Instituto Politcnico NacionalEscuela Superior de Medicina

Bioqumica I: PRCTICA NO. 7Oxidaciones Biolgicas

EQUIPO 3- Ramrez Hernndez Vernica.- Rojo Arroyo Claudia Stephany.- Sols Noxpanco Zaira.- Trueba Chaparro Mireya.2CM11

Dra. Eunice Dalet Farfn Garca

18-Junio-2015

Experimento 1. Oxidacin por prdida de electrones Evidencia de aprendizaje: 1. Registre sus resultados en la siguiente tabla para el reporte de laboratorio. Solucin K3fe(CN)6 KSCN

SULFATO FERROSOCambio a color azulColor rojo

SULFATO FERRICOColor azul Color rojo

1. Escriba las reacciones de identificacin que se han efectuado en cada caso.

1.- Al calentar (Fe) con H2SO4 obtuvimos sulfato ferroso

2.- en este caso se puedo observar la presencia de sales frricas al agregar (KSCN)

Al agregarle ferricianuro de potacin se tio de color azul lo cual indico la presencia de sales ferrosas.

En el segundo caso al oxidar la sal ferrosa a ferrica y repetir los dos casos anteriores se obtuvo en el primer caso al agregar un color azul , y en el otro un color rojo.

1. Si el KMnO4 es capaz de oxidar al sulfato ferroso, Qu compuesto se reduce?

KMnO4+FeSO4+H2SO4 = MnSO4+K2SO4+Fe2 (SO4)3 + H2OEl Fe se reduce 1. Escriba la reaccin de xido-reduccin que se ha efectuado.

2KMnO4 + 10FeSO4 + 8H2SO4 K2SO4 + 2MnSO4 + 5Fe2(SO4)3+ 8H2

Experimento 2. Oxidacin por deshidrogenacin Evidencia de aprendizaje: 1. Registre los resultados en la tabla para el reporte de laboratorio.

Tubo1 testigo2 calor3 temp. Amb.4 H2O25 FeCl3

Tiempo de reoxidacin del azul de metileno o nmero de gotas1 gota2 minutos5 minutos8 gotas 3 gotas

1. Escriba la reaccin qumica que se ha efectuado en cada caso. Tubo 4: La descomposicin del perxido de hidrgeno se puede considerar como la oxidacin de una molcula por otra. La reaccin es: 2H2O2O2+ 2H2O

Tubo 5:El cloruro frrico es un agente oxidante dbil: 2FeCl3 + H2O 2FeCl2 + HCl + OSe utiliza para transformar la hidrquinona en quinona, el naftol en dinaftol y los derivados de la hidroxilamina en compuestos nitrosos.

En la imagen podemos observar los 5 tubos de ensayo, donde el tubo uno como sabemos, es el testigo y no se le agrego algn otro reactivo. Lo que fue el tubo 2, regreso al azul de metileno en 2 minutos al estar en ebullicin, en el tubo numero 3 tardo 5 minutos a su temperatura ambiente, en el tubo 4 se le agregaron 8 gotas de H2O2 y volvi al azul de metileno, en cambio al tubo 5 se le agregaron 3 gotas y regreso a un azul un poco ms bajo del normal.

Experimento 3. Reacciones de Oxido- Reduccin Biolgicas. Evidencia de aprendizaje: 1. Registre sus resultados en la tabla para el reporte de laboratorio1. En cual de las fracciones de hgado deben encontrarse las mitocondrias y por qu?1. Describa como acta el malonato de sodio en esta reaccin.1. Explique sus resultados sobre la base del anlisis del contenido de cada tubo.

Reactivo /Tubo.Tubo 1.Tubo 2.Tubo 3.Tubo 4.Tubo 5.Tubo 6.

Azul de metileno 0.002 M. mL0.30.30.30.30.30.3

Succinato de sodio 0.1M. mL-----0.50.5-----0.50.5

Malonato de sodio 0.1M. mL----------0.5----------0.5

Agua destilada. mL1.51.00.51.51.00.5

Suspensin de Hgado. mL0.50.50.5---------------

Sebrenadante de Hgado. mL---------------0.50.50.5

Mezclar bien el contenido de cada tubo.Vaselina mL.0.50.50.50.50.50.5

Incubar de 37 a 40 C.En la mitocondria se producen una serie de transferencias de electrones por reduccin y oxidacin de los componentes de la cadena, tratados de resumir en pequeos complejos.el azul de metileno que cuando se oxida por el O2 da un tono azul, pero este puede ser reducido de nuevo por el Succinato, ya que el azul de metileno es mediador entre electrones, protones, O2 y sustrato que se oxida (Succinato). El azul de metileno reducido es incoloro, mostrando la dinmica de reduccin.Por otra parte con la Succnico deshidrogenasa se emplea un aceptor artificial de hidrgenos que es la P.F.D. ( Parafenilendiamina )con la cual se ve la cadena respiratoria en su etapa final pues esta se oxida en presencia del alfa - naftol quedando de un color azul llamado azul de indofenol.La reaccin se llevo a cabo en el tubo dos.

Experimento 4. Localizacin y demostracin de la actividad de la citocromo-oxidasa Evidencia de aprendizaje: 1. Registre sus resultados en la siguiente tabla para el reporte de laboratorio:

TiempoTubo 1Tubo 2Tubo 3Tubo 4Tubo 5Tubo 6Tubo 7Tubo 8Tubo 9 Tubo 10

0 minutos

5 minutosX

10 minutos

15 minutosX

1. Escriba la reaccin de formacin del azul de indofenol. O2 oxidadoDimetil-p-fenilendiamina + a-naftol-------------- Azul de indofenol (37) (insoluble en agua) Citocromo C

1. Explique por qu no se us vaselina en este experimento.No se utiliz la vaselina en este experimento, porque aislara el oxgeno del azul de indofenol reducido y para la aparicin del mismo, la solucin debe oxidarse por accin del O2 del ambiente que entra al tubo. 1. Explique sus resultados sobre la base del anlisis del contenido de cada tubo. TUBO1: coloracin azul dispersaTUBO 2: no se llevo a cabo la reaccin por falta de a-naftolTUBO3 : no se llevo a cabo la reaccin TUBO 4: Sin suspensin de hgado se da una pequea coloracin (si reacciono)TUBO 5: debido a que se agrego KNC se inhibio, por lo cual fue lenta la reaccionTUBO 6: se presento la reaccin a tiempo estndar TUBO 7: no se llevo a cabo TUBO 8: no tubo un indicador TUBO 9: se diluyo por el agua destilada, pero si reacciono (tonos claros)TUBO 10: por KNC se inhibio y fue lenta la reaccin

Podemos observar que los tubos que cambiaron en dicho experimento, fueron los tubos 5 y 6, uno un poco ms que el otro, por ejemplo, en el tubo 5 cambio a los 5 minutos, quedando un azul de indofenol, en cambio en el tubo 6 tardo 15 minutos y fue un azul ms oscuro.

Conclusin Final

Una reaccin redox es aquella donde existe un intercambio de electrones entre sustancias qumicas. Si en el intercambio de electrones el reactivo acepta los mismos, esta sustancia se reduce. En cambio si el reactivo qumico pierde electrones, ste sufre una oxidacin o simplemente se oxida. Ambos sucesos, oxidacin y reduccin, ocurren simultneamente. El agente reductor es la sustancia que permite que otra se reduzca. Por lo tanto para que existe la reaccin redox. El el caso de los dos experimentos se pudo comprobar la oxidacin y reduccin en el sulfato frrico a ferroso y en las coloraciones que indicaban las presencia de ciertas sales.

En esta prctica experimentamos la transformacin de energa, bajo varios comportamientos y mtodos, uno de ellos fue la oxidacin por deshidrogenacin, donde Wieland consideraba el proceso bsico en la oxidacin de los metabolitos era la Activacin del Hidrgeno, mediante la accin de enzimas llamadas Deshidrogenasas, las cuales transportaban el hidrgeno al oxgeno u otros agentes oxidantes. Del mismo modo Szent Gyorgyi supuso que es necesaria la activacin del hidrgeno y oxgeno. As tambin, Keilin dijo que interviene como eslabn intermediario del citocromo, por lo tanto podemos comprobar que en las oxidaciones influyen una cantidad de aceptadores de hidrgeno. Lo que paso en el experimento 4 respecto a la citocromo oxidasa, sabemos que es la ltima enzima de la cadena respiratoria y es la responsable de la activacin del oxgeno para oxidar a los citocromos. As, tanto los citocromos como la citocromo oxidasa, son metaloprotenas (porforinas), que se caracteriza por su sensibilidad al cianuro y al moxodo de carbono. Aqu, comprobamos que la enzima indofenol solo oxida al citocromo c, el cual a su vez oxida el indofenol, por lo tanto se conoce como citocromo-oxidasa.

Bibliografa

Bioqumica Texto y AtlasKoolmanRohmEditorial Medica PanamericanaMxico D.F.

Bioqumica MdicaPacheco LealEditorial LimusaMxico D.F., 2014