LEVADURASEMERGENTES

TM Alejandra Soto LabraTM Alejandra Soto Labra

Tecnología MédicaTecnología Médica

UNIVERSIDAD DE CONCEPCIONFACULTAD DE MEDICINA

CARRERA TECNOLOGIA MEDICA

LEVADURAS

Las levaduras son hongos unicelulares que se reproducen por gemación o por fisión binaria.

Existen 623 especies conocidas distribuidas en 60 géneros, 30 de importancia médica

A. Colonia color verde de C. albicans; B. Colonia color burdeo de C. glabrata; C. Colonia color violeta de C. tropicalis; D. Colonia rosada clara de C. krusei.

AB

C

Presencia de levaduras (A), pseudohifas (B) y clamidoconidios (C)

ClamidoconidiosClamidoconidios

PseudomicelioPseudomicelio

Candida albicansCandida albicans

Punto de gemación

SEUDOMICELIO

¿Que es una Levadura Emergente? Son aquellas levaduras antes consideradas

inocuas a las que ahora se les atribuye la capacidad de dañar al cuerpo humano.

Ej. Saccharomyces cerevisiae( usada ampliamente en la industria)

Malassezia spp Trichosporon spp Rhodotorula spp.

Generalidades de Malassezia spp. Levadura lipofílica

Colonizante habitual de la piel

84% de la población en edad escolar , 3% de los neonatos sanos y 50-80% de neonatos internados en UCI está colonizado.

Significancia Clínica

El cuadro clínico más común causado por Malassezia spp. es Pitiriasis versicolor.

Últimamente se ha encontrado en cuadros de dermatitis seborreica, foliculitis, y sepsis neonatal.

Malassezia y sepsis

M.furfur, se ha asociado en algunas ocasiones con infecciones sistémicas.

Desde 1981 en adelante se han descrito casos de sepsis neonatales.

La mayoría de estos casos asociados a prematuros de bajo peso y aporte de alimentación parenteral con suplemento lípidico a través de catéter venoso central.

Malassezia y sepsis

El factor determinante en la sepsis neonatal es la colonización del catéter venoso central.

Esta colonización se ve favorecida por el largo periodo que los pacientes pasan en la UTI.

Malassezia y sepsis

Ante pacientes con signos de sepsis, que reciben alimentación parenteral con suplemento lipídico y que no responden a la antibioticoterapia de amplio espectro, ha de considerarse que el agente etiológico sea Malassezia spp.

Diagnóstico de Malassezia spp.

Es difícil hacer cultivos de Malassezia spp. Por su condición de levadura lipofílica.

SCA-aceite (agar Sabouraud cloranfenicol actidiona, suplementado con aceite de oliva).

Examen microscópico directo.

Características macroscópicasde Malassezia spp.

o Las colonias son altas, suaves y secas al comienzo, tornándose rugosas con el tiempo.

o El color de las colonias de M.furfur es café amarillento con aspecto graso

Género Malassezia: Clasificación

• Malassezia furfur• Malassezia sympodialis• Malassezia globosa• Malassezia slooffiae • Malassezia obtusa • Malassezia restricta• Malassezia pachydermatis• Malassezia dermatis - Sugita. et al. 2002

• Malassezia nana• Malassezia equii - Nell et al. 2002

• Malassezia japonica - Sugita S. et al. 2003

• Malassezia yamatoensis - Sugita S. et al. 2004

Identificación Género Malassezia

Morfologia Catalasa Lipofilia

Crecimiento en Tween 20,40, 60,80.

Desdoblamiento de la esculina

Generalidades. Trichosporon spp. Es una levadura que ha sido aislada

desde: Suelo, muestras de agua, vegetales, mamíferos y aves.

Es un miembro de la flora normal de la boca, piel, y uñas.

La especie más conocida es T. asahii.

Significancia Clínica

Trichosporon spp. es el agente causante de piedra blanca, infecciones superficiales y trichosporonosis invasivas.

Los pacientes que se encuentran en mayor riesgo de infecciones sistémicas son los inmunocomprometidos.

Trichosporonosis invasiva

Cuando Trichosporon spp. Causa infecciones invasivas, estas son de progresión rápida, involucrando varios órganos y sistemas, incluyendo pulmones, riñones y bazo.

Lesiones cutáneas como manifestaciones de infecciones diseminadas también han sido descritas.

Trichosporonosis invasiva

Trichosporon spp. ha sido aislado de pacientes con fungemia.

Puede infectar válvulas protésicas, SNC, cornea y peritoneo.

También es el causante de funguria benigna en transplantados renales

La trichosporonosis diseminada es muy rara en pacientes inmunocompetentes.

Relación Especie-Infección

Trichosporonosis sistémica.

T.asahii y T.mucoides

Piedra blanca (cabello)

Piedra blanca (pubis)

T.ovoides

T.inkin

Infección cutánea superficial

T.cutaneum y T.asteroides

Infección AsociadaEspecie

Diagnóstico de Trichosporon spp.

Características Macroscópicas:• Colonias de crecimiento rápido, suaves, altas,

rugosas (se acentúa con el tiempo) o plegadas.

• Color blanco amarillento o crema.• Producción de ureasa, ayuda a distinguir el

género.

Diagnóstico de Trichosporon spp.

Caracteristicas Microscópicas• Abundantes pseudohifas• Blastoconidios• Artroconidios

Identificación Género Trichosporon Microcultivo

Ureasa

Asimilación de Hidratos

de Carbono

Crecimiento en cicloheximida Termoresistencia

Generalidades.Saccharomyces spp Es una levadura comúnmente aislada

desde humanos, mamíferos, aves, suelo, alimentos, etc.

S. cerevisiae, es usada en la industria alimenticia en la producción de diversos productos como; vinos, cervezas, pan, etc.

Significancia Clínica

Es común la colonización digestiva después de la ingesta de Saccharomyces con la dieta y en suplementos alimenticios.

S. cerevisiae es causante de infecciones en pacientes inmunodeprimidos.

Actualmente también afecta a pacientes inmunocompetentes.

S. cerevisiae en pacientes Inmunodeprimidos.

Produce; neumonía, endocarditis, abscesos hepáticos, fungemias y sepsis, pero no con mucha frecuencia.

Ha sido aislada desde lesiones periodontales de pacientes con VIH.

S. cerevisiae en Inmunocompetentes

En pacientes inmunocompetentes se han observado fungemias, e infecciones en injertos de aorta.

También se ha encontrado en vaginitis, pero con mucho menor frecuencia.

Existen algunas cepas más virulentas que otras.

Diagnóstico. Saccharomyces spp.

o Características Macroscópicas:o Las colonias crecen

rápidamente y maduran en 3 días.

o Son planas, suaves, húmedas, brillantes u opacas, color crema.

o La imposibilidad de usar nitrato y la capacidad de fermentar carbohidratos son características típicas.

Saccharomyces spp

Diagnóstico. S.cerevisiae

o Caracteristicas Microscópicaso Se observan

Blastoconidioso Celulas Globosas y

elípticaso Ascosporaso S.cerevisiae se diferencia

de otras levaduras por la producción de ascosporas y por la fermentación

Agente causal de vaginitis y de balanitis en sus parejas.

Vaginitis por Saccharomyces cerevisiae

En un caso pudo demostrarse que la cepa causal de un episodio de vaginitis era la misma que se obtenia de los dedos del esposo de la paciente y de la levadura con que elaboraba pizza en un establecimiento de su propiedad.

Wilson et al. Bread making as a source of vaginal infection with Saccharomyces cerevisiae . Report of a case in a woman and apparent transmission to her partner. Sex Transm Dis 1988.Nyirjesy et al : Saccharomyces cerevisiae vaginitis : Transmission from yeast used in baking Obstet Gynecol 1995.Garcia -Martos et al : Saccharomyces cerevisiae vaginitis Enfer Infecc Microbiol Clin 1996 Posteraro et al: Molecular and epidemiological characterization of vaginal Saccharomyces cerevisiae JCM 1999.

S cerevisiae : levadura ascosporada . Elaboración de: vino ,cerveza y pan

Saccharomyces

Rhodotorula spp.

Especies: R.minuta, R.glutinis y R. mucilagenosa.

Rhodotorula ha sido aislada como agente causal de micosis oportunistas.

Casos de meningitis, endocarditis, ventriculitis, peritonitis, endoftalmitis, infección de catéter venoso central, fungemia y sepsis, han sido reportados.

Rhodotorula spp.

Características Macroscópicas: Las colonias crecen rápido, son suaves,

brillantes u opacas, mucosas. Son de color rosado cremoso y/o rojo

anaranjado. No fermenta azúcares y produce ureasa.

Rhodotorula spp.

Características Microscópicas:

Blastoconidios globosos y elongados. Pseudohifas e hifas aseptadas y

rudimentarias.

1.- Tubo germinativo

2- Tubo germinativo

Medios cromógenos

3.- Medios cromógenos : Chromagar, Candida ID

Sistemas manuales : Galerias API: 20C- 32 C

Sistemas automatizados : Vitek,Microscan

¿Qué tenemos actualmente?¿Qué tenemos actualmente?

Identificación Candida

Levaduras redondas u ovales ( Blastoconidios) - pseudohifas

Filamento que emerge de la levadura en suero a 37°C, 2-3 hrs.

Falso positivo : C. tropicalis

2.- Examen Microscópico2.- Examen Microscópico

3.- 3.- Tubo GerminativoTubo Germinativo ( Tschadjian,1960)( Tschadjian,1960)

1.- 1.- Observación macroscópicaObservación macroscópica Agar Sabouraud glucosado

Identificación Candida

Producción de clamidoconidios

Agar papa zanahoria

Agar harina de maiz- Tween 80

Agar harina arroz- Tween 80

4.- 4.- MicrocultivoMicrocultivo ( Dalmau, 1929 ) Estudio micromorfológico de las levaduras

Identificación Candida

Yeast Nitrogen Base( Difco)

Medio C

Yeast Carbon Base ( Difco)

Medio N

Hidratos de Carbono -Nitrógeno

AsimilacionesAsimilaciones Fermentación carbohidratosFermentación carbohidratos

Producción de ácido y gas

Auxanograma con discos

34 especies C. neoformans C. albidus C. laurentii

Identificación

Cápsula Asimilación de azúcares Fuentes de nitrógeno Ureasa

Cápsula(tinta China)

Ureasa

37°C por 8 hrs

Identificación Identificación CryptococcusCryptococcus

7 especies M. pachydermatis M. furfur M. sympodialis M. restricta M. slooffiae M. globosa M. obtusa

Identificación

Crecimiento a diferentes temperaturas • Test de catalasa• Producción de pigmento (Triptófano)• Hidrólisis de la esculina

•Asimilación de Tween 20,40,60,80

•

Identificación Identificación MalasseziaMalassezia

Cultivo Medios de cultivos especiales

Temp: 31º y 35º, ideal 32ºC

Medio de DixonMedio de Leeming - Notman

Medio de Sabouraud + aceite de oliva• poco rendimiento• no desarrollan o sobreviven todas las especies(M. globosa – M. restricta y M. obtusa)

Identificación Trichosporon

1992 , Gueho, en base a características moleculares dividió a Trichosporon beigelii en 6 especies distintas .

- T.cutaneum, T.asteroides (lesiones de piel)- T.asahii , T.mucoides (piel, uñas y lesiones cerebrales)- T.ovoides (bigotes, barba y lesiones sistémicas)- T.inkin (pelo genital y de infecciones diseminadas)

IdentificaciónCrecimiento en cicloheximidaCrecimiento en cicloheximidaTermorresistenciaTermorresistenciaAsimilación de azúcares Asimilación de azúcares UreasaUreasaMicrocultivoMicrocultivo

T.asahiiT.asahii

Cryptococcus neoformans

Candida albicans

Trichophyton tonsurans