UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

PROFESOR: BQF. Carlos García MSc.

ALUMNO: Monica Elizabeth Lapo.

CURSO: 5to Paralelo: “A”

GRUPO: N° 7

FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 7 de Julio del 2014

FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 13 de Julio del 2014

PRÁCTICA N° 6

TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR PLOMO

ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar

TÓXICO ADMINISTRADO: NITRATO DE PLOMO (SOLUCIÓN SATURADA)

VOLUMEN ADMINISTRADO: 5 ml

VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial

TIEMPOS:

o Inicio de la práctica: 8:10am

o Deceso del animal: 08:19 min

o Hora de disección: 08:24

o Inicio del baño maría: 8:35 am

o Finalización del baño maría: 09:05 am

o Final de la práctica: 10:30 am

SÍNTOMAS: hipoxia

Convulsiones

Pupilas dilatadas

Perdida de la actividad motora

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por Plomo

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1

2. Observar atentamente las manifestaciones que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por Plomo

3. Controlar el tiempo en que actúa el Plomo en el cobayo. 4. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Plomo

MATERIALES SUSTANCIAS Jeringuilla de 10cc Campana Equipo de disección Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación. Tubos de ensayo Pipetas

Agitador Clorato de potasio (KClO3 ) Ácido clorhídrico (HCl) Nitrato de plomo (Pb(NO3)2 ) Hidróxido de Sodio (NaOH) Ácido acético (C2H4O2) Cromato de potasio (K2CrO4) Cloruro estannoso (SnCl2) Yoduro de potasio (KI) Cromato de Cadmio (CdCrO4)

Guantes de látex Mascarilla Mandil Perlas de vidrio Probeta Espátula

EQUIPOS

Balanza Analítica Campana de Gases Cocineta Eléctrica

Tapón de vidrio y de caucho Cinta Pinza para tubos Panema Mechero de Alcohol

PROCEDIMIENTO

1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo

2. Aplicar todas las normas de bioseguridad antes de iniciar la práctica

3. Administrar el tóxico (5 ml de Solución saturada de plomo)

4. Colocar la rata wistar en la panema.

5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo se dan hasta su

muerte.

6. Con la ayuda del bisturí procedemos a realizar la disección de la rata wistar.

7. Colocar la muestra ( vísceras ) en vaso de precipitación .

8. Agregar las 50 perlas de vidrio , 2 g KClO3 y 25ml (500 gotas) HCl concentrado

9. Llevar a baño maría por 30 minutos con agitación regular

10. 5 minutos antes que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g mas de KClO3

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2

11. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las

reacciones de reconocimiento.

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizaran las reacciones de identificación que a continuación se detallan

1. Con el cromato de potasio: se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una capsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo de cromato de potasio.

Pb(NO3)2 + K2CrO CrO4Pb + 2KNO3

2. Con el yoduro de potasio: con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de I2Pb soluble en caliente con agua y precipitable en frio como agujillas amarillas

Pb(NO3)2 + 2IK PbI2 + 2KNO3

3. Con la Difenil tío carbazona: esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono , al reaccionar con el plomo produce un color rojo

4. Con el ácido sulfúrico: en una solución diluida, produce un precipitado blanco de sulfato de plomo, este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el precipitado produce un color anaranjado.

5. Con el tetrametildiaminodifenilmetano: es una solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido de hidrogeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución muestra; el papel filtro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta en baño, maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar el plomo como oxido de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde se dejó caer las gotitas de la muestra. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo.

6. Con la bencidina: a 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta la que mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade ½ ml de peróxido de hidrogeno al 3% se hierve cuando momento, se separa y lava el precipitado (por centrifugación o filtración) con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica la presencia de plomo.

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GRÁFICOS

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Con Cromato de Potasio precipitado amarillo de cromato de potasio.

Solución Problema Positivo – Característico

(Antes (Naranja Intenso)

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Pesar y medir sustancias 2 g KClO3

y 25ml (500 gotas) HCl concentrado

Añadir 2 g KClO3 y 25ml (500 gotas) HCl concentrado a las vísceras trituradas

Llevar a baño María durante 30 minutos.

Filtrar y realizar las reacciones de reconocimiento.

Yoduro de potasio debe producir un precipitado amarillo cristalino.

Solución Problema (Antes)

Positivo – No característico(Naranja Intenso)

Reacción con Difenil tio Carbizona produce un color rojo.

Solución Problema(Antes)

Positivo – Característico

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Reacción con ácido Sulfúrico hasta que se disuelva el precipitado produce un color anaranjado

Solución Problema(Antes)

Positivo (no característico)

Reacción con tetrametil diaminoalfenilmetano aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo

Solución Problema Positivo (no característico) (Antes)

Reacción con bencidina Un color azul nos indica la presencia de plomo. Solución Problema (Antes) Positivo (no característico)

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OBSERVACIONES Se necesitó solo 5 ml (100 gotas) de solución saturada de plomo para producir el

deceso de la rata wistar. Al realizar la disección a la rata wistar se pudo observar que todo sus órganos

presentaban una coloración negra. El tiempo en que se produjo el deseo del cobayo fue solo de 9 min.

CONCLUSIONES

La reacción que presento la rata wistar ante la intoxicación plomo presentó pérdida del equilibrio, convulsiones, y su muerte se produjo después de un tiempo de solo 9 minutos , con lo que se concluye que el plomo es una sustancia muy tóxica y letal, además con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se puedo comprobar la presencia de plomo en medios biológicos teniendo en cuenta que las reacciones de reconocimiento para plomo son indispensables para la verificación de una intoxicación y muerte por este tóxico.

RECOMENDACIONES

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida Para una mayor eficacia en los resultados de la práctica realizar correctamente la

administración del tóxico al animal a experimentar.

CUESTIONARIO

1. DETALLE LAS ACTIVIDADES EN QUE EL RIESGO POR EL USO DE PLOMO ES ELEVADO

Metalurgia del plomo. Fundición y refinado. Recuperación de plomo y de residuos metálicos que lo contengan (Chatarra). Industrias de la construcción (Tubos fontanería). Fabricación y reciclado de acumuladores eléctricos (Baterías).

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Soldadura de objetos y aleaciones de plomo. Tratamientos térmicos en baños de plomo. Fabricación de explosivos. Fabricación y manipulación de arseniato de plomo como insecticida. Fabricación y utilización de pinturas, esmaltes y barnices compuestos de sales y óxidos

de plomo. Industrias del plástico que utilicen aditivos a base de plomo.

2. INDIQUE UNA VÍA DE INTOXICACION Y SU MECANISMO DE ACCIÓN DENTRO DEL MISMOVía respiratoria: Es la vía de entrada más importante, penetrando por inhalación de vapores, humos y partículas del polvo. El 50% del Pb depositado en los pulmones se encuentra en sangre circulante tras aproximadamente 50 horas, pasando un porcentaje a tejidos o siendo eliminado (10). El grado de absorción de plomo por esta vía depende de la concentración ambiental en el puesto de trabajo, del tiempo de exposición, de la forma física (vapores, humos, tamaños de las partículas) y química del plomo inhalado, de factores personales (edad, tipo de ventilación), y de las condiciones de trabajo (temperatura, humedad y ventilación ambientales, y nivel de esfuerzo físico).

3. DESCRIBA LAS VÍAS DE ELIMINACIÓN DEL PLOMO ABSORBIDOEl plomo absorbido es eliminado principalmente a través de la orina. Una pequeña parte es eliminada a través de la bilis en las heces. La porción de plomo que ha sido ingerida y no absorbida es igualmente eliminada por las heces. Otras vías de eliminación son la saliva, el sudor, las faneras y la leche. En el caso de baja exposición al plomo existe un equilibrio entre el aporte del tóxico y la eliminación. Pero una vez pasado un cierto nivel, la eliminación del plomo no se corresponde con el grado de la carga corporal del metal; se ha producido acumulación y comienza el riesgo de intoxicación. El nivel referido depende no solamente del grado de exposición al plomo, sino también de la edad y de la integridad de órganos importantes para su metabolismo y eliminación, como el hígado o el riñón

4. INDIQUE EL CUADRO CLÍNICO QUE SE PRESENTA ANTE UNA INTOXICACÓN AGUDA POR PLOMO

Intoxicación agudaEs muy difícil observarla actualmente en la industria de nuestro medio.Los síntomas son:

A nivel del aparato digestivo: cólico saturnino con dolor, vómitos y estreñimiento. A nivel del sistema nervioso: encefalopatía saturnina con convulsiones y coma que

conduce a la muerte en dos o tres días. También puede presentarse en forma de delirio o psicosis tóxica.

A nivel renal: albuminuria, cilindruria, oliguria. A veces hay afectación hepática pudiendo aparecer desde una necrosis hepática hasta

una ligera citolisis

WEBGRAFÍACOMISIÓN DE SALUD PÚBLICA CONSEJO INTERTERRITORIAL DEL SISTEMA NACIONAL DE SALUD. PLOMO. Madrid. 1999. Consultado 10 de Julio del 2014. Disponible en: https://www.msssi.gob.es/ciudadanos/saludAmbLaboral/docs/plomo.pdf

Danza F. Contaminación por Plomo. Uruguay. Consultado 10 de Julio del 2014. Disponible en: http://www.smu.org.uy/sindicales/resoluciones/informes/plomo.pdf

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Wikipedia. FANERAS. 25 de Enero del 2014. Consultado 10 de Julio del 2014. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Fanera

Machala 14 de Julio del 2014.

FIRMAS DE RESPONSABILIDAD

______________ Mónica Elizabeth Lapo.

GLOSARIO

a. FANERASSon estructuras complementarias y visibles sobre la piel o que sobresalen de ella. Son faneras las uñas y los pelos en los seres humanos y las plumas, pezuñas, escamas y cuernos en otros animales. Las faneras, junto a la piel, constituyen en sistema integumentario. El término se reintrodujo en francés en 1823 -phanère- a partir del griego.

b. FONTANERÍATécnica y oficio de colocar, conservar y reparar las conducciones de agua e instalaciones sanitarias que regulan, canalizan y distribuyen el agua en un edificio

c. OLIGURIA

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Es una disminución de la producción de orina (diuresis). Esta disminución puede ser un signo de deshidratación, fallo renal o retención de orina.

d. CILINDRURIAPresencia de cilindros en el sedimento urinario, caracterizados por la precipitación en la luz de los segmentos distales de la nefrona de proteínas secretadas por el túbulo renal y por otros elementos

e. PSICOSIS TÓXICASe produce por los efectos de sustancias químicas o fármacos, incluidas las producidas por el propio cuerpo. 

ANEXOS:

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