Medicin de clulas por medio de Micrometra

Flores Gonzlez Lesli Paulina, Gonzlez Martnez Claudia Sarai y Lpez Garca Lucero. Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Facultad de Ciencias, Carrera de Biologa. , Materia: Biologa Molecular de la clula lll. Grupo: 5678. Profesora: Paola Moreno lvarez, 03/09/14.

ResumenCon el previo conocimiento de las partes y funciones del microscopio nos dimos a la tarea de medir el tamao de distintas preparaciones frescas con el uso de la micrometra, para un mejor desarrollo y entendimiento de las formas tan microscpicas que nos rodean.Esto nos permiti conocer el tamao y promedio de clulas y ncleos de la epidermis de la cebolla, clulas epiteliales y clulas de Elodea.

IntroduccinLa observacin de clulas y objetos microscpicos con el ojo humano es imposible puesto que son muy diminutos, es por eso que se utilizan tanto el microscopio como la micrometra para determinar cmo es su estructura y para obtener un tamao lo ms aproximado posible de las clulas, objetos o microorganismos observados a travs del microscopio.

La micrometra puede definirse como el arte de medir el tamao de los detalles estructurales de los objetos o seres que se observan al microscopio. En micrometra la unidad de medida es la micra que es igual a 0.001 mm (Casartelli, 1974).

Figura 1. Estimacin de la longitud celular por medio de micrometra.

Para determinar el tamao de un objeto en unidades absolutas es necesario conocer la longitud o tamao de las divisiones o cuadrculas, que suele darse en micras. Para ello, debe hacerse un calibrado de estas divisiones, comparndolas con un objeto de tamao conocido (Casartelli, 1974).

La operacin de calibrado consiste en determinar, por comparacin con la escala conocida, la del micrmetro del objetivo, el valor en micras en una divisin de la escala del ocular micromtrico. Para ello, el micrmetro objetivo, que generalmente tiene una escala de 1 mm en 100 partes, se coloca sobre la platina del microscopio y se enfoca, se saca el ocular y se introduce el ocular micromtrico, luego se observan detenidamente ambas escalas y se hace coincidir al menos una raya de una escala con la de la otra de la forma ms exacta posible (Marcel Locquin, 1985).

Figura 2. A) Micrmetro ocular, B) micrmetro ocular superpuesto sobre la escala del micrmetro objetivo.

SI a es el nmero de divisiones del ocular micromtrico y b el nmero de divisiones del micrmetro objetivo y si f es el valor en micrmetros de una divisin de esta ltima, el valor micromtrico de la escala ocular utilizada en estas condiciones ser igual a:

m= b/a*f

Una vez calibrada la escala del ocular micromtrico, para medir cualquier estructura, basta con superponer sobre la preparacin la escala del ocular y medir; posteriormente se consulta el cuadro de equivalencias y sale automticamente en micrmetros el valor de la medida real de la estructura (Marcel Locquin, 1985).

Materiales y mtodosPara la elaboracin de esta prctica se utiliz un microscopio de campo claro, se realiz la iluminacin Khler con la ayuda de una preparacin fija y se siguieron todos los pasos para la calibracin de la reglilla ocular. Se ajust primero la reglilla micromtrica en el objetivo de 10x, se coloc el ocular micromtrico y se hicieron coincidir, tomando como referencia el punto de coincidencia ms alejado del 0. Posteriormente se hicieron los clculos para determinar cuantos x m existan en 1 unidad ocular; lo mismo se hizo para el objetivo 40x.Se elabor un exudado de clulas epiteliales de una mejilla y se midieron distintas clulas, con los dos objetivos 10x y 40x. Se procedi a desprender la epidermis de la cebolla para medir clulas y ncleos, al igual que con la Elodea. Finalmente se sac el tamao de cada una.

Resultados

Imagen 1: Clulas epiteliales 10x

Imagen 2: Clulas epiteliales 40x

Imagen 3: Clulas de la epidermis de la cebolla

Imagen 4: Clulas de hoja de la Elodea Ajuste 10x40u.o. ------- 550m1u.o. --------- 13.75m

Ajuste 40x98 u.o. --------340 m1 u.o. ------- 3.46 m Exudado 10xClulas epitelialesPromedioVarianzaDesviacin estndarUnidades ocularesMicrmetrosVolumen Micrmetros (volumen del ncleo)

1.5 1.54 .3464 .5881.5 20.625m1.32 u.o 18.5 m^3

1.51.520.625 m1.32 u.o.18.5 m^3

.5.56.875 m.049 u.o..673 m^3

2.22.230.25 m4.17 u.o.57.33 m^3

2227.5 m3.14 u.o.43.17 m^3

Cebolla 10xClularea de la cebollaMicrmetros(rea de la cebolla)NcleoVolumen del ncleoMicrmetros (volumen del ncleo)

1.5 u.o.1.76 u.o. ^224.2 m^2.1 u.o..000785 u.o. ^3.010 m^3

1.5 u.o.1.76 u.o. ^224.2 m ^2.1 u.o..000785 u.o. ^3.010 m^3

2 u.o.3.14 u.o. ^227.5 m ^2.1 u.o..000785 u.o. ^3.010 m^3

1.8 u.o.2.54 u.o. ^224.75 m^2.1 u.o..000785 u.o. ^3.010 m^3

2.9 u.o.6.6 u.o. ^290.75 m^2.1 u.o..000785 u.o. ^3.010 m^3

rea de las clulas de la cebolla

Promedio 2.8

Varianza4.19

Desviacin estndar2.04

Volumen de los ncleos de las clulas de la cebolla

Promedio .000785

Varianza.00098

Desviacin estndar.0313

Cebolla 40x

Clularea de la cebollamicrmetrosNcleoVolumen del ncleomicrmetros

4.7 17.3459.99 m^21.2 1.35 u.o. ^34.67 m^3

5.2 21.2273.42 m^2.5 .098 u.o. ^3.339 m^3

5 19.6267.88 m^2.6 .169 u.o. ^3.584 m^3

4.8 18.0862.55 m^2.4 .050 u.o. ^3.173 m^3

6 28.2697.77 m^2.6 .169 u.o. ^3.584 m^3

rea de las clulas de la cebolla

Promedio 20.9

Varianza19.1

Desviacin estndar4.37

Volumen de los ncleos de las clulas de la cebolla

Promedio .367

Varianza.304

Desviacin estndar.551

Elodea 10xLargo de clula de ElodeaAnchoVolumen de la clula de ElodeamicrmetrosCloroplastosmicrmetros

.8.4.128u.o. ^31.76 m^3.22.75 m

.7.3.063 u.o. ^3.866 m^3.11.37 m

.6.3.054 u.o. ^3.742 m^3.22.75 m

.7.5.175 u.o. ^32.4 m^3.11.37 m m

.8.4.128 u.o. ^31.76 m^3.11.37

Volumen de la clula de Elodea

Promedio .1096

Varianza.0027

Desviacin estndar.051

Dimetro de los cloroplastos

Promedio .2

Varianza.015

Desviacin estndar.122

Elodea 40xLargo de clula de ElodeaAnchoVolumen de la clula de ElodeamicrmetrosCloroplastosmicrmetros

21.54.5 u.o. ^315.57 m^3.72.422 m

3.71.58.3 u.o. ^328.71 m^3.31.038 m

2.51.66.4 u.o. ^322.14 m^3.41.384 m

31.45.8 u.o. ^3 u.o. ^320.06 m^3.41.384 m

21.86.422.14 m^3.51.73 m

Volumen de la clula de Elodea

Promedio 6.28

Varianza1.87

Desviacin estndar1.36

Dimetro de los cloroplastos

Promedio .46

Varianza.022

Desviacin estndar.148

DiscusinCul es la importancia de la calibracin del microscopio?El retculo del microscopio, el cual es fundamental para la observacin ptima de una muestra, slo es ampliado por el ocular. Sin embargo, el aumento total del objeto depende del objetivo, del cambiador de aumentos y del ocular, por lo cual al modificar cualquiera de esos factores tambin se cambia el aumento del retculo. La calibracin es muy importante ya que se establece el valor de un intervalo del retculo con respecto al aumento del objeto lo que crea las dimensiones verdaderas de un objeto, por lo cual debe de hacerse cada vez que se efectan comparaciones de mediciones o cuando se busca obtener valores de medicin absolutos.En qu otras disciplinas se utiliza la micrometra?En primera instancia la obtencin de medidas especiales de objetos microscpicos se llama morfometra. Lo cual es importante para realizar un informe cientfico y existen dos formas para indicar los tamaos de la estructura: Incluyendo una escala y su equivalencia en micras o mencionando los aumentos totales a los que se est viendo la imagen.Se puede utilizar en disciplinas tales como parasitologa, ya que establecen las caractersticas morfolgicas diferenciales en cada una de sus fases; tambin se utiliza en la citologa e histologa vegetal as como en la animal; en la embriologa vegetal y animal; ficologa; microbiologa; inmunologa; en la protozoologa.Al observar una misma clula a 10x y 40x Hay variaciones en la medida? Si es as a qu se debe?Si existen variaciones en la medida, ya que el valor micromtrico obtenido slo es vlido para el objetivo en que se efectu la calibracin, por ello es que se utiliza las medidas de conversiones para cada uno de los objetivos. Es decir al observa una clula en el objetivo 10x, las medidas de sus dimensiones sern ms pequeas que las medidas de las dimensiones que se obtendrn en el objetivo 40x, esto debido a que en el primer objetivo mencionado se logra ver a la muestra en un menor aumento (menor tamao) en comparacin con el segundo objetivo.

Referencias J. D. Casartelli. (1974). Microscopia terico-prctica. Espaa: URMO. Marcel Locquin y Maurice Langeron. (1985). Manual de microscopia. Barcelona: Editorial Labor.