INSTITUTO DOMINICANO DE INVESTIGACIONES … · mejoramiento de la calidad y salud de suelos...
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INSTITUTO DOMINICANO DE
INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS Y
FORESTALES
Sociedad Dominicana de Investigadores Agropecuarios y
Forestales (SODIAF)
Sexto Congreso de la SODIAF
Juan de Dios Moya, Pedro Núñez, Socorro García, Elpidio Avilés, Feliciano Andújar.
PROYECTO
CONIAF-IDIAF
IDIAF/23-08/RN
Juan Dolio, San Pedro de Macorís, República Dominicana.
25 de octubre de 2013
“Aislamiento de cepas nativas de Trichoderma spp. de suelos, sustratos y raíces de plantas en invernaderos en República
Dominicana”
CONTENIDO 1. Introducción
2. Objetivo
3. Metodología
4. Resultados
5. Conclusiones
6. Recomendaciones
7. Agradecimientos
8. Referencias
INTRODUCCIÓN
La producción de vegetales en invernaderos es una actividad de importancia económica en República Dominicana.
Año Superficie (miles m2)
Producción (millones de lb)
Exportación (millones de lb)
Divisas generadas (millones US$)
2004 269 4.0 3.3 1.3 2005 562 8.6 5.7 1.8 2006 1107 23.6 17.5 8.9 2007 1590 28.3 23.0 12.1 2008 2340 43.3 29.7 25.1 2009 2946 53.6 34.2 31.6 2010 4426 72.5 51.8 46.7 2011 5411 89.5 64.3 58.5
Fuente: Ministerio de Agricultura. PROMEFRÍN
En los invernaderos los cultivos presentan problemas de enfermedades radiculares
causadas por hongos de suelo
INTRODUCCIÓN
La mayoría de los productores manejan estos problemas principalmente con:
• Prácticas culturales • Plaguicidas químico-sintéticos
Estos plaguicidas pueden provocar:
• Resistencia de la plaga • Resurgencia de la plaga • Contaminación ambiental • Toxicidad • Residuos en los frutos • Rechazo de exportaciones
INTRODUCCIÓN
Por esta razón, es necesario implementar el “Manejo Integrado de Plagas”, en el cual se consideran
otras alternativas de control, entre ellas, el “Control Biológico”
Dentro del Control Biológico se considera el uso de Trichoderma spp.
INTRODUCCIÓN
Trichoderma spp. son hongos que se encuentran en la mayoría de los suelos, especialmente donde hay
materia orgánica o material vegetal en descomposición.
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
Actúan como antagonistas de hongos fitopatógenos, mediante:
• Antibiosis,
• Competencia,
• Parasitismo,
• Inducción de resistencia en las plantas.
Se considera que los organismos nativos (residentes) están mejor adaptados que los introducidos a las condiciones agroecológicas locales
El uso de Trichoderma spp. nativos puede:
• Hacer más eficiente el manejo de los fitopatógenos
• Promover la industria nacional
• Ahorro de divisas
INTRODUCCIÓN
OBJETIVO
Aislar cepas nativas de Trichoderma de suelos, sustratos y raíces de plantas en invernaderos, con potencial antagonista en el control de hongos fitopatógenos radiculares del suelo.
Muestreo exploratorio no probabilístico
Período: julio-septiembre del año 2010
METODOLOGÍA
• Suelos • Raíces • Sustratos
Zona Número de
invernaderos
(Unid.)
Constanza 7
Jarabacoa 7
Moca Villa Trina 5
Juan López 2
San José de Ocoa 7
La Vega (Parte Baja) 7
Total 35
METODOLOGÍA
Invernaderos muestreados según zona
Criterios de selección de los invernaderos:
• Accesibilidad
• Disponibilidad al momento de la visita
• Permiso concedido por el propietario.
METODOLOGÍA
Toma de muestras
METODOLOGÍA
En cada invernadero:
• Una muestra de suelo
• Una muestra de sustrato (si lo tiene) • Una muestra de raíz: una planta por cultivo, una o dos de maleza
Aprox. 800 cm3
(10 sub-muestras) Profundidad: 0-20 cm
Tipo de muestra
Zona Suelo Sustrato Raíz
cultivo Raíz
maleza Total
Constanza 7 4 7 0 18
Jarabacoa 7 5 6 0 18
Moca Villa Trina 5 3 5 0 13
Juan López 2 0 2 0 4
S. José O. 7 4 7 0 18
La Vega (zona baja) 7 0 6 6 18
Total 35 16 33 6 89
Muestras tomadas por zona y según tipo de muestra. Valores en unidades (Unid.)
METODOLOGÍA
Procesamiento de las muestras
Estación Experimental Mata Larga, del (IDIAF), en San Francisco de Macorís, Provincia Duarte
Utilización del Protocolo Acuña y Peña (2005), modificado: • PDA (papa dextrosa agar) • 200 mg/l de estreptomicina • 30 gotas/l de ácido láctico.
METODOLOGÍA
Suelos y sustratos
Homogenización y tamizado (4 mm)
Pesada: 10 g Dilución madre: 10 g en 90 ml agua
Procesamiento de las muestras
METODOLOGÍA
Raíz
Procesamiento de las muestras
Corte 0.5-1.0 cm 2 - 10 g en 150 ml agua 20 minutos en agitador horizontal
METODOLOGÍA
Diluciones seriadas 10-2 y 10-3 0.1 ml/plato Petri Dos platos por dilución
Procesamiento de las muestras
Incubación: 8 días a 25-30 ºC.
METODOLOGÍA
Variable evaluada: cantidad de colonias de Trichoderma En base a sus características morfológicas: • Color verde o amarillo verdoso • Crecimiento rápido y • Abundante esporulación
METODOLOGÍA
METODOLOGÍA
Conservación:
• Papel filtro estéril (0.5 cm x 3.0 cm) • Microtubos de 2 ml • Temperatura de 5 ºC
Reaislamiento y
Purificación en PDA
Zona
Número de colonias (Unid.)
Total Nativas Introducidas
Constanza 9 8 1
Jarabacoa 20 8 12
Moca
Villa Trina 23 14 9
Juan López 8 0 8
San José de Ocoa 27 20 7
La Vega (Parte Baja) 8 6 2
95 56 39
Aislados de Trichoderma según zona
RESULTADOS
8 8
14
0
20
6
1
12
9
8
7
2
0
5
10
15
20
25
30
Constanza Jarabacoa Villa Trina Juan López S. José O. La vega
Núm
ero
de c
olo
nia
s (U
nid
.)
Introducidos
Nativos
Aislados de Trichoderma según localidad
RESULTADOS
Zona Suelo Sustrato Raíz
cultivo Raíz
maleza Total
Constanza 5 0 4 N.A. 9
Jarabacoa 4 8 8 N.A. 20
Moca Villa Trina 2 5 16 N.A. 23
Juan López 2 0 6 N.A. 8
S. José O. 3 14 10 N.A. 27
La Vega (zona baja) 3 0 0 5 8
Total 19 27 44 5 95
N.A. = No aplica
Aislados de Trichoderma según localidad y tipo de muestra Valores en unidades (Unid.)
RESULTADOS
13 14
29 6 13
20
0
10
20
30
40
50
60
Suelo Sustrato Raíz
Núm
ero
de c
olo
nia
s (
Unid
.)
Introducidos
Nativos
Aislados de Trichoderma según tipo de muestra
RESULTADOS
Se aislaron 56 colonias de Trichoderma provenientes de cepas nativas con potencial antagonista de hongos fitopatógenos radiculares.
CONCLUSIONES
La mayor cantidad de aislados nativos se obtuvo en invernaderos de San José de Ocoa (20) y Villa Trina (14).
La mayor cantidad de aislados nativos se obtuvo en las muestras de raíz (29)
• Probar en laboratorio e invernadero el antagonismo de los aislados frente a hongos fitopatógenos radiculares;
• Identificar (morfológica y molecularmente) los aislados de Trichoderma; • Continuar con las exploraciones en suelos, sustratos y raíces en otras localidades.
RECOMENDACIONES
AGRADECIMIENTOS
Al CONIAF por el financiamiento de la investigación y por permitir la presentación de los resultados en este evento A los técnicos de laboratorio de la Estación Mata Larga por su dedicación en el procesamiento de las muestras
Acuña O; Peña W. 2005. Determinación de poblaciones de microorganismos en el suelo mediante técnicas de recuento directo. En: Protocolos de metodologías para análisis de indicadores microbiológicos. Proyecto Innovaciones tecnológicas para el manejo y mejoramiento de la calidad y salud de suelos bananeros en América Latina y el Caribe. Eds. Imbap, Universidad de Costa Rica, Fontagro. p. 4-7.
Cook, R.J.; Baker, K:F. 1983. The nature and practice of biological control of plant pathogens. Eds APS. US. p 33, 283-311, 374 -389.
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Ferrucci, F. 2000. La importancia del Mercado en la investigación agraria para el desarrollo alternativo. Orientación de la investigación agraria hacia el desarrollo alternativo. Proyecto IICA-GTZ. p. 35-36. Series de publicaciones misceláneas. ISSN 0534-5391. Lima, Perú.
García, R.; Riera, R.; Zambrano, C.; Gutiérrez, L. 2006. Desarrollo de un fungicida biológico a base de una cepa del hongo
Trichoderma harzianum proveniente de la región Andina Venezolana. Fitosanidad, vol, 10, no. 2, junio 2006. pp. 115-121. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal, La Habana, Cuba.
Harman, G.E.2000. Myths and Dogmas of Biocontrol. Changes in Perception derived from Research on Trichoderma harzianum T-22. Plant Disease. Vol., 84,nº 4, pp. 377-393.
Programa de Mercados, Frigoríficos e Invernaderos (Promefrín). 2010. Avances de la agroplasticultura en la República Dominicana al cierre del año 2009. Estadísticas 2004-2009. (En línea). Consultado em fecha 06 de mayo 2011. Disponible en: http://www.promefrin.org/paginapromefrin1/Estadistica_Index.html
Samuels, G. 2004. Trichoderma: a guide to identification and biology. United States Department of Agriculture. Agricultural Research Service. Systematic Botany and Mycology Laboratory. Beltsville, USA. 40 p.
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REFERENCIAS