Método de detección de coliformes
Click here to load reader
-
Upload
mary2509 -
Category
Health & Medicine
-
view
1.333 -
download
4
Transcript of Método de detección de coliformes
Integrantes:
Mendoza Blancas DarghiTarazona Tapia Maricruz
Coliformes fecales Mesofilos
MICROORGANISMOS INDICADORES
Libre microorganismos
consideradospatógenos
libre de bacterias indicadoras de contaminación
fecal
Determinar la calidad bacteriológica del agua subterránea de consumo humano determinando el recuento de heterótrofos, coliformes totales y termotolerantes
22/10/13
Muestra:
Aguas Subterráneas de los 46 pozos de la Yarada y Los Palos –
Tacna
Muestra:
Aguas Subterráneas de los 46 pozos de la Yarada y Los Palos –
Tacna
22/10/13
Composición y preparación de medios de cultivos y reactivos
Verde Brillante Bilis 2% Caldo (gramos/litro )
• Bilis de buey deshidratada………… 20,0gr • Lactosa ………………………………..10,0gr • Peptona……………………………… 10,0 gr• Verde brillante ………………………..0,0133gr
pH: 7,2 +/-0,2
Preparación de Brilla simple en tubos de 10 ml: 66 tubos x 10 ml = 660 ml pero se prepara 661
40 g -----------> 1000 ml X g <------------ 661 ml
X = 24,44 g para 66 tubos simples.
Preparación del Brilla doble en tubos de 10 ml: 33 tubos x 10 ml = 330 ml pero se prepara 331
40 g ------------> 1000 ml X g <------------- 331 ml
X = 13,24 g pero por ser doble se usa 13,24 x 2 = 26,48 g Agua Peptonada (gramos/litro)
• Peptona de carne………. 10,0 gr• Cloruro de sodio………... 5,0gr pH: 7,2 +/-0,2
Agar Cuenta Colonias + TTC al 0,5%
Agua destilada estéril
+ 0,5 g de TTC
Filtro de celulosa estéril de 45 µm
Solución TTC al 0,5 % estéril
Agar Cuenta Colonias PCA +
TTC 0,5%
Procedimiento
COLIFORMES TERMOTOLERANTES
Muestra de Agua Subterránea
Gas (+) 24
horas
Gas (-) 24
horas
Reincubar 24 HorasPrueba de
temperatura elevada en Caldo Bri l la e incubar a 44,5 +/- 0,2
°CGas (+) 48
horas: Prueba posit iva
para Coliformes
totales
Gas ( -) 48 horas: Prueba
negativa
Gas (+) 24 horas
Prueba confirmati
va posit iva
para Coliforme Termotole
rante
Gas (-) 24
horas
Prueba negativ
a
10ml
Caldo Brilla Doble
Concentrado
Caldo Brilla Simple
Concentrado
22/10/13
Siembra en Caldo Brilla
Presencia de turbidez
Colonias coloreadas teñidas por la reducción del TTC
conteo de bacterias mesófilas
se observa que la mayoría del agua subterránea de los pozos muestreados (54%), no cumplió con la norma nacional establecida para la cantidad aceptable de
coliformes totales
22/10/13
resultados
MO Aerobios Mesófilos :
Muestra : preparados de nutricion enteral Metodo : recuento en placa por siembra en profundidad Medio : agar plate countDiluyente : agua de peptona 0,1 %
MO Coliformes Fecales :
Muestra: preparados de nutricion enteral Metodo: recuento en placa Medio : agar violeta cristal rojo neutro bilis (VRBA)Diluyente: agua de peptona 0,1%
MO AEROBIOS MESÓFILOS
•ISO 4833 :Directiva general para el recuento de microorganismos. Método por recuento de colonias a 30º C
•AF V 08-01 :Método de rutina para el recuento de microorganismos. Método de recuento de las colonias a 30º C
COLIFORMES TOTALES
•ISO 4831 Directiva general para el recuento de coliformes
•NF V 08-050 Método de rutina para la enumeración de coliformes mediante el recuento de colonias a 30º C.
Métodos normalizados