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^ . ^ ,.^^^. OBTE N CI O N, PREPAR A CIO N Y E N YIO D E M UEST AA S P A R A ANA LISIS VETERI NA RIO N" 5 y 6- 67-H. Enrique Zarzuelo Veterinario del Cuerpo Nacional MINI3TERl0 DE AGR[CULTORA

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OBTEN CI O N, PREPARACIO NY EN YIO DE MUESTAAS

PA RA ANA LISIS VETERINA RION" 5 y 6- 67-H.

Enrique ZarzueloVeterinario del Cuerpo Nacional

MINI3TERl0 DE AGR[CULTORA

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Obtención, preparación y envio tle muestraspara análisis veterinario

Existe una serie de factores, tanto económicos (mayor va-lor de los animales, explotaciones ganaderas más grandes, pe-queñas anot•malidades que producen una baja en los rendi-mientos, originando una explotación antieconómica, etc.)como técnicos (elevación del nivel cultural, aparición de nue-vas enfermedades, etc.), que determinan que, cada vez conmás frecuencia, los veterinarios y ganaderos tengan que recu-rrir a los diversos análisis de laboratorio para aclarar las du-das existentes.

La obtención, preparación y envío de las diversas muestras

exigen el cumplimiento de determinadas condiciones, a fin deque se puedan conseguir unos resultados que representen una

realidad y no sean falsos como consecuencia de una forma in-correcta de obtención, preparación y envío de las muestras.

Para comprender mejor lo que acabamos de exponer, pon-

dremos algunos ejemplos prácticos. Si deseamos intentar el

aislamiento de un virus del bazo, éste se deberá obtener en

las mejores condiciones posibles de esterilidad, y es muy con-

veniente espolvorear su superficie con penicilina y estrepto-

micina. Por el contrario, para hacer un aislamiento bacteria-

no, está totalmente contraindicado añadir los antibióticos. Y

otro ejemplo: para hacer un análisis de un pienso compues-

to, será totalmente necesario recoger porciones de todas las

partes de un saco (superior, medio y fondo), ya que de no ha-

cerlo así, los resultados serán sin duda incorrectos.

Desgraciadamente, la realidad es que muchas veces no secumplen las mínimas condiciones exigibles. Este hecho, ennuestra opinión, se debe, en la mayor parte de las ocasiones,a falta de una información adecuada.

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De acuerdo con una sistemática práctica, vamos a dividir

este trabajo en cinco partes diferentes: 1) obtención; 2) pre-

paración; 3) envío; 4) muestras de elección para las distintas

e;nfermedades, y 5) informe sobre los antecedentes.

OBTENCION

Es indudable que para realizar un determinado análisis es

condición previa e indispensable obtener una muestra del pro-blema. Sea cual fuere su naturaleza u origen (pelos, sangre,

animal vivo o muerto), no cabe duda quc su obtención tendráque hacerse de acuerdo con ciertas condiciones. Además, cada

muestra exige una técnica determinada.Antes de empezar a describirlas, daremos unos breves deta-

]les sobre la forma en que se pueden extraer, con relativa es-

terilidad, las diferentes vísceras u órganos.

En primer lugar procederemos a hervir en agua salada

(agua potable con 0,85 por lU0 de cloruro sódico -sal co-

mún-) tres tijeras, tres pinzas y un bisturí, así como un re-

cipientc con tapa, donde dejaremos enfriar dicho material.

Con el cadáver del animal, procederemos primeramente a

mojarlo con cualquier producto desinfectante, a fin de fijar

los pelos o plumas. Después se abre en una habitación limpia

e incluso en pleno campo, pero nunca en la cuadra. Con el pri-

iner par de pinzas y tijeras y con el bisturí procederemos a se-

parar la piel, cogeremos el segundo par para abrir la cavidad

torácica o abdominal y, finalmente, el tercero servirá para

cortar la víscera u órgano de elección. Habrá que hacer dichasoperaciones con cuidado para no cortar el sistema digestivo

y evitar que su contenido contamine todo el organismo.

La misma solución salina se utilizará para hervir los fras-cos y tapones en donde se colocarán las vísceras o unos tro-zos de ellas. Los frascos y tapas, una vez hervidos, se coloca-rán boca abajo, todavía dentro del agua, y sin sacar la bocade su superficie se vaciará de agua y se colocará inmediata-mente el tapón.

Cuando interese tener algodón u otro inaterial con relativa

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esterilidad, y que no se puede mojar, así como glicerina e in-cluso solución salina, lo pondremos dentro de un frasco, cuyañoca tendrá un tapón de algodón. El frasco así preparado seintroducirá hasta su cuello, en un recipiente que contengaagua salada y se pondrá a hervir por lo menos durante treintaminutos (fig. 1).

Otro material que se pueda necesitar para la obtención decualquier otra muestra se prepara de una forma semejante alo indicado.

Una vez hecha esta introducción, vamos a tratar de las: ondiciones de obtención de las muestras más corrientes.

Fig. 1.-Forma de colocar ]os recipientes para poder efectuar la esteriiización.

Agua.

Su obtención, como es lógico, no presenta dificultad algu-na. Cuando es agua de un pozo, hay que procurar tomarla delfondo, y cuando dicho pozo tiene instalada una bomba, larr^uestra se tomar^í después de haber estado en funcionamien-to dos horas, como mínimo.

Contenido gastro-intestinal.

Puede interesar para un análisis bacteriológico. En el pri-

mer caso es imprescindible obtenerlo con esterilidad. En el

segundo caso es muy conveniente, pero no indispensable.

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Una vez abierta la cavidad abdominal, el estómago se ata-rá en sus dos extremos (cardias y píloro) mediante una dobleligadura en cada uno de ellos. El intestino se dividirá en dospartes, que igualmente se atarán con una doble ligadura.

El estómago se debe colocar en un recipiente, indepen-diente del intestino.

Costr-as.

La mejor forma de recogerlas es utilizando una cartulinafina y fuerte (una tarjeta de visita). En ocasiones podrá inte-resar ablandar ligeramente dichas costras a fin de facilitarsu recolección. Esto se puede realizar perfectamente con so-]ución salina (agua potable con sal común al 0,85 por 100).

Esca^ncrs.

Su recogida se hace perfectamente con tma cartulina fina.En este caso el mojarlas es un inconveniente en lugar de una

ventaja.

Tanto en este caso como en el anterior, y dado que la can-

tidad de material de muestra siempre será necesariamente es-

casa, resulta muy adecuado recogerlas y mandarlas entre dos

"portas".

Exudados vagirzales.

Su obtención se realiza mediantc un hisopo hecho con c.malambre o palito largo. En uno de sus extrcmos se ata unabola de algodón seco que se introduce en la vagina tocandocon él sus paredes. De este modo el algodón absorbe los exu-dados existentes. Para su envío al laboratorio se introducc enun frasco estéril.

Fetos.

Para todos los efectos podemos considerar que se trata d^una víscera _y, por tanto, hay que actuar dc acuerdo con lo in-dicado para ellas.

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Heces.

Su recogida no representa dificultad de ninguna clase,

pero hay que procurar que estén limpias dc paja y que scan

recientes.

En los cadáveres, la muestra de heces se puede obtener en

las últimas porciones del intestino. En estos casos es conve-

niente ligar los dos extremos de una pequeña porción y man-

darla en un frasco de boca ancha.

Hacesos.

Posiblemente los huesos largos representan uno de los mejores e indispensables medios para un análisis bacteriológico.

Hay que procurar quitarles toda la carne posible, pero nece-

sariamente deberán estar íntegros, es decir, su medula no

^lebe estar en contacto con el exterior.

I eche.

Es muy conveniente recogerla directamente de la ubre, la-

vando ésta previamente con agua y jabón y secándola con un

paño limpio. Después se ordeña sobre el recipiente que vaya-

mos a emplear para su envío. Hay que tener en cuenta quc nilas primeras ni las últimas porciones de un ordeño deben ser

empleadas como muestra para análisis.Cuando la muestra se recoja de un ordeño ya realizado,

hay necesidad de remover perFectamente la leche antes de to-mar la muestra correspondicnte.

Lznfa de vesículas-aftas.

Una vez recortada, con unas tijeras esterilizadas, la mem-brana que las recubre, se recogerá la linfa existente con unbisturí.

Igualmente se puede absorber mediante algodón bien seco.

Líquido cefalorraqzlídeo.

Es utilizado pocas veces en la clínica veterinaria, pues co-rrientemente exige una anestesia local del animal.

Para obtener la muestra se coloca al animal en decúbito

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lateral. Se introduce un trócar en el espacio lumbo-sacro, es

decir, entre la última vértebra lumbar y la primera del sacro.

Esta punción se ticne que hacer lentamente y el trócar debe-

rá introducirse hacia delante con un ángulo aproximado

de 45 grados.E1 grosor y longitud del trócar depender^í de la especie del

animaL Igualmente se puede utilizar una aguja con su corres-

pondiente jeringa para obtener la muestra.

En bóvidos y solípedos, con frecuencia, es necesario reali-

zar un pequeño ojal en la piel, con bisturí, para facilitar la

operación.

Moco.

Corrientemente intcresa este exudado cn los casos de en-fermedades respiratorias en que es normal se presente unaabundante secreción nasal.

En estos casos conviene hacer Lu1 lavado nasal, mediantesolución salina tibia. Seguidamente, colocando al animal conla cabeza baja, se hace la recogida directa en un frasco deboca ancha.

Cuando el moco no es abundante, se puedc recurrir a re-cogerlo mediante un hisopo. Hay ocasiones, hemos leído, quese puede provocar el estornudo de los animales, para poste-riormente hacer la recogida del moco. Teniendo en cuenta quehrovocar el estornudo no siempre es fácil y el violento movi-miento de cabeza que hacen al estornudar, comprenderemoslas dificultades que presenta este método.

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Sin disponer dc instalaciones, que por otra parte cs lo co-rriente en el campo, la recogida de la orina puede resultarfácil en el macho, pero relativamente difícil en las hembras.

Si por las i-azones que sean no es posible realizarlo de unaforma natural, se pucde recurrir a sondar.

Purásitos c,rternos.

Su recolección es fácil y no presenta incom^cniente alguno.

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Parásitos interrzos.

Limitándonos a los macroscópicos, su recolección es fácil,ya que normalmente en un animal afectado existen cn gran-des cantidadcs.

Pelos-plumas.

No presenta dificultad alguna. Unicamente hay que tener

en cuenta que algunos de ellos deben ser arrancados de raízv no cortados.

Pierisos.

Dado el distinto peso dc sus componentes, hay que haccr

una buena mezcla y coger una pequeña porción de la parte

superior, media e inferior de cada saco.

Cuando se trata de un lote constituido por varios sacos, sedeberá tomar una muestra de la mayor parte o de la totali-dad de los recipientes.

Ptrs.

Para recogcr una mucstra dc pus hay que curlar tudos l05

pelos o plumas existentes en el abceso. Inmediatamente selimpia su superficic con agua salada, previamente hervida.

Después, mcdiante un bisturí estéril, se procederá a sajarlo.

Si el abceso es pequeño, con un nuevo bisturí, también esté-

ril, se recogerá el pus. En el caso de que sea grande, se puedehacei- con una pequeña cucharilla de café esterilizada.

Salii^a.

No ofrece dificultad alguna. En el caso de que la cantidadexistentc sca escasa, se puede recoger mediante un hisopo.

Snttgrc.

La recogida de este interesante líquido es muy conocida,

para que tengamos que insistir mucho sobre este punto.

En todos los casos se realizará una desinfección previa de

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Fig. 2. - llistintoslugares donde sepueden efectuar las

inyecciones.

Q Intramuscular

^ Endovenosa

^ Subcutánea

Q Intradérmica

0 Intraperitoneal

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la zona por la que se va a proceder a su extracción, y siem-

pre se hará mediante aguja y jeringa estériles.

En los équidos y rumiantes, la zona adecuada es la ya^g^i-ilar.En los suidos, la vena marginal de la oreja. En el perro y elgato, la safena. Para cl conejo, la marginal de la oreja. Final-mente, en las aves, la vena mediana del ala (fig. 2).

Serosidades.

Su recogida es semejante a las indicadas en otros puntos,de acuerdo con las condiciones que puedan presentar.

Suero sanguíneo.

Por su excepcional importancia para la determinación de

distintas pruebas inmunológicas, indicaremos que una vez ex-

traída la muestra de sangre, tal y como hemos señalado antes,

se dejará coagular. A las veinticuatro haras se habrá forma-

do un coágulo y una parte líquida que es el suero. En ocasio-

nes esta separación no se produce, y entonces con un hilo de

cobre, de un cable de luz, se bordeará toda la masa, para se-

nararla de las paredes del recipiente. A las doce-catorce horas

de efectuada esta operación se habrá ralizado la separación

del suero.Cuando el suero sc haya separado, hay que transvasarlo

a otro tubo, a fin de evitar una nueva disolución del coágulo.

Vísceras.

La obtención de las distintas vísceras (bazo, riñón, hígado,

pulmón, etc.) se ha de realizar con esterilidad, de acuerdo con

las normas dadas al principio dc esta primera parte.

Hay que destacar la importancia que tiene realizar la ex-

tracción de las vísceras nada más producirse la muerte o el

sacrificio del animal enfermo. Con ello evitaremos que las

bacterias de la putrefacción invadan las vísceras. ^

PREPARACION DE LAS MUESTRAS

Debemos considerar el hecho de que las distintas mues-tras recogidas deberán enviarse al laboratorio para realizar

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su análisis. Corrientemente, desde el momento que se obtie-nen hasta que llegan a las manos del técnico que tiene quebacer las pruebas, pasan, en el mejor de los casos, veinticua-tro horas, y con frecuencia cuarenta y ocho o setenta y doshoras. Por eso es necesario preparar las muestras de formaadecuada para que lleguen al laboratorio en las mejores con-diciones posibles.

Como antecedentes generales indicaremos que para reali-

zar un análisis bactcriológico es preciso el envío de dos fras-quitos distintos conteniendo una pequeña porción dc la mis-

ma muestra. Para los análisis químicos es indispensable pre-

parar un litro o un kilo (segíul sea líquido o sólido) de lamuestra del problema.

De una muestra puede interesai° realizar muy distintas cla-

ses de análisis. Así, por ejemplo, si unas heces se recogen para

hacer un examen de huevos de parásitos, debemos añadirlesformol al 10 por 100. Sin embargo, si en estas mismas heces

interesa hacer una determinación química, no podremos aña-

dirle producto alguno, y si lo son para un análisis vírico, po-

dremos añadirle antibióticos. Resumiendo, las muestras se ob-

tendrán como hemos indicado en la primera parte, pero para

su envío se prepararán como explicaremos seguidamente (figu-ra 3), según las normas generales que exigen, para la recogida

de las muestras, cada uno de los análisis que se citan.

AtiATOM OP:ITOLÓGiCO

Esta clase de análisis es exclusivo de los diversos produc-

tos biológicos o, concretando más, de las distintas muestrasorgánicas.

Tanto para la observación de lesiones anatómicas como delas histológicas, las muestras de elección serán aquellas que

presenten lesiones. Se recogcrán siempre en w1a solución de

formol al 10 por 100, en un recipiente que cierre perfecta-

tamente. Cuando se quiera apreciar las lesiones macroscópi-

cas, es necesario remitir la víscera u órgano que presente le-

siones, pero completos. Para la apreciación de las histológi-

cas, es conveniente enviar todo el órgano, pero en muchas

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ocasiones puede bastar sólo con un trozo, en el cual estén laslesiones más acusadas.

BICTFRTOLGGICO

Para los ganaderos, esta clase de análisis constituye posi-blemente un porcentaje del 70 por ]00 de la totalidad de losque solicitan o necesitan.

Los análisis bactcriológicos pueden estar encaminados aponer de manifiesto la existencia de una bacteria, hongos ovirus, causantes de un determinado proceso. A su vez, tambiénpuede interesar una simple observación morfológica o bienlograr su aislamiento. En cualquiera de las circunstancias, losmétodos de preparación de la muestra problema son funda-mentalmente diferentes.

A continuación vamos a describir las principales condicio-

nes a que hay que ajustarse en cada caso.

BACTERIAS

Para la investigación de las posibles bacterias productorasde un determinado proceso, se puede intentar su aislamientoy posterior identificación, o bien simplemente realizar unaobservación microscópica clirecta. La forma cíe actuación esdistinta para cada caso.

En un caso como en el otro, la toma de muestras hay querealizarla necesariamente lo antes posible, tras de producirsela muerte del animal o el sacrificio del enfermo, ya que trans-curridas doce horas en el verano y veinticuatro en el invierno,las bacterias de la putrefacción invaden el cadáver y resultamuv difícil la identificación.

Tanto para realizar una identificación morfológica directacomo para realizar un aislamiento, cada enfermo presentaunas vísceras de elección, que posteriormente detallaremos, yen general para todas ellas, la medula ósea de un hueso largoconstituye un excelente medio para intentar ambas cosas.

Iderzti f icacióra a^rorfológica.-Para realizar un frotis de unadeterminada víscera (generalmente las que muestran lesiones,

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^ no olvidemos en todos los casos la médula ósea de un huesolargo), hay que disponer de un mínimo material constituido(fig. ^) por: "portas", espátula o cuchillo de punta redon-da, bisturí, tijeras, pinzas, mechero o algodón con alcohol.Solución fisiológica estéril o hervida, o en su lugar agua po-table hervida. Finalmente, asa de platino, o tres o cuatro alam-bres de cobre de un cable de luz, retorcidos, para que formenun conjunto que tenga una pequeña circunferencia de medio^nilímetro, aproximadamente, en uno de los extremos.

Se extrae la víscera elegida y el hueso largo con las pin-

zas, bisturí y tijeras, y se colocará sobre una superficie planav limpia. En seguida, con la espátula o cuchillo calientes como

para producir una quemadura de primer grado, se dan dos

toques sucesivos y rápidos. Uno de ellos con una de las caras

sobre la superficie de la víscera y el otro con la punta romade la espátula, introduciéndola en su interior, precisamente

sobre la zona quemada anteriormente. Con ello conseguimos

Jlegar al interior de la víscera, sin contaminarla ni introducir

bacterias extrañas. Después se calienta al rojo el asa de pla-

tino o de alambres de cobre y se deja enfriar para, seguida-

mente, introducirla por la raja realizada en la víscera con un

Fig. 4.--Material necesario y útil para realizar un "frotis" de las vísceras.

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ángulo de unos 45°. Así, del interior intacto de la víscera se

saca con la pequeña circunferencia una pequeñísima porción

dc la misma (casi no observable), quc sirve dc muestra (figu-

ra 5). En dos portas dispuestas de antemano, con una gotade solución fisiológica cada una, sc lleva el asa con la por-

ción de vísceras sobre dicha gota y se extiende por toda lasuperficie. Téngase presente que aunque a simple vista no

se aprecia nada, queda material más que suficiente para rea-lizar la observación microscópica. Una vez practicada la ex-

iensicín hay que fijarla, pasando el porta por la cara contra-

ria a donde hemos realizado la cxtcnsión, por la llama del

mechero durante die-r, segundos, tres veces seguidas, dejando

enfriar y repitiendo la misma operación otras dos veces.

Cuando se trate de la médula ósea, después de partido elhueso se toma w^a muestra con el asa de platino y se actúacomo se ha indicado antes.

De cada víscera, médula ósea, etc., hay que hacer necesa-riamente dos frotis como mínimo, ya que corrientemente ha-brá que realizar cn el laboratorio dos tinciones distintas.

Aislamiento.-Para intcntar hacer un aislamiento bacte-

riano, se prepara la muestra de elección, sin tratar con pro-

ducto alguno y en un frasco estéril o hervido.

En este caso el hueso largo se enviará íntegro, aunque des-provisto de masa muscular.

Ho^cos

Las condiciones que hay que cumplir para la recogida deuna muestra en la cual se sospeche la existencia de hongosson las mismas reseñadas para las bacterias, tanto en el po-sible aislamiento como en la identificación morfológica.

^% [ RUS

La observación de un virus mediante el microscopio elec-trónico es perfectamente posible; sin embargo, en la práctica,y para realizar una posible identificación, no es una t ĉcnicautilizada. Por ello el método adecuado es el posible aislamien^to del virus.

Debemos advertir que, en la mayor parte de las ocasiones,

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]as vísceras, a partir de las que debemos intentar el aislamien-to, no presentarán lesiones anatómicas.

E1 trozo de órgano recogido se introduce en un frasco de

boca ancha estéril y se cubre con glicerina, que también ante-

riormente habremos hervido a baño maría, por lo menos

quince minutos. La glicerina actúa impidiendo en parte la pu-

irefacción de la muestra orgánica, e incluso inhibe a muchas

bacterias y actúa sobre los virus protegiéndolos.

El hecho de que los antibióticos actúen sobre las bacte-

rias y no sobre el virus, hace quc actualmente se espolvoreen

las muestras, del tamaño aproximado de una mandarina,con 500.000 unidades de penicilina y 0,5 gramos de estrepto-

micina.

TOXINAS

Las toxinas bacterianas no son afectadas por los antibió-ticos. Ello nos permite proceder de la misma forma reseñadacn la recogida cíe muestras para el aislamiento de virus, o seaespolvoreando la muestra orgánica con penicilina y estrepto-

HE^[ATOI.ÚGICO

Recomendamos, por su sencillez, añadir por cada centí-metro cúbico de sangre dos o tres gotas de "heparina". Par-tiendo de esta muestra se podrán realizar las dos clases deinvestigaciones reseñadas en este punto.

La "heparina" (fácil de conseguir en cualquier farmacia)

se pone en un frasco de antibióticos limpio, hervido y sin res-

tos de agua. Sobre la "heparina" se echa la sangre extraída

con jeringa, inmediatamente de obtenida. La "heparina" hace

incoagulable la sangre y permite la investigación de la mayor

parte de las constantes sanguíneas y parásitos.

Aunque menos apropiados, se pueden emplear para hacer

incoagulable la sangre, el oxalato potásico (8-10 cristales por

cada 5 cc. de sangre) 0 1 cc. de citrato sódico al 3,8 por 100

por cada 4 cc. de sangre.

Frecuentemente se recomienda para la obtención de estasmuestras hacer un frotis de sangre, gota gruesa, etc. Sincera-

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Fig. 5. --Formade obtener unamuestra pararealizar

un "frotis" osicmbra.

^^ --^--^mente creemos que la °heparina" supera con mucho a los de-más métodos.

Seguidamente, y por su importancia, vamos a describir laforma de hacer un frotis sanguíneo. Para ello necesitamos dos

portas; uno de ellos conviene que tenga uno de los bordes

biseladus. Una gota de sangre se coloca en el extremo de uno

de los portas, y con cl otro, colocado con una inclinación

de 45 grados aproximadamente, se toca con el borde la gota

de sangre. A continuación se moverá el porta, tirando de la

gota de sangre (no empujándola), con lo que se logra Lmabucna extensión (fig. 6).

I\T\SLNOLÓGICO

Esiste la posibilidad de investigar en un órgano determi-nado el posible antígeno, es decir, las bacterias o virus quepueda contener, o bien los anticuerpos existentes en el suérosanguíneo, leche, exudados vaginales, etc. La técnica para pro-ccder a^u preparación es distinta para ambos casos.

ANTÍGF.NOS

En este caso específico, y tal como ya hemos indieado, los^Intígenos que nos interesa investigar están constituidos conlas bacterias o virus, causantes de un determinado proceso ypresentes en las diversas vísceras.

Para la preparación de estas vísceras hay que actuar detorma semejante a la ya mencionada, segíln queramos inves-tigar antígenos bacterianos o víricos.

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A;v ^• 1 c<<r u i^os

Es posible detectar la existencia de anticuerpos en leche,

exudados genitales y suero sanguíneo. La obtención de cadauna de estas muestras se hará de acuerdo a las normas dadas

en la primera parte.Para el mantenimiento de estas muestras es pertinente

añadir merthiolato al 1'10.000, como bacteriostático, que im-pide la multiplicación bacteriana, conservando intactas laspropiedades inmunológicas.

Quín^ rco

Esta clase de análisis está generalizándose extraordinaria-

mente. E1 99 por 100 de estas investigaciones están orientadasal análisis cualitativo-cuantitativo de los piensos y aguas.

Tanto para una como para otra clase de análisis químico,

el método de mantenimiento y obtención son iguales. La úni-

ca precaución que hay que adoptar es meter la muestra en un

recipiente, a ser posible de cristal o plástico, limpio y, espe-cialmente, que la muestra represente la totalidad del saco,

lote, ctc., para lo cual se obtendrán pequeñas porciones detodas las partes de un saco o de todos los recipientes de un

lote.PAUasrror.Gcico

Tanto las porciones intestinales como los parásitos, o las

muestras de heces para la observación de huevos, se manten-drán en formol al 10 por 100.

ENVIO DE LAS MUESTRAS

A1 trabajar con productos biológicos que presentan la do-ble condición de tener una patogeneidad potencial y de entraren putrefacción fácilmente, el simple hecho de remitir al labo-

Fig 6 Forma. .de hacer un"frotis" de san- ^

^re.

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r.atorio unas muestras debe hacerse de acuerdo con unas con-dicioncs precisas.

En primer lugar, siempre que se pueda, habrá que enviar

el cadáver entero de un animaL Hay que insistir mucho en

que dichos cadáveres deben estar desprovistos de su aparato

digestivo. De interesar su cnvío, debc realizarse en paquete

aparte y debe estar frío, para lo que sc meterá en una cámara

o, en su lugar, aplicándole hielo.

CAD^IVEKES

Los cadáveres de los animales no se deben introducir enuna bolsa de plástico cerrada, porque esto favorece la multi-plicación dc las bacterias anaerobias.

El método correcto para el envío de los animales muertos

consiste en, una vez despojados de su aparato digestivo, en-

volver en paños o en un par de sacos empapados de formol

al 10 por 100. También puede espolvorearse la piel de los ani-

males con ácido bórico y antes de envolverlos en un saco. En

estas condiciones, el cadáver se meterá en otro recipiente que

contenga paja, serrín, etc., para absorbcr los posibles líquidos

que se originen.

O'rROS PROllUCI'OS BIOLÓGICOS

Las vísceras u órganos a los cuales se les puede añadirformol, etc., consiste en envolverlas en un paño O arpilleracierre bien. Son muy aconsejables los de plástico de bocaancha.

El método correcto de enviar las muestras biológicas sinforlnol, etc., consiste en envolverlos en un paño o arpilleralimpia y después introducirla en un recipienle que no cierreherméticamente, con vil-uta, algodón, serrín, etc.

PROllC-C'COS YEI,IGROSOS

Existen muestras, tales c^mo puedan ser un productosospechoso de rabia, de hidatidosis o de causa productora de

una epizootia, por ejemplo, peste equina, pcste porcina afri-

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cana, fiebre aftosa, etc., cuyo posible contacto con el esterior

puede constituir wi evidente peligro para las personas quelas manejen o para la diseminación de una enfermedad.

En estos casos hay que procedcr necesariamente a intro-

ducir la muestra en un frasco que cicrre perfectamente. Este

frasco, a su vez, se meterá en otro mayor y entre ambos reci-

pientes se pondrá con preferencia hidróxido sódico puro o,

en su lugar, lcjía pura. E1 frasco exterior deberá cerrar tam-

bién perfectamente (Fig. 7). Así se logra que los posibles res-

tos patógenos que puedan salir del primer frasco sean inmc-

diatamente destruidos por el hidróxido sódico existentc cn

cl segundo.

En la práctica, la mayor parte de las veces, lo que interesaestudiar es la presencia de un posible ^^irus y la adición delntibióticos es recomendable; por tanto, la existencia de undoble recipiente cerrado no constituye ningíul problema.

P120DliCTOS \O PliTREFACTIBLES

Las plumas, pelos, piensos, agua, etc., exigen realmente

pocas precauciones en su en^^ío, v con introducirlos en w1

frasco limpio es suficiente.

MUESTRAS DE ELECC[ON PARA LAS DISTTNTASENFERMEDADES

Cada proceso tiene un órgano o ^^íscera en la cual prefe-

rcntemente debcmos investigar su pcesencia. Sin embargo, en

t^rminos generales, dcbemos tener en cuenta que las bacte-

rias se deben buscar en la médula ósea de un hucso lai°go;

los virus, en el bazo o cerebro; los parásitos externos, en los

pelos o plumas; los anticucrpos, en el suero sanguíneo, v,

I^inalmente, la investigación anatomo-patológica, en las vísce-

ras que presenten lesiones.Seguidamente se reseñan, por orden alfabético, las enfer-

medades más frecuentes, con indicación de la muestra o mues-tras orgánicas que en cada caso hay que seleccionar:

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Aborto co^ztngioso.-Ver Brucelosis.

Abor^to epi<.oótico.-Flujo vaginal y suero sanguíneo de lamadre. Un feto entero, con cordón umbilical, y si esto no es

posible, sangre coagulada o suero sanguíneo y sangre desfi-

brinada, así como el estómago con su contenido.

Fig 7.-Forma de preparar una muestrapeligrosa para su enví^ al laboratorio.

Actinonzicosis.-Un actinomicuma o trozos dc órganos

afectados (con o sin formol al 10 por 100). Pus.

Agalnxia.-Exudado de una articulación y leche rcci^n or-

deñada.

.4rinpln.^itiosis. - Prutis cle sangrc, sangre desfibrinada,

orina.

A^iet^2ia i^rfecciosn del caballo.-Fi-otis de sangrc clesfibri-nada, orina, secreción ocular.

Ai^italv^ri^iosis A de las aves.-Un animal enfermo o recien-

temente muerto, una cabeza o senos nasales, placas traquea-

les y trozos de esófago cn formol al l0 por ]00.

Buscjrtill^r.-V^ase Enterotoxemias.

Botrrlisrrto.-10 a 20 cc. de sangre desfibrinada, hígado,

bazo, riñón y contenido intestinal. Alimentos o sus residuos,

sobre los que recaigan sospechas c incluso, si es posible, el

recipientc o envase que los conlenía.

Brortquitis iizfecciosc^ de las aves.-Animales en[ermos ymuertos.

Brucelosis.-Un leto abortado o su estómago con el con-

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tenido. Suero sanguíneo, sangre desfibrinada, exudado vagi-nal y leche de las madres.

Carbur2co bn.cteridiano.-Un hueso largo, frotis de pulpaesplénica, secados al aire si la autopsia fue reciente; sangredesfibrinada, un trozo de bazo, hígado y ganglios linfáticos.

Carbunco sirztotnático.-Trozos de tumores crepitantes

(uno sin líquido conservador o en glicerina; el otro en formol

al 10 por 1001.

Cisticercosis.-Trozos de carne con quistes (corazón, len-

gua con faringe y laringe, maseteros, pilares diafragmáticos,

esternón e isquiopubial) en los bóvidos, tejido conjuntivo in-termuscular. Heces.

Coccidiosis.-En los animales mayores, un trozo de hígadocon quistes o el hígado entero; intestino con contenido y he-ces. En los animales pequeños, un cadáver.

Cólera aviar.-Un cadáver y un animal enfermo, y de noser posible esto, un hueso largo, pulmón, hígado, bazo y riñón.

Coriza contagioso uviar.-Un animal enfermo o un cadá-ver reciente, una cabeza o senos nasales, placas traqueales ytrozos de esófago en formol al 10 por 100.

Coriza gangr^.noso.-Una cabeza, pus de las fosas nasales,tr-ozo de pulmón con grandes bronquios, exudado pleurítico,contenido intestinal, sangre desfibrinada.

Diarrea blarzca bacilar de las aves.-Hueso largo, suerosanguíneo y ovarios de la madre. Un polluelo enfermo y uncadáver, heces en solución conservadora, sangre desfibrinadao suero sanguíneo y un hígado de polluelo.

Di f teria aviar.-Lo mismo que la avitaminosis A de las

aves.

Difteria de los terlieros.-Pulmón con focos purulentos,

cabeza, pus de los abscesos periarticulares y una pezuña

anterior.

Disentería de los recién nacidos.-Un hueso largo, un trozode intestino, sangre desfibrinada, heces.

Disentería vibriói^iica.-Intestino grueso, bazo e hígado.

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Distomatosis.-Trozos de hígado, heces.

Dtcrina.-Líquido de edema prepucial, frotis sanguíneo, san-gre desfibrinada, suero.

Eiicefalitis.-Cerebro con glicerina.

Encefalomielitis aviar.-Animales enfermos y muertos.

Eritema contagioso del carnero.-Igual que en la fiebreaftosa.

Erzfermedades de Aatjeszky.-Igual que en la rabia y, ade-más, un hueso largo y un trozo de músculo.

En f ermedades dc los edemas.-Cadáveres entcros.

Erz(ermedades de origen alimenticio.-Estómago, una por-ción de intestino con su contenido, sangre desfibrinada y coa-gulada, trozos de hígado, riñón y bazo en fresco, orina, heces.iVIuestras de alimento y agua de bebida (cada uno de los pro-ductos en frasco independiente).

Elzf ermedad respiratoria crónica.-Animales enfermos y

^nucrtos.

Enterotoxemias.-Hígado, un trozo de duodeno, cl cuajar,un riñón y, a ser posible, un animal enfermo.

Envenenamientos.-Como en enfermedades de origen ali-

menticio.

Ectima contagioso.-Como en la difteria de los terneros.

Estomatitis contagiosa.-Saliva, secreción nasal, trozos demucosa nasal, con vesículas, nódulos o úlceras.

E.strongilosis.-Trozos de tráquea, pulmón e intestino, se-

creción nasal, moco faríngeo, heces, parásitos en alcohol de 70°.

Fiebre aftosa.-Mucosa de la cara interna de los labios con

vesículas o aftas llenas de linfa. Saliva. Pezuñas con lesiones.Si el transporte es rápido, los productos se rcmitirán de suerte

que las aftas vayan sin líquido conservador, pero en recipien-te con hielo. Si el transporte es lento, se incluirán en glicerina

y suero fisiológico estéril, a partes iguales.

Fiebre Q.-Suero sanguíneo con merthiolato, un trozo deplacenta, garrapatas.

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Fiebre c1e MaZta.-Véase Brucelosis.

Gangrena gaseosa.-Véase Carbunco sintornático.

HeZmintiasis.-Un trozo de intestino, heces o parásit^^ en

formol al 10 por 100.

Histonor^2iasis (cabeza negra).-Animales enf^^^nos y muer-

tos. Hígado.

In fluenza.-Píloro y un trozo de intestino grueso (en for-mol al 10 por 100), un riñón, sangre desfibrinada, un huesolargo.

Intoxicaciones.-Véase "Enfermedades de origen alimen-ticio".

Laringo-traqueítis infecciosa de las gaZlinas.-Un cadáver yun animal enfermo.

Leishmaniosis.-Trozos de piel alterada, en formol al lu

por 100. Suero sanguíneo, bazo, hueso largo, hígado y ganglios

en formol al 10 por 100 y otros trozos sin antisépticos. Frotis

de estos mismos órganos por impresión (no por frotamiento).

Lengua azul.-Sangre, bazo eon antibióticos.

Leptospirosis.-Suero sanguíneo con merthiolato, orina,

riñón.

Leucosis.-Enfermos y cadávcres.

Linfagitis.-Trozos de piel con nódulos ptu^ulentos y úlce-ras. Para estudios histológicos, envíense los mismos preductos,más los ganglios en formol al 10 por 100.

Linfagitis epi,oótica uZcerosa.-Sangre coagulada o suero

sanguíneo, moco purulento y pus, cuando se trate de un enfer-

mo. Si se trata de un cadáver, además de lo ya relacionado,

deberán enviarse los ganglios, trozos de pulmón con nódulosy trozos de piel y tabique nasal ulcerado. Los mismos órganos

en formol al 10 por 100.

Listeriosis.-Cerebro, estómago e hígado.

MctZ rojo del cerdo.-Riiión, bazo, un hueso largo, un trozode intestino y un ganglio linfático.

Mar^nitis estreptocócica de la ^^aca.-Leche de todos los

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cuarterones o de los sospechosos (50 a 100 cc.), recogida asép-

ticamente.

Mamitis gangrenosa.-Mama de res enferma o muerta.

Moquillo del perro.-Bazo con antibióticos.

Muermo.-Lo mismo que para la Linfagitis epizoótica ul-

^erosa.

Nosemosis.-Abejas adultas o gusanos de seda enfermos.

Osteodistro f ia f ibrosa.-Frotis de sangre, sangre coagulada,huesos largos, planos; vértebras lumbares, orina, heces y mues-

tras de piensos y agua.

Papera de los éqctidos.-Pus de los abscesos submaxilareso ganglionares, ganglios linfáticos, trozos de pulmón con abs-cesos purulentos, flujo nasal.

Parati f osis porcina.-Cadáver completo o, en su defecto

todas las vísceras, incluido el tubo digestivo completo y em

paquctado por separado.

Pasteurelosis (bóvidos, óvidos y suidos).-Un hueso largo,riñón ^ trozos lesionados de pulmón, de hígado y bazo.

Perirzeu.monía exudativa contagiosa. - Trozos de pulmón,anos sin antisépticos ni conservadores, o a lo sumo, en gliceri^

na; otros, en formol, al 10 por 100. Exudado pulmonar o pleu^

rítico ^^ ganglios.

Pcste aviar.-Un cadáver o, en su defecto, sangre desfibri-nada, cerebro, secreción nasal y heces.

Peste bovina.-Sangre desfibranada, un hueso largo, un tro-^o de bazo, secreción nasal y heces.

Peste eqr.iiaza.-Sangre y bazo con antibióticos.

Peste porcina clásica.-Un hueso largo, sangre desfibrina-d.a, riñón, bazo, ganglios, pulmón y cerebro, en formol al 10

por 100.

Pe ĉ te porcina cc^ricana.-Un trozo de bazo con antibióti-

cos.

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Piroplasrnosis.-Dos o cuatro frotis de sangre por cada ani-mal enfermo o sospechoso, sangre citratada, orina, bazo, liíga-do, garrapatas.

Pleuroneumonía corztagiosa de 1os équidos. - Exudadobronquial, exudado pleurítico, si lo hay. Trozos de pulmón, sinconservador, unos, y en formol al 10 por 100, otros. Un huesolargo.

Pseudotubercitlosis.-Pus y ganglios en glicerina.

Pullorosis.-Véase "Diarrea blanca bacilar de las aves". '

Pztlmonía contagiosa (bóvidos, óvidos y suidos).-Un huesa]argo, riñón, trozos de pulmón lesionado, intestinos con su contenido y trozos de hígado y bazo.

Rabia.-Si el animal es pequeño y el envío se hace con ra-

pidez, se remitirá la cabeza; en caso contrario, estráigase r^l

asta de Ammón y un trozo de cerebelo, seccionado trasve^-sal-

mente en trocitos de un centímetro de espesor y un ganglio

plexiforme en formol al 10 por 100. Un trozo de cerebro para

inoculaciones, sin líquido conservador o, a lo sumo, en peda-

zos grandes sumergidos en glicerina.

Sarnas.-Costras y pelos obtenidos por raspaduras, remiti-

das al natural entre dos portas; si hay defunciones, de los ca-

dáveres, se remitirán trozos de piel con lesiones.

Septicemia ltemorrágica ( bóvidos, óvidos y suidos).-Unhueso largo, riñón, trozos de pulmón con lesiones, intestinoscon su contenido y trozos de hígado y bazo.

Sea^dotuberczclosis.-Ganglios linfáticos mediastínicos, tro-

zos de pulmón con nódulos (unos sin conservador y otros en

íormol al 10 por 100), trozos de hígado y riñón con nódulos.

Ti fosis aviar.-Un animal enfermo y un cadáver reciente,

un hueso largo y suero sanguíneo.

Tiñas.-Costras y pelos obtenidos por raspaduras, remiti-

das al natural entre dos portas; si hay defunciones, de los ca-

dáveres, se remitirán trozos de piel con lesiones.

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Toxoplasmosis.-Suero sanguíneo con merthiolato. Sangre.bazo.

Tricomoniasis. - Frotis sanguíneo, sangre desfibrinada ysuero, líquido de edema prepucial, orina e insectos.

Triqz^inosis.-Trozos de músculos, de preferencia de pila-res y diafragmáticos; los músculos laríngeos intercostalesy masticadores.

Tuberculosis. - Ganglios y nódulos pulmonares de otros

órganos en glicerina; trozos con nódulos y ganglios en formol,

al 10 por 100. En casos de tuberculosis abierta es conveniente

remitir moco, leche, orina, heces o exudado uterino, según la

localización que la clínica haga sospechar.

Tumores.-Si las dimensiones lo permiten, el tumor se en-viará entero; si ello no es posible, se enviarán trozos cortadosen el sentido de su espesor y siempre en formol al 10 por 100.

Vaginitis granulosa.-Exudado vaginal y raspado de mu-

cosa.

Viruela aviar.-Un cadáver reciente o un animal enfermo,

una cabeza o senos nasales, placas traqueales y trozos de esó-

fago en formol al 10 por 100.

Viruela ovina y caprina.-Trozos de piel con pústulas car-

gadas de linfa (uno, sin conservador, y otros, en formol, al

10 por 100).

INFORME SOBRE LOS ANTECEDENTES

Hay que tener en cuenta que para el técnico que realiza el

correspondiente análisis el informe resulta totalmente impres-

cindible, para orientar el sistema de análisis, así como para

valorar adecuadamente los resultados obtenidos. Igualmente

resulta indispensable indicar la clase de análisis que se desea

se realice en una determinada muestra.

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Es una parte de los análisis que, prácticamente, todo elinundo olvida, sin duda por ignorar su importancia.

He aquí un esquema de cómo debe ser el mencionado in-forme:

Don ................................................... envía para sus análisis los si-guientes productos : ............................................................ proceden-tes de un animal de la especie ............................ raza ........................,edad ................... sexo ........................, empleado para ..................de ia finca ......................................................... del término municipalde ............................... provincia de .........................

Número de animales que componen el efectivo .................................Sistema de explotación y régimen alimenticio ....................................Estado de nutrición y sanitario ......................................................Epizootias que existen en los alrededores ..........................................Número de enfermos, especificando edad ..........................................Día en que comenzó la enfermedad ...................................................Curso (número de enfermos y muertos por día) .................................Sintomatología ....................................................................Lesiones anatómicas ......................................................................Vacunaciones de que ha sido objeto y fechas de las mismas ........................................................................................................................Duración media de la enfermedad ...................................................Enfermedad que se sospecha ............................................................Fecha de recogida de los productos y condiciones en que se envían...........................................................................................................

Investigaciones que desea se realicen ................................................

.........................a.........de..................... de19......

PUBLICACIONES DE CAPACITACION AGRARIA

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Depósito legal: M. 5.733 - 1967 GRAFICAS ARAGON, S. A.-Madrid

Se autoriza la reproducción íntegrade esta publicación mencionando suorigen, "Hojas Divulgadoras del Mi-nisterio de Agricultura".