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Fred Griffith – 1928: Principio transformador
Bacteria Pneumococcus: cápsula externa de polisacáridos esencial para la patogenicidad
S= bacteria normal
R= mutante sin cápsula
Oswald Avery-Colin MacLeod-Maclyn McCarthy – 1944:
fraccionamiento del extracto celular de neumococos S muertos por calor
El componente fundamental del principio transformador es el ADN
Oswald Avery-Colin MacLeod-Maclyn McCarthy – 1944:
fraccionamiento del extracto celular de neumococos S muertos por calor
¿Cómo sabían que se trataba de ADN?
Análisis químico elemental coincidente con el calculado para el ADN
Propiedades ópticas, de ultracentrifugación, difusión y electroforésis similares al ADN
no afecta la extracción de lípidos y proteínas
tripsina y quimotripsina no afectan
ribonucleasa no afecta pero desoxirribonucleasa sí.
Erwin Chargaff -1950: – que procedimiento siguió??
Utilizó extractos de DNA
Los hidrolizó en medio ácido.
Utilizando cromatografía en papel separó los distintos nucleótidos.
Utilizando espectrofotometría UV cuantificó los porcentajes de las
distintas bases.
Estructura tridimensional – modelo de Watson y Crick -1953
estabilización por ptes de H y
apilamiento
parámetros estructurales
A-T
(amarillo)
G-C
(azul)
Estructura tridimensional – modelo de Watson y Crick
parámetros estructurales
la secuencia precisa de bases transporta la
información genética
modelo de replicación
Estructura de ácidos nucléicos
Alto número de conformaciones
torsión del esqueleto
de fosforibosa
torsión del anillo
de azúcar
torsión del anillo
aromático en torno al
azúcar.
syn: más compacto pero impedido estéricamente, principalmente para
pirimidinas
Sugar pucker
Las rotaciones están correlacionadas para mantener la conformación no-planar
144≤ Ψ ≤190 0≤ Ψ ≤36
Estructuras de DNA
B form: forma fisiológica,alta humedad
A form: baja humedad, alcoholes, NaCl por debajo de 10%
DNA, DNA-RNA, RNAs dobles
Z form: alta concentración salina 3-4 M NaCl,
alternancia purina-pirimidina (GC)n, (GT)n
Metilacion C5 cytosina.