células que expresan la proteína Hsc70 en la membrana citoplasmática es del 7.01% (A), e intracelular es del 35.8% (B), lo cual corresponde al nivel basal de expresión de dicha proteína. Cuando estas vellosidades se infectan con el rotavirus ECwt, el porcentaje de células que expresa la Hsc70 en la membrana es del 25,31% (C), e intracelular del 34.57% (D). Cuando las vellosidades son sometidas a choque térmico por 30 min a 42ºC la proporción de células que expresan la Hsc70 en la membrana citoplasmática es del 37.18% (E), 5 veces más que el nivel basal, lo cual contrasta con su expresión a nivel intracelular, la cual es del 37.01% (F). Cuando se combina el choque térmico y la infección, se observa un aumento en la cantidad de células que expresan a nivel de la membrana citoplasmática la Hsc70, alcanzado 65.33% (G), 9 veces más que el nivel basal y casi el doble del valor alcanzado sólo con la infección por rotavirus. A nivel intracelular alcanza un 51.12% (H).

Figura 4. Citometría de Flujo de Hsc70. Para evaluar los cambios en la expresión de la proteína HSC70 a nivel de membrana citoplasmática e intracelular, se extrajeron las vellosidades intestinales de 3 ratones ICR con 1.5mM de EDTA, se mezclaron y se fijaron con paraformaldehido (Sigma) al 4% en PBS. Luego se disgregaron los enterocitos de las vellosidades con EDTA (4.5mM) y se eliminaron los cúmulos. Para permeabilizar se adicionó Tritón X100 0.2% por 5 min y saponina 0.25%, 30 min a 4ºC . Se adicionó Ac anti-Hsc70 (0.2 mg/ml, SC1059 Santa Cruz) durante 1h a 37°C, se lavaron y se adicionó el Ac secundario conjugado con FITC (0.5 mg/ml, Santa Cruz). A. células no permeabilizadas B. células permeabilizadas, C. Infectadas con ECwt, no permeabilizadas D. Infectadas con ECwt y permeabilizadas E. Choque térmico por 30 min a 42ºC, no permeabilizadas F. Choque térmico por 30 min a 42ºC y permeabilizadas, G. Choque térmico e infección con ECwt, no permeabilizadas. H. Choque térmico e infección con ECwt permeabilizadas.

15

Se detectó la fluorescencia en un citómetro de flujo FACSCALIBUR (Beckton Dickinson) y se analizaron los datos por medio del programa CELLQUEST con los parámetros apropiados. Los resultados mostrados corresponden a 3 experimentos independientes para cada una de las proteínas evaluadas.

Expresión de Hsc70 en vellosidades intestinales evaluada por citometría de flujo

Membrana Celular Intracelular NCh NI 7,01% NCh NI 35,38% NCh Inf 25,31% NCh Inf 34,57% Ch NI 36,18% Ch NI 37,01% Ch Inf 65,33% Ch Inf 51,12% Tabla 1. Expresión membranal e intracelular de Hsc70 en vellosidades intestinales

evaluada por citometría de flujo. Valores expresados como porcentaje de células positivas para la proteína Hsc70 siguiendo la metodología mencionada anteriormente. Resultados

obtenidos a partir de dos experimentos utilizando anticuerpos comerciales mono y policlonales (Santa Cruz).

La proteína Hsp70 aumenta su expresión en vellosidades infectadas con ECwt y en choque térmico, pero no cuando se combinan los dos procedimientos. Al analizar enterocitos de la figura 5 que no fueron sometidos a choque térmico se observa que el porcentaje de células que expresan la proteína Hsp70 en la membrana citoplasmática es de 0.0% (A), e intracelular es de 1.62% (B), lo cual corresponde al nivel basal de expresión de dicha proteína. Cuando estas vellosidades se infectan, con el rotavirus ECwt, el porcentaje de células que expresa la Hsp70 en la membrana es del 13,1% (C), e intracelular del 17% (D). Cuando las vellosidades son sometidas a choque térmico por 30 min a 42ºC la proporción de células que expresan la Hsp70 en la membrana citoplasmática es del 61.02% (E) e intracelular del 44.39% (F). Cuando se combina el choque térmico y la infección, la expresión a nivel de la membrana citoplasmática es del 17.41% (G), e intracelular del 1.29% (H).

16

Figura 5. Citometría de Flujo de Hsp70. Para evaluar los cambios en la expresión de la proteína Hsp70 en la membrana citoplasmática e intracelular, se extrajeron las vellosidades intestinales de 3 ratones ICR con 1.5mM de EDTA, se mezclaron y se fijaron con paraformaldehido (Sigma) al 4% en PBS. Luego se disgregaron los enterocitos de las vellosidades con EDTA (4.5mM) y se eliminaron los grumos. Cuando se permeabilizó se adicionó Tritón X100 0.2% por 5 min y saponina 0.25%, 30 min a 4ºC . Se adicionó Ac monoclonal anti-Hsp70 (1 μg/ml, ZYMED) o policlonal (0.2 mg/ml, SC1060 Santa Cruz), durante 1h a 37°C, se lavaron y se adicionó el Ac secundario conjugado con FITC (0.5 mg/ml, Santa Cruz). Se detectó la fluorescencia en un citómetro de flujo FACSCALIBUR (Beckton Dickinson) y se analizaron los datos por medio del programa CELLQUEST con los parámetros apropiados. Los resultados mostrados corresponden a 3 experimentos independientes para cada una de las proteínas evaluadas. A. células no permeabilizadas B. células permeabilizadas C. Infectadas con ECwt, no permeabilizadas D. Infectadas con ECwt y permeabilizadas, E. Choque térmico por 30 min a 42ºC, no permeabilizadas F. Choque térmico por 30 min a 42ºC y permeabilizadas, G. Choque térmico e infección con ECwt, no permeabilizadas. H. Choque térmico e infección con ECwt permeabilizadas.

17

Expresión de Hsp70 en vellosidades intestinales evaluada por citometría de flujo

Membrana Celular Intracelular NS NI 0,00% NS NI 1,62% NS Inf 13,00% NS Inf 17,00% S NI 61,02% S NI 44,39% S Inf 17,41% S Inf 1,29%

Tabla 2. Expresión membranal e intracelular de Hsp70 en vellosidades intestinales evaluada por citometría de flujo. Valores expresados como porcentaje de células positivas para la proteína Hsp70 siguiendo la metodología mencionada anteriormente. Resultados obtenidos a partir

de dos experimentos utilizando anticuerpos comerciales mono y policlonales (Santa Cruz). DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Los enterocitos aislados de las vellosidades y las vellosidades aisladas se les examinó la viabilidad comparando las vellosidades infectadas respecto a las no infectadas. Como se muestra en la figura 1, al comparar las células infectadas con las no infectadas, el porcentaje de viabilidad fue similar durante las 12 horas en que fueron examinadas, determinada con la técnica de azul Tripán y analizando la fragmentación del DNA nuclear mediante Hoechst. Hay una tendencia hacia la disminución la viabilidad en las células no infectadas, sugiriendo que los enterocitos infectados tienen una tendencia a disminuir la apoptosis. Por otro lado, la mayoría de las células teñidas con azul de tripán durante los ensayos de viabilidad eran las del ápice de la vellosidad, lo cual está acorde con lo reportado (Boshuizen et al., 2003) sobre un incremento de la apoptosis de las células apicales, dado que se conoce que los rotavirus tienen un tropismo particular hacia estas células. Llama la atención que el rotavirus infecte preferencialmente los enterocitos del ápice de las vellosidades, puesto que son las que más rápido se desprenden. Pudiera ser que el rotavirus cuando ingresa tiene efectos antiapoptóticos, pero una vez se ha replicado y formado viriones maduros se induce apoptosis, la cual parece estar programada para las 24 h.p.i. y 4 d.p.i. (días post infección) como lo mostró Boshuizen et al. (2003) en un estudio in vivo Los datos obtenidos por Chaïbi et al. (2005) indican que los procesos apoptóticos que sufren las células infectadas por rotavirus, como RRV, se deben a que este agente infeccioso estimula el aumento de la concentración de Ca+2 al interior de la célula, alterando el potencial de la membrana mitocondrial durante su replicación, causando un aumento del citocromo C liberado al citosol.

Durante los experimentos observamos que el número de células en la alícuota de células infectadas fue disminuyendo paulatinamente, respecto a las no infectadas, por la lisis que causa el virus, aunque se mantiene la proporción de células viables en las células infectadas respecto a las no infectadas. Lo anterior obedece a que el virus lisa las células y solo se examinan las restantes que no están infectadas o apenas están en el inicio del proceso. Los fragmentos de las células lisadas se pierden con los lavados durante la fijación a la placa cubreobjetos y al retirar el reactivo (Hoescht), lo que explica que no se puedan ver al examinar las células con inmunocitoquímica. No hay diferencias en la infección entre las células que recibieron el choque térmico de las que no lo recibieron, aunque se aprecia una tendencia de mayor infección en las células con choque térmico a las

18

2 h.p.i. En este caso, las técnicas empleadas para evaluar la infección fueron ELISA e inmunocitoquímica. En las dos técnicas se utilizan Acs que reconocen proteínas virales, ya sea que estén haciendo parte de viriones maduros o estén dispersas en el citoplasma de las células, es decir, aún no ensambladas en el virión. Debido a esto, solo podemos decir que no hay diferencias en la detección de antígenos virales cuando se comparan vellosidades con y sin choque térmico. Una probable razón es que a partir de las 4 h.p.i. la replicación viral es tan alta que la proporción de células susceptibles a infección es baja, con relación a los viriones infectivos, de manera que aún si hay muchos virus presentes la cantidad de células infectadas permanece prácticamente igual. Sin embargo, los resultados de la figura 3 muestran que hay una tendencia hacia mayor infección en los lisados provenientes de vellosidades que fueron sometidas a choque térmico, respecto a las que no lo recibieron. Esto sugiere que en las vellosidades, el choque térmico facilita el ensamblaje más rápido de los viriones a partir del aumento de la expresión de estas proteínas de estrés térmico. Esto concuerda con lo reportado para la línea celular MA104 (Pulido et al., 2007) donde se observa que existe una correlación entre células infectadas con un aumento de la expresión de la proteína Hsc70 respecto a las no infectadas. Estos datos contrastan con lo observado en líneas celulares como BHK y MA104, donde no se encontró un aumento del nivel global de expresión de la Hsc70 ante condiciones similares de choque térmico por medio de Western Blot, y usando la citometría de flujo se encontró que aún si se sometieron las células a 47-48ºC por 20 min usando medio DMEM precalentado a 47-48ºC, no hubo cambios en la expresión de Hsc70 en la membrana celular de estas líneas celulares (López et al., 2006) Al analizar los resultados de la citometría de flujo el porcentaje de vellosidades que expresan Hsc70 no cambia cuando se compara la Hsc70 intracelular basal de vellosidades no infectadas, respecto a las infectadas. Se debe tener en cuenta que la forma en que se presentan los datos de la citometría se relaciona el número de células positivas para este marcador, no el cambio de la expresión de Hsc70 en las células individualmente. Sin embargo, cuando se analiza el marcador Hsp70, se observa que esta proteína intracelular aumenta su expresión basal cuando se comparan vellosidades infectadas con las no infectadas, sin choque térmico. Podría ser que Hsp70 también participe en el ensamblaje de las proteínas virales para formar viriones. Esto concuerda con lo reportado (Cuadras et al., 2002) donde por la técnica de micro arreglos encuentran que Hsp70 se sobre expresa en células MA104 infectadas con rotavirus. Por medio de las técnicas Western blot y citometría (FACS) López et al. (2006) encontró que la línea celular BHK no mostró presencia de Hsp70 en la membrana de células no sometidas a choque térmico, aunque sí después 8 h después de dar el choque térmico. La línea MA104 presentó un nivel basal de expresión de Hsp70, el cual aumentó vertiginosamente a partir de las 2 h siguientes al choque térmico en el citoplasma. No se detectó la presencia de Hsp70 en la membrana citoplasmática de células BHK o MA104 sin importar si estas habían sido sometidas a choque térmico o no. Llama la atención que se disminuya el porcentaje de vellosidades infectadas y con choque térmico que expresan la Hsp70 a nivel intracelular, podría suceder que la Hsp70 esté siendo exportada hacia la membrana como encontró Broquet et al. (2003). Es posible que esta proteína, en las condiciones de choque térmico, esté involucrada negativamente en la replicación y ensamblaje del rotavirus. Por esta razón, es probable que el rotavirus tenga mecanismos moleculares para inhibir la expresión selectiva de Hsp70 y no de Hsc70. Es decir, en las condiciones de choque térmico Hsp70 Y Hsc70 pueden tener funciones opuestas relacionadas con la replicación del rotavirus. Este análisis concuerda con lo reportado por Broquet et al. (2007) que muestra que la Hsp70 afecta negativamente la biodisponibilidad

19

de las proteínas de rotavirus, en la línea Caco-2. El porcentaje de vellosidades que expresan Hsc70 aumenta con el choque térmico a nivel de la membrana citoplasmática. Cuando se cosechan las vellosidades infectadas entre cero y cuatro horas, y luego este lisado se usa para infectar vellosidades que se cosecharán 12 h.p.i se observa mayor infección respecto a los lisados procedentes de vellosidades infectadas sin choque. Esto sugiere que aunque son tiempos relativamente cortos de infección, hay un mayor ingreso de partículas virales a las células, las cuales se replicaron y formaron viriones rápidamente. El mismo fenómeno no se observa en 8, 10 y 12 h.p.i. probablemente porque cuando ingresa gran cantidad de viriones, que se replican y destruyen rápidamente las células, las cuales no son detectadas por la inmunocitoquímica. Es decir, en este procedimiento, el error técnico consistió en no haber hecho mayores diluciones de los lisados a las 0, 2, 4, 6, 8, 10 y 12 h.p.i. que se emplearon para la re-infección. En este caso solo diluimos cinco veces el lisado que contenía ECwt y una sola vez el de RRV. Es probable que se requieran mayores diluciones de los lisados para poder determinar si existen diferencias claras entre vellosidades con y sin choque térmico. Esto es debido a que alrededor de las 6 h.p.i., hasta las 12 h.p.i., la concentración de viriones es mucho mayor que la de células susceptibles a la infección, de manera que la cantidad de células potencialmente infectables se constituye como un factor limitante de la infección. Por esta razón, en el ELISA no se observan diferencias porque son lisados de 12hpi y no discrimina entre viriones y proteínas virales no ensambladas y que están en suspensión. Los Acs pueden estar reconociendo mayoritariamente proteínas virales no ensambladas en las vellosidades que no recibieron choque, en cambio los Acs pueden estar detectando principalmente viriones en las vellosidades que recibieron el choque térmico; esto asumiendo que la proporción de viriones es mayor, respecto a las proteínas virales no ensambladas en las vellosidades con choque térmico, cuando se compara con las que no lo recibieron.

20

Bibliografía BEAVER, B.V.; REED, W.; LEARY, S.; MCKIERNAN, B.; FAIRFIELD, B.; SCULTZ, R.; BENNETT; B. T.; PASCOE, P.; SHULL, E.; CORK, L.C.; FRNCIS-FLOYD, F.; AMASS, K. D.; JOHNSON, R.; SCHMIDT, R. H.; UNDERWOOD, W.; THORNTON, G. W.; KOHN, B. 2001. Report of the AVMA Panel on Euthanasia. Journal of the American Veterinary Association Vol 218 No 5 669-696p BECKER, J. & CRAIG, E. A. 1994. Heat-Shock Proteins as Molecular Chaperones. European Journal of Biochemistry Vol 219 11 -23p BOSHUIZEN, j. A.; REIMERINK, J. H. J.; KOERTELAND-VAN MALE, A.M.; van HAM, V. J. J.; KOOPMANS, M. P. G.; BÜLLER, H. A.; DEKKER, J.; EINERHAND, A. W. C. 2003. Changes in Small Intestinal Homeostasis, Morphology, and Gene Expression during Rotavirus Infection of Infant Mice. Journal of Virology Vol 77 No 24 13005–13016p BROQUET, A. H.; THOMAS, G.; MASLIAH, J.; TRUGNAN, G.; BACHELET, M. 2003. Expression of the Molecular Chaperone Hsp70 in Detergent-resistant Microdomains Correlates with Its Membrane Delivery and Release. Journal of Biological Chemistry Vol. 278, No. 24 21601–21606p BROQUET, A. H.; LENOIR, C.; GARDET, A.; SAPIN, C.; CHWETZOFF, S.; JOUNIAUX, A-M.; LÓPEZ, S.; TRUGNAN, G.; BACHELET, M.; THOMAS, G. 2007. HSP70 Negatively Controls Rotavirus Protein Bioavailability in Caco-2 Cells Infected by the Rotavirus RF Strain. Journal of Virology Vol. 81 No. 3 1297–1304p BRUCE, B. D. & CHURCHICH, J. 1997. Characterization of the Molecular-Chaperone Function of the Heat-Shock-Cognate-70-Interacting Protein. European Journal of Biochemistry Vol 245 738-744p CÁCERES, D.C.; PELÁEZ, D.; SIERRA, N.; ESTRADA, E.; SÁNCHEZ, L. 2006. La carga de la enfermedad por rotavirus en niños menores de cinco años, Colombia, 2004. Rev Panam Salud Publica Vol 20 No 1 9–21p CHAÏBI, C.; COTTE-LAFFITTE, J.; SANDRE´, C.; ESCLATINE, A.; SERVIN, A. L.; QUÉRO, A. M.; GÉNITEAU-LEGENDRE, M. 2005. Rotavirus Induces Apoptosis in Fully Differentiated Human Intestinal Caco-2 Cells. Virology Vol 332 480-490p CUADRAS, M. & GREENBERG, H. B. 2003. Rotavirus Infectious Particles Use Lipid Rafts During Replication for Transport to the Cell Surface in vitro and in vivo. Virology Vol 313 308–321p DAUGAARD, M.; ROHDE, M.; JÄÄTTELÄ, M. 2007. The Heat Shock Protein 70 Family Highly Homologous Proteins with Overlapping and Distinct Functions. FEBS Letters Vol 581 3702–3710p DENISOVA, E.; DOWLING, W.; LAMONICA, R.; SHAW, R.; SCARLATA, S.; RUGGERI, F.; MACKOW, R. R. 1999. Rotavirus Capsid Protein VP5* Permeabilizes Membranes. Journal of Virology Vol 73 3147–3153p

21

ESTES, M. K. & KAPIKIAN, A. Z. 2007. Rotaviruses En: Fields Virology. 5th Ed. Eds KNIPE, D. M.; HOWLEY, P.M.; GRIFFIN, D.E. LAMB, R. A.; MARTIN, M. A. Wolters Kluwer Health, Lippincott Williams & Wilkins. FLAHERTY, K.M., DELUCA-FLAHERTY, C., AND MCKAY, D.B. (1990). THREEDIMENSIONAL STRUCTURE OF the ATPase fragment of the 70 K heat-shock cognate protein. Nature 346, 623-628p. GUALTERO, D. F.; GUZMÁN, F.; ACOSTA, O.; GUERRERO, C. A. 2007. Amino Acid Domains 280-297 of VP6 and 531-554 of VP4 are Implicated in Heat Shock Cognate Protein HSC70-Mediated Rotavirus Infection. Archives of Virology Vol 152 2183–2196p GUERRERO, C. A.; BOUYSSOUNADE, D.; ZÁRATE, S.; ISA, P.; LÓPEZ, T.; ESPINOSA, R.; ROMERO, P.; MÉNDEZ, E.; LÓPEZ, S.; ARIAS, C. F. 2002. Heat Shock Cognate Protein 70 Is Involved in Rotavirus Cell Entry. Journal of Virology Vol 76 No 8 4096–4102p KIANG, J. G. & TSOKOS, G. C. 1998. Heat Shock Protein 70 KDa Molecular Biology, Biochemistry, and Physiology. Pharmacology and Therapetics Vol 80 No 2 183–201p LÓPEZ, S. & ARIAS, C. F. 2004. Multistep Entry of Rotavirus into Cells a Versaillesque Dance. Trends in Microbiology Vol 12 No 6 271-278p LÓPEZ, S. & ARIAS, C. F. 2006. Early Steps in Rotavirus Cell Entry. 2006. Current Topics in Microbiology and Immunology Vol 309 39–66p LÓPEZ, T.; LÓPEZ, S.; ARIAS, C. F. 2006. Heat Shock Enhances the Susceptibility of BHK Cells to Rotavirus Infection Through the Facilitation of Entry and Post-Entry Virus Replication Steps. Virus Research Vol 121 74–83p ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE SALUD (OPS). 2007. Vigilancia Epidemiológica de Diarreas Causadas por Rotavirus Guía Práctica. Publicación Científica y Técnica No. 623. Wahington D. C. 43p PULIDO, D.R.M.; ACOSTA, O.; GUERRERO, C.A. 2007. Acumulación de la proteína de choque térmico, Hsc70, en células MA104 después de la infección con rotavirus. Rev. Fac. Med Vol. 55 No 4; 224-239p.

SANTANA, A.Y.; GUERRERO, C.A.; ACOSTA, O. 2013. Implication of Hsc70, PDI and integrin αvβ3 involvement during entry of the murine rotavirus ECwt into small-intestinal villi of suckling mice. Arch Virol. 158(6):1323-36.

SIMMY, T.; ANUP, R.; PRABHU, R.; BALASUBRAMANIAN, K. 2001. Effect of Surgical Manipulation of the Rat Intestine on Enterocyte Populations. Surgery Vol. 130 No. 3 479-488p VASICKOVA, P.; DVORSKA, L.; LORENCOVA, A.; PAVLIK, I. 2005. Viruses as a Cause of Foodborne Diseases A Review of the Literature. Vet. Med. – Czech Vol 50 No 3 89-104p

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23404461

22

WEISER, M. M. 1973. Intestinal Epithelial Cell Surface Membrane Glycoprotein Synthesis. I. An Indicator of Cellular Differentiation. Journal of Biological Chemistry Vol 248 2536-2541p WHITT, D. D. & SAVAGE, D. C. 1988. Stability of Enterocytes and Certain Enzymatic Activities in Suspensions of Cells from the Villous Tip to the Crypt of Lieberkuhn of the Mouse Small Intestine. Applied and Environmental Microbiology Vol 54 No 10 2398-2404p

1

LOS RETOS DEL BUEN USO DEL

ESPAÑOL FRENTE A LA

TECNOLOGÍA

Carolina Linares Mendoza1

Resumen

La tecnología es una herramienta útil para el

desarrollo de actividades diarias, trae consigo

ventajas y desventajas, estas se pueden ver

desde diferentes perspectivas todo depende de

un análisis exhaustivo en el cual se establezcan

diversos aspectos como sociales, económicos,

culturales, entre otros y la relación entre cada

uno de estos. Un aspecto importante y del cual

es necesario hablar es la relación que tiene el

desarrollo de nuevas tecnologías con el aspecto

social y el papel que juega o roles que

desempeña en cada individuo.

Abstract

The technology is a tool for the development

of daily activities, also it has some advantage

and disadvantages that can observe the

differents forms, and it depends of a vast study

for determinate many aspects like: social,

economic, cultural, and the relation

1 Estudiante programa de Ingeniería Ambiental.

between this. An important aspect for discuss

is the social aspect ant the relation with new

technologies and how each of them affect any

group of people.

Palabras claves: Tecnología, aspecto social,

individuo.

Key words: Technology, social aspect, group of

people.

Introducción

En el mundo durante los últimos siglos, se ha

evidenciado el avance de la tecnología, esto se

debe en gran parte a que la raza humana cada

día quiere seguir explorando su entorno con el

fin de alcanzar nuevas herramientas que le

permitan facilitar el día a día. El desarrollo de

2

la tecnología se remonta con el inicio de la

Revolución Industrial, en el siglo XVIII,

durante esta época se reemplazó la mano de

obra y se empezaron a tecnificar procesos, un

invento que allí surgió fue la máquina de vapor.

Desde entonces se ha venido buscando

diferentes formas, las cuales permitan

desarrollar nuevas tecnologías que sean de gran

aporte para la humanidad y que sirvan a su vez

como un legado en la historia.

Foto 1. La revolución industrial el inicio de

una generación tecnológica.

Problema de discusión

Con el uso de nuevas tecnologías hoy en día la

influencia de los medios de comunicación

masiva influyen de manera positiva y negativa

en niños, jóvenes y adultos, pero se ha

preguntado “¿si la evolución de la tecnología ha

cambiado hábitos en las personas, no solo

relacionado a su lenguaje y forma de expresarse

sino en todo lo que concierne al desarrollo

integral de un individuo?, dudas como estas nos

las deja Daniel Cassany, él dice de manera

implícita quien hace que alguna herramienta sea

buena o mala depende del uso que se le aplique,

en este caso se habla específicamente de la

relación de la tecnología y las formas de

escritura y de lectura.

Foto 2. Los medios de comunicación masiva.

Declaración del problema

Es común escuchar que el siglo XXI ha llegado

a ser una revolución tecnológica, así como se

había mencionado en el siglo XVIII se originó

la Revolución Industrial. La revolución del siglo

XXI, cambia la forma de leer, la comunicación

cada vez es más informal dejando de un lado e

irrespetando reglas de nuestro lenguaje que

remontan a muchos años, lo que se quiere

lograr es que la tecnología no desplace las

tradiciones primitivas y orales sino por el

contrario sirva como puente a la interconexión

de ideas, opiniones y que surgan otras

3

funcionalidades del lenguaje, además de esto es

importante conocer los ámbitos en el que se

desarrolla la oralidad y como se relacionan

entre sí con la práctica de lectura y escritura.

Problema

La tecnología sirve como una herramienta de

medio magnético que permite una

comunicación más rápida, sencilla e informal,

un ejemplo son las redes sociales, en estas se ha

dejado a un lado comunicaciones que puedan

aportar algún conocimiento; además cada

individuo adopta ciertas palabras que no están

dentro de un vocabulario adecuado para

expresarse y los usa como modismos o formas

para cortar palabras y a su vez implementa

gráficos según la intención que quiera dar.

Foto 3. La tecnología de la mano con la

sociedad.

Metodología

Con base en entrevistas y acercamiento

humanístico, se ha podido evidenciar que la

población que más hace uso de la herramienta

internet oscila entre los 3 años hasta personas

alrededor de los 40 años, este rango depende

también de las habilidades con las que cuente

cada individuo, las destrezas y la búsqueda por

obtener mayor provecho de las herramientas

que les brinda las nuevas tecnologías.

Un factor importante es la edad en la que inicia

el ser humano a hacer contacto con algún

medio electrónico, resulta cada vez más

preocupante, entre más años pasan al mismo

tiempo más avanza la tecnología, es decir esto

se convierte en una relación directamente

proporcional con una rata de crecimiento con

tendencia exponencial y a partir de lo anterior

se generan ciertos interrogantes, como por

ejemplo ¿Cómo se masifica estas tecnologías

hacia un ámbito más de conocimiento que de

entretenimiento?, la respuesta a esto es muy

sencillo, de acuerdo a la entrevista de Cassany,

él dice que desde la escuela y casa se le pueden

brindar competencias a los niños para que

hagan uso de cualquier dispositivo como una

alternativa de estudio, es decir podrían servir

como un material didáctico y de esta manera los

niños tienen una mayor percepción del

4

conocimiento, al hacer que él pueda realizar

interacciones más dinámicas y prácticas de

emplear; también es importante inculcar

hábitos de lectura. Una falsa afirmación es que

la tecnología ha desplazado los libros, de

ninguna manera, lo que ha permitido la

tecnología y siendo esto una ventaja y fortaleza

es que se tiene un acceso a información más

fácil y también se puede usar

como un libro electrónico de una manera

diferente a la tradicional. Claramente no solo

hay libros, podemos encontrar artículos,

revistas, entre otros.

Cada individuo se permite así mismo hasta

dónde quiere llegar con la tecnología y como

emplearla, aunque sería interesante realizar

foros de participación lingüística con referencia

a lo que concierne este articulo los impactos

que genera la tecnología en el buen uso del

lenguaje, es evidente que muchos han dejado de

un lado los formalismos pero las ventajas que

nos aporta una buena ortografía, el ser cultos a

partir de conocimiento científico basándose en

lecturas previas, son reconocimientos en la

sociedad, la presentación que generamos e

impactos va a decir mucho de una persona ¿O

usted qué opina cuando ve algo que está mal

escrito, que no tiene coherencia, ni sentido? Tal

vez pensará que esa persona no tiene la

capacidad de dar a conocer sus ideas, no puede

expresarse como desea y entre muchas eso que

hace falta que se instruya porque el leer

reconforta y alimenta el conocimiento mejora

la capacidad de memoria, redacción y

ortografía. Todos pueden ser escritores no se

necesita ser un literario, vivimos en una

sociedad literaria y cada individuo puede

generar buenas opiniones solo con lo que

abstrae de su entorno.

Desde las aulas de clase se puede enseñar desde

los más pequeños, pues son ellos los que tienen

una mejor capacidad de entender las cosas,

tiene habilidades con las que generaciones

pasadas no contaba, esto es una oportunidad a

explotar y a aprovechar empezar a educar a

nuestros infantes porque de allí parte el ser

integro, así mismo los jóvenes son los lideres,

son aquellos que aportan las ideas y que buscan

día a día alternativas para mejorar, un campo

muy aplicable de la tecnología y la educación

está ligada al campo de la investigación, que

mejor aplicación de la tecnología que con

estudios que en algún futuro no muy lejano

sirvan para dar un gran conocimiento, un

descubrimiento y así mismo dejar un aporte a

las generaciones futuras. De esta manera

mejorar el lenguaje con la tecnología no es tarea

tan difícil solo es buscar otras áreas del

conocimiento para que sean de apoyo y se

complementen entre sí para llegar a un mejor

resultado.

5

En el aspecto social es importante el uso de la

tecnología sería erróneo no hacer uso de algo

que ya está creado, sino por el contrario sacar

el mayor provecho y ahí está la razón principal

las aplicaciones deberían integran un corrector

que le permita a la persona mejor su ortografía

y respetar un poco más la comunicación con la

persona que se está comunicando y así mismo

usar los iconos de la mejor manera posible,

aunque como muchos años atrás los

jeroglíficos era un medio grafico de expresión y

comunicación, pero hoy por hoy no solo nos

podemos quedar con lo que se tiene, se debe ir

más allá y lograr la creación de tecnologías que

sirvan como un eje integrador del ser humano

como por ejemplo el prototipo de sistema de

información para el fortalecimiento de las

competencias lectoescriturales en los

estudiantes universitarios, haciendo uso de las

herramientas tecnológicas dispuestas en la red

social Facebook.

Foto 4. La tecnología como herramienta de educación.

6

CONCLUSIONES

Obtener el mayor beneficio de la tecnología es

una tarea que se debe explorar y se debe hacer

en todas las etapas del ser humano cada uno va

a explorar y a identificar qué es lo útil y qué le

sirve. También es importante que cada

individuo de la sociedad sea divulgador de

buena información un ejemplo es cuando se

establece una conversación por chat procurar

que sea con la mejor ortografía y así la otra

persona va a tener una buena imagen de su

emisor, el canal por el que nos comuniquemos

no debe ser impedimento para que el mensaje

inicial en cierto momento quede interrumpido,

sino por el contrario el canal debe ayudar a que

la comunicación se desarrolle con el fin de que

tanto el emisor como el receptor tengan claro

el mensaje que tienen entre sí.

Bibliografía

Arce, N. G.C. (2007). Experiencias con

Competencias Lectoescriturales en

Estudiantes de Ingeniería. Bogotá:

Universidad Libre.

__________. (2014). Private Education.

International Journal Business and Social Science.

Cassany, D. (14 de Noviembre de 2010).

Escribir bien es comunicar bien, con eficacia.

(U. A. Bolívar, Entrevistador).

Contreras, J. A. (9 de Mayo de 2015). La

inflencia del la tecnologia en el lenguaje.

(Estudiante, Entrevistador) España, S.F, S.F.

Martínez, M. (30 de Mayo de 2007). Canal de

YouTube. Recuperado el 18 de Mayo de 2015,

de Canal de YouTube:

https://www.youtube.com/watch?v=0knJUq

WS2Ms

UL, D. (S.F de Abril de 2015). El lenguaje y la

tecnología . (E. UL, Entrevistador)

Infografía

https://www.youtube.com/channel/UCOpN

cN46UbXVtpKMrmU4Abg/about. (15 de

Diciembre de 2013). Aborgard. Recuperado el

10 de mayo de 2015, de Alborgard:

https://www.youtube.com/channel/UCOpN

cN46UbXVtpKMrmU4Abg/about

1

¿CÓMO INCENTIVAR EL BUEN USO

DEL ESPAÑOL EN LOS JÓVENES

INGENIEROS DE LA UNIVERSIDAD

LIBRE?

Leiby Jineth Lancheros Currea1

Resumen

A continuación se presenta la investigación de

un proceso académico, que busca incentivar el

buen uso del español en los jóvenes ingenieros

de la Universidad Libre.

Al evaluar por medio de entrevistas un tema de

vital uso en el diario vivir de todos los jóvenes

ingenieros, como por ejemplo las categorías

gramaticales, se puede observar que existe

pobreza en el conocimiento de estas y por ende,

el uso del español está deteriorado.

Este tipo de investigación permite conocer de

forma directa el uso que los jóvenes ingenieros

le dan al español, teniendo en cuenta que se

encuentran en formación profesional, pero que

al parecer no se interesan por dar buen uso del

español, por estar actualizados en las nuevas

palabras o tendencias modernas.

El objetivo de esta investigación busca como

incentivar el buen uso del español a los

1 Estudiante de - Ingeniería Industrial Universidad Libre

estudiantes de ingeniería de la Universidad

Libre, basado en los diferentes medios

etnográficos que soportan como hace

adecuado uso del lenguaje español, así como en

el conocimiento adquirido en el taller de

gramática.

Abstract

Then the research of an academic process,

which seeks to encourage the correct use of

Spanish in the young engineers of the Free

University is presented.

To assess through interviews and issue of vital

use in the daily lives of all young engineers,

such as parts of speech, we can see that there is

poverty in the knowledge of these and

therefore the use of Spanish is impaired.

This type of research allows knowing directly

the use that young engineers give the Spanish,

given that they are in training, but apparently

not interested in giving good use of Spanish, to

be updated on new words or modern trends.

The purpose of this research sought as to

encourage the correct use of Spanish

engineering students at the Free University,

based on the different ethnographic means

2

supporting and makes appropriate use of the

Spanish language as well as the knowledge

gained in the workshop of grammar.

Palabras claves

Incentivar, uso, español, ingenieros.

Key words

Encourage, use, spanish, engineers.

Introducción

El proceso de investigación empleado para el

buen uso del español, se fundamenta

principalmente para incentivar a los jóvenes

ingenieros de la Universidad Libre, con el cual

se busca la mejor estrategia para que se

obtengan resultados que los beneficie para su

proceso académico y especialmente, en su vida

personal y profesional. Se adoptan realidades

relativas que suplen la necesidad de

comunicación entre estos jóvenes, con el hecho

de estar actualizados en las expresiones que se

emplean actualmente, que para la gran mayoría

tiene sentido.

Experimentalmente se mide la individualidad

del uso del español, partiendo desde la

necesidad que genera el uso adecuado del

mismo; pasando por la investigación de

factores que a posteriori conlleven a la

estrategia de incentivar.

Descripción del problema

En la Universidad Libre, aún no se han

implementado estrategias para el buen uso del

español, lo que hace que los jóvenes ingenieros

estudiantes no se motiven por el auto-

aprendizaje. Por tanto, se hace indispensable

que los alumnos tengan acceso a más

conocimientos amplios para el uso adecuado

del español. Lo que se busca es brindar

mediante esta investigación una estrategia para

la formación de jóvenes ingenieros, capaz de

transformar y acelerar esta insuficiencia para su

proceso de desarrollo y crecimiento personal y

profesional. Los jóvenes ingenieros necesitan,

la introducción de nuevas técnicas

convirtiendo la pedagogía educativa desde los

diferentes campos con el mejor uso del español.

La investigación evidencia tal insuficiencia al

desarrollarse una encuesta a jóvenes ingenieros,

que consta de preguntas sobre las categorías

gramaticales y la cual arrojó como resultado que

en forma individual, se desconoce la

clasificación de las categorías gramaticales,

aunque en la expresión verbal se utilicen

diariamente. El desconocimiento del nombre,

es la causante de un mejor rendimiento

académico.

Mediante la observación directa se confirma la

poca motivación que muestra el alumno frente

3

al buen uso del español y para corroborar está

información se tomaron fotografías, sin que el

estudiante lo notara y con él se puede constatar

lo relatado anteriormente y se confirma que el

alumno no dedica tiempo a un tema demasiado

importante que se emplea en diferentes

actividades de la vida cotidiana.

Planteamiento del problema

¿Cómo incentivar el buen uso del español en

los jóvenes ingenieros de la Universidad Libre?

Foto 1. Estudiante encuestada en el Bloque

C de la Universidad Libre.

Justificación

El PEI (Proyecto educativo institucional) de la

Universidad Libre, especialmente en los

programas de ingeniería, carece de motivación

en el campo del uso del español, que permita la

retención de los estudiantes hasta terminar su

proceso académico de pregrado.

Con la poca motivación que se recibe en el área

de español, el estudiante no satisface

plenamente sus necesidades para el ejercicio de

sus compromisos académicos. La carencia de

fuentes que incentiven el buen uso del español,

no permite promover el crecimiento personal

del conocimiento dicha lengua.

Teniendo en cuenta que en la Facultad de

Ingeniería de la Universidad Libre, siempre ha

tenido gran acogida en la comunidad estudiantil

por sus programas orientados hacia la

formación de profesionales íntegros y el

desarrollo humano. Nace la idea de llevar a

cabo un proyecto con estrategias para

responder a necesidades actúales, desarrollado

con base en los requerimientos que afrontan los

estudiantes de ingeniería para competir y

desafiar los retos como profesionales.

La estrategia a desarrollar, se plantea mediante

actividades de bienestar en el área de recreación

y cultura, por medio de un semillero, debido a

4

la falta de lenguaje expresivo de los alumnos

(vocabulario, sintaxis, dicción), y la

metodología utilizada para la producción de

documentos, sin ninguna norma, donde se

busca fortalecer las competencias laborales en

los jóvenes ingenieros: con la participación en

secciones lúdico-culturales como teatro,

chistes, música y demás que interesen y

motiven, con un mensaje directo: Buen uso del

español, como una prioridad para la vida diaria.

Enseñarles que el uso del español tanto en las

expresiones como escrito, es una gran inversión

de conocimiento que les abrirá puertas, que los

nutre mentalmente y les ayudará a superarse,

principalmente para el momento que tengan

que formular su trabajo de grado y

desarrollarlo, puedan tener claridad para

coherencia y cohesión.

Foto 2. Estudiante encuestada en la cafetería

del Bloque D de la Universidad Libre.

Objetivo General

Incentivar el buen uso del español en los

jóvenes ingenieros de la Universidad Libre.

Objetivos Específicos

Fomentar el adecuado uso del español, tanto

escrito como verbal, en los jóvenes ingenieros,

resaltando que es una herramienta valiosa para

su desempeño personal y académico.

Difundir estrategias que permitan llegar a los

estudiantes para concientizarlos de la

importancia del buen uso del español.

Inculcar a los estudiantes de ingeniería sobre la

excelente oportunidad que se logra al dar buen

uso del español.

Hipótesis

Los estudiantes de ingeniería no son

conscientes de la importancia del buen uso del

español, como portador de conocimientos en

su vida diaria.

Metodología

El desarrollo de la investigación es con base en

la siguiente etnografía:

El proceso académico en la asignatura de

Electiva de gramática.

5

Entrevistas realizadas a diferentes

estudiantes en ingeniería de la Universidad

Libre.

Videos aportados por la docente Gloria

Arce de taller de gramática.

Lectura sobre Artículo Científico.

Bibliografía sugerida en el programa de la

Electiva de Gramática.

En el desarrollo de esta investigación, en el

proceso académico de la asignatura de Electiva

de Gramática con la docente Gloria Cristina

Arce, se hicieron las encuestas a algunos

estudiantes de la Universidad Libre y como

evidencia de ello, se tomaron algunas

fotografías:

Foto 3. Estudiante encuestada en el Bloque C

de la Universidad Libre.

Foto. 4 Docente encuestado en la cafetería del

Bloque C de la Universidad Libre.

6

Marco Teórico

Los signos de puntuación:

1. Dan coherencia al texto.

2. Marcan entonación y respiración durante la

lectura.

3. Los dos puntos se escriben después del

saludo de una carta.

4. La coma señala pausa dentro de la oración.

5. Las comillas sirven para reproducir citas

textuales.

6. El guion sirve para señalar incisos dentro

de oraciones, numeraciones, precedida de

puntos en epígrafes.

7. Signos de interrogación para comienzo y

final de una pregunta.

8. Signos de exclamación, representa lectura

exclamativa de una frase.

9. Loa puntos indican que una oración ha

terminado, con sentido completo.

10. El punto final concluye el texto.

11. Los puntos seguidos, indica frase inacabada

que concluye y que una oración está

completa.

12. Las comas simples se utilizan para

enmarcar significados o señalar palabras o

señalar palabras que no se pueden utilizar

cursivas.

13. Los paréntesis se utilizan para señalar

aclaraciones que se producen en una

oración como fechas, números, provincias.

14. Los corchetes se usan para aclaraciones,

traducciones fonéticas o los capítulos

donde se encuentran los fragmentos de

texto.

Categoría gramatical

Se refiere a una variable lingüística que puede

tomar diferentes valores que condicionan la

forma morfológica concreta de una palabra

mucho más general que el uso tradicional del

término.

En gramática tradicional la clasificación según

categorías es de tipo semántico y no funcional.

El concepto tal como se introdujo la gramática

tradicional se considera superado y ha sido

sustituido por un análisis más moderno, no

obstante su uso sigue siendo común en la

gramática escolar y tradicional.

Las categorías que reconoce y la clasificación

que propone la gramática tradicional

son morfológicas y no deben confundirse con

la función sintáctica que desempeña la palabra

o grupo de palabras (locuciones).

La gramática tradicional distingue nueve partes

de la oración (las ocho de Nebrija más el

artículo):

Determinante (aunque este puede ser

considerado un tipo de adjetivo)

Sustantivo o nombre

Pronombre

Verbo

Adjetivo

http://es.wikipedia.org/wiki/Morfolog%C3%ADa_ling%C3%BC%C3%ADstica

http://es.wikipedia.org/wiki/Gram%C3%A1tica_tradicional

http://es.wikipedia.org/wiki/Morfolog%C3%ADa_ling%C3%BC%C3%ADstica

http://es.wikipedia.org/wiki/Sintaxis

http://es.wikipedia.org/wiki/Determinante_(ling%C3%BC%C3%ADstica)

http://es.wikipedia.org/wiki/Sustantivo

http://es.wikipedia.org/wiki/Pronombre

http://es.wikipedia.org/wiki/Verbo

http://es.wikipedia.org/wiki/Adjetivo

7

Adverbio

Preposición

Conjunción

Interjección

Las cinco primeras (artículo, nombre,

pronombre, verbo y adjetivo), son las

llamadas partes variables de la oración, pues las

palabras que pertenecen a estos tipos pueden

variar en género y número, sin dejar de ser la

misma palabra. Una excepción la constituye el

verbo, que no varía en género, pero sí en

número, persona, tiempo, modo, voz y

aspecto.

Obviamente esta clasificación de la gramática

tradicional no es aplicable a lenguas como el

chino, el turco o muchas lenguas amerindias,

bien por carecer de flexión o bien por carecer

de preposiciones, o bien porque verbos y

adjetivos forman una clase única.

Análisis y Resultados

Se pudo observar que hay una carencia de

conocimiento sobre el uso adecuado del

español en los estudiantes de ingeniería, lo cual

no permite un óptimo desempeño en su

comunicación verbal y escrita, como parte

fundamental en el proceso académico.

Es importante sugerir sobre los ejes temáticos

que ofrecen en la facultad de ingeniería de la

Universidad Libre, con el fin de profundizar e

incentivar el buen uso del español de los

estudiantes, como un gran aporte para su vida

personal y profesional.

CONCLUSIONES

La investigación en los estudiantes de

Ingeniería, se desarrolló para buscar una

estrategia a implementar, que influya en la

motivación sobre el enriquecimiento de

conocimiento en el uso adecuado del español,

como parte del ser integral. Evidentemente la

carencia de este lenguaje, brinda la oportunidad

de reforzar el buen uso de este lenguaje, como

eje fundamental en la formación de ingenieros

unilibristas, teniendo en cuenta que a nivel

personal proyecta una mejor imagen y

desarrolla mayor competitividad al ejercer la

profesión.

Por consiguiente, es prioritario que en la

Facultad de Ingeniería de la Universidad Libre,

se complemente dentro del proceso académico

para que los egresados ingenieros obtengan un

nivel satisfactorio en el uso del lenguaje

español, como una herramienta fundamental

en diario vivir y ejemplo a seguir.

http://es.wikipedia.org/wiki/Adverbio

http://es.wikipedia.org/wiki/Preposici%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Conjunci%C3%B3n_(gram%C3%A1tica)

http://es.wikipedia.org/wiki/Interjecci%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9nero_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/N%C3%BAmero_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/Persona_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/Tiempo_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/Modo_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/Voz_gramatical

http://es.wikipedia.org/wiki/Aspecto_(ling%C3%BC%C3%ADstica)

8

Bibliografía

Arce N., G.C. (2007). Experiencias con competencias lectoescriturales en estudiantes de Ingeniería. Bogotá: Universidad Libre. Barthes, R. (1987) ¿Qué es la escritura? En: grado cero de la escritura. México: S. XXI Editores. Berlo k., D. (1982). El proceso de la comunicación. México: El Ateneo Blake H. R. y O. H. E. (1983). Taxonomía de conceptos de la comunicación. México: Ediciones Nuevo Mar. Cassany, D. (2000). Reparar la escritura. Barcelona: Anagrama. _________. (2000). Describir el escribir. Barcelona: Paidós. Clavijo, P.; Arce, G.C. (2 011). Diseño e implementación de un sistema de información para la autoevaluación y seguimiento de las competencias lectoescriturales en la Facultad de Ingeniería. Parra, M. (2000). Cómo se produce el texto escrito. Bogotá: Impreandes Presencia. Peña, G. I. (2010). El universo de la creación. Bogotá: Ediciones Huaco Santana, D. y Villamil C. (2015). Software:

Prototipo de sistema de información para el

fortalecimiento de las competencias

lectoescriturales en los estudiantes de ingeniería

de sistemas de la Universidad Libre, haciendo

uso de las herramientas tecnológicas dispuestas

en la red social Facebook. Bogotá: Universidad

Libre.

Infografía

https://youtu.be/9duF_BdTPVM?t=12 https://youtu.be/gYEmsJChtzc. https://youtu.be/OXBCktWuLac Gramática Lengua Española, Larousse. www.unilibre.edu.co/revistaingeniolibre/Ingenio Libre 8, 5, 4, 1/ ISNN 1692-0767. www.unilibre.edu.co/Avances Año 6/ No. 11/ ISNN 1794-4953. [email protected] http://tallerdegramatica.wix.com/tallergramatica2015 De la Torre, A. Web educativa 2.0. [En línea]. [Consultado 27 noviembre de 2015] disponible en: (edutec.rediris.es/Revelec2/revelec20/anibal20.pdf) El Tiempo. Ni leen ni escriben. [En línea]. [Consultado 16 agosto de 2015] disponible en: (www.eltiempo.com/opinion/editoriales/articulo-web-new_nota_interior-12135934.html).

https://youtu.be/9duF_BdTPVM?t=12

https://youtu.be/gYEmsJChtzc

https://youtu.be/OXBCktWuLac

http://www.unilibre.edu.co/revistaingeniolibre/

http://www.unilibre.edu.co/Avances%20Año%206/%20No.%2011/%20ISNN%201794-4953

http://www.unilibre.edu.co/Avances%20Año%206/%20No.%2011/%20ISNN%201794-4953

mailto:[email protected]

http://tallerdegramatica.wix.com/tallergramatica2015

http://tallerdegramatica.wix.com/tallergramatica2015

INGENIO Revista Facultad de Ingeniería de la … · la condición de época de lluvia en la zona,...

Documents

Transcript of INGENIO Revista Facultad de Ingeniería de la … · la condición de época de lluvia en la zona,...