Inseminacion Artificial en Porcinos
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INSEMINACION ARTIFICIAL
CUALIDADES DE UN BUEN EYACULADO
Ausencia de organismos contagiosos
Alta calidad
Adecuada durabilidad o resistencia al
almacenamiento
Buena fertilidad
Alto valor genético
Motilidad progresiva 60-70%
Células espermáticas anormales < 20%
Número total de espermatozoides en el eyaculado 29-48 x
109
Durabilidad (resistencia al almacenaje) < 60% de motilidad
progresiva después de 48 horas de almacenado
VIRUS ENCONTRADOS EN EL
SEMEN PORCINO
PESTE PORCINA AFRICANA
PSEUDORABIA (AUJESZKY)
PESTE PORCINA CLÁSICA
PARVOVIRUS PORCINO
VIRUS DEL PRRS
CYTOMEGALOVIRUS
ADENOVIRUS
ENTEROVIRUS
AFTOSA
ENCEFALITIS JAPONESA
REOVIRUS
ENFERMEDAD VESICULAR PORCINA
VIRUS DEL PAPILOMA GENITAL
BACTERIAS ENCONTRADAS
EN EL SEMEN
COMUNES INFRECUENTES
STAPHYLOCOCCUS spp CORYNEBACTERIUM spp
PSEUDOMONAS spp STREPTOCOCCUS spp
ESCHERICHIA spp PROTEUS spp
KLEBSIELLA spp SERRATIA spp
CITROBACTER spp BACILLUS spp
MICROCOCCUS spp ENTEROBACTER spp
EUBACTERIUM SUIS AEROBACTER spp
BORDETELLA spp
MYCOPLASMA spp
INSEMINACIONARTIFICIAL
VENTAJAS GENETICAS:
- Mayor difusión genética de los sementales de
calidad en un periodo de tiempo corto
- Lotes homogéneos, más uniformidad en los
cerdos para sacrificio y la producción de canales
con mejores características.
- Aumento en el número de concepciones por
macho. La proporción de verracos/cerdas
reproductoras es de 1/75-100 comparado con la
monta natural 1/17-20.
VENTAJAS GENETICAS
Un reproductor logra producir más
lechones/año y más kilos de carne cerdo
al año.
Facilita la práctica de cruzamientos
interraciales para la producción de
híbridos comerciales.
Aumenta la cantidad de hembras servidas
por un reproductor y es más rápida la
transmisión de características deseadas
VENTAJAS SANITARIAS
Reduce el riesgo de transmitir
enfermedades a través del semen,
siempre y cuando este provenga de
granjas con un buen estado sanitario.
Ayuda a detener los traumatismos y la
propagación de enfermedades de tipo
reproductivo.
Nos permite establecer programas de
bioseguridad en el manejo del semen.
VENTAJAS ECONOMICASMenor costo por mantenimiento del
reproductor.
Se puede tener más control de la calidad
del semen que se está trabajando.
Menor número de machos y mayor
aprovechamiento de los mismos.
Manejo de machos de diferente peso.
Esto nos permite el manejo de las cerdas
sin importar el peso y la edad.
Ayuda a controlar la sobreutilización del
macho.
DESVENTAJAS DE LAINSEMINACION ARTIFICIAL
- Posibilidades de errores humanos
- Exposición del semen a factores
ambientales, sin la debida protección.
- Requiere de una adecuada detección del
celo, para establecer el momento óptimo
de la inseminación.
- Elevados costos para el montaje de
laboratorio en explotaciones pequeñas
ENTRENAMIENTO MACHOS
PERSONAL CAPACITADO
INTALACIONES ADECUADAS
RECONOCIMIENTO DE LAS INSTALACIONES POR EL MACHO
EDAD Y DESARROLLO ADECUADOS
PRIMEROS INGRESOS DE EXPLORACION
EVITAR LOS RUIDOS FUERTES
NO PEGARLE AL MACHO
MUCHA PACIENCIA
SITIO ATEMPERADO MANIQUI CON OLOR
MANEJO REPRODUCTIVO DE MACHOS
Manejo individualPubertadEdadNutriciónEntrenamientoLuminosidadEspacios (corrales)Evaluación del
comportamiento sexual
ENTRENAMIENTO DE MACHOS
Reason Number of boars
Breeding strategy
Genetic value
Hereditary defect
Leg problems
36 (12%)
18
1
17
Sperm production
Quality
Quantity
Libido/ejaculation
189 (61%)
145
27
17
Other
Leg problems
Illness
Death
Aggressiveness
Other
84 (27%)
20
13
20
6
25
REASONS FOR REPLACING BOARS AT AN AI STATION
PROCESO DE RECOLECCION
PREPARACION DEL MATERIAL DE RECOLECCION (TERMOS, FILTROS, VASOS)
PREPARACION DEL MACHO (EVACUACION PREPUCIAL, RETIRO DE RESIDUOS, CONDUCCION A LA SALA)
ASEPSIA DEL OPERARIO DE RECOLECION
SECADO DEL PREPUCIO
MONTA DEL MACHO AL MANIQUI
ERECCION Y RECOLECCION
SEPARACION DE LAS FRACCIONES
OBSERVACION DEL SEMEN (OLOR, COLOR, IMPUREZAS)
TRANSPORTE AL LABORATORIO
PROCESO DE RECOLECCIÓN
FRACCIÓN CANTIDAD (%) ORIGEN
Pre-espermática 25 ml (20%) Próstata
espermática 40 - 1000 ml (30 -50%)
Epidídimo
Post-espermática
70 - 400 ml (50 -60%)
Epidídimo y vesículas seminales
Tapioca 20 -40 ml (8%) Glándulas bulbouretrales
COMPOSICIÓN DEL EYACULADO DEL
VERRACO
FRACCIONES SEMINALES
1.Secreción
Uretral
2.Fracción rica
3.Fracción
pobre
4.Fase
gelatinosa
PROCESO DE RECOLECCIÒN
Técnica de mano enguantada
PROCESAMIENTO DEL SEMEN Evaluación macro (olor, color, impurezas, otros)
CLASIFICACIÓN MICROSCOPICA(motilidad, tipo de movimiento,
anormalidades)
Motilidad
Morfología
EVALUACION MICROSCOPICA
1. MOTILIDAD
Atemperar todo el equipo (cubre y
portaobjetos, platina microscopio)
Colocar gota de evaluación pequeña
Poner en objetivo de 40 ò 100x
Porcentaje de espermatozoides en
movimiento
Registrar en hoja de vida macho
CALIFICACIÓN
MOTILIDADCARACTERÍSTICAS
0 A 20% Muy pocos espermatozoides presentan movimiento progresivo, gran cantidad sin movimiento.
20 A 40% Una pequeña proporción de espermatozoides tiene movimiento progresivo, el movimiento es oscilatorio.
40 A 60% Una buena proporción tiene movimiento pero de tipo circular o fijo.
60 A 80% La mayoría de los espermatozoides tienen movimiento progresivo y vigoroso, pero un poco lento a través del campo.
80 A 100% La mayoría de los espermatozoides muestran movimiento progresivo y vigoroso.
2. TIPO DE MOVIMIENTO
TIPO 0 Espermatozoides sin movimiento.
TIPO 1 Espermatozoides sin movimiento progresivo
girando sobre sí mismos.
TIPO 2 Espermatozoides con movimientos anormales y algunos progresivos.
TIPO 3 Espermatozoides con movimientos progresivos lentos y en zigzag.
TIPO 4 Espermatozoides con movimientos progresivo rápidos.
TIPO 5 Espermatozoides con movimientos progresivo muy rápidos.
Motilitya
(%)In vitro sperm
penetration rateb
(%)
Farrowing ratec (%)
Number born alive
94.7 89.5v (58) 86.9v (460) 10.6v
82.3 81.7v,w (55) 87.1v (330) 10.5v
76.1 84.3v,w (50) 84.5v (300) 10.5v
66.2 74.7w (44) 86.1v (264) 10.1v
52.4 55.5x (40) 72.4w (201) 9.2w
44.2 34.7y (28) 72.3w (168) 9.2w
32.6 21.3z (17) 51.7x (85) 7.8x
SEMD 4.8 5.8 0.3
Relationships among motility, sperm penetration rates, farrowing rates and number of pigs born alive for boar semen
a Motility is expressed as the average number of motility spermatozoa within the following classes:>90; 80-89; 70-79; 60-69; 50-59; 40-49; and 30-39.b In vitro sperm penetration rate is defined as the percentage of eggs that that were fertilized. Numbers in parentheses represent the number of ejaculates within a motility category.c Numbers in parentheses represent the number of sows inseminated with semen within a motility category.d Standard error of the mean.v, w, x, y, z Means within the same column with different superscripts are significantly different (P < 0.05).
3.PRESENCIA DE CUERPOS EXTRAÑOS(AGLUTINACIONES)
POCA Menos de 2 aglutinaciones por campo.
+
MEDIA Entre 3 y 5 aglutinaciones por campo.
++
ABUNDANTE Más de 5 aglutinaciones por campo.
+++
Aglutinación. Acúmulo de células que se valora
junto con la motilidad (0 a 3 cruces).
+ ++ +++
Aglutinación
4. CONTEO DE ESPERMATOZOIDES
Se ubica la cámara de conteo (burker)
Se pone el cubreobjetos
Se adiciona una gota pequeña que
ingresa por capilaridad (previamente
diluido en suero formolado)
Se cuentan los espermatozoides en el
interior de 40 cuadros
Se hace el calculo de dosis así:
CONCENTRACIÓN
ESPECTROFOTOMETRÍA
COLORIMETRÍA
CITOMETRÍA DE FLUJO
CONCENTRACIÓN
CÁMARA DE BÜRKER
(WOELDERS, 1990; HAFEZ, 2000; NOAKES et al., 2001)
A X V
Nº DE DOSIS = ------------
300
DONDE :
A = # De espermatozoides en 40 cuadros
V = volumen de fracción rica.
con una concentración de 3000 Millones de espermatozoides por Dosis de 100 CC.
CALCULO DE DOSIS SEMINALES
VOLUMEN= 250 ml.
CONTEO = 28 Espermat. En 40 cuadros
N = 250 * 28 = 23.33 dosis
300
5. ANORMALIDADES ESPERMATICAS
Gota citoplasmática proximal (máx.. 50%)
Gota citoplasmática distal (máx.. 80%)
Colas en látigo (máx.. 25%)
Cabeza sin cola
Doble cabeza
Colas enrolladas
Perdidas del acrosomas
Aglutinaciones
Anormalidades menores al 20% del total de los espermatozoides contados en 40 cuadros
NormalCola en
látigo
Gota
citoplasmática
proximal
Gota
citoplasmática
distal
Morfología del espermatozoide. Durante el conteo en
cámara de Bürker, por tinción y fijación de la muestra.
Las más comunes son colas en látigo, gotas
citoplasmáticas proximales y distales.
Gota Citoplásmatica
Anormalidades
normal dañado perdiendo perdido
Integridad del acrosoma. El acrosoma es fundamental en la
fecundación, ya que contiene las enzimas necesarias par la
penetración en el óvulo. El análisis queda supeditado a
laboratorios especializados que dispongan de microscopio de
contraste de fases y personal cualificado que realice e
interprete este tipo de análisis. Los diferentes estados del
acrosoma son: normal, dañado, perdiendo y perdido.
¿Son válidos estos espermatozoides…?
Espermatozoides porcinos teñidos mediante combinación de SYBR/PI(Garner)
Spz con membrana funcional (vivos) aparecen verdes, teñidos con SYBR-14
Spz con la membrana dañada (muertos) se muestran rojos.
Spz con marcajes intermedios se consideran moribundos.
Acrosomas teñidos con PSA-FITC con permeabilización de membrana
¿Son válidos estos espermatozoides…?
Espermatozoides viables con el acrosoma y la vaina
mitocondrial intactas. Los núcleos de espermatozoides
viables emiten una intensa fluorescencia azul (A)
Los acrosomas intactos y las vainas mitocondriales
intactas emiten fluorescencia verde débil y moderada
respectivamente (B). 40x.
Bisbenzimida/PI/SBTI Alexa Fluor/ Mitotracker Green
¿Son válidos estos espermatozoides…?
Espermatozoide viable con el acrosoma intacto
(A) y la vaina mitocondrial intacta (MS). 40x.
MS
A
MS
A
Bisbenzimida/PI/SBTI Alexa Fluor/ Mitotracker Green
Espermatozoide viable con el acrosoma reaccionado
(A) y la vaina mitocondrial intacta (MS). 40x.
¿Son válidos estos espermatozoides…?
ENVASADO
ALMACENAMIENTO
Después de haber sido evaluado
Envasar el semen ya diluido y evaluado en las botellas, cuidando de no dejar aire en su interior
Rotular las botellas a almacenar (fecha, macho, hora)
Dejar bajo una toalla las botellas acostadas durante 2 horas.
Almacenar en la nevera entre 15 y 16 º c
No sacar antes de 24 horas en lo posible
Voltear cada 12 horas.
ALMACENAMIENTO
CALENTAMIENTO DE DOSISSacar las dosis y cubrir con una toalla, dejar reposar 15 minutos
Introducir al baño Maria (37º c) durante otros 15 minutos
Transportar en nevera a una temperatura de 37º c
Transportar pocas dosis a la vez evitando cambios bruscos de temperatura
Proteger siempre de la luz
TECNICA DE INSEMINACIÓN
CATETER DE MELLROSE
OTROS CATETERES
DESECHABLES
TECNICA DE INSEMINACION
PASO1
TECNICA DE INSEMINACIÓN
PASO 2
TECNICA DE INSEMINACION
PASO 3
TECNICA DE INSEMINACION
PASO 4
USO DE ARNESES PARA INSEMINAR
USO DE ARNESES PARA INSEMINAR
USO DE ARNESES PARA INSEMINAR
TÉCNICA
CONVENCIONAL
Actualmente la
inseminación es
intracervical con
aplicación de 70 –
100 ml con 2.5 – 4 x
109
espermatozoides
Recientemente se redujo la
dosis a 10 millones de
espermatozoides en cada
cuerno, aplicados
quirúrgicamente en la unión
útero tubárica (Krueger y
Rath, 2000)
TÉCNICA POST-CERVICAL
50 ML CON 1.5X109
ESPERMATOZOIDES 30 ML CON
1X109
ESPERMATOZOIDES
CÁNULA POST-CERVICAL SOFT
QUICK® (IMPORVET ,ESPAÑA)
DIÁMETRO EXTERNO DE 3.5 MM Y
LONGITUD DE 72 CM, CON DOS
ORIFICIOS EN SU CABEZA QUE
PERMITEN LA SALIDA DEL SEMEN
POR LA CÁNULA.
I IUP 1
Mediante cateterización
transcervical con cateter
flexible es posible inseminar
con una dosis de 5 ml y una
concentración de 50
millones de esp. (Martinez
et al, 2001)
I IUP 2
I IUP 3
I IUP 4
I IUP 5
I IUP 6
I IUP 7
I IUP 8
I IUP 9
0,86 0,80
0,00
0,10
0,20
0,30
0,40
0,50
0,60
0,70
0,80
0,90
1,00
IAC IIUP
TASA DE PARICION
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Tasa
partos
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 0.86 0.78
Montelindo 6 3 5 3 0.83 1.00
Pontevedra 125 11 113 11 0.90 1.00
Asturias 125 14 107 9 0.86 0.64
El Trébol 104 13 88 9 0.85 0.69
TOTAL 436 50 378 39 0.86 0.80
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Tamaño
camada
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 11.22 11.22
Montelindo 6 3 5 3 11.40 8.00
Pontevedra 125 11 113 11 11.82 12.73
Asturias 125 14 107 9 10.98 9.42
El Trébol 104 13 88 9 10.51 8.00
TOTAL 436 50 378 39 11.19 9.24
11,19
9,24
0123456789
101112
IAC IIUP
TAMAÑO DE CAMADA
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Nacidos
vivos
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 10.33 7.80
Montelindo 6 3 5 3 10.80 7.73
Pontevedra 125 11 113 11 10.82 11.73
Asturias 125 14 107 9 10.22 9.04
El Trébol 104 13 88 9 10.17 7.50
TOTAL 436 50 378 39 10.47 8.70
10,47
8,70
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
IAC IIUP
NACIDOS VIVOS
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Nacidos
muertos
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 0.45 0.12
Montelindo 6 3 5 3 0.40 0.67
Pontevedra 125 11 113 11 0.53 0.55
Asturias 125 14 107 9 0.48 0.21
El Trébol 104 13 88 9 0.25 0.26
TOTAL 436 50 378 39 0.42 0.35
0,42
0,35
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0,30
0,35
0,40
0,45
IAC IIUP
NACIDOS MUERTOS
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Nacidos
momias
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 0.44 0.06
Montelindo 6 3 5 3 0.20 0.00
Pontevedra 125 11 113 11 0.47 0.45
Asturias 125 14 107 9 0.28 0.17
El Trébol 104 13 88 9 0.08 0.24
TOTAL 436 50 378 39 0.30 0.19
0,30
0,19
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0,30
0,35
IAC IIUP
NACIDOS MOMIAS
Nombre
granja
Número
inseminac.
Número
partos
Peso
nacimiento
IAC IIUP IAC IIUP IAC IIUP
La Fabiola 76 9 65 7 1.42 1.57
Montelindo 6 3 5 3 1.19 1.48
Pontevedra 125 11 113 11 1.57 1.51
Asturias 125 14 107 9 1.57 1.75
El Trébol 104 13 88 9 1.59 1.73
TOTAL 436 50 378 39 1.47 1.61
1,471,61
0,00
0,20
0,40
0,60
0,80
1,00
1,20
1,40
1,60
IAC IIUP
PESO AL NACIMIENTO
ASENTAMIENTO EN REGISTROS
METAS DE AREA DE SERVICIOS
Entrega de machos y hembras con capacidad de reproducción
Hembras de buen estado sanitario
Machos con buena producción de semen (monta ) y excelente estado sanitario y corporal
Reproductores de buen potencial genético para transmisión a su descendencia
Principales causas de mortalidad embrionaria:
Altas temperaturas ambientales
Mezcla de las cerdas después de la monta
Lesiones en el aparato locomotor/ otras lesiones
Marranas en jaula después de la monta
Problemas nutricionales
Dia 0 4 - 6 6 - 8 8 - 14 14 - 18
Mortalidad Embrionaria
EL PERIODO DE LA GESTACIÓN
CERDA CICLANDO
EL MECANISMO SE ESTABLECE A LOS
12-14 DÍAS DEL CICLO
SE INICIA LA LISIS PROPIAMENTE A
LOS 14-16 DÍAS DEL CICLO
LUTEOLISIS
Ludwig et al. (1998)
CERDA RECIEN PREÑADA
SE BLOQUEA 10-12 DÍAS DE INICIADA
LA GESTACIÓN
El desarrollo de un ambiente uterino que soporte el crecimiento del conceptus es crítico para el establecimiento de la preñez, y requiere primordialmente que la dominancia de la progesterona sobre el útero no sea interrumpida por los mecanismos luteolíticos que normalmente ocurren durante el ciclo estral, o sea, que el cuerpo lúteo permanezca funcional; este fenómeno se conoce con el nombre de reconocimiento materno de la preñez (Cross y Roberts,
1989)
RECONOCIMIENTO
MATERNO DE LA PREÑEZ
Bajo Retorno al Celo
Baja Mort. Embrionaria
Alta Fertilidad
Buena CondiciónCorporal
Buen Peso de los Lechones al Nacimiento
METAS EN LA GESTACIÓN
MORTALIDAD PRENATAL35 – 40% en el cerdo
20 a 30% durante los primeros 30 d de gestación
10 a 20% entre 40 y 100 d de gestación
Muchas pérdidas embrionarias (75%) ocurren
durante la peri-implantación, entre d 12 y
18 de gestación
(Webel and Dziuk, 1974; Pope, 1994; Anderson, 1993; Ford, 1997;)
Mucha Energia
Menos Progesterona
Menos Proteinas UterinasMayor mortalidad embrionaria
Cantidad de Mortalidad Progesterona
ración, kg/dia embrionaria,% en el Plasma,ng/ml
1,50 17,2 16,7
2,25 21,4 13,8
3,00 28,1 11,8
(Dyck et al, 1980)
Primeros 7 dias de Gestación
6
10
14
18
22
Ovu
lación
13 dias
25 dias
114 dias
Nacido
s Totales
Nacido
s Vivo
s
PÉRDIDAS EMBRIONARIAS Y FETALES
DE LA OVULACIÓN HASTA EL PARTO
2018
1412,5 12 11,3
El blastocisto de 5 a 6 mm (d 11 de gestación) empieza a producir 17-estradiol (E2) trofoblástico (Wilson and Ford, 1997).
La producción E2 tiene un pico entre d 12 y d 15 de gestación (Geisert et al., 1994b; Pusateri et al., 1990)
Como respuesta al E2 se producen cambios en el útero (endocrinos, inmunológicos y vasculares),
determinantes para la viabilidad del conceptus (Engelhardt et al., 1997; Frank et al., 1977; Keys and King,
1995; Pope et al., 1982)
La implantación comienza el día 12, si el embrión muere antes la cerda repetirá el celo cíclicamente (18-23 días). El periodo embrionario
termina cuando se inicia la osificación (día 35).
Pasa de un cigote a animal maduro, a través
de procesos de hiperplasia e hipertrofia
celular, acompañados de diferenciación
celular, bajo la influencia de factores genéticos
y ambientales, regulados por procesos
enzimáticos y hormonales.
Cerdo 21 días de Gestación
CAPACIDAD UTERINA
Maximo número de fetos que la cerda puede soportar en su útero en una etapa específica de la gestación
(Christenson et al., 1987)
Pérdidas debidas a insuficiente capacidad uterina ocurren principalmente entre los 30 días de gestación y el parto, con un
pico entre 50 y 70 días
(Fenton et al., 1970; Webel and Dziuk, 1974; Knight et al., 1977)
PLACENTA FUNCIONAL
Finalización de la unión del trofoblasto al endometrio (d 19)
Final de la formación del saco corioalantoideo (d 26)
La mortalidad embrionaria y las características del embrión
porcino durante este período podrían estar relacionados con
cambios morfológicos y bioquímicos en el endometrio, de manera similar a como han sido
asociados durante la peri-implantación
GRACIAS POR SU ATENCIÓN