INNOVACIN, SOSTENIBILIDAD Y BIENESTAR PARA COLOMBIA

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INNOVACIÓN, SOSTENIBILIDAD Y BIENESTAR PARA COLOMBIA Nematodos entomopatógenos en agroecosistemas palmeros de Colombia y su potencial uso en el control de insectos plaga de la palma de aceite Introducción Objetivos Metodología Resultados Miriam Rosero Guerrero 1 , Leidy Johanna Contreras 2 , Anuar Morales Rodríguez 3 1 Ingeniera Agrónomo, M.Sc, Asistente de Investigación Área de Entomología, Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected] 2 Ingeniera de Producción Biotecnológica. Auxiliar de Investigación del Área de Entomología. Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected]. 3 Biólogo, Ph.D., Coordinador Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected] Los nematodos entomopatógenos (NEPs) de la familia Steinernematidae y Heterorhabditidae se emplean para el control biológico de diferentes insectos plaga y particularmente contra los que habitan en el suelo. Estos organismos presentan alta virulencia, capacidad de desplazarse, buscar, encontrar e infectar insectos y sobrevivir por largos períodos de tiem- po en suelo en ausencia del huésped, además, son amigables con el medio ambiente, mamíferos y son compatibles con otros entomopatógenos e insecticidas de síntesis química. En zonas productoras de palma de aceite en Colombia algu- nos insectos plaga cumplen parte de su ciclo de vida en el suelo, fruto o en hábitats crípticos, causan daños de importan- cia económica al cultivo y son promisorios para ser controlados con nematodos entomopatógenos. Aislar NEPs procedentes de suelo de plantaciones de palma de aceite ubicadas en las cuatro zonas palmeras de Colombia. Evaluar las cepas de NEPs almacenados en la Colección de Microorganismos Entomopatógenos Asociados a la Palma de Aceite (MEPA-CENIPALMA) en el control de insectos plaga del cultivo de la palma de aceite. Aislamiento de nematodos entomopatógenos a partir de muestras de suelo La técnica utilizada para el aislamiento de NEPs es la conocida como “insecto trampa” la cual consistió en depositar 500 g de suelo en un recipiente plástico y 10 larvas de último instar de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae). Las muestras se ubicaron en oscuridad y a temperatura ambiente. 4 y 8 días después se realizó la extracción de larvas que presentaron síntomas de infección con NEPs y se ubicaron en trampas ‘White’ modificadas para la recolección de los Juveniles infestivos (JI) (Figura 1). Con los JI emergidos se probaron los postulados de Koch en larvas de G. mellonella. Aislamientos almacenados en la colección MEAPA-Cenipalma 665 muestras de suelo provenientes de plantaciones de palma de aceite de las cuatro zonas palmeras de Colombia, se evaluaron con el método de insecto trampa obteniéndose 34 aislamientos de NEPs (Figura 2), 28 aislamientos de la familia Heterorhabditidae y 6 asilamientos de la familia Steinernematidae. Los NEPs aislados se depositaron en MEPA-CENIPAL- MA. En la colección también se encuentran nematodos que han sido cedidos por Cenicafé (5) y Cenicaña (1). Multiplicación In vivo de NEPs La multiplicación In vivo de NEPs se llevó a cabo sobre larvas de último instar de G. mellonella. La suspensión resultante que contuvo los JI se depositaron en recipientes plásticos los cuales se almacenaron posteriormente a una temperatura de 15 °C en una solución de bicarbonato de sodio [1 %]. Eupalamides guyanensis Houlber, 1917 (Lepidoptera: Castniidae) barrenador gigante de la palma de aceite Sagalassa valida Walker, 1735 (Lepidoptera: Glyphipterigidae), barrenador de raíces de palma de aceite Leucothyreus femoratus Burmeister, 1844 (Coleoptera: Scarabaeidae) defoliador de la Palma de Aceite Cephaloleia vagelineata Pic, 1923 (Coleoptera: Chrysomelidae) raspador de la flecha de la Palma de Aceite Haplaxius crudus Van Duzee, 1907 (Hemiptera: Cixiidae) presunto transmisor de la Marchitez letal Control de insectos plaga de la palma de aceite con NEPs Figura 1. Proceso de aislamiento de NEPs procedentes de suelo mediante la metodología de “insecto trampa” utilizando larvas de G. mellonella. Figura 7. Control de larvas de E. guyanensis del 61,7 % con Steinernema carpocapsae en condiciones de campo A) larva sana, B) pupa infectada (Ayala et al. 2004). Figura 6. Control de larvas de S. valida hasta del 85,7 % con Steinernema carpocapsae en condiciones de campo. A) larvas sanas, B) larvas infectadas (Ortiz et al., 1994). Figura 5. Control de larvas de L. femoratus del 74,4 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1302) en condiciones de campo. A) larva sana, B) larva infectada (Aldana y Bustillo 2015). Figura 4. Control de larvas de C. vagelineata del 83,3 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1402) en condiciones de campo. A) larva sana, B) larva infectada (Barrios et al., 2017). Figura 3. Control de ninfas de Haplaxius crudus del 89,8 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1301) en condiciones de campo. A) ninfa sana, B) ninfa infectada (Rosero y Bustillo 2019). Figura 2. Procedencia de los aislamientos de NEPs almacenados en al colección de MEAPA-Cenipalma. Referencias Conclusiones A A A A A B B B B B Agradecimientos Al Fondo de Fomento Palmero (FFP), administrado por Fedepalma, por la financiación de la colección y las investigaciones, y a Rosa Cecilia Aldana, Carlos Enrique Barrios y Jesús Arvey Matabanchoy por el material fotográfico suministrado. Los estudios realizados con nematodos entomopatógenos contribuyen al conocimiento de la diversidad de los entomo- patógenos en el agroecosistema de la palma de aceite y dan una perspectiva del posible empleo de estos organismos como un componente importante del manejo integrado de insectos plaga de este cultivo. ALDANA DE LA TORRE, R. C.; BUSTILLO, P. A. E. 2015. Biología de Leucothyreus femoratus en cultivos de palma de aceite y evaluación de nematodos para su control. XVIII Conferencia Internacional sobre Palma de Aceite. Poster. Cartagena de Indias, Colombia. 22 al 25 de septiembre de 2015. AYALA, L. D.; CALVACHE, H.; LEIVA, F. R. 2004. Evaluación de técnicas de aplicación de Steinernema carpocapsae (Rhabditida: Steinernematidae) para el control del barrenador gigante de la palma Cyparissius daedalus Cramer en los Llanos Orientales de Colombia. Agronomía Colombiana 22 (2): 119-127. BARRIOS, T. C. E.; VIECCO, M. A. J.; ROSERO, G. M.; BUSTILLO, P. A. E. 2017. Selección de nematodos entomo- patógenos para el control de larvas de Cephaloleia vagelineata (Coleoptera: Chrysomelidae). 44 Congreso SOCO- LEN. Sociedad Colombiana de Entomología, Memorias y Resúmenes. Bogotá, D. C., Colombia. 5, 6 y 7 de julio de 2017. 593 p. ORTIZ, S. L. B.; CALVACHE, G. H.; LUQUE, Z. E. 1994. Control microbiano de Sagalassa valida Walker (Lepidopte- ra:Glyphipterigidae) con el nematodo Steinernema carpocapsae (Weiser) en Tumaco (Nariño). Palmas (Colombia) 15 (1): 29-37. ROSERO, G. M.; BUSTILLO, P. A. E. 2019. Selection of Entomopathogenic Nematodes to Control Nymphs of Haplaxius crudus (Van Duzee) (Hemiptera: Cixiidae). American Journal of Entomology. 3 (1): 24-29. Técnica de “Insecto trampa” Larvas de G. mellonella infectadas con NEPs NEPs aislados Nariño Tumaco (1) Casanare Villanueva (1) Orocué (2) Maní (3) Bolívar San Pablo (2) Tolima Fresno (1) Quindío Quimbaya (1) Paraguaicito (1) Risaralda Guática (1) Caldas Naranjal (2) Meta San Carlos de Guaroa (5) Puerto Gaitán (3) San Martín (1) Cabuyaro (2) Acacias (1) Cesar San Martín (1) Codazzi (4) El Copey (7) Magdalena Fundación (1)

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INNOVACIÓN, SOSTENIBILIDAD Y BIENESTAR PARA COLOMBIA

Nematodos entomopatógenos en agroecosistemas palmeros de Colombia y su potencial uso en el control de insectos plaga de la palma de aceite

Introducción

Objetivos

Metodología

Resultados

Miriam Rosero Guerrero1, Leidy Johanna Contreras2, Anuar Morales Rodríguez3

1Ingeniera Agrónomo, M.Sc, Asistente de Investigación Área de Entomología, Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected] 2Ingeniera de Producción Biotecnológica. Auxiliar de Investigación del Área de Entomología. Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected]. 3Biólogo, Ph.D., Coordinador

Programa de Plagas y Enfermedades, Cenipalma. [email protected]

Los nematodos entomopatógenos (NEPs) de la familia Steinernematidae y Heterorhabditidae se emplean para el control biológico de diferentes insectos plaga y particularmente contra los que habitan en el suelo. Estos organismos presentan alta virulencia, capacidad de desplazarse, buscar, encontrar e infectar insectos y sobrevivir por largos períodos de tiem-po en suelo en ausencia del huésped, además, son amigables con el medio ambiente, mamíferos y son compatibles con otros entomopatógenos e insecticidas de síntesis química. En zonas productoras de palma de aceite en Colombia algu-nos insectos plaga cumplen parte de su ciclo de vida en el suelo, fruto o en hábitats crípticos, causan daños de importan-cia económica al cultivo y son promisorios para ser controlados con nematodos entomopatógenos.

Aislar NEPs procedentes de suelo de plantaciones de palma de aceite ubicadas en las cuatro zonas palmeras de Colombia.

Evaluar las cepas de NEPs almacenados en la Colección de Microorganismos Entomopatógenos Asociados a la Palma de Aceite (MEPA-CENIPALMA) en el control de insectos plaga del cultivo de la palma de aceite.

Aislamiento de nematodos entomopatógenos a partir de muestras de suelo

La técnica utilizada para el aislamiento de NEPs es la conocida como “insecto trampa” la cual consistió en depositar 500 g de suelo en un recipiente plástico y 10 larvas de último instar de Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae). Las muestras se ubicaron en oscuridad y a temperatura ambiente. 4 y 8 días después se realizó la extracción de larvas que presentaron síntomas de infección con NEPs y se ubicaron en trampas ‘White’ modificadas para la recolección de los Juveniles infestivos (JI) (Figura 1). Con los JI emergidos se probaron los postulados de Koch en larvas de G. mellonella.

Aislamientos almacenados en la colección MEAPA-Cenipalma

665 muestras de suelo provenientes de plantaciones de palma de aceite de las cuatro zonas palmeras de Colombia, se evaluaron con el método de insecto trampa obteniéndose 34 aislamientos de NEPs (Figura 2), 28 aislamientos de la familia Heterorhabditidae y 6 asilamientos de la familia Steinernematidae. Los NEPs aislados se depositaron en MEPA-CENIPAL-MA. En la colección también se encuentran nematodos que han sido cedidos por Cenicafé (5) y Cenicaña (1).

Multiplicación In vivo de NEPs

La multiplicación In vivo de NEPs se llevó a cabo sobre larvas de último instar de G. mellonella. La suspensión resultante que contuvo los JI se depositaron en recipientes plásticos los cuales se almacenaron posteriormente a una temperatura de 15 °C en una solución de bicarbonato de sodio [1 %].

Eupalamides guyanensis Houlber, 1917 (Lepidoptera: Castniidae) barrenador gigante de la palma de aceite

Sagalassa valida Walker, 1735 (Lepidoptera: Glyphipterigidae),barrenador de raíces de palma de aceite

Leucothyreus femoratus Burmeister, 1844 (Coleoptera: Scarabaeidae) defoliador de la Palma de Aceite

Cephaloleia vagelineata Pic, 1923(Coleoptera: Chrysomelidae) raspador de la flecha de la Palma de Aceite

Haplaxius crudus Van Duzee, 1907 (Hemiptera: Cixiidae) presunto transmisor de la Marchitez letal

Control de insectos plaga de la palma de aceite con NEPs

Figura 1. Proceso de aislamiento de NEPs procedentes de suelo mediante la metodología de “insecto trampa” utilizando larvas de G. mellonella.

Figura 7. Control de larvas de E. guyanensis del 61,7 % con Steinernema carpocapsae en condiciones de campo A) larva sana, B) pupa infectada (Ayala et al. 2004).

Figura 6. Control de larvas de S. valida hasta del 85,7 % con Steinernema carpocapsae en condiciones de campo. A) larvas sanas, B) larvas infectadas (Ortiz et al., 1994).

Figura 5. Control de larvas de L. femoratus del 74,4 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1302) en condiciones de campo. A) larva sana, B) larva infectada (Aldana y Bustillo 2015).

Figura 4. Control de larvas de C. vagelineata del 83,3 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1402) en condiciones de campo. A) larva sana, B) larva infectada (Barrios et al., 2017).

Figura 3. Control de ninfas de Haplaxius crudus del 89,8 % con Heterorhabditis sp. (CPHsp1301) en condiciones de campo. A) ninfa sana, B) ninfa infectada (Rosero y Bustillo 2019).

Figura 2. Procedencia de los aislamientos de NEPs almacenados en al colección de MEAPA-Cenipalma.

Referencias

Conclusiones

A

A

A A

A

B

B

B B

B

AgradecimientosAl Fondo de Fomento Palmero (FFP), administrado por Fedepalma, por la financiación de la colección y las investigaciones, y a Rosa Cecilia Aldana, Carlos Enrique Barrios y Jesús Arvey Matabanchoy por el material fotográfico suministrado.

Los estudios realizados con nematodos entomopatógenos contribuyen al conocimiento de la diversidad de los entomo-patógenos en el agroecosistema de la palma de aceite y dan una perspectiva del posible empleo de estos organismos como un componente importante del manejo integrado de insectos plaga de este cultivo.

ALDANA DE LA TORRE, R. C.; BUSTILLO, P. A. E. 2015. Biología de Leucothyreus femoratus en cultivos de palma de aceite y evaluación de nematodos para su control. XVIII Conferencia Internacional sobre Palma de Aceite. Poster. Cartagena de Indias, Colombia. 22 al 25 de septiembre de 2015.

AYALA, L. D.; CALVACHE, H.; LEIVA, F. R. 2004. Evaluación de técnicas de aplicación de Steinernema carpocapsae (Rhabditida: Steinernematidae) para el control del barrenador gigante de la palma Cyparissius daedalus Cramer en los Llanos Orientales de Colombia. Agronomía Colombiana 22 (2): 119-127.

BARRIOS, T. C. E.; VIECCO, M. A. J.; ROSERO, G. M.; BUSTILLO, P. A. E. 2017. Selección de nematodos entomo-patógenos para el control de larvas de Cephaloleia vagelineata (Coleoptera: Chrysomelidae). 44 Congreso SOCO-LEN. Sociedad Colombiana de Entomología, Memorias y Resúmenes. Bogotá, D. C., Colombia. 5, 6 y 7 de julio de 2017. 593 p.

ORTIZ, S. L. B.; CALVACHE, G. H.; LUQUE, Z. E. 1994. Control microbiano de Sagalassa valida Walker (Lepidopte-ra:Glyphipterigidae) con el nematodo Steinernema carpocapsae (Weiser) en Tumaco (Nariño). Palmas (Colombia) 15 (1): 29-37.

ROSERO, G. M.; BUSTILLO, P. A. E. 2019. Selection of Entomopathogenic Nematodes to Control Nymphs of Haplaxius crudus (Van Duzee) (Hemiptera: Cixiidae). American Journal of Entomology. 3 (1): 24-29.

Técnica de “Insecto trampa”

Larvas de G. mellonella infectadas con NEPs NEPs aislados

Nariño Tumaco (1)

CasanareVillanueva (1)

Orocué (2)Maní (3)

BolívarSan Pablo (2)

TolimaFresno (1)

QuindíoQuimbaya (1)

Paraguaicito (1)

RisaraldaGuática (1)

Caldas Naranjal (2)

Meta San Carlos de

Guaroa (5)Puerto Gaitán (3)

San Martín (1)Cabuyaro (2)Acacias (1)

CesarSan Martín (1)Codazzi (4)El Copey (7)

MagdalenaFundación (1)